INMUNOLOGÍA

PRÁCTICA 1 “Grupos Sanguíneos”

INTEGRANTES:
 Paloma Georgina Garza Quintero
 Manuel Alejandro López Villarreal
 Ana Valeria Ramírez Sánchez
 Gabriela Alejandra Reyes López

Dr. José de Jesús Alba Romero

Gómez Palacio Durango a 13 de Febrero 2018

Objetivo
El alumno determinará por diferentes antígenos en la superficie de los eritrocitos por
medio de una reacción antígeno – anticuerpo conocido (antisueros A, B, AB y anti
D), además verificará la calidad de los antisueros por medio de la prueba de avidez.

Introducción
El sistema de grupo sanguíneo AB0, descubierto hace más de 100 años, es uno de
los sistemas más importantes en medicina transfusional; fue Karl Landsteiner quien
descubrió la existencia de dos factores hereditarios en los hematíes: los
aglutinógenos o antígenos A y B, y en el plasma aglutininas o anticuerpos
específicos para antígenos del mismo sistema. Los eritrocitos de algunos individuos
poseen el antígeno A, otros individuos tienen en sus eritrocitos el antígeno B, un
tercer grupo de personas posee ambos antígenos y, finalmente, hay un cuarto grupo
cuyos hematíes no tienen en su membrana ninguno de estos antígenos, por lo tanto,
existen cuatro tipos sanguíneos de este sistema que denominamos sistema A B 0,
estos son: A, B, AB y 0 (cero), los cuales están determinados genéticamente.

Los Ag A y B fueron identificados inicialmente sobre la membrana de los eritrocitos

y posteriormente sobre la superficie de otros tipos de células, así como también en
algunas secreciones, por lo tanto, el sistema AB0 también es llamado el sistema de
grupo histo-sanguíneo, más que sistema de grupo sanguíneo. Debido a que estos
Ag existen en otras células diferentes a los eritrocitos, la compatibilidad AB0 es
importante no sólo en la transfusión de sangre. Si no también en el trasplante de
células, tejidos y órganos.

Los Ag del sistema AB0 se detectan sobre los eritrocitos entre la quinta y sexta
semana del embrión y no se desarrollan completamente hasta después del
nacimiento. Esa podría ser una razón para que la enfermedad hemolítica del feto y
del recién nacido por incompatibilidad AB0, sea usualmente leve, Durante el
crecimiento, se van adicionando los azúcares terminales sobre la cadena de
oligosacáridos en la membrana de los eritrocitos, dando origen a cada uno de los
Ag de forma específica, entre los 2 y 4 años, los Ag A y B están completamente
desarrollados y permanecen constantes durante toda la vida.
• La sangre del grupo A contiene el antígeno A en sus hematíes y el anticuerpo

anti-B en el plasma.

• La sangre del grupo B tiene el aglutinógeno B en sus hematíes y la aglutinina anti-

A en su plasma.

• La sangre del grupo 0 no tiene antígenos en sus hematíes y, en consecuencia,

tiene aglutininas anti-A y anti-B.

• La sangre del grupo AB tiene hematíes con los dos tipos de antígenos A y B, pero
su plasma no contiene aglutininas.

Además de los antígenos del sistema AB0, existen otros innumerables

aglutinógenos en los eritrocitos. Los del sistema Rh tienen importancia clínica En
este sistema los individuos se clasifican como Rh positivos o Rh negativos,
perteneciendo el 85% de la población española al primer tipo. A diferencia del
sistema de grupos anterior su distribución en las células y secreciones orgánicas
está menos extendida, lo que significa que para que en el plasma de una persona
Rh negativa existan anticuerpos Rh se hace necesario un primer contacto, que
active el sistema inmunitario.

