PLÁSTIDOS DESENCADENADOS: SU DESARROLLO Y SU INTEGRACIÓN EN

EL DESARROLLO DE LA PLANTA

1. Introducción
La característica principal de las plantas es su dependencia a la energía solar para
producir energía que será utilizada por casi toda la biosfera para formar otras
moléculas e impulsar el resto de procesos importantes para la vida, los
cloroplastos son los sitios donde sucede esto.
La fotosíntesis se originó a partir de procariotas tempranos que en un momento se
asociaron entre sí para aprovechar el agua como fuente de electrones
energizados por la luz, esa fotosíntesis oxigenica fue la ventaja de las
cianobacterias y se acepta que hace más de 1000 millones de años, una célula
eucariota con mitocondria engullo a una cianobacterias en una relación
endosimbiotica, sus descendientes colonizaron la tierra hace 450 millones de
años, en ese momento las cianobacterias se convirtieron en cloroplastos quienes
conservaron un pequeño grado de autonomía genética pero un alto grado de
bioquímica, perdieron funciones que tenían cuando tenían vida libre y adquirieron
nuevas, su necesidad ahora era sintetizar y acumular proteínas dentro de ellos y
en el citoplasma de la célula huésped.
Los cloroplastos definieron la fotosíntesis determinando el desarrollo de la planta
y el adaptamiento a señales ambientales como la luz y la disponibilidad de
materias primas. Los cloroplastos se diversificaron en otros plástidos para llevar a
cabo otras funciones esenciales en otras células que no necesariamente son
fotosintéticas que también dependían de señales ambientales para determinar su
función. Por tanto los cloroplastos transmitían información al núcleo de su célula
huésped mediante influencias ambientales o por iniciativa propia y también
aceptaron contribuciones que requería la relación endosimbiotica y contribuyeron
al conjunto del genoma del huésped. Por lo tanto ahora las plantas tendrían un
rango de sensores ambientales y reguladores químicos y morfogeneos que
afectarían su desarrollo.
2. Cloroplastos y otros tipos de plástidos
Los cloroplastos son característicos de las células de las hojas verdes y a parte de
las vacuolas son el compartimento más grande de las células del mesofilo. Su
tamaño oscila entre 5 y 10 μm de diámetro y 3-4 μm de grosor. Dependiendo de la
especie varían desde decenas hasta más de 100. Su papel primario es la
fotosíntesis. Tiene una membrana interna y otra externa que lo delimitan. En su
interior están los tilacoides: membranas fotosintéticas extensas que se extienden
por su eje formando vesículas, ya sea individuales: tilacoides estromales u
organizadas en pila o grana, contienen un espacio interno o luz. Las membranas
de tilacoides albergan los cuatro principales complejos o pigmentos de proteína
implicados en las reacciones de luz de la fotosíntesis: fotosistemas (PS) I y II, el
complejo de citocromo b6 / f y la ATP sintasa. La disposición en grana permite la
separación entre los dos PS, con PSII y su complejo de recolección de luz se
limita a membranas de granal no en contacto con estroma, mientras que el
fotosistema I se encuentra exclusivamente en tilacoides expuestos al estroma.
