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Biología General: Manual de Laboratorio

Publicado por la Universidad San Francisco de Quito – USFQ.


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El texto de este manual es publicado bajo la Licencia Creative Commons


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publicadas en Wikimedia Commons (http:// commons.wikimedia.org). Los autores
de la imagen del Bosque y otras dentro del manual mantienen todos sus derechos
de autor.

Autores:
Pablo Riera, David Romo, María de Lourdes Torres, Nelson Zabala, Arturo Paredes, Ronald Reese.
Supervisor de Edición:
Pablo Riera (Coordinador de Laboratorios de Biología, USFQ) Revisión:
David Romo, Diego F. Cisneros-Heredia, Camila Acosta.
Diseño de Portada:
Diego F. Cisneros-Heredia

Créditos fotográficos:
Fondo: Bosque Reserva privada Río Guajalito, autor Vlastimil Zak, curador de Herbario USFQ-
QUSF
Imágenes pequeñas (en sentido horario): Nievas J.M. 2013. Los sonetos de
Shakespeare. En una moleé cula de ADN. http://constelator.blogspot.com/2013/01/los-
sonetos-de-shakespeare-en-una.html

Universidad San Francisco de Quito

Colegio de Ciencias Biológicas y Ambientales COCIBA-USFQ

Séptima Edición,

Semestre I y II 2015-2016

Cronograma de las prácticas de laboratorio (140 L)


Semana Tema de Laboratorio Observaciones
1 El Método Científico e Introducción de Química Preparar informe
Aplicada a la Biología
2 Moléculas Orgánicas Preparar resultados

3 Preparar resultados
El Microscopio su uso/ Estructura celular
Primer Examen Parcial
4
Preparar informe, prelab y post
5 Procesos Celulares: Difusión, Osmosis y Diálisis Lab, Preparar resultados

Enzimas
6
7 Respiración Preparar resultados
8 Segundo Examen Parcial

9 Preparar resultados
Fotosíntesis
10 Mitosis.
Preparar resultados
Meiosis, Genética y la Herencia.
11
Evolución Preparar informe y entrega tarea de
12
temas revisados
13 Abiogénesis y Evolución, Clasificación de los Seres Preparar resultados
Vivos (Taxonomía y Sistemática)
14 Discusión y Debates
Examen Final
Preparar resultados, poster y
15 Presentación práctica laboratorio de
temas investigados en el curso

Contenido

CRONOGRAMA DE PRÁCTICAS DE LABORATORIO DE BIOLOGÍA GENERAL (BIO 140 L)


Guía de Seguridad
Origen de la vida
Lineamientos Generales para la Presentación de Trabajos Escritos Formato para la Escritura del
Informe de Laboratorio de Biología
Laboratorio I y Laboratorio IA
EL MÉTODO CIENTÍFICO, EL AGUA Y LA QUÍMICA EN LA BIOLOGÍA (parte complementaria a
Introducción de la Química Aplicada a la Biología)
VARIABLES DE EXPERIMENTACIÓN
FORMULACIÓN DE UNA HIPÓTESIS
CONTROL EXPERIMENTAL
ELABORACIÓN DE CONCLUSIONES VÁLIDAS
Laboratorio II
MOLÉCULAS ORGÁNICAS
EJERCICIOS DE COMPOSICIÓN QUÍMICA DE LAS CÉLULAS
Laboratorio III
EL MICROSCOPIO Y SU USO
MONTAJES HÚMEDOS
SECCIONES Y CORTES PARA OBSERVACIÓN
OTROS MICROSCOPIOS
Laboratorio IV
PROCESOS CELULARES: DIÁLISIS Y ÓSMOSIS
DIFUSIÓN
ÓSMOSIS
PRESIÓN DE TURGENCIA
ÓSMOSIS EN CÉLULAS VIVAS
Laboratorio V
ENZIMAS
Acción enzimática
Laboratorio VI
RESPIRACIÓN CELULAR
Laboratorio VII
FOTOSÍNTESIS
Laboratorio VIII
MITOSIS
Laboratorio IX
MEIOSIS y HERENCIA
Laboratorio X
ABIOGENESIS YEVOLUCIÓN
Laboratorio XI
LA CLASIFICACIÓN DE LOS SERES VIVOS Y LA TAXONOMÍA
Taxonomía Moderna
Cladogramas
Clasificación Binomial
Manejo de Claves
CARACTERÍSTICAS DE DOMINIO, REINO Y FILUM
Clasificación de células
Dominio Bacteriae
Reino bacteriae
Dominio Archeae
Reino Archeobacteriae
Dominio Eukarya
Reino de los protistas
Reino plantae
Reino Fungi
Reino Animalia
Guía de Seguridad

Previo al trabajo en el laboratorio los estudiantes deben notificar al instructor en caso de


embarazo, daltonismo, alergia a insectos o químicos, uso de drogas inmunosupresoras o
cualquier otra condición médica que pueda requerir medidas de precaución especiales.

