INTRODUCCIÓN

Los aminoácidos son compuestos de bajo peso molecular y de alta polaridad, que poseen
simultáneamente carácter ácido y básico. en la naturaleza ,los aminoácidos se encuentran libres o
formando parte de las proteínas , de las cuales podemos obtenerlos por hidrolisis . un
aminoácido por lo general es una molécula que contienen un grupo carboxílico y un grupo amino
(-NH2) libre , son insolubles en solventes orgánicos (como éter o benceno ), pero solubles en
agua , álcalis diluidos o ácidos diluidos.

LAS PROTEINAS:

Las proteínas son macromoléculas; son biopolímeros, es decir, están constituidas por gran número
de unidades estructurales simples repetitivas (monómeros). Debido a su gran tamaño, cuando
estas moléculas se dispersan en un disolvente adecuado, forman siempre dispersiones coloidales,
con características que las diferencian de las disoluciones de moléculas más pequeñas.

FUNCIONES:

Las proteínas ocupan un lugar de máxima importancia entre las moléculas constituyentes de los
seres vivos (biomoléculas). Prácticamente todos los procesos biológicos dependen de la presencia
o la actividad de este tipo de moléculas. Bastan algunos ejemplos para dar idea de la variedad y
trascendencia de las funciones que desempeñan. Son proteínas: casi todas las enzimas,
catalizadores de reacciones químicas en organismos vivientes; muchas hormonas, reguladores de
actividades celulares; la hemoglobina y otras moléculas con funciones de transporte en la sangre;
los anticuerpos, encargados de acciones de defensa natural contra infecciones o agentes extraños;
los receptores de las células, a los cuales se fijan moléculas capaces de desencadenar una
respuesta determinada; la actina y la miosina, responsables finales del acortamiento del músculo
durante la contracción; el colágeno, integrante de fibras altamente resistentes en tejidos de
sostén.

ESTRUCTURA:

Es la manera como se organiza una proteína para adquirir cierta forma. Presentan una disposición
característica en condiciones fisiológicas, pero si se cambian estas condiciones como temperatura,
pH, etc. pierde la conformación y su función, proceso denominado desnaturalización. La función
depende de la conformación y ésta viene determinada por la secuencia de aminoácidos.

Conformaciones o niveles estructurales de la disposición tridimensional:

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PROPIEDADES:

Solubilidad: Se mantiene siempre y cuando los enlaces fuertes y débiles estén presentes. Si se
aumenta la temperatura y el pH, se pierde la solubilidad.

Capacidad electrolítica: Se determina a través de la electroforesis, técnica analítica en la cual si las

proteínas se trasladan al polo positivo es porque su molécula tiene carga negativa y viceversa.

Especificidad: Cada proteína tiene una función específica que está determinada por su estructura
primaria.

Amortiguador de pH (conocido como efecto tampón): Actúan como amortiguadores de pH

debido a su carácter anfótero, es decir, pueden comportarse como ácidos (aceptando electrones)
o como bases (donando electrones).

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DETALLES EXPERIMENTALES
Reactivos:

 Solución de proteína de huevo fresco de gallina

 Proteína de huevo fresco no diluido
 Soluciones al 1% de glicina, α-alanina, β-alanina.
 Soluciones al 0,01% de tirosina, triptófano, histidina, hidrocloruro de cisteína, metionina,
acido aspartico y acido glutamico, α-alanina, β-alanina y arginina.
 Reactivo de Biuret (NaOH y Cu2+ )
 Ninhidrina, solución acuosa al 0,5%.
 HNO3 (cc)
 NaOH al 10%.
 Acido acético glacial.
 H2SO4 (cc)
 Acetato de plomo al 5%
 Nitroprusiato de sodio al 5%.
 α-naftol al 0,2%
 hipobromito de sodio.
 Acido sulfanilico al 1% en acido clorhídrico al 5%
 KNO2 al 0,5%
 Na2CO3 al 10%
 Sulfato de cobre al 0,04 M

Materiales:

 Tubos de ensayo,
 goteros,
 pipetas,
 probetas,
 baño de agua,
 bagueta,
 algodon.

