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SEGUNDO PARCIAL PRÁCTICO

MICROBIOLOGÍA

Daniela Valentina Noriega Nuñez


ENTEROBACTERIAS

Daniela Valentina Noriega Nuñez


AGENTES ETIOLÓGICOS DE LA DIARREA
1. VIRUS: Rotavirus, Calicivirus, Adenovirus, etc.
2. BACTERIAS:
• Enterotoxigénicas ⇢ Diarrea acuosa
ü E. coli enterotoxigénica (ECET)
ü Vibrio cholerae (Colera)
ü Aeromonas hydrophila
a. Productoras de citotoxinas ⇢ Diarrea de tipo disentérica
• Shigella dysenteriae
• E. coli enterohemorrágica

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b. Enteroagregativas ⇢ Diarrea aguda y crónica
Ø E. coli enteroagregativa (ECEAg)
Ø E. coli enterotoxigénica
c. Enteroinvasivas ⇢ Diarrea inflamatoria
§ Salmonella enteritidis
§ E. coli enteroinvasiva (ECEI)
§ Campylobacter jejuni
DX MICROBIOLÓGICO DE INFECCIONES ENTÉRICAS
ü Examen simple de heces: Permite conocer las características de evacuaciones
respecto al pH, presencia de moco, y sangre, así como descartar etiologías
parasitarias.
ü Prueba de investigación de leucocitos fecales: Determinar el tipo de células
inflamatorias presentes en las heces.
Enfermedad Tipo de célula predominante
Shigelosis
Salmonelosis Polimorfonucleares
E. coli enteroinvasiva

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Fiebre tifoidea
Mononucleares
Amibiasis
Colitis ulcerosas Polimorfonucleares, Eosinófilos
Diarrea alergica Mononucleares
Diarreas virales, toxigénicas y Ausencia de células inflamatorias
personas sanas
MEDIOS DE TRANSPORTE - CONSERVACIÓN

Cary-Blair o Ames

Son utilizados en caso de pasar mas de 2


horas entre el momento de la toma de la
muestra y la siembra

Permite conservar la vialidad de las

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enterobacterias patógenas por varios días
COPROCULTIVO
Estudio bacteriológico de una muestra adecuada de las heces, en medios
adecuados para el diagnostico de bacterias patógenas entéricas.
Suspensión fecal o hisopado rectal

Agar
Agar Wilson- Caldo
Agar S.S. MacConkey o
Levine Blair Tretrationato

E. coli, Salmonella
Shigella y
Shigella y typhi y otras SUBCULTIVO
Salmonella

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Salmonella salmonelas

Agar Wilson-
Agar S.S
blair

Salmonella Salmonella
MEDIOS DE ENRIQUECIMIENTO

Caldo Tetrationato

Inhibe el crecimiento de bacterias


Gram(+) y limita el crecimiento de
casi toda la totalidad de las
enterobacterias

Permite el aislamiento de bacterias

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del género Salmonella

Se incuba a 37ºC por 24 horas


AGAR “SS” Se incuba a 37ºC por 24 horas
“VIRGEN”

CLASIFICACIÓN:
ü Sólido.
ü Selectivo, por contener sales
biliares.
ü Diferenciador, por la fermentación
de la lactosa, que se evidencia por
el indicador de pH (rojo de neutro).

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Permite el aislamiento de bacterias
de los géneros Salmonella y Shigella

(El color es como un vinotinto)


Agar MacConkey Se incuba a 37ºC por 24 horas
“VIRGEN”

CLASIFICACIÓN:
ü Sólido.
ü Selectivo, por contener sales
biliares.
ü Diferenciador, por la fermentación
de la lactosa, que se evidencia por
el indicador de pH (rojo de neutro).