Todo esto, permite redistribuir la recolección de luz de acuerdo a sus condiciones.
El estroma, es el sitio de la fijación de carbono. Los tilacoides como el estroma son
 muy ricos en proteínas. El estroma también contiene cantidades variables de
grandes gránulos de almidón y pequeñas gotas de lípidos, llamadas plastoglobuli.
El componente lipídico de envolturas de cloroplastos y tilacoides se basa en
galactolípidos en lugar de fosfolípidos. La membrana exterior es muy permeable a
moléculas de hasta 10 kDa, mientras que la membrana interior es mucho más
selectiva, contiene una serie sofisticada de transportadores dedicados de
pequeñas moléculas que permiten, entre otros, la exportación de fotoasimilados.
Los cloroplastos también son fundamentales para el metabolismo de las plantas
en general: Síntesis de almidón, fotorreducción de nitrógeno, para todos los
aminoácidos y azufre, para cisteína, biosíntesis de ácidos grasos, de la base de
purina y pirimidina constituyente de los ácidos nucleico, la clorofila y otros
tetrapirroles, todos tienen lugar en los cloroplastos
Las células meristemáticas contienen proplastos incoloros, de entre 0,2 y 1 μm y
con vesículas de membrana internas muy limitadas. Existen alrededor de 10-20
proplastidos por célula. El embrión, así como muchos tipos de células no
metabólicamente especializadas, también contienen proplastidos. Los plástidos
con una morfología muy variable, más grandes que los proplastidos y con
membranas internas más desarrolladas, tanto en muchas células de la raíz como
en células de la hoja muy jóvenes que eventualmente contienen cloroplastos, han
sido llamados plastidios ameboides.
 AMILOPLASTOS: en células de la raíz, está lleno de una gran cantidad de
gránulos de almidón generados de fotosintato importado y también tiene una vía
de fosfato de pentosa oxidativa muy activa, que genera energía para asimilar
nitrógeno. Son componentes principales de las células de los órganos de
almacenamiento, como los tubérculos, los cotiledones y el endospermo de la
semilla
 LEUCOPLASTOS: se especializan en almacenar lípidos, acumulan aceites
aromáticos y se producen en pelos secretores (tricomas) o elaioplásitos, como los
que se encuentran en los órganos de almacenamiento que acumulan aceite, como
las semillas oleaginosas.
 CROMOPLASTOS, tienen la capacidad de acumular pigmentos, principalmente
los carotenoides isoprenoides y las xantofilas, y son responsables de los amarillos,
naranjas y rojos de muchas flores y frutos, los atrayentes de los animales que
ayudan a transferir el polen o dispersan la semilla. Se han descrito muchos por la
habilidad de formar cristales, su distinta solubilidad y la variedad de carotenoides.
 ETIOPLATOS: En células de la hoja. Acumulan grandes cantidades de lípidos
tilacoidales con el complejo de protoclorofilida y una enzima que conduce a la
reducción de la luz: protoclorofilia reductasa. Su membrana se verá como una
estructura semicristalina: cuerpo promelar. Tras la iluminación, los sacos de
membrana planos surgirán del cuerpo promelar que se convertirán en tilacoides
con sus complejos fotosintéticos normales.