• Al entrar al laboratorio deben hacerlo con su mandil puesto, depositar


sus pertenencias en los lugares especialmente designados, no colocarlos en las
mesas de trabajo ni en los pisos o entre las mesas de trabajo.

• Tener en cuenta la ubicación de las salidas de emergencia, la localización y uso


de los extintores, botiquines de primeros auxilios y contenedores de desechos.

• En caso de incendios o movimientos telúricos abandonar el laboratorio hacia


las áreas de evacuación designadas, usando las salidas existentes en el área de
laboratorios.

• Prohibido comer, fumar, beber, aplicación de cosméticos o lentes de contacto


dentro del laboratorio.

• En caso de cabello largo mantenerlo recogido usar gorros o mallas para cabello,
no usar joyas o ropa holgada durante la práctica.

• Queda prohibido el uso de sandalias o zapatillas durante la práctica.

• En caso de heridas mantenerlas cubiertas con vendas resistentes al agua


antes de iniciar las prácticas.
 Se recomienda usar lentes protectores al trabajar con químicos.

• Nunca pipetear con la boca. Se debe usar accesorios y pipetas mecánicas.


• En caso de contacto con químicos o microorganismos se debe lavar el área
afectada inmediatamente.

• Está prohibido realizar experimentos no autorizados.

• No usar los equipos de laboratorio sin haber recibido las instrucciones para
su uso.

• Reportar al instructor cualquier accidente, derrame de químicos, daño en


material de vidrio o equipos entregados para la práctica.

• Nunca dejar fuentes de calor abandonadas o sin atención, apagarlas cuando


termine su uso.

• Tener precaución al utilizar estufas, se debe asumir que siempre están


calientes.

• Usar protección al manipular material de vidrio caliente.

• Mantener los químicos lejos del calor o de la luz solar.

• Mantener los contenedores de químicos inflamables lejos de las fuentes de


calor o llamas.

• Mantener las conexiones eléctricas secas. No intente desconectar equipos que


estén haciendo cortocircuito o humeando.

• No recoger restos de vidrio con las manos, se debe usar un recogedor y


escobas, descartar los restos de vidrio en los contenedores designados.

• Una vez terminada la práctica se deben colocar los materiales utilizados en los
sitios designados.

• Usar guantes desechables en prácticas con material biológico, como fluidos o


tejidos.

• Terminada la práctica descartar los guantes en el contenedor apropiado y


asearse inmediatamente las manos.

• Dejar el laboratorio así como su mesa de trabajo, limpio y ordenado antes de


salir.
• Antes de abandonar el laboratorio, lavarse las manos.

• El símbolo de riesgo biológico indica que se debe tomar precauciones durante


la práctica ya que existe riesgo para la salud.
Introducción

Origen de la vida

El origen de la vida es un tema que despierta muchas pasiones y preguntas de toda índole,
desde las teorías más aceptadas hasta unas desquiciadas.

Teoría del Big Bang: Esta teoría es la más aceptada, supone la explosión de un núcleo
condensado y caliente, para formar las galaxias a partir de nubes de gases principalmente de
hidrógeno y helio. De acuerdo con esta teoría el origen del sistema solar y los planetas se
formaron hace 4500 millones de años.

Generación espontánea: El término fue acuñado por el biólogo Thomas Huxley en su obra
“Biogénesis y abiogénesis” en 1870.
Sugiere que la vida se origina a partir de la materia inerte. Según sus
creencias y por observación suponían que del lodo se formaban las
lombrices, de la carne en descomposición las moscas, de la ropa sucia
y basura las ratas. Paralelamente en el siglo XVI los resultados de Jan
Van Helmont químico y naturalista, llega a afirmar en su obra
Ortus medicina 1648 que: “Los piojos, garrapatas, pulgas y gusanos
surgen de nuestras vísceras y excrementos, aseguraba que; si juntamos
con trigo la ropa que usamos bajo nuestro atuendo cargada de sudor en un recipiente
de boca ancha, al cabo de 21 días cambian los efluvios penetrando a través de los salvados del
trigo, y transmutando éstos por ratones. Tales se pueden ver de ambos sexos y cruzar con otros
que hayan surgido del modo habitual...”