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Permite el aislamiento de bacterias
de los géneros Salmonella y Shigella

(El color es como un rojo claro/opaco)


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Salmonella y Shigella (No fermentadores) E. Coli y Enterobacter (Fermentadores)
Colonias incoloras y traslucidas. Colonias de color rosado a rojo.
Agar Wilson-Blair
“VIRGEN”
Se incuba a 37ºC por 24 horas

Medio selectivo para el aislamiento


del genero Salmonella

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También es llamado Sulfito de Bismuto
Agar Wilson-Blair

Salmonella Typhi:
Colonias de color negro o gris oscuro
con brillo metálico

Otras Salmonellas:

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Colonias de color negro
Agar TBCS (Agar tiosulfato citrato-bilis-sacarosa)
Es un medio selectivo de
diferenciación para el aislamiento y
cultivo de Vibrio cholerae.

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Agar Levine Se incuba a 37ºC por 24 horas
“VIRGEN”

CLASIFICACIÓN:
ü Sólido
ü Selectivo
ü Diferenciador

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Permite el aislamiento de bacterias del
género E. Coli, Shigella y Salmonella

(El color es un rojo oscuro)


Agar Levine

Escherichia coli:
Colonias con centro negruzco y
reflejo metálico verdoso

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Agar Levine

Otras bacterias en este medio:


Salmonella y Shigella(L-)
Colonias pequeñas e incoloras

Klesbisela y Enterobacter (L+)

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Colonias mucosas de color morado
claro con o sin reflejo metálico
PRUEBAS DE IDENTIFICACIÓN BIOQUÍMICAS
1. MEDIO CITRATO
2. MEDIO UREA-INDOL
3. MEDIO MANITA-MOVILIDAD
4. MEDIO KIEGLER
5. CALDO MRVP

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MEDIO CITRATO

Se fundamenta en la capacidad de las bacterias de


emplear el citrato como fuente de carbono.

El medio empleado contiene buffer, cationes, citrato y


azul de bromotimol, un indicador de viraje de pH.
Además la reacción requiere de oxigeno.

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MEDIO CITRATO

El desarrollo de microorganismos con un


viraje del color del medio a AZUL, indica que
el organismo ha podido utilizar el citrato,
entonces el resultado es positivo (+)

Si el medio permanece de color verde, el


organismo es incapaz de aprovechar el

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sustrato, por tanto el resultado es negativo (-)
MEDIO UREA-INDOL

Permite investigar conjuntamente dos


propiedades:
1. Hidrólisis de la urea, casi siempre (-)
2. Produccion de Indol

El caldo urea-indol se siembra realizando una

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suspensión en el caldo de una colonia
bacteriana, se incuba a 37ºC y la prueba se lee
transcurridas 24 horas.
Contiene un indicador de viraje de pH, el rojo de
fenol
MEDIO UREA-INDOL

Si la cepa sembrada elabora ureasa (una enzima)


el medio se alcaliniza por la formación de CO2 y
amoniaco y el medio vira a rojo violáceo. UREA (-)

En caso de producción de indol aparece un anillo

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de color rojo cereza en la superficie del medio, que
indica la presencia de indol en el medio. INDOL (+)
MEDIO MANITA MOVILIDAD

Se investiga conjuntamente la fermentacion de la


manita y la movilidad de las cepas en estudio

Es un medio solido, preparado en forma de taco, el


cual se siembra por punción y se incuba 24 horas
a 37ºC. Contiene rojo de fenol, un indicador de

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viraje de pH
MEDIO MANITA MOVILIDAD

La fermentación de la manita se pone de


manifiesto por el viraje del medio hacia un color
amarillo.

Si la cepa sembrada es móvil se observa una


invasión parcial o total del medio a partir del canal

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de punción produciendo una opacidad.
En cambio si es inmovil, el desarrollo queda
limitado al canal de punción, quedando
transparente el resto del medio
MEDIO KIEGLER

Permite apreciar 4 propiedades


a. Fermentación de la glucosa.
b. Fermentación de la lactosa.
c. Producción de gas en la fermentación
de los carbohidratos.
d. Producción de H2S.

§ Se siembra por punción en el taco y estrías

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en el bisel.
§ La lectura se realiza a las 18-24 horas de
incubación
§ Contiene un indicador de viraje de pH, el rojo
de fenol
MEDIO KIEGLER

¿CÓMO IDENTIFICAR CADA REACCIÓN?