Material y métodos

Material

 Kit de venopunción  Placa de porcelana

 8 tubos de ensaye  Soluciones anti-A, anti-B, anti-
 1 gradilla D
 6 pipetas Pasteur  1 micropipeta de 20-200
 1 pizeta de agua destilada  1 micropipeta 50-1000
 Solución salina  Pizeta de alcohol
Métodos

Lavado de eritrocitos

1. Tomar una muestra de sangre del paciente en un tubo lila

2. Centrifugar la sangre 3500 revoluciones por 5 minutos para separar el plasma
y posteriormente colocarlo en otro tubo
3. Hacer el lavado en solución fisiológica 3 veces para obtener una
concentración al 5 % de glóbulos rojos

Avidez

4. Rotular la placa con las letras A, B, 0; colocar una gota de cada uno de los
tipos de sangre conocidos y agregar una gota del anti-suero según
corresponda.
5. Con la ayuda de un aplicador, mezclar cada una de las secciones de la placa
y esperar una aglutinación.
6. Se confirma el correcto funcionamiento de los anti-sueros si la aglutinación
ocurre en un periodo de 8-12 segundos.

Prueba directa

7. Colocar en 3 de los tubos 0.5 µl de la suspensión preparada y 0.95 µl del

anti-suero correspondiente a cada tubo rotulado.
8. Centrifugar y observar cada tubo.

Prueba inversa

9. Colocar 0.5 µl del plasma separado y 0.95 µl del anti-suero correspondiente

a cada tubo.
10. Meter en la centrifuga y observar resultados.
Lavado de eritrocitos

Prueba de avidez

Prueba de avidez
Prueba directa

Prueba indirecta
Observaciones

Prueba de Avidez

Para la prueba de avidez, se registró el tiempo en el que el Anti-suero o anticuerpo

“Aglutinó” con la muestra de sangre conocidas.

Figura 1. Prueba de Avidez

Prueba directa

Para la prueba directa que se realizó con la solución eritrocitaria al 5% se confirmò

la reacción con la Sangre tipo B+ (aunque de este último no se realizó prueba para
conocer el factor Rh) dando un color rojo en el sobrenadante color amarillo.

Figura 2. Prueba Directa

Prueba Inversa

En la prueba indirecta que se realizó con suero se confirmó el cambio de color en la

muestra tipo B+

Figura 3. Prueba Inversa

Resultados
En la siguiente tabla se muestran los resultados obtenidos en las diferentes pruebas
que se realizaron para conocer el tipo de sangre de los alumnos del grupo de 8º “C”.

TABLA 1. RESULTADOS EN LAS PRUEBAS DE ANTÍGENOS DE

SUPERFICIE EN SANGRE
Prueba de
Prueba Directa Prueba Indirecta
Avidez
SANGRE A 8 seg Negativo Negativo
SANGRE B 7 seg Positivo Positivo
SANGRE 0 7 seg negativo Negativo

Lo cual demuestra que las pruebas se realizaron de una manera correcta al

confirmar el tipo de sangre del que se trataba.

Conclusiones

Paloma Georgina Garza Quintero

El sistema AB0, se forma por transferencia de azúcares específicos mediante

transferasas que actúan en diferentes zonas ubicadas en la superficie del eritrocito.
En la actualidad para garantizar el éxito de la transfusión de los componentes de la
sangre con el mínimo riesgo de inmunización, es necesario efectuar la
caracterización fenotípica y genotípica del posible donante que permite identificar la
posible presencia de anticuerpos irregulares en el suero o plasma, tanto del
paciente, como del componente por transfundir.

La prueba para la clasificación sanguínea de rutina se basa en una técnica de

hemaglutinación, utilizando reactivos comerciales que contienen Ac específicos
para cada Ag, que se mezclan con la sangre a detectar.

Idealmente las pruebas de rutina para determinar el grupo sanguíneo AB0 se deben
hacer en dos partes:

 En la primera se busca en los eritrocitos la presencia de Ag A y/o B en la

membrana, esta es la prueba globular o directa.
  La segunda parte, se busca en el plasma los Ac Anti-A y/o Anti-B, esta es la
prueba inversa.

