Universitatea de Ştiinţe Agricole şi Medicină Veterinară BUCURESTI

FACULTATEA DE MEDICINA VETERINARA

BOLI PRIONICE LA OM SI ANIMALE

Autor: Conf. univ. dr. Florica BARBUCEANU

Curs - MEDICINĂ VETERINARĂ ŞI SĂNĂTATE PUBLICĂ, an IV

A nu se copia sau distribui fără copyright
 EST
ANIMALE OM

 ESB  boala C.J.

 SCRAPIE  nv bolii C.J.
 BCCC
 ESF  Kuru
 ESU  Sindromul GSS Gerstmann-
 EST (nurcă) Streussler-Scheinker
 Insomnia familială fatală
 CARACTERISTICI GENERALE
 maladii strict neurologice
 trasmise experimental
 Evoluţia epidemiologică
- necontagioasa (ex. scrapia)
- sporadica (MCJ)
- enzootică (ESB sau ETV)
 incubaţie foarte lungă
 întotdeauna mortală
 fără răspuns imun
 diagnostic foarte greu
 agent cauzal încă dezbătut

 ENCEFALOPATIA SPONGIFORMA
BOVINA
este expresia anatomo-clinica a infectiei produsa de catre proteina P27-30 (PrP
= prion) care poseda infectiozitate numai in asociere cu subunitati membranare
celulare.
PrP –iozforma PrP –este produsul de acumulare la nivelul membranelor
celulare, rezistenta la UV, radiatie ionizanta, formol, temperatura si proteinaza
K.
Antigenitatea PrP, in prezentarea glicoproteica, a permis obtinerea unui anticorp
policlonal specific, care reactioneaza “in situ”cu SAF si proteinele fibrilare ale
ESB, precum si obtinerea AcMo antiepitopii de specie.
Infectia naturala NUinduce raspuns serologic (similitudine cu PrP 33-35,
imunotoleranta).
Perioada de incubatie ↔ dependenta de tulpina, -calea de inoculare,
-doza -genotipul gazdei -controlata la soarece de genele Sinc si PID, situate
pe cromozomul 2.
TABLOUL CLINIC:
tulburari de comportament
modificari de postura si locomotie
tulburari de sensibilitate
Leziuni microscopice in trunchiul cerebral:
vacuolizare intraneuronala si a neuropilului
glioza astrocitara
depopulare neuronala a unor regiuni, asociata uneori
cu depozit amiloid fibrile analoge SAF
absenta reactiei inflamatorii
DIAGNOSTIC (post-mortem)
Histopatologic
Examen electronomicroscopic
Examen IHC
Teste rapide: Elisa, IC, WB
 BOALA CREUTZFELDT-JACOB
 Caracteristici:
 boală neurodegenerativă la om, clasificată a fi o EST
 afectează oamenii în vârstă (65 de ani vârsta medie)
 evoluţie (12-14 luni) cu sfârşit letal
 trei forme:
 sporadică

 - rata: 1/1.000.000 pentru 85-90% din cazuri

 familială (genetică)

 - rata: 5-10% din total cazuri de BCJ

 iatrogenică*)
 - rata: sub 5% din cazuri de BCJ
 -------------------------------------------------------------------------------------------------
 *) prin echipament chirurgical contaminat, transplant de dura mater sau de cornee,
administrare de hormoni de creştere
 primul caz: 1920
 nu se cunoaşte cum se transmite de la o persoană la alta
 vaccin: nu
 terapie: nu
NOUA VARIANTĂ A BOLII CREUTZFELDT JACOB

 Caracteristici :
 boală neurodegenerativă la om, clasificată a fi EST

 afectează oamenii mai tineri : 29 ani vârsta medie

 evoluţie( circa 6 luni în medie) cu sfârşit letal

 strâns legată de expunere la agentul ESB

 Primul caz descris: martie 1996

 1996-2002: 129 cazuri în RU,
 6 cazuri în Franţa- 3 cazuri rezultat al expunerii în UR

 1 caz în Canada - 1 caz rezultat al expunerii în UR

 1 caz în Irlanda

 1 caz în Italia

 1 caz în SUA - 1 caz rezultat al expunerii în UR

 Vaccin: Nu
 Terapie : Nu
 SCRAPIA
 Identificată la începutul sec. XVII
 Australia şi Noua Zeelandă: indemne
 PI : 1- 3 ani sau peste
 Semne clinic: comportament (excitaţie sau dimpotrivă letargie, incoordonare
motrice, prurit intens de origine nervoasaă (« gratte » ou scrapie pentru anglo-
saxoni)
 Transmiterea pentru prima dată în lume în 1936 la l'Ecole vétérinaire de Toulouse
de către 2 medici veterinari, J. Cuillé et P. L. Chelle ( inoculare IC)
 Transmiterea neintenţionată pentru prima dată în RU la peste 18 000 ovine prin
prepararea unui vaccin anti louping-ill preparate pe porţiuni de creier de la ovine cu
tulpini cu PrPsc
 Contaminare intraplacentara
 Păşunile pot rămâne contaminate peste 10 ani
 Numărul total de cazuri de ESB raportate în lume