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REACCION DE BIURET SOBRE EL GRUPO PEPTIDICO.
En un tubo de ensayo limpio se colocó unas de gotas solución de ovoalbúmina y en otra glicina.

A cada tubo se le agrego reactivo de Biuret gota a gota con una agitación continua, observándose
la aparición de la coloración característica.

REACCION DE LA NINHIDRINA

En un tubo de ensayo limpio se colocaron unas gotas de solución de ovoalbúmina, a-alanina, b-

alanina y prolina. Luego se adicionó unas gotas de ninhidrina, para luego ser llevado a baño maría
para ebullición seguidamente se observó la coloración.

REACCION XANTROPOTEICA.

En un tubo de ensayo se colocó la solución de ovoalbúmina, en otro fenilalanina, en un tercer

tirosina y en el cuarto histidina.

Seguidamente se adiciono a cada tubo ácido nítrico concentrado, por las paredes, y luego se
calentó hasta ebullición hasta cambio de coloración.

El contenido se enfrió bajo chorro de agua de caño, para luego añadir hidróxido de sodio hasta
iniciar el cambio de coloración.

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REACCION DE HOPKINS COLE.

En un tubo de ensayo se colocaron ovoalbúmina y en otro triptófano, a cada tubo se le adicionó

acido acético glacial, luego se le adiciono acido sulfúrico por las paredes de manera paulatina y sin
agitar observándose asi la formación del anillo característico.

REACCION DE FOLY

En dos tubos de ensayo se colocan solución de acetato de plomo, seguidamente se añadió

hidróxido de sodio para la disolución del precipitado, al primer tubo se añadió ovoalbúmina , al
segundo cisteína. Se hirvió la mezcla , obsevando colores y formacion de precipitado.

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NITROPRUSIATO SODIO.

En un tubo de ensayo se colocó solución de ovoalbúmina y en otro cisteína, a cada tubo se le

adiciona hidróxido de sodio y se hirvió por tres minutos, luego se enfrió el contenido,
seguidamente se adiciono nitro prusiato de sodio y observo coloración.

REACCION D PAULY:

Se adiciona ácido sulfanilico en acido clorhídrico y se le agrega solución de nitrato de potasio.

Agitándose fuertemente la mezcla e inmediatamente se añade de ovoalbúmina y luego, después
de agitar el contenido del tubo, se adiciona solución de carbonato de sodio al 10%.

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RESULTADOS:

BIURET

OVOALBUMINA Coloración de solución violeta intenso coloreado

GLICINA Coloración de solución verde oscuro

NINHIDRINA

OVOALBUMINA Coloración amarillo

A-ALANINA Coloración amarillo con tonalidad tenue

B-ALANINA Coloración amarillo claro con tonalidad tenue

PROLINA Coloración amarillo claro con tonalidad tenue

XANTOPROTEICA
OVOALVUMINA Rojo Naranja con efervescencia
FENILALANINA Amarillo claro
TIROSINA Amarillo claro

HOPKINS COLE
OVOALBUMINA Presencia de dos fases de diferentes colores el anillo
característico no es tan notorio
TRIPTOFANO Presencia de dos fases, y se puede apreciar el anillo
característico

NITROPRUSIATO DE SODIO
ALBUMINA Color de la solución negro
CISTEINA Color de la solucion naranja amarillo

PAULI
OVOALBUMINA Color rojo sangre intenso

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DISCUSIÓN DE RESULTADO
En la reacción de biuret dio positiva con la ovoalbúmina debido a los enlaces peptídicos que hay
en la proteína y forman un complejo en medio básico con el cu, a diferencia de la glicina que es un
aminoácido libre y no tiene el enlace peptídico para poder formar el complejo y dar el color
característico violeta de la identificación.

Cuando se calentó la ovoalbúmina la reacción también dio positiva debido que al calentar la
ovoalbúmina, se desnaturalizo las proteínas que habían en esta pero eso quiere decir que solo se
destruyó las estructuras cuaternarias terciarias secundarias, etc, pero el enlace peptídico sigue
intacto ya que se necesitaría mucho más energía para romper este enlace de tipo covalente.

