INTRODUCCIÓN

Un paso importante en la caracterización de la función de un gen es identificar las células

en las que se expresa. En el caso de los virus que no son celulas tiene un ARN viral que
contiene todo su informacion genetica. Para los retrovirus, al contrario que otros virus
ARN monocatenarios, usan ADN intermedio para replicarse. La transcriptasa inversa,
una enzima viral procedente del propio virus, convierte el ARN viral en una cadena
complementaria de ADN, que se copia para producir una molécula de ADN bicatenario
viral. Este ADN dirige la formación de nuevos viriones.
La PCR de transcripción inversa o RT-PCR, permite el uso de RNA como molde. Un paso
adicional permite la detección y amplificación del RNA. El RNA se transcribe de forma
inversa en DNA complementario (cDNA) utilizando una transcriptasa inversa. La calidad
y pureza del RNA molde es esencial para el éxito de la RT-PCR. El primer paso de la RT-
PCR es la síntesis de un híbrido DNA / RNA. La transcriptasa inversa también tiene una
función RNasa H, que degrada la porción de RNA del híbrido. La molécula de DNA de
cadena sencilla restante sirve entonces como molde para la formación de cDNA,
mediante la actividad DNA polimerasa dependiente de DNA, de la transcriptasa inversa.
La eficiencia de la reacción de la primera cadena puede afectar al proceso de
amplificación. A partir de aquí, se utiliza el procedimiento de PCR convencional para
amplificar el cDNA. La posibilidad de revertir el RNA en cDNA por RT PCR tiene muchas
ventajas. El RNA es monocatenario y muy inestable, lo que dificulta el trabajo con este
material. Más comúnmente, sirve como un primer paso en qPCR, que cuantifica la
cantidad de RNA que ha sido transcrito en una muestra biológica.
 HISTORIA

La idea de la transcripción inversa era muy impopular en un principio, ya que contradice

el dogma central de la biología molecular, que establece que el ADN se transcribe en
ARN que se traduce en proteínas. Sin embargo, en 1970, cuando los científicos Howard
Temin en la Universidad de Wisconsin-Madison y David Baltimore descubrió de forma
independiente tanto de la enzima responsable de la transcripción inversa, llamada
transcriptasa inversa, la posibilidad de que la información genética podría ser
transmitida de esta manera fue finalmente aceptada. Los dos compartieron el Premio
Nobel de Fisiología o Medicina en 1975 con Renato Dulbecco por su descubrimiento.

Transcriptasas inversas bien estudiadas incluyen:

 VIH-1 de la transcriptasa inversa de humanos de tipo virus de la inmunodeficiencia

1(AP 1HMV)
 M-MLV transcriptasa inversa del virus de la leucemia murina Moloney
 La transcriptasa inversa AMV del virus de la mieloblastosis aviar
 La telomerasa transcriptasa inversa que mantiene a los telómeros de los
cromosomas eucariotas.

Dogma de la Biología Molecular

Howard Temin David Baltimore Renato Dulbecco
DEFINICIÓN

TRANSCRIPTASA INVERSA – REACCIÓN EN CADENA DE LA POLIMERASA

La transcripción reversa (RTPCR) es una técnica que permite sintetizar DNA
complementario (cDNA) a moléculas de RNA usando para ello la enzima transcriptasa
reversa. El cDNA obtenido es la cadena complementaria de la cadena molde de RNA. Es
una variante de la PCR, una técnica de laboratorio comúnmente usada en biología
molecular para generar una gran cantidad de copias de ADN, proceso llamado
"amplificación". En la RT-PCR, se retrotranscribe una hebra de ARN en ADN
complementario (ADNc) usando una enzima llamada transcriptasa inversa o
transcriptasa reversa, y el resultado se amplifica mediante una PCR tradicional. El
término PCR en transcripción reversa no debe confundirse con la PCR en tiempo real,
también denominada PCR cuantitativa (Q-PCR), que en ocasiones, por una mala
traducción del inglés, se abrevia de la misma manera (RT-PCR, por Real Time-PCR).