Desde el siglo XVII en adelante se ha visto gradualmente que, al menos en el caso de todos
los organismos superiores y visibles a simple vista, era falso lo previamente establecido con
respecto a la generación espontánea. La alternativa parecía ser el aforismo omine vivum ex
ovo: es decir, que todo lo que vive viene de otro ser vivo preexistente (literalmente, del
huevo).

En 1768 Lazzaro Spanllazani probó con caldos nutritivos que ciertas bacterias estaban en el
aire, debido a que en este medio crecieron colonias bacterianas, luego al paso del tiempo se
entendió el motivo que produjo este crecimiento, y fue por el uso de frascos de boca ancha no
herméticos. En 1861 Louis Pasteur realizó varios experimentos controlados en los que se
usaron matraces con cuello en forma de cisne o de S en su interior se agregó caldo nutritivo.
Esta forma peculiar de matraz evitó que el aire transportara microorganismos al caldo
nutritivo, qué previamente había sido hervido para esterilizar el medio, esto evitó el
crecimiento de hongos y bacterias. Al final se obtuvo la conclusión, que aunque los matraces
no estaban cerrados los microorganismos no pueden ser transportados por el aire hasta el
caldo nutritivo, por tanto demostró que los microorganismos eran transportados por el aire, lo
cual confirmaba la teoría celular.

Teoría de Oparin-Haldane: Supone una atmósfera gaseosa (He, H, CO2, Amoniaco,


metano, ácido sulfhídrico) Características de la tierra:
•Altas temperaturas (volcanes)
•Producción constante de lluvias
•Constantes relámpagos

En esta atmósfera ocurrían reacciones químicas debido a los efectos que generaron las
descargas eléctricas y los rayos ultravioletas e infrarrojos. Esto permitió el aparecimiento de
las primeras moléculas orgánicas. Estos compuestos se concentraron en los mares y océanos
primitivos, por esta característica es que los científicos los llamaron caldos nutritivos.
Estos compuestos orgánicos se mezclaron para formar monómeros (compuestos orgánicos +
compuestos orgánicos).
•Monómero + monómero= polímero
•Polímero = Aminoácidos
•Azúcares = monosacáridos, disacáridos o polisacáridos
•Fosfatos + ácidos grasos + glicerol = membranas
•Ácidos grasos (saturados o insaturados) + glicerol = Lípidos (sólidos o líquidos).

En el año de 1924 el biólogo y bioquímico ruso Aleksandr Ivanovich Oparin demostró que el
oxígeno atmosférico impedía la síntesis de moléculas orgánicas que son constituyentes
necesarios para el surgimiento de la vida. Oparin publica en 1938 su obra “El origen de la vida
en la Tierra”, donde exponía una teoría quimiosintética (síntesis química) en la que una “sopa
primitiva” de moléculas orgánicas se debió haber generado en una atmósfera sin
oxígeno a través de la acción de la luz solar. Éstas se combinarían de una forma cada vez más
compleja hasta quedar disueltas en una gotita de coacervado. Estas gotitas crecerían por fusión
con otras y se reproducirían mediante fisión en gotitas hijas, y de ese modo se generó un
metabolismo primitivo en el que estos factores asegurarían la supervivencia de la
“integridad celular” de aquellas que no acabaron extinguiéndose. Muchas teorías modernas
del origen de la vida aún toman las ideas de Oparin como punto de partida. El mismo año
J.B.S. Haldane también sugirió que los océanos pre-bióticos (antes de la vida) de la tierra
habrían formado una “sopa caliente diluida” en la cual los compuestos orgánicos, los
constituyentes elementales de la vida, se pudieron haber formado. Esta idea se llamó
biopoesis, es decir, el proceso por el cual la materia viva surge de moléculas autorreplicantes
pero no vivas.

Biomoléculas: son sustancias formadoras de la vida, es decir glúcidos, lípidos, proteínas,


ácidos nucléicos. La opinión más extendida en el ámbito científico establece la teoría, de que
la vida evolucionó de la materia inerte en algún momento entre 4.400 millones de años atrás,
cuando se dieron las condiciones para que el vapor de agua pudiera condensarse por primera
vez y 2.700 millones de años atrás. Cuando la proporción entre los isótopos estables de
carbono (12C y 13C), hierro (56Fe, 57Fe y 58Fe) y azufre (32S, 33S, 34S y 36S) fueran parte
de isótopos naturales que se distribuyeron en todo el planeta. Esta teoría induce a pensar en un
origen biogénico de los minerales y sedimentos que se produjeron en esa época y los
biomarcadores moleculares indican que ya existía la fotosíntesis como una suma más a las
condiciones que se fueron creando para generar las células primigenias con una membrana
celular primitiva. Como elemento complementario a este resumen sobre el origen de la vida
se trata o se ha tomado en cuenta la idea u hipótesis sobre un posible origen extra planetario o
extraterrestre de la vida (panspermia), que habría sucedido durante los últimos 13.700
millones de años de evolución del Universo conocido tras el Big Bang.

