Angelus Giuseppe Pereira da Silva

Diego da Silva Sales

Etelvira Cristina Barreto Rangel Leite
Ítalo de Oliveira Matias

Cadernos
de Engenharia
Fascículo 1 - 2014

Fundamentos de Estereologia: Introdução

Volume 1
Primeira Edição
Cadernos Palavras do Editor
de Engenharia
Fascículo 1 - 2014

Cadernos de Engenharia
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Editor
Angelus Giuseppe Pereira da Silva
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Autores: Angelus G.P. da Silva, Diego S.
Sales, Etelvira C.B.R. Leite e Ítalo O. Matias
Publicação: Cadernos de Engenharia, Vol. 1,
Fascículo 1, 2014
Título: Fundamentos de Estereologia:
Introdução
Local: cadeng.com.br
E
Este fascículo inaugura a coleção cadernos
de engenharia. Esta coleção pretende ofere-
cer conteúdos técnicos e acadêmicos rela-
cionados às diversas engenharias. O fascículo é
uma das formas de publicação de conteúdo que
serão divulgadas no portal cadeng.com.br. Outros
formatos disponíveis são o vídeo, softwares, ani-
mações, simulações, slides, imagens etc. O usu-
ário pode ter acesso gratuito aos conteúdos me-
diante download, após cadastrar-se no site.
O tema deste fascículo é a estereologia. Trata-
-se de uma técnica de caracterização quantitativa
de imagens, também denominada de microscopia
quantitativa. A estereologia encontra aplicação em
áreas como geologia, biologia, medicina e mate-
riais.
Este fascículo introduz o tema, com superfi-
cialidade. O objetivo é passar aos leitores o que a
estereologia é, em que é aplicada, como é aplicada
e que tipos de informações pode produzir. Os de-
mais capítulos aprofundam o assunto.

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Projeto gráfico e diagramação

Mariana de A. Reis
mari.r.design@gmail.com

Imagem da capa:
Simulação computadorizada de grãos de carbeto
de tungstênio em ligas de metal duro.
Sumário
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de Engenharia
Fascículo 1 - 2014

04 Índice de Figuras
Listas de Símbolos e Abreviaturas

05 Introdução

10 Teste de Avaliação e Fixação

11 Bibliografia
Índice Remissivo

3
Índice de Figuras
Figura 1 - Página 6

Figura 2 - Página 7

a) b)

Índice de Símbolos e Abreviaturas

ASTM – American Society for Testing and Ma-
terials. Órgão norte-americano responsável
pela preparação de normas.
CEN - Comité Européen de Normalisation.
Órgão europeu responsável pela preparação
de normas.
FME – Ferramenta de Medição Estereológica.
Recurso usado para permitir a identificação
dos elementos a serem medidos na imagem
da estrutura. Pode ser pontos, linhas, planos
etc.
PP – Fração dos pontos traçados sobre a ima-
gem da estrutura que estão localizados sobre
uma determinada fase presente.
VV – Fração de volume da estrutura que é ocu-
pada por uma determinada fase presente.