Ţara Nr. Ţara Nr. Ţ1ara Nr. Ţara Nr. Ţara Nr.
total total total total total
cazuri cazuri cazuri cazuri cazuri

Austria 5 Finlanda 1 Israel 1 Olanda 82 Spania 707

Belgia 94 Franţa 984 Italia 141 Polonia 56 Suedia 1

1
Canada 3 Germania 415 Japonia 34 Portugalia 1029 Elveţia 464

R. Cehia 28 Grecia 1 Liechten - 2 Slovacia 23 Regatul 18457

steria Unit 3

Danemarca 17 Irlanda 1613 Luxemburg 3 Slovenia 8 SUA 2

 SCRAPIA IN LUME
TARA Anul aparitiei
AFRICA GHANA 1993
AFRICA DE SUD 1972
AMERICA BRAZILIA 1985
CANADA 1947
USA 1947
ASIA JAPONIA 1994
EUROPA BELGIA 1992
CEHIA SPORADIC
FRANTA SPORADIC
GERMANIA 1990
ISLANDA SPORADIC
IRLANDA
SUEDIA 1986
ELVETIA 1993
UK ENZOOTIC
OCEANIA AUSTRALIA 1952
NOUA ZEELANDA 1954
 SITUAŢIA EPIDEMIOLOGICĂ A EST
ÎN ROMÂNIA

 ESB la bovine: DA
 ESB la ovine: NU

 SCRAPIE la ovine: DA
 SCRAPIE la caprine: DA

 FORME ATIPICE DE SCRAPIE: NU

 BCCC: NU

 ESF: NU
 Limite de competenţă privind emiterea buletinului de analiză oficial şi
notificarea internă şi internaţionala – circulatia probe si informatii
Notificare


internationala

 Buletin de analiză ANSVSA


EST confirmare
IDSA


LNR-EST  Notificare
nationala


 Notificare internă
 Buletin de analiză
suspiciune
EST infirmare

EST
 Probe

Laboratoare

 Pozitiv/inconcluziv
Morfopatologie  Notificare DSVSA
din DSVSA DSVSA


judetene judetene
 Buletin de analiză
negativ EST

 Probe
 Probe

 Circumscripţie  Prelevare de probe de la toate

Abator
teritorială/zonala categoriile ţintă de rumegatoare
PRELEVAREA PROBELOR DE
CREIER
 SUPRAVEGHEREA RUMEGĂTOARELOR PENTRU ESB PRIN
EXAMENE CLINICE
Cunoaşterea semnelor clinice

• deţinătorii de bovine, ovine, caprine • întâlniri de popularizare a

din exploataţiile individuale semnelor clinice prin
• fermierii imagistica în domeniu
• tehnicienii veterinari
• medicii veterinari • diagnosticul clinic
- de liberă practică diferenţial
- zonali
- igienişti din DSVSA judeţene • fişa de observaţie clinică
- epidemiologi / epidemiologi
EST
- igienişti din abatoare
 BOVINE


GRUPE ŢINTĂ
100 % Bovine > 30 luni sacrificate pentru consum uman

100 % Bovine > 24 luni sacrificate de necesitate

100 % Bovine > 24 luni suspecte clinic de ESB

100 % Bovine > 24 luni depistate cu semne de ESB la examenul antemortem

100 % Bovine moarte

Suspiciunea de EST / ESB: SE NOTIFICĂ pe baza
semnelor nervoase si/sau a
testului rapid pozitiv

Suspiciunea de EST / ESB: SE CONFIRMĂ /

INFIRMĂ în baza
buletinului de analiză emis
de LNR – EST
 TESTE RAPIDE (SCREENING)
 TeSeE for purification and detection of PrPres

 Prionics Check Western for detection disease specific Prion Protein in cattle
(BSE), sheep and goats (scrapie) (100 teste)

 Prionics Check PrioStrip for detection BSE

 IDEXX Herd CHECK antigen scrapie and BSE

CONDUITA DE DIAGNOSTIC

 În caz de rezultat NEGATIV: se consideră probă negativă şi se dă carcasa în

consum
 În caz de rezultat POZITIV:
 2.a. Se consideră suspiciune şi se notifică SUSPICIUNE
 2.b. Se trimite proba la LNR pentru confirmare/infirmare prin alte metode
 2.c. În caz că LNR infirmă suspiciunea: proba se consideră NEGATIVĂ şi se
procedează conform punctului 1
 2.d. În caz că LNR confirmă suspiciunea: proba se consideră POZITIVĂ şi se
declară boala
 TESTE DE CONFIRMARE