Los eventos estudiados sobre el tema del origen de la vida, constituyen un área limitada de
investigación, a pesar de su profundo impacto en la biología y la comprensión humana del
mundo natural. En el objetivo de reconstruir el evento se emplean diversos enfoques basados
en estudios tanto de campo como de laboratorio. Por una parte el ensayo químico en el
laboratorio o la observación de procesos geoquímicos o astro químicos, que produzcan los
constituyentes de la vida en las condiciones en las que se piensa que pudieron suceder en su
entorno natural.

En la tarea de determinar estas condiciones se toman datos de la geología de la edad oscura de


la Tierra a partir de análisis radiométricos de rocas antiguas, meteoritos, asteroides y
materiales considerados prístinos, así como la observación astronómica de procesos de
formación estelar.

Por otra parte, se intenta hallar las huellas presentes, en los actuales seres vivos, de aquellos
procesos mediante la genómica comparada y la búsqueda del genoma mínimo. Por último se
trata de verificar las huellas de la presencia de la vida en las rocas, como microfósiles,
desviaciones en la proporción de isótopos de origen biogénico y el análisis de entornos,
muchas veces extremófilos semejantes a los paleoecosistemas iniciales.
Los progresos en esta área son generalmente lentos y esporádicos, aunque aún atraen la
atención de muchos dada la importancia de la cuestión que se investiga. Existe una serie de
observaciones que apuntan las condiciones fisicoquímicas en las cuales pudo emerger la vida,
pero todavía no se tiene un cuadro razonablemente completo acerca de cómo pudo ser este
origen. Se han propuesto varias teorías, siendo las más importantes, en cuanto al número y
calidad de investigadores que la apoyan, la hipótesis del mundo de ARN y la Teoría del
mundo de hierrosulfuro.

Estas explicaciones al ser de carácter científico, no pretenden discernir sobre aspectos


religiosos que examinan el papel de la voluntad divina en el origen de la vida (creacionismo),
ni sobre aspectos metafísicos que ilustren acerca de las causas primigenias.
LINEAMIENTOS GENERALES PARA LA PRESENTACIÓN DE TRABAJOS
ESCRITOS

Los trabajos escritos serán evaluados tomando en cuenta la calidad, relevancia de la


investigación, profundidad y entendimiento del tema desarrollado. El uso de literatura para
apoyar los argumentos, la claridad del texto, la coherencia de los argumentos, el pensamiento
crítico e independiente, la creatividad y el estricto ajuste a las normas de presentación
requeridas o sugeridas en este documento. Imprimir a ambos lados para ahorrar papel.
Las hojas deberán estar grapadas juntas en la esquina superior izquierda (no presentar
en carpetas, con vinchas, con clips o en archivadores plásticos).

Se exige corrección en el uso del idioma, pues es vital para el efectivo entendimiento entre las
personas y para realizar un eficiente proceso de comunicación. Tengan especial cuidado con la
ortografía, la sintaxis y otras herramientas de expresión del español.

Estos lineamientos son equiparables a los solicitados por revistas científicas internacionales y
su aplicación en los trabajos de este curso les permitirá practicar la eficiente comunicación de
sus investigaciones, análisis, resultados, conclusiones y recomendaciones.

Los documentos deben estar digitados a espacio simple, texto justificado y en letra tipo Times
New Roman tamaño 12. El formato del papel debe ser A4 (21,0 x 29,7 cm) con márgenes de 3
cm a cada lado. Las páginas del manuscrito deben ser numeradas consecutivamente. El texto
debe tener el siguiente orden: Título, Cuerpo del texto, hipótesis, objetivos, materiales,
resultados, conclusiones y Literatura Citada, Tablas, Apéndices.

Título
El título debe ser conciso, explicativo y claro. Debe indicar el tema o la pregunta que se está
tratando, es decir se debe establecer claramente el problema del que se trata la investigación.
Por ejemplo, si se investiga el papel de la hormona auxina en el crecimiento de las plantas
Coelus, el informe titulará: El efecto de la auxina sobre el crecimiento de Coelus, o Auxina y
Elongación Celular en Coelus. El comenzar el informe con un título como: Crecimiento
Vegetal u Hormonas Vegetales y Crecimiento es insuficiente.

Ninguno de los dos últimos títulos es muy informativo.

Nombre y número de estudiante

Nombre del instructor y sección (lunes, martes, etc.)