3. GENETICA PLASTICA, a principios del siglo XX se informó que algunas de las

mutaciones en la forma de los plástidos no obedecían a las leyes de Mendel para
su transmisión entonces el biólogo celular Mereschkowsky propuso que los
 plastidios podían ser formas reducidas de las cianobacterias, observaciones que
se reforzaron mediante el modelo de endosimbiosis.
4. Porque tienen su propio ADN?
En los años 60 y 70 se demostró que los cloroplastos tienen su propia molécula de
ADN. Los proplastidos tienen alrededor de 20 copias del genoma, y los
cloroplastos alrededor de 100. Se ha determinado la secuencia del genoma
completo de cloroplasto de 45 organismos fotosintéticos; 22 son plantas
semilleras. Los análisis filogenéticos han concluido que la endosimbiosis de la
cianobacterias y una eucariota con mitocondria dio lugar a los cloroplastos. Los
genomas de cloroplastos contienen entre 120 y 135 genes; 76 codifican proteínas,
el resto otros ARN.
Organización de los genes del cloroplasto, los genes están organizados en
operones expresados como unidades policistronicas. El operon rpl23 del
cloroplasto contiene genes que en E.coli están separados en 3 operones. Algunos
de los genes de los cloroplastos también tienen intrones. 50 unidades
transcripcionales existen en general, dando lugar a la necesidad de procesamiento
post-transcripcional. La mayoría de los operones codifican subunidades del mismo
complejo molecular, aunque también existen híbridos.
Expresión del genoma plástido
El genoma del cloroplasto codifica 4 subunidades centrales rpoA, rpoB, rpoC1 y
rpoC2 de un ARN polimerasa similar a E.coli llamada polimerasa codificada por
plastidios o PEP. De acuerdo con esta maquinaria de transcripción de tipo
eubacterial, muchos genes de plástidos tienen secuencias promotoras -35
(TTGACA) y -10 (TATAAT). La búsqueda de una plástido polimerasa (NEP),
condujo a la identificación de un ARN polimerasa de subunidad única. Tres genes
para NEP existen en Arabidopsis, uno dirigido a las mitocondrias, uno a los
plástidos y uno a ambos. Las funciones NEP y PEP siguen un papel secuencial:
los genes de la maquinaria genética plástica, incluidos los genes PEP, son
transcritos primero por la NEP, mientras que esta PEP es la responsable principal
de la transcripción de los genes relacionados con la fotosíntesis. Sin embargo,
NEP continúa expresándose incluso en hojas verdes y muchos genes
relacionados con la fotosíntesis pueden ser transcritos por ambas polimerasas.
Proteoma plastido
Dado que el genoma plástido codifica menos de 80 proteínas se requiere un
número mayor para la variedad de funciones. Muchos genes para proteínas
fotosintéticas se identificaron como codificados en el genoma nuclear de la célula.
Las proteínas codificadas por nucleótidos se traducen en el citoplasma y se
importan en los plastidios. El bajo número sugiere que hay finos detalles en las
funciones de distintos plástidos. El estudio de Klefmann et., al 2004 identifico
proteínas en muchas categorías funcionales (ENERGIAFOTOSINTES) y
metabolismo, detecto un gran número de transportadores asociados a la
envoltura, proteínas implicadas en la defensa celular, la expresión génica, ciclo
celular. Existe un papel principal para la transcripción/acumulación de
transcripción en la regulación de la expresión génica para proteínas dirigidas a los
cloroplastos.
Transferencia de genes al núcleo y contribución del endosimbionte al
huésped
 Las comparaciones de un genoma de planta completo con el de cianobacterias y
levaduras han dado una estimación de alrededor de 4500 genes de Arabidopsis
derivados del antepasado endosimbionte del cloroplasto y han señalado a las
cianobacterias como su pariente más cercano, la integración de genes plastificas
en el genoma nuclear se ha controlado a través de la selección de eventos de
transferencia con un marcador que solo estaba activo cuando se expresaba en el
núcleo. Una visión ingenua seria que los genes de cianobacterias pasaron al
núcleo y luego de nuevo al orgánulo.
¿Por qué un genoma de plástidos?
El número de genes del cloroplasto es alrededor de 100, algunos genes de las
proteínas han sido transferidos y otros no, la mayoría de las proteínas retenidas
codifican los componentes de la membrana tilacoidal, entonces las proteínas de
membrana altamente hidrófobas y difíciles de importar y ensamblar han sido
retenidas en el genoma organelar.