• F. Glucosa: Acidificación y viraje al color amarillo del taco del tubo de
ensayo
• F. Lactosa: Acidificación y viraje al color amarillo del bisel
• Producción de gas: Formación de burbujas de gas que rompen el
medio o se levanta el taco del fondo.
• Producción de H2S: Ennegrecimiento del medio por la producción de

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sulfuro de hierro
MEDIO KIEGLER (EJEMPLOS)

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F. Glucosa (+) F. Lactosa: (-) F. Glucosa (+) F. Lactosa: (-) F. Glucosa (+) F. Lactosa: (+)
Producción de gas: (-) Producción de gas: (-) Producción de gas: (+)
Producción de H2S: (+) Producción de H2S: (+) Producción de H2S: (-)
CALDO MRVP (Rojo de metilo y Voges Proskauer)

Estas pruebas detectan la presencia de los


productos finales de dos vías metabólicas en un
mismo medio denominado MRVP.

El microorganismo en estudio debe ser

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incubado entre 18-48 horas a 37ºC.
CALDO MRVP

REACCIÓN DEL ROJO DE METILO


ü Si al añadir 5 gotas de solución RM el
indicador permanece ROJO la prueba es
positiva (+)

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ü Un viraje a AMARILLO indica un pH > 6, es
decir la prueba es negativa (-)
CALDO MRVP (Rojo de metilo y Voges Proskauer)

REACCIÓN DE VOGES PROSKAUER


ü La aparición de un halo color rosado tenue
indica positividad (+)

ü Si el medio permanece incoloro o se torna

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amarillo, la prueba es negativa (-)
SEPSIS

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SEPSIS
Presencia o presunción de una infección acompañada de
evidencias de síndrome de respuesta inflamatoria sistémica.
Ø Temperatura corporal mayor a 38ºC, o menor que 36ºC
Ø Frecuencia cardiaca mayor a 90 lpm
Ø Frecuencia respiratoria mayor a 20 rpm
Ø Contaje de leucocitos mayor a 12.000 xmm3, o menor que
4.000xmm3.

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Ø Mas de 10% de formas inmaduras en un frotis sanguineo
SEPSIS SEVERA: Sepsis y disfunción de uno o mas órganos
relacionada con el proceso inflamatorio sistémico.

SHOCK SEPTICO: Definido por la presencia de sepsis e


hipotensión que no responde a la administración de fluidos
parenterales y requiere el empleo de drogas vasopresoras.

BACTERIEMIA: Presencia de bacterias en sangre, puede ser

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transitoria (la mayoría de los casos), o continua.
HEMOCULTIVO
Permite demostrar la presencia de bacterias que se diseminan a
través del torrente circulatorio.
• Debe realizarse en todo paciente con fiebre, de la cual se sospeche
origen infeccioso
• La muestra debe tomarse durante la fase aguda de la enfermedad y
antes de la administración de antibióticos
• Deben tomarse al menos tres muestras con intervalos de 30 minutos
entre una y otra, y a partir de venas diferentes.

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• Deben utilizarse medios de cultivo líquidos apropiados para el
crecimiento de los patógenos mas frecuentes
• Deben seguirse las normas para la toma de la muestra
TOMA DE UNA MUESTRA DE SANGRE
1. Palpar la vena.
2. Lavarse las manos con solución jabonosa yodada, usar guantes estériles.
3. Limpiar el sitio de la punción venosa con una gasa estéril impregnada en
alcohol isopropilico al 70%.
4. Limpiar una vez mas con gasas estériles impregnadas con solución de
alcohol yodado.
5. Efectuar la punción usando aguja y jeringa desechables.
6. Limpiar le tampón de goma de la botella que contiene el medio de cultivo.