4
Introdução
A
estereologia é um conjunto de procedi-
mentos baseados em probabilidade e
geometria capazes de produzir valores
para características de uma estrutura 3D a
partir de medições feitas em uma imagem 2D
desta estrutura.
A microscopia é uma das técnicas mais
utilizadas na pesquisa, desenvolvimento e
controle de qualidade de estruturas de mate-
riais. Ela permite caracterizar estruturas qua-
litativa e quantitativamente. A caracterização
qualitativa registra as fases presentes em uma
estrutura, aponta se os grãos existentes são
grossos ou finos; se as fases estão homogene-
amente dispersas ou concentradas em certas
regiões da estrutura; qual o formato dos grãos;
se apresentam algum tipo de orientação etc.
Este tipo de informação é subjetiva e pos-
sui baixa reprodutibilidade. Um mesmo indi-
víduo pode produzir resultados distintos, se
repetir a observação algum tempo depois. A
ciência e a técnica requerem mais do que isso.
Informações quantitativas, por outro lado,
são expressas numericamente. Isto elimina
em muito a subjetividade do ato de medição.
Contudo, métodos de medição devem ser cria-
dos de forma que produzam resultados confi-
áveis e reprodutíveis.
A estereologia, também denominada de
microscopia quantitativa, é um conjunto de
procedimentos que determinam valores para
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de Engenharia
Fascículo 1 - 2014
diversas características estruturais. Esses
procedimentos são baseados em probabili-
dade e geometria. A estereologia consegue
determinar características de uma estrutura
tridimensional a partir de uma imagem bidi-
mensional dela. Portanto, pode-se também
definir a estereologia como uma técnica ca-
paz de transformar valores medidos de ele-
mentos bidimensionais em valores associa-
dos do espaço tridimensional.
Esta técnica é capaz de medir áreas su-
perficiais, volumes, comprimentos, densida-
des, distribuição de tamanhos, entre outros
parâmetros. Não se pode confundir procedi-
mentos estereológicos com aqueles empre-
gados, por exemplo, para determinar tama-
nho médio de grão ASTM (ASTM, 1996), ou
para classificar a porosidade presente em
metal duro (CEN, 1993). Esses métodos ci-
tados como exemplo fazem uso de gráficos
que devem ser comparados visualmente com
a imagem da estrutura. Uma vez encontrado
o gráfico mais assemelhado com a estrutura
observada, dá-se o valor correspondente ao
gráfico ao parâmetro estrutural que se está
medindo. O valor atribuído ao parâmetro em
questão depende da comparação entre a ima-
gem e o gráfico, que é uma ação subjetiva.
O uso correto da estereologia deve ser pla-
nejado como um projeto de medição. O fluxo-
grama mostrado na Figura 1 ilustra as etapas
deste projeto.
5
Figura 1: Etapas do projeto de medição estereológica de uma estrutura
Fonte: Próprio autor.
O trabalho começa com a definição dos parâ-
metros a serem medidos. A medição de cada parâ-
metro requer um procedimento distinto e a disper-
são das medidas pode ser estimada em função do
número de elementos estruturais medidos.
Existe um grande número de procedimen-
tos de preparação de amostras disponíveis.
Deve-se escolher o mais adequado para o
material específico a ser analisado. Em geral,
o procedimento mais adequado está relacio-
nado à natureza do material. Por isso, eles são
agrupados e recebem os nomes de metalogra-
fia, ceramografia ou petrografia, relacionados
a materiais metálicos, cerâmicos ou minerais,
respectivamente. Sem mencionar a preparação
de materiais biológicos que possuem técnicas
completamente específicas de preparação.
Deve-se sempre enfatizar a importância da
boa preparação da amostra. A qualidade da ima-
gem é uma condição de extrema importância na
medição estereológica. Esta qualidade come-
ça a ser assegurada pela correta preparação da
amostra. É nesta etapa que todas as amostras
são preparadas. Para tal, o número de amostras
necessárias é determinado com base na estima-
tiva de erro. O ideal é a preparação de um número
de amostras que exceda as necessidades.
Em geral, as estruturas só podem ser vis-
tas com auxílio de microscópio. Existem diver-
sos tipos de microscópio. Cada qual com suas
características. A escolha de qual microscópio
deve ser usado depende de fatores tais como
a natureza do material a ser observado, as di-