En la reacción con la Ninhidrina sobe el grupo 𝛼-amino no se aprecio en ningun tubo la coloración
azul-violeta( Purpura de Ruheman) de la desanimación oxidativa del grupo 𝛼-amino de los
aminoácidos, pude ser debido al calentamiento adecuado que no se dio pero por otro lado los
colores de la solución luego del calentamiento fueron amarillos claros para todos los tubos
excepto para el tubo con la ovoalbúmina que tenía un amarillo intenso debido probablemente a la
reacción de la Ninhidrina con el aminoácido prolina de la proteína desnaturalizada.

En la reacción xantoproteica sobre el anillo aromático de aminoácidos cíclicos se pudo apreciar el

color amarillo de los compuestos dinitro-derivados formados en la reacción por calentamiento
masacido nítrico, luego al enfriarlos y llevarlos a medio alcalino con NaOH, solo el tubo con
albumina se torno de color rojizo anaranjado debido a que se formo grupos cromoforos con
estructuras quinoideas que tienen dicha coloración. En el tubo con tirosina también se debió
formar la coloración anaranjada pero no cambio de color, debio ser a que el medio no era
suficientemente alcalino.

En la reacción de Hopkins-Cole sobre el triptófano el anillo no se forma en el tubo de la

ovoalbúmina, puede ser debido a que a pesar de que la ovoalbúmina tiene triptófano pero este
está unido mediante enlace peptidico con otros aminoácido y además de las estructuras que
terciarias y cuaternarias que poseen esto debe inhabilitar la formación del anillo.

En la reacción de foly sobre aminoácidos que contienen azufre débilmente unido, en el tubo con
reactivo cisteína no se formo el sulfuro de plomo debió ser que no habían aminoácidos unido a
asufre en cambio con el tubo de ovoalbumina si se noto el precipitado de color negro debido a que
en el huevo si hay aminoacidos unidos debilmente a asufres.

En la prueba de pauli en el tubo de la cisteina se noto el color naranja rojizo debio ser a que
reacciono con el acido diazobencensulfonico, a diferencia de la ovoalbumina que se torno un
negro amarillento quizas a la formacion de algun otro complejo.

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CONCLUSIONES
 En la reacción de la Ninhidrina, el grupo alfa-amino de los aminoácidos forma complejos
de color violeta con la Ninhidrina. Esta reacción también identifica los grupos alfa-amino
libres presentes en péptidos y proteínas , y da coloración amarilla si dicho grupo amino
se encuentra en un anillo como en el caso de la prolina

 En esta prueba Xantoprotéica se produce la nitración del anillo bencénico(al agregar

ácido nítrico) presente en los aminoácidos como la tirosina y fenilalanina , obteniéndose
nitrocompuestos de color amarillo, que se vuelven anaranjados en medio alcalino .

 El color presente en la prueba de viuret nos indica la presencia de enlace peptídico ,

mientras mayor sea la concentración de proteínas mayor será la coloración oscura.

 Se necesita condiciones más drásticas para desdoblar una proteína como la

ovoalbúmina, ya que al calentarlo solo rompemos los puentes disulfuros.

RECOMENDACIÓN

 Como en la primera experiencia se debe calentar la solución de ovoalbumina para

determinar si cambian los resultados al desnaturalizar la proteinas.
 No se debe seguir al pie de la letra la guia cuando se trata de las cantidades sino tomar las
cantidades en menor cantidad pero proporcionalmente como esta en la guia de practica.
 Estar atento en el calentamiento de las muestras porque se nos puede pasar alguna
coloracion y perder los resultados

BIBLIOGRAFÍA

 Bioquímica, Mary K.Campbell, Shawn O.Farrell. 4ta edicion,2004,editorial Thompson, pág.

91,92.

 Bioquímica. Peña, Arroyo, Gomez.2da edición,2004, editorial Limusa Mexico.pag 65-67,87.