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(anticoagulante) con una gasa estéril impregnada con solución de alcohol
yodado.
7. Estérilmente agregar la sangre al medio de cultivo en proporción que
debe ser de 10%.
8. Los frascos/botellas se marcaran con una etiqueta que contenga los
datos de identificación del paciente y la hora de la extracción.
SANGRE

Caldo Biliado Caldo Cerebro Caldo Caldo Tioglicolato


Soya Tripcasa
Ruiz-Castañeda

Selectivo para De enriquecimiento


Salmonella para anaerobios
No selectivo y
enriquecido

No desarrollo Desarrollo entre 18—72h


a los 5-7 días

Examen en fresco Gram

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Negativo

Agar Sangre
(24-18h a 37ºC)
HEMOCULTIVO
Pruebas de Identificación Antibiograma

Serológicas
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HEMOCULTIVO
Permite demostrar la presencia de bacterias que se diseminan a
través del torrente circulatorio.
• Debe realizarse en todo paciente con fiebre, de la cual se sospeche
origen infeccioso
• La muestra debe tomarse durante la fase aguda de la enfermedad y
antes de la administración de antibióticos
• Deben tomarse al menos tres muestras con intervalos de 30 minutos
entre una y otra, y a partir de venas diferentes.

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• Deben utilizarse medios de cultivo líquidos apropiados para el
crecimiento de los patógenos mas frecuentes
• Deben seguirse las normas para la toma de la muestra
METODO LISIS CENTRIFUGACION
Permite la concentración de microorganismos en un sedimento
que se siembra en medios de cultivo especificos.
ü Permite mejorar un 50% la detección de hongos levaduriformes y
filamentosos
ü Es el metodo de elección en bacteriemias por micobacterias
ü Mejora la dete cción de enterobacterias
ü Hace posible realizar hemocultivos cuantitativos
ü Es útil para el diagnostico de bacteriemia

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SALMONELOSIS: conjunto de enfermedades producidas por las
diferentes especies de Salmonella
1. Gastroenteritis, producida por Salmonella enteritidis
2. Bacteriemia, producida por Salmonella enteritidis
3. Estado de portador: El paciente no presenta síntomas pero excreta
salmonellas por las heces temporal o permanentemente y ex capaz
de transmitir la infección
4. Fiebre tifoidea, producida por Salmonella typhi y la Fiebre enterica
producida por Salmonella paratyphi

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La fiebre tifoidea es una enfermedad sistémica caracterizada por
fiebre, cefalea, dolor abdominal, lesiones cutáneas y episodios de
estreñimiento. Su Dx incluye aislamiento de salmonella en sangre
y heces y detección de anticuerpos.
SERODIAGNOSTICO DE WIDAL
Investigación de aglutininas reactivas en el suero que se aplica
solo al diagnostico de salmonella.
Salmonella posee dos antígenos: El antígeno “O” y el antígeno “H,
que desencadenan en el organismo formación de anticuerpos
específicos.
ü Anti O [Capsular]: son las primeras en aparecer en la sangre (8vo día),
se corresponden con la fase aguda, y desaparecen con rapidez

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ü Anti H [Flagelar]: Aparecen poco después (12mo día), alcanzan títulos
mas altos que las anti O y persisten en la sangre mucho mas tiempo
(meses o años).
SERODIAGNOSTICO DE WIDAL

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METODO RAPIDO EN CAJA DE HUDDLESON
Materiales:
Ø Suero del enfermo
Ø Antígenos rápidos en frascos de goteros calibrados
Ø Pipetas de 0,2cc graduadas
Ø Caja de Huddleson

La caja de huddleson es una caja de madera/latón que tiene una placa de vidrio
rayada con cuadros 2x2cm y posee iluminación lateral.