Ana Valeria Ramírez Sánchez

El sistema ABO es consecuencia de la presencia de una glucoproteína en la

membrana de los glóbulos rojos. Los grupos sanguíneos A, B y AB se refieren al
tipo de proteínas que presenten los glóbulos rojos; en el caso de que no se presente
esta proteína se incluye a estos individuos en el grupo sanguíneo 0. Estas proteínas
corresponderían a lo que se denomina antígenos. La práctica realizada sobre la
determinación del grupo sanguíneo que es un método para indicar cuál es el tipo de
sangre que se tiene (A, B, AB, 0) así como el factor Rh, este factor corresponde a
una proteína del plasma. La presencia de esta proteína es Rh+ y la ausencia Rh-.
La determinación del grupo sanguíneo o tipificación ABO se realiza comúnmente
cuando se quiere donar sangre o recibir una transfusión de manera segura, de igual
manera se les realiza de manera rutinaria a los recién nacidos para conocer el grupo
sanguíneo y de la misma manera a una persona que va a someterse a alguna
cirugía. La importancia de conocer un Grupo Sanguíneo está en la conformación
del complejo Antígeno-Anticuerpo que puede llegar a formarse en casos de
Transplante de Sangre, por lo que se deben realizar pruebas para determinar el
Grupo y Factor para verificar que efectivamente la sangre donada sea compatible
con quien será el receptor de la misma de Importancia.

Gabriela Alejandra Reyes Lòpez

Un grupo sanguíneo es una forma de clasificar a la sangre de acuerdo con las
características presentes en la superficie de los glóbulos rojos y en el suero de la
sangre. Las dos clasificaciones más importantes para describir grupos sanguíneos
en humanos son los antígenos (el sistema AB0) y el factor Rh.
El sistema AB0 fue descubierto en 1901, convirtiéndolo en el primer sistema de
grupo sanguíneo conocido; su nombre proviene de los tres tipos de grupos que se
identifican: los de antígeno A, de antígeno B, y 0 sin antígenos.

En esta práctica se realizó la determinación de dichos antígenos presentes en una

muestra obtenida por venopunción en tubo lila tanto de manera directa como
indirecta, de la cual fue centrifugada y separado el plasma para la prueba indirecta,
al igual que fue realizado una suspensión de eritrocitos al 5% debido a que la prueba
fue realizada en tubo para el método directo.

Dichas pruebas consisten en la determinación e identificación de antígenos tanto A

como B presentes en la superficie de los eritrocitos o bien la ausencia de estos, esto
en el caso de la prueba directa; mientras que para la determinación indirecta se
empleó plasma para la determinación de la presencia o ausencia de anticuerpos A
y B.

Los resultados obtenidos para la muestra fue la presencia de aglutinación en el

grupo B tanto en la prueba directa e indirecta.

Así mismo se realizó una prueba de avidez, la cual consistió en mezclar sangre y
anti-sueros conocidos del mismo grupo (A, B, 0), esto para determinar el tiempo que
tardaban en aglutinar. Para dicha prueba los resultados se encontraron dentro de lo
normal ubicados en un rango de 8-12 segundos.

Manuel Alejandro López Villarreal

A manera de conclusión y de forma breve, la práctica nos deja como aprendizaje

sólido que es importante conocer bien la técnica y no sólo conocerla sino también
dominarla puesto que una mala determinación del tipo de sangre puede causar un
gran problema en el paciente al no contar con la compatibilidad del antígeno de
superficie que se encuentra en el eritrocito del donador y del receptor.

Es importante la prueba de Avidez ya que nos proyecta la confiabilidad de un

reactivo cuando se habla de Inmunología, pues era cierto lo que el doctor nos decía
pues por más que se estandarice y se normalice la metodología; si el reactivo no es
bueno o no está controlado el resultado simplemente no será correcto.
Por último, me deja una amplia noción de las pruebas para antígeno de superficie
que se realizan en el laboratorio de Hematología y de Inmunología, ambas con una
estrecha relación. Califico la práctica como buena, sin embargo no como excelente
puesto que como estudiantes nos fallan aún muchas cosas y debemos de aprender
a dominar las metodologías.

Bibliografía

Arbeláez C. (2009). Sistemas de Grupo Sanguíneo ABO. 17 Febrero 2018, de

Medicina & Laboratorio Sitio web:
http://www.medigraphic.com/pdfs/medlab/myl-2009/myl097-8c.pdf
Referencias Electrónicas
http://cleuadistancia.cleu.edu.mx/cleu/flash/PAG/lecturas/hematologia/Grupos%20
sanguineos.pdf