 TeSeE Western blotting

 Metoda histologică de colorare HE

 Testul de discriminare suşe EST

 Metoda IHC
 INSTITUTUL DE DIAGNOSTIC ŞI
SĂNĂTATE ANIMALĂ

 LABORATORUL NATIONAL DE REFERINTA PENTRU

DIAGNOSTIC SI SANATATE ANIMALA

 LABORATORUL NATIONAL DE LABORATORUL NATIONAL DE



REFERINTA PENTRU REFERINTA PENTRU BIOLOGIE

ENCEFALOPATII MOLECULARA
SPONGIFORME
TRANSMISIBILE
  ACREDITED METHODS FOR TESTING
INSTITUTE FOR DIAGNOSIS AND ANIMAL HEALTH


NATIONAL REFERENCE LABORATORY FOR DIAGNOSIS OF TSEs

 SCREENING TESTS*  CONFIRMATORY METHODS* METHODS for detection of

nervous tissue from CNS in the
meet

Imunoenzimatic methods: Histological method: H & E GFAP – ELISA Brainostic

TeSeE ELISA , IDEXX Imunohistophatological test
method> IHC for
Immunobloting methods: confirmation of TSEs
PRIONICS CHECK TeSeE Western Blot –

WESTERN method for confirmation of

TSEs
Immunocromatographic Discryminatory test for

metods: PRIONICS CHECK smoll ruminants

PrioSTRIP

 All this tests were accredited by national organism for

accreditation RENAR.
 Rezultate ale examenelor imunoenzimatice şi de imunoblotare obţinute prin testele rapide
TeSeE Bio-Rad şi Prionics Check Western pe probe de trunchi cerebral de rumegătoare mici
 EXAMEN HISTOLOGIC
 Met. HE
CONDUITA DE DIAGNOSTIC

1. În cazul în care se decelează modificări vacuolare specifice:

1.a. Proba se trimite la LNR (de preferat un set de probe de la acelaşi caz) – preparate
histologice permanente, ţesut inclus în bloc de parafină, omogenat, ţesut proaspăt, ţesut cu
lichid fixator pentru a fi confirmată histopatologic şi prin alte metode speciale
1.b. În cazul în care LNR infirmă EST, atunci investigaţiile se continuă pentru precizarea
diagnosticului citohistopatologic şi nosologic-cu referire în mod deosebit la: rabie, boala
Aujeszky, listerioză, meningoencefalite nespecifice, tumori, etc.
1.c. În cazul în care LNR confirmă EST şi prin alte metode, atunci boala se notifică oficial

2. În cazul în care la examenul histologic nu se decelează modificări specifice de EST, atunci

proba (v. punctul 1.a) se trimite la LNR pentru confirmare/infirmare

2.a. În cazul în care LNR confirmă lipsa modificărilor histopatologice specifice, iar aplicarea
unei alte metode speciale are rezultatul negativ, atunci se procedează ca la punctul 1.b.
2.b. În cazul în care LNR precizează diagnosticul de EST şi prin alte metode speciale, atunci
boala se notifică oficial
 ARIILE DE INTERES PENTRU DIAGNOSTICUL
HISTOPATOLOGIC ÎN ESB

BULBUL RAHIDIAN (OBEX)

 Nucleul n. vag dorsal

 Nucleul şi tractusul n. solitar
 Nucleul şi tractusul n. spinal
 Formaţiunea reticulară
 Nucleii cuneaţi
 Nucleii n. fascicular lateral
 Nucleul ambiguus
 Nucleii olivari
 Nucleul n. hipoglos
 Area postrema (fără semnificaţie)
Rezultate ale examenelor imunocromatografice obţinute prin testul Prionics Check Western

PRIOSTRIP pe probe de trunchi cerebral de bovine
Rezultate ale examenelor imunoenzimatice şi de imunoblotare obţinute prin testele rapide TeSeE


Bio-Rad şi Prionics Check Western pe probe de trunchi cerebral de rumegătoare mici

  Rezultate ale examenului de confirmare WB pe probe de trunchi
cerebral de rumegătoare mici
 Corelaţie test rapid imunoenzimatic/test confirmare WB

 1/10 1/10 1/30 1/5001/10001/200 1/300  1/10 1/10 1/30 1/5001/10001/200 1/300
0 0 0 0 0 0 0 0

 Ove  1.616 0.985 0.660  Ove  1.616 0.985 0.660

r r

Empty
imunoenzimat

 +  + + + ic
 +  + + +


Empty
 +  + + +  +  + +  WB  + 
 + - - - -  -
 Rezultate ale testului de discriminare pe probe de trunchi cerebral
de rumegătoare mici

Obex ovina
Rezultate ale testului de discriminare pe probe de trunchi cerebral
de rumegătoare mici
 Va multumesc!
Intrebari, comentarii, observatii........