Fecha de Entrega

Cuerpo del texto

El texto debe estar dividido en las siguientes secciones: Introducción, Hipótesis, Objetivos
Materiales y Métodos, Resultados, Discusión (donde se incluirá las conclusiones y
recomendaciones).

Introducción

Tal vez sea útil imaginar la estructura de la introducción como un triángulo invertido.
Inicialmente, se empieza con un planteamiento amplio o general y se lo va disminuyendo
hacia abajo con el experimento específico realizado. Se deberá empezar hablando del área
general de estudio. Se explicará de qué se trata el tema y al hacerlo se irá definiendo
cualquier término que sea tan especializado y/o técnico que seguramente el lector no conozca
y no entienda su significado. La introducción crea el escenario en el cual se expondrá el
experimento, pues se lo entiende como el fondo del problema, esto debido a que en esta
sección se inicia con la revisión de información obtenida y relacionada con los antecedentes
que existan del problema. Es útil exponer el tema en perspectiva, refiriéndose a experimentos
que se han efectuado sobre el mismo tema o de un tema íntimamente relacionado. Si el
problema que se está investigando ha recibido poca atención, es posible encontrar literatura
relevante sobre algún aspecto relativo al problema. Por ejemplo, si se está investigando el
efecto de las endorfinas en la respuesta del pinchazo en la cola de las ratas, posiblemente
exista poca literatura o ninguna literatura directamente relacionada con este tema. Pero
seguramente se podrá encontrar literatura sobre los efectos de la endorfina en otras variables.

La introducción también será utilizada para convencer al lector que ésta investigación es
importante al referirse a estudios que indican el interés actual en el problema. Después de que
los antecedentes (marco teórico) del tema han sido tratados, se describen estudios
directamente relevantes para explicar las razones del experimento. En este punto, habrá que
referirse a los trabajos previos con mayor detalle, mencionando los métodos y resultados. Se
hará referencia a artículos que presentan hipótesis que se van a probar en el experimento en
cuestión, a estudios que tratan del mismo tema pero que difieren del mismo ligeramente, y/o a
esos estudios que uno cree que están errados. Finalmente se describe el experimento y su
propósito. Se establece la hipótesis, la pregunta, el problema o la razón para el experimento.

Cualquier referencia de estudios previos o de hallazgos de investigación que se mencionan en


la introducción (o en cualquier sitio del informe) tiene que estar respaldada refiriéndose a la
fuente bibliográfica apropiada. Por ejemplo, en un informe sobre la genética de la
determinación del sexo, uno tal vez querrá plantear lo siguiente: Un mecanismo inusual de
determinación sexual ocurre en el lemming de bosque y en el lemming de collar, el que
lleva a una proporción sexual que tiene una inclinación a que existan una mayor
cantidad de hembras (Bull y Bullmer, 1981). (Ve a la sección acerca del Estilo de Escritura
para obtener detalles sobre la forma de citar referencias bibliográficas correctamente).

Cuando se escribe la introducción, se considera las siguientes preguntas:

Preguntas para contestar y entregar al final del trabajo en el laboratorio

a) ¿Cuál es el tema general que ha sido estudiado?


b) ¿Cómo se relaciona el experimento con trabajos previos en la misma área?
c) ¿Cuál es la hipótesis que ha sido probada? ¿Cómo se relaciona ésta con el tema general?

En el párrafo final se debe incluir una hipótesis general del tema, ésta hipótesis se trata de una
predicción a la pregunta de investigación.

Para finalizar la sección de introducción incluir máximo tres objetivos y hacerlo a manera de
lista usando siempre en infinitivo.

Materiales y Métodos

En la sección de métodos se describe como fue ejecutado el estudio. Se describen los


métodos con suficiente detalle de forma tal que el lector pueda repetir el experimento si así lo
desea. Esta sección debe ser escrita en tiempo pasado personal o en pasado impersonal ya
que resulta mejor porque el experimento ya ha sido completado. Los sujetos utilizados en el
experimento (por ejemplo: Veinte grillos machos adultos, Gryllus bimaculatus) o la especie
que estudie (por ejemplo: la bacteria, Serratia marcescens) tiene que estar claramente
mencionada. El equipo utilizado en el experimento tiene que ser mencionado, debe hacer una
lista de materiales y equipos utilizados (esta indicación no se relaciona con la redacción del
informe, pues en la parte final de este anexo encontrarán las respectivas indicaciones). NO se
deben escribir los procedimientos como una lista de instrucciones. Si se ha seguido un
procedimiento utilizando alguna fuente (por ejemplo: el manual de laboratorio, un artículo de
alguna revista) no se necesita repetir todo el procedimiento, sino que se debe citar la fuente
original para detalles completos (ejemplo: “Cromatografía de papel realizada de
acuerdo a procedimiento descrito por Larsen, B. y Meyer, 1985”). Si se cambió algo del
procedimiento original, los cambios tienen que ser descritos. Como dato informativo, el
manual puede ser citado como parte de su investigación bibliográfica, siendo este optativo
para usted, es decir usted decide citarlo o no.
Resultados

