LABORATORIO DE MICROBIOLOGÍA

MATERIA: MICROBIOLOGÍA GENERAL INTRODUCCIÓN

BIOSEGURIDAD EN EL LABORATORIO DE MICROBIOLOGÍA

1.OBJETIVOS:

 Concienciar al estudiante con los principios de trabajo en el laboratorio de

microbiología y proporcionar orientación práctica sobre las normas de bioseguridad y el
uso correcto del equipo de seguridad.

2. BASES CONCEPTUALES

Un laboratorio de microbiología es un área convenientemente habilitada donde se pueden

manejar y examinar microorganismos. Es esencial familiarizarse con la organización de este
tipo de laboratorios y las normas de seguridad antes de realizar cualquier ejercicio práctico
para garantizar la seguridad de los usuarios y lograr el uso eficaz del tiempo y de los recursos.
El trabajo debe ser llevado a cabo con una buena técnica aséptica por lo que se requiere un
ambiente limpio y ordenado, para ello debe trabajarse en condiciones de esterilidad. En un
laboratorio de microbiología se pueden lograr estas condiciones en cámaras de seguridad
biológica (cámaras de flujo laminar), o bien en la proximidad de la llama de un mechero de
alcohol o de gas.

Nunca debe olvidarse la necesidad de cumplir con estos dos requisitos básicos:
1. Restringir la presencia de los microorganismos en estudio a sus recipientes y medios
de cultivo para evitar el riesgo de contaminación
2. Evitar que los microorganismos ambientales presentes en la piel, pelo, aire, ropa, etc.,
contaminen sus muestras

BIOSEGURIDAD EN EL LABORATORIO DE MICROBIOLOGÍA:

Bioseguridad es el conjunto de normas o actitudes que tienen como objetivo prevenir los
accidentes en el área de trabajo, es decir, a disminuir el potencial riesgo ocupacional.
Durante el trabajo diario en la sección de microbiología, se dan situaciones de potenciales
riesgos que varían según el agente infeccioso y los procedimientos utilizados. Las Normas de
Bioseguridad pretenden reducir a un nivel aceptable el riesgo inherente a la manipulación de
material peligroso.

La peligrosidad de un agente está directamente relacionada con el tipo de microorganismo y la

manipulación a la que es sometido. Por ello es básico:
1. Conocer los agentes, sustancias y productos peligrosos que existen en el laboratorio.
2. Conocer la metodología de trabajo del laboratorio.
3. Conocer el equipamiento del laboratorio.
4. Conocer las medidas a tomar en caso de emergencia.
5. Conocer las leyes relacionadas con la seguridad biológica.
6. Respetar y hacer cumplir todo lo anterior.

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Para que se produzca un accidente por agente biológico deben concurrir básicamente cuatro
elementos:
a. Un huésped susceptible
b. Un agente infeccioso
c. Una concentración suficiente de éste
d. Una ruta de transmisión apropiada.

De todos ellos, el que mejor se puede controlar en el laboratorio es la ruta de transmisión. Las
rutas de transmisión más comunes en el laboratorio son la aérea y la inoculación directa, muy
por encima de todas las demás, aunque la oral, la percutánea y el contacto directo con la piel
o las mucosas también son posibles.

CLASIFICACIÓN DE LOS AGENTES BIOLÓGICOS POR GRUPO DE RIESGO:

Según la capacidad que tienen los microorganismos para causar enfermedades en humanos
se clasifican en cuatro grupos de riesgo

Grupo Riesgo infeccioso Riesgo de Profilaxis o Ejemplo

de propagación tratamiento eficaz
riesgo a la
colectividad
1 Poco probable que causen No Innecesario B. subtilis, Naegleria,
enfermedad E. coli ,
Saccharomyces sp.
2 Pueden causar una Poco Generalmente Actinomyces sp,
enfermedad y constituir un probable posible Enterobacterias,
peligro para los Candida sp,
manipuladores Cryptococcus
neoformans.

3 Pueden provocar una Probable Generalmente Mycobacterium

enfermedad grave y posible tuberculosis,
constituir un serio peligro Histoplasma
para los manipuladores capsulatum, Neisseria
meningitidis,
Chlamydia
trachomatis.

4 Provocan una enfermedad Elevado No conocido en la virus

grave y constituyen un actualidad
serio peligro para los
manipuladores

NIVELES DE BIOSEGURIDAD:

1. Nivel de Bioseguridad 1
En este nivel se trabaja con agentes del grupo 1. El acceso al laboratorio no es restringido y el
trabajo se realiza por lo regular en mesas estándar de laboratorio.