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SANGRE Y BACTERIAS
COLORACIÓN DE GRAM CARACTERÍSTICAS
ü Muestra: Clínica
ü Morfología: COCOS
ü Disposición: Aislados
ü Coloración GRAM: GRAMPOSITIVOS

GR

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BACILOS GRAMNEGATIVOS
COLORACIÓN DE GRAM
CARACTERÍSTICAS
ü Muestra: CULTIVO
ü Morfología: BACILOS
ü Tinción GRAM: GRAMNEGATIVO
ü Especies: -Escherichia Coli
-Pseudomonas aeruginosa

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BACILOS AISLADOS
URINARIA
INFECCIÓN

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AGENTES ETIOLÓGICOS DE LA INFECCIÓN URINARIA
1. Escherichia coli (85% de infecciones urinarias agudas)
2. Proteus mirabilis
3. Klesbisela pneumoniae
4. Pseudomona aeruginosa
5. Enterococcus sp
6. Eterobacter

CLASIFICACIÓN DE LAS INFECCIONES URINARIAS


Según la localización anatómica

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ü Altas
ü Bajas
Según el contexto del paciente
v Complicadas
v No complicadas
DX MICROBIOLÓGICO DE INFECCIONES URINARIAS
ü Toma de la muestra à Técnica de la orina del segundo chorro
ü Transporte de la muestra: Debe enviarse de inmediato al laboratorio (menos
de 30 minutos), colocando el envase en un recipiente que contenga cubos de
hielo o guardarse en nevera hasta el momento de su traslado.
ü Examen simple de orina: Se evalúan parámetros de la orina que
normalmente se modifican en una infección urinaria y por ello nos permite
corroborar la sospecha clínica y proceder a solicitar el urocultivo.
Ø pH
Ø Densidad

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Ø Color y turbidez En presencia de infección se debe
Ø Sedimento urinario encontrar el pH neutro o alcalino,
Ø Tiras reactivas de orina densidad menor a 1015-1020, fuerte
§ Presencia de leucocitos olor, mayor turbidez.
§ Presencia de nitritos
Muestra de orina

Examen simple de Examen en fresco Recuento de colonias


orina

Sedimento urinario
Agar Sangre Agar CLED
Gram

Gram
Identificación de especies
aisladas
Gota de orina sin
centrifugar

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Escherichia coli
Proteus mirabilis
Enterobacter
DX MICROBIOLÓGICO DE Klebsiella
INFECCIONES URINARIAS

Antibiograma
AGAR SANGRE
“VIRGEN”
CLASIFICACIÓN:
ü Sólido.
ü Universal, porque sirve para el
crecimiento de una gran diversidad de
especies bacterianas.
ü Enriquecido, porque se aumentan las
propiedades nutritivas del medio,
añadiendo vitaminas y carbohidratos

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principalmente.
ü Diferenciador, porque permite apreciar
la hemólisis de algunas especies
bacterianas.

Es un medio apropiado para presenciar las


reacciones hemolíticas importantes (α, ß o γ )
AGAR SANGRE

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AGAR SANGRE

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AGAR SANGRE
Efecto Swarming

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AGAR CLED Se incuba a 37ºC por 18-24 horas
“VIRGEN”
MEDIO CISTINA LACTOSA
ELECTROLITO DEFICIENTE

Clasificación:
ü Sólido.
ü Selectivo
ü Diferenciador, por la fermentación de la
lactosa, que se evidencia por el

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indicador de pH (azul de bromotimol).

Permite el aislamiento de bacterias


uropatógenas
AGAR CLED
Fermentadores de lactosa

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(Colonias amarillas en fondo azul)
AGAR CLED Inhibe el efecto Swarming

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AGAR CLED

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RECUENTO DE COLONIAS
Después de la incubación se observa el crecimiento en los medios de cultivo y se
procede a contar las colonias presentes en ellos.
Si la cantidad de colonias es muy abundante se cuentan las colonias las colonias presentes
en un cuadrante de la placa y se multiplica por 4, para tener un numero aproximado de
colonias
Conociendo el numero de colonias en la placa se multiplica por el factor de
acuerdo al asa calibrada utilizada para la siembra (100 o 1000)

Interpretación de resultados
• Recuento de colonias > a 100.000 UFC de un mismo microrganismo mas

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presencia de 5 leucocitos x campo es diagnostico de infección urinaria
• Presencia de 2 o mas especies bacterianas en un urocultivo indica
contaminación de la muestra
• Recuento de colonias entre 10.000 UFC y 100.000 UFC se consideran en
general contaminación y no infección real.
MICOBACTERIAS
Bacilos ácido-alcohol resistentes (BAR)