Esta sección presenta los hallazgos del experimento. Tiene que ser escrita también en
tiempo pasado, personal o impersonal. Se inicia describiendo los hallazgos principales del
experimento teniendo como base al resultado obtenido en la variable dependiente, para luego
entrar en los detalles. Después se presentan los datos y seguido de los resultados de cualquier
prueba estadística que se ha realizado.

Las Tablas y gráficos son útiles para presentar los datos pero éstas TIENEN que estar
acompañadas de un breve resumen verbal de los resultados. En este resumen se tienen que
condensar y clarificar los resultados del o de los experimentos. Se tienen que destacar las
características más importantes de los gráficos y/o tablas refiriéndose a ellas en el texto. Hay
que recordar lo que deseas comunicar al lector o lo que tú quieres que el lector se dé cuenta.
No se tiene que asumir que el lector es especialista, en la mayoría de los casos encontramos a
lectores que están menos familiarizados con el tema o con el experimento, no anote aspectos
sólo porque se cree que ellos son importantes.

Exposición de los Resultados

Tabulación de los datos: La tabulación es un arreglo en categorías de los datos que


comparten características comunes. Las tablas permiten que el investigador y el lector
establezcan relaciones que no son obvias en los datos crudos. Las tablas son también una
forma efectiva de organizar y presentar datos.

Cada tabla deberá tener una explicación por sí misma. Cada tabla contendrá un título claro y
conciso, cada columna debe ser titulada, y si es necesario se tienen que poner pies de página.
Las tablas tienen que estar enumeradas (con números arábigos) en el orden que van
apareciendo en el informe. Finalmente deben tener un análisis de resultados expuestos en la
tabla, importante no olvidarse de señalar la fuente de donde provienen los datos publicados en
la tabla.

La mayoría de las tablas tiene cuatro partes principales:

1) El número y el título,
2) Títulos en las columnas verticales,
3) Títulos de las columnas horizontales (si es necesario) y,
4) Los espacios que contienen los datos (Algunas tablas contienen pié de páginas) (Tabla 1).

Tabla 1. Porcentaje de digestión de la amilasa sobre el almidón en diferentes


Tiempos

Digestión (%)
Tiempo (min)

A2 B C

2 2.5 0 5
4 15 8.5 12
12
6 10 15

Fuente: Laboratorio de Biología General USFQ.

Descripción de la Tabla:
1. El experimento se llevó a cabo a 37°C.
2. A, B, C indican tres repeticiones del experimento.
3. incluir el análisis de resultados que se encuentran en la tabla.

Elaboración de Gráficos de datos: Los gráficos tienen un eje horizontal X (la abscisa) y un
eje vertical Y (la ordenada). Los dos ejes deben tener marcas de índice que deben estar
explicadas concisa y claramente. La marcación de cada eje debe incluir las unidades de
medida así como el tipo de datos que van a ser graficados. Se acostumbra hacer la abscisa
aproximadamente una vez y medio más largo que la ordenada.

La variable independiente debe ser colocada en la abscisa y la variable dependiente en la


ordenada. Todos los puntos de los datos deben ser señalados en el gráfico, si tiene más de una
curva, es necesario que se pueda distinguir cada curva. Se deben utilizar diferentes tipos de
línea, una entera, una punteada, o cada punto de la curva puede tener una forma específica:
cuadrado, círculo, etc.

Si los puntos de los datos no forman una línea recta, en muchos casos, es mejor hacer calzar la
curva a los datos que conectar los puntos. La línea que calce mejor puede ser determinada
estadísticamente. (Los gráficos son mucho más fáciles de hacer si se utiliza una hoja de
cálculo como Excel). Para nuestros propósitos, la línea que calce mejor puede ser graficada
intentando poner la línea equidistante entre los puntos de los datos. La línea tendrá que ser
hecha con un número igual de puntos en cada lado de la línea o con una distancia
aproximadamente igual entre la línea y todos los puntos en cualquier lado de la línea.

Discusión.
Esta sección consiste en tú interpretación de los resultados. Se deben explicar los resultados de
acuerdo al propósito del experimento o de la hipótesis se comprobó o no. También se quiere
relacionar los resultados obtenidos con aquellos de estudios previos para confirmar o clarificar
las conclusiones.