5. LA BIOGÉNESIS DE LOS PLÁSTIDOS

Maquinaria de importación de proteína Plastida
Las proteínas codificadas por el núcleo se traducen en ribosomas citoplasmáticos
y si no están dirigidas a la envoltura externa, deben introducirse en el cloroplasto
cruzando dos envolturas de plástidos. Las proteínas que van a ser importadas
llevan un péptido de transito N-terminal de entre 20 y 80 aminoácidos. Los
péptidos de transito de diferentes proteínas no guardan secuencia, tienen una
abundancia de aminoácidos hidroxilados pequeños y pocos ácidos hidrófobos
grandes. Los péptido de transito tienen en común el sitio para la fosforilacion en
un residuo Ser o Thor pero el sitio puede mutarse sin efectos perjudiciales. La
importancia de estos radica en que tiene complejos situados en ambas
membranas: traslocon, en la membrana exterior del cloroplasto (Toc) y el
traslocon de la envoltura interior (Tic). El complejo Toc, se compone de tres
subunidades, Toc159, Toc75 y Toc34, Toc75 forma un canal a través de la
membrana externa. Tiene una estructura similar a las porinas bacterianas, con 16
intercambios, en lo que se ha llamado un barril. El canal es selectivo para los
cationes, como se espera de la naturaleza de los péptidos de tránsito. Toc159 y
Toc34 funcionan conjuntamente como receptores y sitios de acoplamiento para los
polipéptidos que se importarán. Ambas son guanosina trifosfatasas (GTPasas) con
una región de alta homología. La unión de Toc34 a GTP provoca la hidrolisis de
GTP, seguida de la liberación de difosfato de guanosina GDP y el substrato. Cada
subunidad de los complejos Toc y Tic está codificada por una pequeña familia de
genes. Estos genes tienen un grado de redundancia pues no afectan mucho la
supervivencia, pero el mutante de importación de una proteína plástica ppi1 tiene
una alteración de atTOC33 que da lugar a cloroplastos defectuosos. La pérdida
en ppi2 de atToc159, la forma principal del receptor, conduce a cloroplastos con
pérdida severa de tilacoides y plantas que no pueden crecer autótroficamente. la
pérdida de atToc159 y atToc132 es letal en todos los casos.
Los complejos Tic contienen al menos 6 subunidades. El más grande, Tic110, a
menudo se purifica con complejos Toc. Al igual que Toc75, Tic110 puede formar
un canal para cationes. Dado que Tic110 también se pliega en una serie de
hebras predichas, es posible que también forme un barril .Entonces Tic110 forma
el poro de importación de proteínas a través de la membrana interna.
Una vez se atraviesa la envoltura una péptidasa de procesamiento estromal divide
el péptido de tránsito, permitiendo que la proteína se doble en el estroma y siga su
camino. Las proteínas que van a las membranas tilacoidales usan una segunda
secuencia para el tramo final. Estas proteínas requieren un péptido de transito
bipartito con dos dominios: uno para el tránsito de la envoltura y otro para la
dirección del tilacoide. Los plástidos evolucionaron una ruta alternativa donde el
gradiente del PH a través del tilacoide se usa para conducir la translocación. Las
proteínas de membrana tilacoide integrales están dirigidas por un tercer tipo de
dominio, y están reconocidas por una partícula de reconocimiento de señal SRP o
se integran por sus propiedades biofísicas de solubilidad de péptido. Las proteínas
que si usan un dominio objetivo de tilacoides se separan en el lumen por una
peptidasa de procesamiento de tilacoides
Maquinaria de división Plastida
los plástidos se originaron por plástidos preexistentes, el proceso por el cual una
célula de la hoja que tiene 20 proplastidos da lugar a cientos de células foliares
que tienen cada una más o menos 100 cloroplastos, y debe acompañarse de una
división masiva de plastos. Bajo el microscopio el plástido sufre una contracción
del anillo denso de electrones que está en los lados citoplasmático y estromal,
finalmente esto separa completamente los dos plástidos hijos.
existen mecanismos separados, o miembros de familias de genes separados, que
desempeñan papeles en la división de los plástidos en diferentes etapas. El
enfoque genético ha producido la proteína ARTEMIS que estando mutada no
completa la división de plástidos pero se puede identificar sistemas de tilacoides
separados, entonces los sistemas de tilacoides tienen un proceso de división
distinto al del cloroplasto. El gen ARC5 codifica una proteína relacionada con la
dinamina que está implicada en eucariotas en el corte de la membrana, por
ejemplo en la endocitosis o el tráfico de membranas y, también en la división
mitocondrial. ARC5 podría desempeñar un papel en completar la separación de
las membranas, una vez que las primeras etapas de la división han creado una
contracción suficientemente pequeña.
'plasticidad' y estromulos
Los estudios dieron a conocer unos túbulos en los cloroplastos llamados
estromulos que son capaces de transportar GFP del estroma, pueden transportar
proteínas endógenas y la producción de estromulos depende del tipo de célula y
de plástido. los estromulos se asocian principalmente con plastidios no
fotosintéticos. Una posible función de los estromulos es proporcionar un aumento
en el área superficial del plástido. Un papel que ayuda a integrar el conjunto total
de plástidos en un compartimento único de plástidos.
El origen y el papel de las funciones específicas de orgánulos
La importación de proteína de plástidos era un requisito surgido de la vida
endosimbiotica y la migración de genes al núcleo de la célula. El orgánulo
emergente uso elementos de la cianobacteria para la división y también recurrió a
las proteínas eucariotas disponibles como lo hizo para identificar las proteínas que
necesitaban ser traslocadas. Los cloroplastos se ajustan, físicamente a las
condiciones de luz predominantes, mostrando una respuesta de acumulación
hacia la luz de baja intensidad y evitando la luz fuerte y potencialmente dañina,
ambos movimientos son activados por fototropinas

