Chromatographie sur couche mince

des OPC de pépins de raisin

I - Préparation de la solution pour chromatographie
 Dissoudre l'extrait sec d'OPC de pépins de raisin (dans le ballon), en
ajoutant, dans un premier temps, 4 à 5 gouttes de méthanol =
"solution d'OPC".
II - Chromatographie
 Support : film de Silice sur plaque aluminium - 3 pistes - Migration
sur 7,5 cm.
 À l'aide d'un capillaire, déposer :
1) 4 fois de la solution préparée ci-dessus (solution d'OPC).
2) 4 fois le témoin pour chromatographie de tanins catéchiques
(catéchine).
3) Leur mélange (piste centrale).
Ne jeter pas le reste de votre "solution d'OPC". Il est utilisé pour
mettre en évidence les polyphénols (FeCl3) et identifier leur
nature (Bate-Smith).
 Développer avec : Chloroforme - Méthanol - Acide acétique (7 / 3 /
0,3).
III – Révélation
 Placer le chromatogramme sous la hotte, et sécher à l'air (séchoir à
cheveux), afin d'éliminer toute trace de solvants.
 Observer le chromatogramme sous lumière UV (254 nm et 365 nm).
 Pulvériser (tamponner avec un coton) le réactif à l'anisaldéhyde.
Chauffer sur plaque chauffante (ou "heat-gun"), pour révéler le
chromatogramme.
 Repérer les monomères, les dimères et les trimères, par rapport à la
position de la catéchine, témoin.

Chromatographie des oligomères
procyanidoliques du pépin de raisin
Navigation :
Pour mettre en évidence et
caractériser les polyphénols de
cette drogue végétale, procéder
de la manière suivante :
Au reste de la "solution
d'OPC", ajouter : méthanol
(MeOH) : 3 mL
Répartir en 2 tubes à essais (de
16 mL ) : 1 mL et 2 mL
environ.
MEE des polyphénols :
réaction au perchlorure
ferrique
MEE des tanins condensés :
réaction de bate-smith
MEE des flavonoïdes : réaction
dite à la cyanidine
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