2. Nivel de Bioseguridad 2
Es similar al nivel 1 y en él se manejan agentes de peligro moderado hacia el personal y el

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ambiente, pero difiere del nivel 1 en las siguientes características:

 El personal de laboratorio tiene entrenamiento específico en el manejo de agentes
patógenos
 El acceso al laboratorio es restringido cuando se está realizando algún trabajo.

3. Nivel de Bioseguridad 3
Este nivel es el que se encuentra en los laboratorios clínicos, de diagnóstico, algunos
laboratorios universitarios y también de investigación, en el cual se realiza trabajo con agentes
exóticos o que pueden causar un daño serio y potencialmente mortal como resultado de la
inhalación o exposición a los mismos (por ejemplo, el Ántrax).

4. Nivel de Bioseguridad 4
Este nivel es el que se utiliza para trabajar con agentes biológicos que representan un alto
riesgo individual de contagio y que además son un riesgo para la vida.

NIVELES DE CONTENCIÓN:
1. De las técnicas de laboratorio:
El elemento más importante para contener los riesgos biológicos es el seguimiento
estricto de las prácticas y técnicas microbiológicas. (Manual de Seguridad Biológica).

2. De los equipo de seguridad (barreras primarias): son la primera línea de defensa

cuando se manipulan materiales biológicos que puedan contener agentes patógenos.
El ejemplo más claro de contención primaria lo constituyen las cabinas de seguridad
biológica y mecheros, además se incluyen también dispositivos o aparatos que
garantizan la seguridad como elementos de protección personal (guantes, mascarillas,
batas, calzado, etc.).

MECHERO DE GAS:
La zona de esterilidad es de 30cm a la redonda del mechero. Normalmente los mecheros de
Bunsen tienen un regulador de entrada de la cantidad de aire con el que hay que obtener una
mezcla aire-gas, de forma que la llama tenga la temperatura suficiente. Las llamas <<frías>>
son anaranjadas y se ven bien pero no esterilizan; las llamas muy <<calientes>> son de un
azul prácticamente invisible, lo cual supone un riesgo si no se trabaja con cuidado, pero
esterilizan.

CABINAS DE SEGURIDAD:

Son una barrera primaria cuando se trabaja con agentes peligrosos o infecciosos, sin embargo
ellas no proveen un completo aislamiento, por ejemplo en el control de aerosoles.
La campana de gases (o vitrina extractora de gases) es un recinto ventilado que captura los
humos y vapores procedentes de la manipulación de los productos químicos en el laboratorio.
No ofrece protección alguna frente a riesgos biológicos.

Las cabinas de flujo laminar emplean un ventilador para forzar el paso del aire a través de
un filtro HEPA barriendo la superficie de trabajo. El flujo de aire puede ser vertical u horizontal.
Estas cabinas ofrecen protección únicamente al material que se maneja en su interior, pero
nunca al operador.

Las cabinas de Seguridad Biológica (CSB) son recintos ventilados diseñados para limitar al
máximo el riesgo del personal de laboratorio expuesto a agentes infecciosos. Proporcionan
una zona de trabajo que minimice la probabilidad que una partícula transportada por el aire
tienda a escapar hacia el exterior de la cabina y contaminar así al operario y a la zona que le
rodea. Además, algunas de ellas, ofrecen protección al material que se manipula.

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AEROSOLES BIOLÓGICOS:

Son la causa más frecuente e importante de accidente biológico y su origen es muy variado.
Muchas veces pasan inadvertidos, por lo que siempre hay que dar por hecho que existen
cuando se producen derrames o salpicaduras.
La mala práctica es la fuente más común de los aerosoles: enfriar asas calientes hundiéndolas
en el agar, utilizar centrífugas no herméticas, centrifugar con tubos abiertos o mal cerrados,
agitar cultivos con el asa dentro del tubo, pipetear con demasiada fuerza, oler las placas, etc.

NORMAS DE TRABAJO EN EL LABORATORIO DE MICROBIOLOGÍA

El laboratorio de microbiología cuenta con las respectivas instalaciones para manejar y

examinar microorganismos, pero es necesario tener en cuenta la posibilidad de riesgos
asociados con el manejo de muestras biológicas (microorganismos) y reactivos químicos.
Todos los microorganismos que se manipulen deben ser manejados con precaución por su
potencial patogenicidad dependiendo de la muestra.