mensões dos elementos estruturais a serem
medidos, o tipo de imagem requerida, e, obvia-
mente, a disponibilidade do equipamento.
Uma vez escolhido o tipo de microscópio,
as condições de observação devem ser otimi-
zadas para produzir a mais alta qualidade das
imagens. O conhecimento e o domínio dos re-
cursos do microscópio são de grande ajuda
neste propósito.
A classificação ou tipificação da estrutura é
outro ponto a ser considerado, pois o tipo de es-
trutura é essencial para determinar que imagens
serão usadas na medição estereológica. O crité-
rio da seleção de imagens é traduzido por duas
palavras: aleatoriedade e representatividade.
Na verdade, o parâmetro mais importante
de classificação de uma estrutura para fim es-
tereológico é sua homogeneidade. Estruturas
homogêneas são aquelas que, quando dividi-
das em volumes menores (subvolumes), as ca-
racterísticas destes volumes são equivalentes.
Nas estruturas heterogêneas, as características
destes subvolumes variam. Imagens podem ser
feitas em qualquer lugar das estruturas homo-
gêneas. No entanto, regras de seleção de ima-
6
gens devem ser seguidas para a produção de dido. O resultado desta contagem, ou medição,
imagens em estruturas heterogêneas. Isto é é substituída em uma fórmula que relaciona a
necessário para garantir que o conjunto de ima- medida feita com o valor do parâmetro estru-
gens represente verdadeiramente a estrutura. tural que se deseja medir.
Registrar imagens é bater a fotografia. Par- Os procedimentos de medição estereoló-
tindo do suposto de que o melhor modo de gica são simples e fáceis de serem seguidos.
preparação da amostra foi adotado e que os É por vezes surpreendente como podem for-
melhores recursos e condições de observação necer valores de parâmetros estruturais 3D
do microscópio estão sendo aplicados, o regis- complexos a partir de uma imagem 2D. Como
tro tem como critérios maiores a qualidade e a exemplo, suponha a imagem mostrada na Fi-
quantidade das imagens. gura 2(a), representando uma estrutura bifá-
sica de um material compósito. A fase matriz
A quantidade de imagens a serem usadas
(azul transparente) envolve uma fase dispersa,
está relacionada ao tipo de estrutura – estrutu-
consistindo de grãos perfeitamente esféricos e
ras heterogêneas requerem número maior de
de mesmo tamanho (vermelha). Os grãos es-
imagens – e ao nível de dispersão desejado. O
féricos ocupam determinada fração de volume
número de imagens está ligado ao número de
da estrutura. Qual o valor desta fração?
elementos estruturais medidos, e este, à dis-
persão encontrada.
A qualidade de uma imagem é descrita pela Figura 2: Estrutura compósita hipotética, constituída de fase matriz
azul transparente e fase dispersa com grãos esféricos vermelhos (a),
resolução e pelo contraste, como será visto em vista de um plano de corte desta estrutura, mostrando a fase matriz,
edição futura. Recursos de câmera devem ser em verde, e as seções dos grãos esféricos, em azul. Sobre a imagem,
uma grade com pontos vermelhos é desenhada (b).
apropriadamente manipulados para maximizar
a qualidade. Em muitas ocasiões, programas
editores de imagem precisam ser usados para a)
aumentar a qualidade. Isto deve ser feito com
cuidado para não alterar as características re-
ais da estrutura representadas na imagem.
Medição estereológicas manuais ou se-
miautomáticas podem ser feitas diretamente
em imagens com ou sem edição, mas quando
a medição é automática, as imagens devem so-
frer bem mais do que edição. Recursos como
segmentação e binarização precisam ser em-
pregados, Estes recursos alteram sobremaneira
as imagens, mas são necessários para que os
softwares de análise estereológicas possam fa-
zer seu trabalho sem intervenção do operador. b)
Todas as etapas do projeto até aqui citadas
antecedem a medição estereológica, mas são
necessárias para que a medição alcance bom
resultado. A medição estereológica envolve a
contagem, a medida de comprimento e/ou de
área de algum elemento estrutural mostrado
na imagem. É comum que para realizar a medi-
ção seja necessário desenhar sobre a imagem
pontos ou linhas, aqui denominados ferramen-
tas de medição estereológica (FME). São essas
FME que indicam o que deve contado ou me- Fonte: imagens produzidas pelo programa Caixa de Grãos (Zeferino, 2006)