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CLASIFICACIÓN DE RUNYON

Especies Enfermedades que producen


M. tuberculosis
Micobacterias tuberculosas Tuberculosis.
M. bovis
M. kansasii Micobacteriosis indiferenciables de la
Fotocromógenas
M. marinum tuberculosis.
M. scrofulaceum
Micobacteriosis. Linfoadenitis cervical
Escotocromógenas M. gordonae
Micobacterias (escrófula), en niños principalmente.
M. xenopi
no tuberculosas
M. avium

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(MNT) No cromógenas Micobacteriosis.
M. intracellulare
Micobacteriosis. Infecciones en tejidos
M. fortuitum
De crecimiento rápido blandos, sobre todo tras intervencioens
M. chelonae
quirúrgicas.
MICOBACTERIOSIS: Infecciones producidas por bacterias NO
tuberculosas.

SINTOMATICO RESPIRATORIO: Todo consultante de primera vez,


de 15 años o más de edad, que consulte por cualquier causa en
un establecimiento de salud y al interrogatorio dirigido manifiesta
presentar tos, expectoración y/o hemoptisis de 2 o más semanas
de evolución.

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VACUNA BCG: Contiene bacilos Calmette-Guérin atenuados.
No impide la infección, pero sí controla la multiplicación y
diseminación del organismo, por lo que protege contra las formas
graves de TBC, como la TBC miliar y la meningitis tuberculosa.
COLORACION DE ZIEHL NEELSEN
1. Coloración con Fucsina fenicada de
Ziehl: 10 min, en los que se calienta 3
veces. Lavar con agua corriente

2. Decoloración con alcohol clorhídrico:


hacer un movimiento de vaivén hasta
eliminar el colorante y dejar actuar por
5min. Lavar con agua corriente

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3. Coloración de contraste: cubrir la
lamina con azul de metileno fenicado y
dejar actuar por 2 min, Lavar con agua
corriente

La coloración de fondo tiñe en azul celulas y flora NO BAR


y resaltan los BAR teñidos en rojo vivo
COLORACION DE ZIEHL NEELSEN

Ningun BAR observado en 100 campos (-)


observados
Menos de 1 BAR por campo en 100 (+)
campos observados
1 a 10 BAR por campo en 50 campos (+) (+)
observados-

Mas de 10 BAR por campo en 20 campos (+) (+) (+)

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observados.
CULTIVO
Ø Previa homogeneización y concentración.
Ø Medios sólidos: Lowenstein-Jensen y Petragnani
Ø Medios líquidos: Sula y Dubos
Ø Se inspeccionan cada 7 días durante 60 días.
Ø Las colonias aparecen alrededor de la 4ta semana.

Mycobacterium tuberculosis: Colonias redondas, irregulares,


rugosas, color blanco crema.

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MNT Fotocromógenas à Coloración amarilla solo cuando se
exponen 1-2 horas a la luz.

MNT Escotocromógenas àColoración anaranjada o rojiza de


las colonias que se mantiene en la oscuridad
CULTIVO

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PDD o PRUEBA DE LA TUBERCULINA
Se inyecta por vía intradérmica 5 unidades de tuberculina en la cara anterior del
antebrazo, se debe leer a la 48-72 horas.
ü Una induración de diámetro mayor o igual a 10 mm se considera positiva
ü Una induración de diámetro menor a 6 mm se considera negativa
ü Una induración de diámetro entre 6 a 9 mm se considera dudosa
ü En pacientes VIH positivos, una induración de diámetro mayor o igual a 5 mm se
considera positiva

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Una prueba positiva indica que el individuo ha estado en contacto con el M.
tuberculosis y que continua alojando bacterias viables en algún tejido
COLORACION DE ZIEHL NEELSEN
Ø NO CRECE EN MEDIOS DE CULTIVO.
Ø Los bacilos se encuentran en las
lesiones cutáneas, ganglios, nervios y
secreción nasal.
Ø Las muestras investigadas son el moco
nasal y escarificación de los lepromas o
lesiones hipocrómicas.