No se tiene que simplemente volver a escribir lo que ya se dijo en la introducción. Cada


planteamiento debe añadir información con respecto al punto que se está tratando de
esclarecer.

La discusión debe describir la importancia del experimento específicamente en relación al


tópico general dentro del cual se encuentra. Hay que tener cuidado de no ir demasiado lejos
del punto que uno quiere tratar. Si se ha llevado a cabo un experimento para determinar el
espectro de absorción de la clorofila A, este no es el momento de revisar toda la literatura
acerca de la fotosíntesis. ! Sólo se discute literatura que sea relevante!

Si los resultados del experimento fueron contrarios a estudios previos, se debe intentar
explicar este hecho. Hay que mencionar cualquier posible fuente de error en el procedimiento
del cual no se preocupó y que uno cree que debió ser relevante para la interpretación de los
resultados. NO se debe utilizar esta sección para hablar ampliamente de cada error del
experimento.

Es posible que se deban incluir especulaciones en esta sección, si se establece claramente que
se trata de una especulación que está íntimamente relacionada al estudio o a la base teórica del
experimento. Este es el lugar donde hay que experimentar con su creatividad. Además se
mencionará brevemente ciertas implicaciones de los resultados, sugerir mejoras en el diseño
del experimento o proponer estudios que puedan ayudar a mejorar experimentos futuros. Se
sugiere usar las siguientes preguntas como guías para escribir una discusión:

a) ¿Cómo ayudó el experimento a resolver el problema original?


b) ¿Debe ser modificada la hipótesis original?
c) ¿Qué conclusiones e implicaciones teóricas pueden extraerse de los resultados del
experimento?
d) ¿Puede realizarse algún otro tipo de estudio para poder contestar la pregunta del problema
inicial?

Agradecimientos

Aquí se reconocerá y agradecerá la ayuda de aquellas personas (incluyendo sus compañeros


de clase) o instituciones que de diversas formas hayan ayudado al desarrollo del proyecto. La
redacción debe ser breve, concisa y directa.

Literatura Citada

No confundir Literatura Citada con Bibliografía, la primera corresponde únicamente a los


trabajos citados directamente en el texto, mientras que bibliografía incluye trabajos no
necesariamente citados más únicamente usados de referencia. En los trabajos escritos de este
curso se referenciará Literatura Citada, NO bibliografía. La literatura citada seguirá el
formato APA, recomendado por el Council of Science Editors. Las referencias colocadas en la
sección de Literatura Citada deben corresponder directamente con las citas ubicadas dentro
del texto. La literatura citada debe seguir un estricto orden alfabético. Si un autor tiene varios
trabajos, primero se referenciaran aquellos realizados por él como único autor y luego
paulatinamente según hayan dos o más autores. Cuando los mismos autores tengan varios
trabajos en el mismo año, estos se organizarán alfabéticamente de acuerdo al título y el año irá
acompañado de letras minúsculas sucesivas. Aquí algunos ejemplos y variaciones según el
tipo de publicación (artículo, capítulo de un libro, libro, tesis, publicaciones electrónicas):

Artículo publicado en una revista científica:


Krabbe, N. (2004) Pale-headed Brush-Finch Atlapetes pallidiceps: notes on population size,
habitat, vocalizations, feeding, interference competition, and conservation. Bird
Conservation Internationa l 14: 77–86.
Citar en texto como: (Krabbe, 2004).

Libros:
CLIRSEN (2000) Plan Ambiental Chocó: uso actual del suelo y cobertura vegetal y
evolución entre los años 1997-2000. Quito, Ecuador: Centro de Levantamientos de Recursos
Naturales por Sensores Remotos. Citar en texto como: (CLIRSEN, 2000).

Freiberg, M. & Freiberg, E. (1998) Las Gesneriaceas del Bosque Protector Otonga, Provincia
Cotopaxi, Ecuador. Ulm, Alemania:
Universidad de Ulm.
Citar en texto como: (Freiberg y Freiberg, 1998).

Capítulo de un libro:
Condoy, F. y Unda, E. (2001) Distribución espacial y uso de hábitat de la ornitofauna acuática
en la laguna de San Marcos (RECC). Pp. 32–58. En: Fundación Antisana (ed.).
Estudios biológicos de aves de altura: Reserva Ecológica Cayambe-Coca, R. E.
Antisana. Quito, Ecuador: Proyecto Bioreserva del Cóndor (Serie Bioreserva del
Cóndor No. 2).
Citar en texto como: (Condoy y Unda, 2001).