7
 A maioria das estruturas de materiais é
opaca. Seccionar a estrutura e observar o pla-
no de corte é a maneira de ver seu interior. A Fi-
gura 2(b) ilustra um plano de corte da estrutura
compósita. Nele, os grãos esféricos são repre-
sentados pelas seções circulares azuis. A fase
matriz é mostrada em verde. As seções variam
de tamanho, pois o plano de corte seccionou
os grãos esféricos em diferentes posições.
Sobre a imagem do plano corte foi traça-
da uma grade de 100 pontos igualmente es-
paçados, mostrados em vermelho. Esta é a
FME a ser usada aqui. A medição estereoló-
gica envolve a contagem do número de pon-
tos da grade que incidem sobre as seções dos
grãos esféricos. Por fim, divide-se o resultado
da contagem pelo número total de pontos da
grade. Este valor, denominado PP, é a fração de
pontos incidentes sobre os grãos esféricos. A
relação estereológica mostrada pela equação
(1) (Underwood, 1970) garante que esta fração
é numericamente igual à fração de volume da
estrutura ocupada pelos grãos esféricos.
VV = PP (1)
O número de pontos coincidentes é 50,
resultando em . Portanto, a fase representa-
da pelos grãos esféricos ocupa cerca de 50%
da estrutura. A diferença entre o valor real e o
valor encontrado depende do número total de
pontos da grade.
Apesar da simplicidade de seus procedimen-
tos, a medição estereológica manual demanda
muito trabalho, pois cada parâmetro medido
pode envolver a contagem de centenas de pon-
tos em várias imagens (ou a medida de compri-
mentos de centenas de segmentos). Esta talvez
seja a razão mais importante da subutilização da
técnica por parte dos pesquisadores.
A medição manual envolve o traçado das
FMEs, o reconhecimento dos elementos a se-
rem medidos, sua medição efetiva (contagem
de pontos, medida de comprimento ou área) e
a aplicação da fórmula específica. A medição é
a etapa particularmente trabalhosa. Horas en-
tediantes podem ser gastas aqui, com a aten-
ção inteiramente voltada para esta tarefa, sob
pena de perder o controle sobre as medidas.
Programas de medição estereológica mu-
daram esta situação, uma vez que eliminam,
ou reduzem bastante, a parte mais trabalhosa
da estereologia, que é a contagem, ou medição
de comprimentos ou áreas. Os programas in-
troduziram dois novos tipos de rotinas de me-
dição: a automática e a semiautomática.
Na medição automática, o usuário deter-
mina os parâmetros a serem determinados. O
programa lê o arquivo de imagem e apresenta
os resultados sem a necessidade de qualquer
outra intervenção do usuário. Cabe ao progra-
ma traçar as FMEs necessárias, reconhecer o
que deve ser contado ou medido, executar a
contagem ou medição, aplicar a fórmula este-
quiométrica e apresentar o resultado final.
A etapa crítica de qualquer procedimento
estereológico automático é o reconhecimen-
to daquilo que deve ser contado ou medido na
imagem. O sucesso desta etapa repousa enor-
memente na qualidade da imagem usada. Caso
o programa não reconheça satisfatoriamente
aquilo que deve medir, os resultados apresen-
tados não serão confiáveis e devem ser des-
cartados. Por isso, é usual editar intensamente
a imagem. Algumas rotinas estereológicas de
medição automática só trabalham com ima-
gens binarizadas, ou seja, que contêm somente
os tons preto e branco. Para isto, a aparência real
da estrutura é completamente mudada, porém,
preservando as características originais que im-
portam para a medição. Somente em imagens
binárias, as rotinas estereológicas automáticas
são capazes de garantir o reconhecimento dos
elementos a medir.
A medição semiautomática é um modo
intermediário de medição. Neste, o programa
deixa o reconhecimento dos elementos a se-
rem medidos ao encargo do usuário e o auxilia
nas demais etapas. Por exemplo, o programa
desenha os FMEs; auxilia a contagem, identifi-
cando os pontos já contados e fazendo a soma
dos pontos; mede comprimentos e áreas e
aplica a fórmula estereológica correspondente.
Este método de medição é indicado para situ-
ações em que a imagem não pode ser editada
8
satisfatoriamente para ser usada por uma roti-
na automática.
O uso de rotinas automáticas de medição
exige do operador crítica e conhecimento so-
bre a estrutura do material e sobre estereo-
logia. Do contrário, a facilidade tentadora que
a rotina automática oferece pode vir acompa-
nhada de erros de medida que desvirtuam os
resultados encontrados.
Os fascículos seguintes trarão mais infor-
mação sobre a estereologia. Serão apresen-
tados conceitos básicos sobre computação
gráfica, envolvendo captura de imagem di-
gital, elementos da imagem digital, e funda-
mentos de recursos de edição de imagens;
tipos de estruturas de materiais e sua classi-
ficação e as regras de seleção de imagens em
função do tipo de estrutura; procedimentos
estereológicos de medição de diversos parâ-
metros estruturais, com sua execução prática
e a respectiva dedução a partir de princípios
de geometria e probabilidade. Ao final de cada
capítulo há um teste de avaliação e fixação
dos conhecimentos apresentados.