LOS PLÁSTIDOS ESTÁN BAJO EL CONTROL DE SEÑALES DE

DESARROLLO
De proplastidos a cloroplastos
Los cloroplastos se derivan de células meristematicas que contienen proplastos. El
gradiente en el desarrollo de plástidos se manifiesta como una replicación activa
del ADN plástido en la región meristemática, seguida por una alta actividad
transcripcional y, finalmente, la acumulación masiva de complejos fotosintéticos.
El progreso en la diferenciación de cloroplastos podría alcanzar un punto en el que
el orgánulo sea mucho más resistente al daño por la pérdida de la proteína, de
modo que no surjan nuevos clones de plástidos / células diferenciales.
Otros tipos de plastidios
Los conocimientos de la conversión de los plastidos son muy limitados, se sabe
que los plastidos se diferencias según la célula que residen. Por ejemplo en las
células del meristemos están los proplastidos pero unas pocas células muy
próximas a estas acumulan un tipo especial de amiloplasto, el estatolito que
detecta la gravedad. Los proplastos se convierten en amiloplastos bajo la
influencia de la kinetina, mientras la luz induce la conversión de amiloplastos en
cloroplastos. Se ha demostrado que esta diferenciación requiere la transcripción
de genes nucleares para proteínas de síntesis de almidón, por ello los
amiloplastos pueden interpretarse como proplastidos convertidos en receptores
semi pasivos de proteínas nucleares específicas
Desarrollo de la diferenciación plastida dentro de las células de la hoja
Hay una diferenciación especial de plastidos en plantas con fotosintesis C4 en la
que las reacciones de luz y el ciclo de Calvin están separados en dos tipos de
células: el mesofilo en donde en los tilacoides del cloroplasto se generan ATP y
NADPH y se libera O2 y el estroma donde se fija el CO2 y se lleva a cabo el ciclo
de Calvin.
Los genes nucleares de la enzima Rubisco del ciclo de Calvin se expresan en
células de envoltura de paquete en C4 y en células de órganos en C3. Algunas
mutaciones alteran las células de envoltura que produce una disminución de
Rubisco lo que conduce a cloroplastos defectuosos.
El control de la transcripción del gen plástido
Durante la diferenciación de las células de las hojas se alcanza la acumulación
masiva de complejos fotosintéticos, esto no ocurre en células no fotosintéticas. La
regulación secuencial de ARN. NEP se requiere para funciones de limpieza. Una
vez la función de NEP ha llevado la traducción de subunidades PEP codificadas
por cloroplastos, estas se vuelven más importantes en la expresión de las
proteínas relacionadas con la fotosíntesis. El reconocimiento de los promotores
PEP requiere la actividad de factores sigma. La mayoría de las plantas superiores
tienen muchos factores sigma. Los genes defectuosos de las plantas revelan
diferencias especificas, las respuestas a señales como la luz se logran mediante la
fosforilacion de los factores sigma y por su expresión diferencial. Los
fotorreceptores criptocromos y fitocromo A son responsables de la detección de la
luz y el control de las respuestas nucleares. El control es, por lo tanto, un
 fotorreceptor con acción en el núcleo celular activa la transcripción de un factor
sigma específico y este factor, dirigido al cloroplasto, actúa como un cofactor de la
ARN polimerasa de plástidos y activa la transcripción de un plastidio codificado por
un gen
6. PLÁSTIDOS / CLOROPLASTOS ESTÁN BAJO CONTROL AMBIENTAL
Fotorreceptores y desarrollo de cloroplastos
las señales ambientales controlan respuestas como patrones de expresión de
genes de cloroplastos como el promotor sensible a la luz azul psbD. El caso mas
extremo es el control por luz de la diferenciación de distintos tipos de plastidos: los
proplastos se convierten en etiplastos en ausencia de luz, mientras que los etilatos
de cotiledón y unos amiloplastos de tuberculos se hacen cloroplastos con luz. El
desarrollo del etioplasto permite una acumulación de membrana y de
protoclorofilida, el precursor de clorofila. La conversión de etioplastos en
cloroplastos implica un numero mayor de componentes requeridos para construir
cloroplastos a partir de proplastos.
Las señales de luz son percibidas por dos clases de fotorreceptores de plantas:
fitocromos: que tienen mucha sensibilidad espectral y mas a la luz roja y los
criptocromos: sensibles a la luz azul-ultravioleta A. Al detectar la luz en plantas
cultivadas en oscuridad mas del 10% de los genes cambian de expresión y la
mitad de estos codifican proteinas de cloroplasto. El gen Lhcb1 para la proteína
granal tilacoide asociada al fotosistema II y RbcS para la subunidad Rubisco.
Hay que tener en cuenta la función de los represores de la fotomorfogénesis,
identificados por mutaciones que permitieron la fotomorfogénesis en ausencia de
luz. El hecho de que es posible prevenir la inducción de luz de Lhcb1 o RbcS sin
alterar otras respuestas de luz, incluida la inducción de genes para proteínas no
cloroplásticas sugiere que deberían existir mecanismos que actúen sobre la
percepción de la luz y activen específicamente el desarrollo de cloroplastos, pero
hasta la fecha no se ha identificado ningún mecanismo de este tipo.
En la naturaleza, la mayoría de los cloroplastos foliares se han construido a partir
de proplastidos meristemáticos, sin detenerse nunca en una etapa de etioplasto.