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En los frotis se pueden observar en grupos o
masas compactas conocidas como “globi" , que
se encuentran rodeados por una membrana
limitante llamada glera, responsable de la
agregación de los bacilos
LEPROMINO REACCION O PRUEBA DE FERNANDEZ Y MITZUDA
Mide la capacidad de un individuo de responder inmunológicamente al M. Leprae
Se realiza mediante la inyección intradérmica en la superficie interna del antebrazo de bacilos
inactivados por el calor
1. A las 48 horas se realiza una lectura conocida como reacción de Fernández
Indica prexistencia de hipersensibilidad retardada. Se considera positiva cuando hay la
formación de un eritema de 10 mm o más y dudosa entre 5 mm y 10 mm.
1. A las 4 semanas se realiza una lectura conocida como reacción de Mitsuda y es la más
importante.
Mide la formación de un granuloma debido a sensibilización previa o inducido por la misma

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prueba.
Se considera positiva cuando el diámetro de la infiltración o pápula que se forma mide 5 mm o
más. Se considera un índice de resistencia del paciente
Tanto la prueba de Fernández como de Mitsuda son negativas en los pacientes lepromatosos y
borderline lepromatosos
INFECCIONES DE
TRANSMISION

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SEXUAL
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TREPONEMA PALLIDUM
COLORACIÓN FONTANA- TRIBONDEAU
IMPREGNACIÓN ARGÉNTICA

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OBSERVACIÓN EN FRESCO EN CAMPO
OSCURO

Puntos brillantes con movimientos Brownianos


SIFILIS
1. Métodos directos: Demostrar agente causal en muestras de la lesión.
• Observación en fresco en campo oscuro
• Impregnación argéntica Fontana-Tribondeau
• Coloración de Giemsa prolongado
• Anticuerpos fluorescentes

2. Métodos indirectos: Serología, en latencias.


A. No Treponémicas: Anticuerpos reagínicos (Cuali-cuantitativo, seguimiento)
VDRL RPR ELISA TRUST

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B. Treponémicas: Anticuerpos especificos (Dx, cualitativo)
FTA, TPHA, Captia siphylis M, WESTERN BLOT
IMPREGNACIÓN ARGENTICA FONTANA- TRIBONDEAU

1. Deshemoglobinización (Muestras con sangre): cubrir la preparación con


liquido de Ruge por 50 seg.

1. Fijación: Cubrir la preparación con alcohol absoluto durante 3 minutos,


eliminar exceso y quemar las ultimas gotas.

2. Mordiente: Cubrir con solución de tanino y calentar hasta emisión de vapores,


dejar actuar por 30 seg y lavar con agua destilada.

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3. Impregnación:
ü Cubrir la lamina con el liquido de fontana y dejar actuar por 30 seg.
ü Calentar hasta emisión de vapores dejar actuar 30 seg mas.
ü Lavar con agua corriente y secar.
SECRECION URETRAL
COLORACIÓN GRAM

Cocos gramnegativos en pareja


predominantemente
intracelulares con PMN.

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URETRITIS
GONOCOCICA VS NO GONOCOCICA
Neisseria gonorrhoeae Chlamydia trachomatis
Ureaplasma urealyticum
Trichomonas vaginalis
Agar Thayer - Martin Se incuba a 35ºC en atmosfera de CO2
“VIRGEN” durante 36 a 48 horas

Medio solido y selectivo predilecto


para aislar Neisseria gonorrhoeae de
muestras que posean flora asociada.

Colonias opacas de blanco-grisaceo

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poco elevadas de bordes lobulados
MEDIOS DE TRANSPORTE - CONSERVACIÓN

Transgrow

Son utilizados cuando no es posible la


siembra inmediata de la secreción.
Es un Thayer-Martin ligeramente modificado

Permite conservar la vialidad de las

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Neisserias por 12 horas
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