9
Teste de Avaliação
e Fixação
1 - Quais as informações que podem fornecer 6 - Use a imagem abaixo para determinar a
as microscopias qualitativa e quantitativa? fração de volume ocupada pela fase repre-
sentada pelos círculos azuis nas duas condi-
ções seguintes:
2 - Defina estereologia.

3 - Quais as etapas de um projeto de medição

estereológica?

4 - Marque V ou F se a sentença for verdadeira

ou falsa.
(___) A informação qualitativa tem em sua sub-
jetividade um ponto positivo
(___) A preparação da amostra para observa-
ção em microscópio segue passos que depen-
dem da natureza do material.
(___) Do ponto de vista da estereologia, estrutu-
Fonte: Imagem gerada pelo programa “caixa de grãos” (Zeferino, 2006).
ras homogêneas são aquelas constituídas de
uma única fase.
7 - Use uma grade de 50 pontos regularmente
espaçados, no mesmo padrão daquela grade
5 - Marque V ou F se a sentença for verdadeira exibida na Figura 2(b).
ou falsa
(___) A medição manual é uma das razões do
8 - Use uma grade de 50 pontos posicionados
pouco uso da estereologia, por demandar mui-
sobre a imagem como você bem quiser.
to trabalho.
(___) Os programas de computador dedicados
à estereologia substituíram completamente a 8 - Compare os resultados encontrados nos
medição manual. itens anteriores. Foram iguais? Deveriam ser
iguais? Justifique.
(___) Na medição semiautomática, o programa
divide o trabalho de medição com o operador,
aproveitando o que estes programas têm de
melhor a oferecer, que é a capacidade de reco-
nhecimento de elementos estruturais, deixan-
do o restante ao encargo do operador.

10
Bibliografia
ASTM. (1996). ASTME112-96 Test methods for
determining average grain size. ASTM Interna-
tional, Montgomery.

CEN. (1993). EN 24505:1993 Specification for

hardmetals - Metallographic determination of
porosity and uncombined carbon. Brussels.

Underwood, E. E. (1970). Quantitative Stereology.

Reading: Addison-Wesley Publishing Company.

Zeferino, L. H. (2006). Simulação computacional

de medidas estereológicas da fase dispersa de
metal duro WC-Co. Tese de Doutorado. Campos
dos Goitacazes, RJ, Brasil: Prog. Pós-Graduação
em Engenharia e Ciência dos Materiais - UENF.

Índice Remissivo
binarização, 7

caracterização qualitativa, 5

ceramografia, 6

contraste, 7

Estrutura compósita, 7; 8

ferramentas de medição estereológica (FME),7

medição automática, 8

medição manual, 8

medição semiautomática, 8

metalografia, 6

microscopia quantitativa, 5

petrografia, 6

resolução, 7

segmentação, 7

11