7. Los plástidos son fuentes de señales de desarrollo

El cloroplasto ejerce una gran influencia en el desarrollo de la celula que lo
alberga. La evidencia de la existencia de señales de desarrollo deriva de análisis
de mutantes variegados. Por ejemplo el mutante DAG de Antirrhinum esta
alterado en un gen que está implicado en la maduración del ARN ribosómico. Sin
DAG los plastos permances en la etapa proplastida y el tejido permance blanco,
pero presenta otros sectores donde se desarrollan cloroplastos normales. Las
células con plastidos libres de ribosomas pueden generarse por crecimiento en
espectinomicina, un inhibidor de la traducción del plástido. Las células mutantes
tienen plastidos mutantes y son de tipo silvestre. Cuando la perdida de la función
del plástido es mas extensa y se da desde el principio, las consecuencias son
graves. Se puede decir que los sectores mutantes de los genotipos tienen una
división y diferenciación defectuosa, debido a que su defecto de plástidos priva a
las células de biomoleculas esenciales. Esto se da por un mecanismo de
señalización entre los genes plástidos y nucleares de proteínas a plástidos o una
señal de desarrollo directo de origen plástido. Un gen apenas identificado
 CRUMPLED LEAF puede estar involucrado en la producción de la señal para el
desarrollo porque codifica una proteína de envoltura de cloroplasto y su ausencia
causa división de cloroplastos defectuosa y problemas en la diferenciación celular.
El desarrollo temprano de plántulas es sensible a la perdida de la función plástica.
Esto traduce en la importancia que tienen los genes que tienen que ver en la
biogénesis de los plástidos y en la supervivencia celular.
Los etioplastos también parecen anormales.
Una búsqueda de mutantes de biogénesis de cloroplastos Clb con deficiencia
severa de clorofila revela que produce efectos en los embriones, sin embargo
embriones con tejidos maternos, otros mutantes de clb mostraron deficiencias de
embriones que permanecieron estrictamente autónomas de células, lo que
nuevamente apunta a la probabilidad de que los plástidos sean fuentes de señales
esenciales de desarrollo.

8. CONCLUSIONES
Con todo lo anterior es posible comprender la gran contribución que el procariota
fotosintético original, el ancestro del cloroplasto hizo al huésped eucariotico y en
qué medida la biología de la planta está dedicada a la construcción del cloroplasto
y al mantenimiento de su rendimiento.
Los cloroplastos se han convertido en objetivos de las señales de desarrollo
diferenciando el tipo de célula en la que residen, también son agentes de
desarrollo, todo esto requiere redes reguladoras complejas.
Es sorprendente que ahora se pueda analizar las funciones de los miembros de
las familias de genes involucrados en la biogénesis de los plástidos, sin embargo
algunos procesos apenas comienzan a desenredarse
El artículo rico en información sobre los plástidos nos permite entender lo que
ocurre molecularmente en las plantas, se logra entender a la perfección todos los
procesos involucrados en su biogénesis así como su metabolismo que aporta
significativamente al desarrollo general de la planta