 El acceso al laboratorio estará limitado a estudiantes con la presentación del carnet

estudiantil.
 Los estudiantes y personal que trabaje en el laboratorio debe cumplir las normas de
seguridad.
 Una vez se ingrese se debe colocar las mochilas, gorras, chompas, libros y demás
objetos, en los casilleros para evitar un posible accidente y NUNCA sobre los bancos o
mesones.
 Los estudiantes con cabello largo deber recogerlo para trabajar dentro del laboratorio;
así como usar todos los implementos necesarios para la protección según el nivel de
riesgo biológico (mandil, cofia, mascarilla)
 No se debe aplicar pestañita u otro tipo de maquillaje porque deteriora los oculares del
microscopio.
 Se debe colocar un calzado cerrado para las prácticas en el laboratorio, así como
mantener las uñas cortas, limpias y sin esmalte.
 Está prohibido comer, beber, fumar y maquillarse, dentro de las instalaciones del
laboratorio.
 Es obligatorio el uso de mandil largo, abotonado y limpio con el nombre, sello de la
Universidad Tecnológica Equinoccial UTE y el logotipo de Ingeniería de Alimentos /
Ingeniería Ambiental; además de usar guantes quirúrgicos y mascarilla; para la
realización de prácticas, revisión de cajas y lavado de material sucio. Estos
implementos personales serán destinados exclusivamente para el trabajo en el
Laboratorio de Microbiología. Podrán retirarse el mandil al terminar la práctica, para el
respectivo aseo y protegiéndolo con una bolsa de plástico, se recomienda lavar
individualmente con jabón estas prendas. (No podrá usarse en otras áreas de la
facultad como aulas de clase o corredores).
 Las puertas y ventanas deben permanecer cerradas durante la práctica de laboratorio
para evitar la contaminación por corrientes de aire.
 Nunca comience el trabajo en el laboratorio sin el permiso previo del instructor o
supervisor
 Al iniciar y finalizar la práctica el estudiante lavará sus manos escrupulosamente con
agua y jabón.
 El lugar de trabajo debe estar siempre limpio y ordenado; para iniciar las siembras
microbiológicas es conveniente desinfectar la superficie de trabajo con alcohol
antiséptico de 70° o 95°.
 Se deben evitar los desplazamientos innecesarios por el Laboratorio, debido a que los
microorganismos deben manejarse cerca de la flama del mechero.

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 Cuando se manipulen microorganismos evite hablar sin necesidad o llevarse las

manos a la nariz, boca, ojos etc.
 Utilice los basureros con la funda de color rojo para depositar los residuos peligrosos
biológicos infecciosos que se generen en la realización de la práctica, no tirar nada en
los lavabos y en la funda de color negro se deben depositar los desechos inorgánicos
(papeles kraff, etc).
 Incubar las siembras microbiológicas el tiempo que se indique, caso contrario
desecharlas.
 No almacenar material en el refrigerador, solo en el caso de que se requiera un mayor
espacio en las incubadoras, y no por mucho tiempo.
 Esta estrictamente prohibido retirar del Laboratorio cultivos o cepas a menos que así lo
indique el profesor.
 Emplee los equipos según las instrucciones o procedimientos operativos.
 Apagar los instrumentos eléctricos antes de manipular las conexiones, y
desconectarlos después de su uso.
 Por seguridad del personal y protección del ambiente, nunca se usará la fregadera,
papelera o basura para deshacerse del material contaminado. Los desechos
contaminados deberán ser esterilizados en el laboratorio antes de procesarlos como
residuos.
 Cuando se trabaje con luz ultravioleta debe tenerse en cuenta que la exposición a este
tipo de radiación es peligrosa, puede producir graves quemaduras e incluso tiene
poder mutagénico
 Al finalizar la práctica entregar el material empleado debidamente limpio, ordenado y
completo.

3. MATERIALES

NO APLICA

4. MÉTODO

NO APLICA

5. CUESTIONARIO DE INVESTIGACIÓN

1. ¿Cómo se debe manejar los residuos líquidos en el laboratorio?

2. ¿Cómo debe eliminarse el material biológicamente peligroso de un laboratorio

de microbiología?

3. ¿Qué medidas deben tomarse en el caso de ocurrir un derrame de algún cultivo

microbiano?

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6. BIBLIOGRAFÍA

- OMS (2005) Manual de bioseguridad en el laboratorio. Tercera Edición. Ginebra. ISBN

92 4 354650 3
- Yousef A., Carlstrom C. (2003). Microbiología de los alimentos: Manual de laboratorio.
Editorial Acribia, S.A. Zaragoza España
- Gamazo C., López-Goñi I, Díaz R. (2009). Manual práctico de Microbiología. Tercera
edición. Elsevier Masson