 Fundamentos de bioquímica estructural, José María Teijon Rivero, Armando Garrido

Pertierra. Editorial Alfa Omega, pág. 27-37

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CUESTIONARIO
1) ¿Qué son los aminoácidos neutros, ácidos y básicos?

Aminoácidos Neutros: son aminoácidos en el cual el grupo R de estos no poseen carga en esta
clase se incluyen la glicina, alanina, valina, leucina, isoleucina, asparagina. Glutamina, serina
cisteína, metionina, fenilalanina, tirosina, triptofano, prolina y treonina.

Aminoácidos Ácidos: son aminoácidos en el cual su grupo R de estos está cargado

negativamente como el acido glutámico y el acido aspártico.

Aminoácidos Básicos: Son aminoácidos en el cual su grupo R esta cargado posiivamente lisina ,
arginina e histidina

2) ¿Cuáles son los aminoácidos esenciales?

Los aminoácidos esenciales son aquellos que el propio organismo no puede sintetizar por sí
mismo. Esto implica que la única fuente de estos aminoácidos en esos organismos es la ingesta
directa a través de la dieta. Las rutas para la obtención de los aminoácidos esenciales suelen ser
largas y energéticamente costosas. Cuando un alimento contiene proteínas con todos los
aminoácidos esenciales, se dice que son de alta o de buena calidad, aunque en realidad la calidad
de cada uno de los aminoácidos contenidos no cambia. Incluso se pueden combinar (sin tener que
hacerlo al mismo tiempo) las proteínas de legumbres con proteínas de cereales para conseguir
todos los aminoácidos esenciales en nuestra nutrición diaria, sin que la calidad real de esta
nutrición disminuya. Algunos de los alimentos con todos los aminoácidos esenciales son: la carne,
los huevos, los lácteos y algunos vegetales como la espelta, la soja y la quinua. Combinaciones de
alimentos que suman los aminoácidos esenciales son: garbanzos y avena, trigo y habichuelas, maíz
y lentejas, arroz y maníes (cacahuetes), etc. En definitiva, legumbres y cereales ingeridos
diariamente, pero sin necesidad de que sea en la misma comida. No todos los aminoácidos son
esenciales para todos los organismos (de hecho sólo nueve lo son), por ejemplo, la alanina (no
esencial) en humanos se puede sintetizar a partir del piruvato. Hay un conjunto básico de 20
aminoácidos los cuales 9 son esenciales:

1) Isoleucina (Ile) 5) Fenilalanina (Phe)

6) Treonina (Thr)
2) Leucina (Leu) 7) Triptófano (Trp)
8) Valina (Val)
3) Lisina (Lys) 9) Histidina (His) (en niños)
4) Metionina
(Met)

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3. ¿Qué aminoácidos dan reacción positiva con el reactivo de biuret y por qué?

Los aminoácidos generalmente dan reacción negativa con el reactivo de biuret, a excepción de los
aminoácidos

Estos aminoácidos pueden dar reacción positiva con el reactivo de biuret en solución y a altas
concentraciones, debido que a esas condiciones se forma ligeramente enlaces peptídicos y estos a
su vez llegan a formar complejo con el reactivo de biuret dando la coloración violeta

4. En qué se fundamentan las reacciones de coloración de los aminoácidos?

La molécula de aminoácido al absorber la luz mediante la captación selectiva de una longitud de

onda, reflejara el color característico para su inmediata identificación cualitativa.
Cualquier grupo funcional (o asociación de grupos) responsable de la absorción, generalmente
debido a la presencia de enlaces múltiples conjugados, recibe el nombre de cromóforo. La
modificación de la longitud de onda o la absorbancia molar podria ser también por la existencia de
grupos auxócromos, que son sustituyentes que no son cromóforos en si mismos pero que están
unidos a grupos cromóforos.
Las bandas de absorción pueden desplazarse hacia menores frecuencias o mayores longitudes de
onda (desplazamiento batocrómico) o desplazarse hacia mayores frecuencias o menores
longitudes de onda (desplazamiento hipsocrómico)

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