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Introducción
Los carbohidratos constituyen sustancias con grupos funcionales aldehídicos o
cetónicos, además de radicales alcohólicos primarios y secundarios. Se definen como
polihiroxialdehídos, polihidroxicetonas o aquellos compuestos que por hidrólisis los
producen.
Las cetosas generalmente producen un color rojo. En las condiciones que se efectúa la
prueba, todas las cetosas que pueden estar unidas en enlace glicosídico quedarán en
libertad y originarán reacción positiva.
Otras reacciones están basadas en la formación de derivados del furfural, en la cual
todos los azúcares dan positiva la reacción. Los monosacáridos pueden deshidratarse
con ácidos minerales fuertes y concentrados para dar lugar a derivados del furfural. Esta
propiedad se utiliza con fines analíticos; ya que los furfurales reaccionan con
compuestos fenólicos, como el α-naftol o la resorcina, para dar derivados quinónicos
coloreados. En esta propiedad se basan los métodos de identificación de Molisch,
Seliwanoff, Bencidina y Tollens.
Figura 5. Prueba de Benedict. Reacción entre el citrato de sodio cúprico (Cu2+) y un azúcar
reductor para formar CuO de color amarillo-verdoso-rojo.
OBJETIVO GENERAL
Reconocer carbohidratos mediantes pruebas químicas
OBJETIVOS ESPECÍFICOS
1. Aplicar pruebas químicas específicas basadas en la formación de derivados del
furfural, poder reductor y otras propiedades en carbohidratos.
RECURSOS UTILIZADOS
1.-Materiales y equipos: capsula de porcelana, gradilla, tubos de ensayo, plancha de
calentamiento, pipeta graduada de 10ml, pipetas de plástico graduadas, goteros,
probetas de 5, 10, 25ml, varillas de vidrio, vasos de precipitación, estufa, termómetros,
pinzas
PROCEDIMIENTO:
I.-Preparación de reactivos
a.-Reactivo de Molish: Disolver 10 g de naftol en 100 ml de etanol al 95%
b.-Reactivo de Lugol: Moler y mezclar finamente en un mortero 50 g de yodo y 100 g de
yoduro de potasio. Disolver con agua destilada y aforar hasta un volumen de 1 litro.
c.-Reactivo de Barfoed: Disolver 13.3 g de acetato cúprico con 200 ml de agua y filtrar
si es necesario, añadir 1.9 ml de ácido acético concentrado.
Tabla de resultados:
Indicadores: coloración de cada precipitado en caso de ser positivo, observaciones en
pruebas negativas, intensidad de color, rapidez de formación de precipitados.
Fructosa
Arabinosa
Maltosa
Lactosa
Sacarosa
Celulosa
Pectina
Muestra 1
Muestra 2
Muestra 3
Muestra 4
Muestra 5
Muestra 6
Muestra 7
Muestra 8
Observaciones:
1.-Incluir el nombre de las muestras que han traído para su análisis correspondiente.
2.-Indicar en las muestras que den positiva la reacción de Barfoed, el tiempo de
aparición del precipitado pigmentado.
3.-Para cada uno de estas pruebas discuta los resultados e indique las conclusiones.
4.-Identifique los carbohidratos que puedan estar presentes en las muestras biológicas
analizadas.
5.-Elaborar una tabla integradora con todos los resultados obtenidos con las muestras
biológicas de todos los grupos
Autoevaluación:
1. De acuerdo a los siguientes resultados obtenidos según las pruebas realizadas,
identificar cada muestra. Discuta los resultados para la identificación de cada
carbohidrato.
Muestra Molish Selliwanoff Benedict Barfoed Lugol Carbohidrato
Muestra 01 + - + + -
(10min)
Muestra 02 + - + + -
(5min)
Muestra 03 + + - + -
Muestra 04 + - - - +
2. Explicar por qué los azúcares empleados dan positivo o negativo en las pruebas
ensayadas.
4. ¿Qué reacción de las realizadas se podría utilizar para identificar glucosa en orina?
Bibliografía
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Robit, J. and White, B. Biochemical Techniques. Theory and Practice. Illinois:
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Figura 10. Marcha analítica de reconocimiento de carbohidratos.
Elaborado por:
Ever Morales
Leonardo García