Tesis:
De la Torre, S. (1991) Área de vida, comportamiento reproductivo y hábitat de Saguinus
nigricollis graellsi (Primates, Callitrichidae) en la Amazonía ecuatoriana. Quito,
Ecuador: Departamento de Biología, Pontificia Universidad Católica del Ecuador
(Tesis).
Citar en texto como: (De la Torre, 1991).
Información en línea:
El patrón básico para una referencia electrónica es:
Autor, inicial(es) de su nombre (año). Título. Mes, día, año, dirección en Internet.

Remsen, J.V., Jr., Jaramillo, A., Nores, M., Pacheco, J.F., Robbins, M.B., Schulenberg, T.S.,
Stiles, F. G., da Silva, J.M.C., Stotz, D.F. & Zimmer, K.J. (2006) A classification
of the bird species of South America. American Ornithologists' Union. Versión en
línea disponible en:
http://www.museum.lsu.edu/~Remsen/SACCBaseline.html. (Fecha de consulta:
31 Enero 2008).

Citar en texto como: (Remsen et.al., 2006).


Se usa esta abreviatura cuando los autores son más de tres, el significado de la misma es "y
otros"

Bancos, I. (n.d.). Los NHS marcan la pauta del cuidado de la salud.


Versión en línea disponible en:
http://www.healthcareguide.nhsdirect.nhs.uk/. (Fecha de consulta: 29 de
agosto de 2001).
Citar en texto como: (Bancos, n.d.).

Si existe inconveniente en obtener la fecha de publicación de debe utilizar la abreviatura n.d.


o s.f. cuyo significado es sin fecha.

• Si no consigue identificar al autor, empiece su referencia con el título del documento.


• Si el documento se ubica dentro de una página institucional, como la de alguna universidad o
departamento gubernamental, primero cite el nombre de la organización o del departamento
en cuestión, antes de dar la dirección electrónica:

Alexander, J., y Tate, M. A. (2001). Evaluando las Fuentes Electrónicas. Versión en línea
disponible en: Widener University, página web conmemorativa de la biblioteca
Wolfgram: http://www2.widener.edu/Wolfgram-Memorial-Library/webevaluation
/webeval.htm. (Fecha de consulta: 21 de agosto de 2001). Citar en texto como: (Alexander y
Tate, 2001).

Decidiendo su futuro. (2000). Versión en línea disponible en:


Portsmouth University, página web de Servicios Profesionales:
http://www.port.ac.uk/departments/careers/plancareer/deciding-your-future.htm. (Fecha de
consulta: 21 de septiembre de 2001). Citar en texto como: (Decidiendo su Futuro, 2000).

En el caso de no existir autor, titulo de documentos de página institucional etc., se debe


incluir como cita el enlace de la página electrónica, si no tiene fecha usar s.f. o n.d. Citar en
texto como: (www.port.ac.uk).

Autor con varias publicaciones:

Curry, R.L. (1986) Whatever happened to the Floreana Mockingbird? Noticias de Galápagos
43:13–15.
Citar en texto como: (Curry, 1986).

Curry, R.L. (1989) Geographic variation in social organization of Galápagos Mockingbird:


ecological correlates of group territoriality and cooperative breeding. Behavioral
Ecology and Sociobiology 23: 141-152.
Citar en texto como: (Curry, 1989).
Curry, R.L. & Grant, P.R. (1990) Galápagos Mockingbirds: territorial cooperative breeding in
a climatically variable environment. Pp. 291–331. En: Stacey, P. B. & Koening,
W. D. (eds.). Cooperative breeding in birds: Long-term studies of ecology
and behavior. Cambridge, Reino Unido: Cambridge University Press.
Citar en texto como: (Curry y Grant, 1990).

Curry, R.L. & Grant, P.R. (1991) Impact of climatic variation on Galápagos
Mockingbird social organization. Canterbury, Nueva Zelanda: Proceedings of the XX
International Ornithological Congress. Pp. 1333–1341. Citar en texto como: (Curry y Grant,
1991).

Autor con varias publicaciones y más de dos co-autores:

Krabbe, N., Rodríguez, O. & Ágreda, A. (1999a) On the rediscovery and


protection of the Paleheaded Brush-Finch. Monterrey, México: Resúmenes del
VI Congreso de Ornitología Neotropical, Instituto Tecnológico de Estudios
Superiores de Monterrey. Pp. 97–98.
Citar en texto como: (Krabbe, Rodríguez y Agreda, 1999).

Krabbe, N., Agro, D.J., Rice, N.H., Jácome, M., Navarrete, L. & Sornoza, F. (1999b) New
species of Antpitta (Formicariidae: Grallaria) from the southern Ecuadorian
Andes. Auk 116:882–890.
Citar en texto como: (Krabbe, et.al., 1999).

Se usa la alocución latina Et álii y se abrevia et.al. cuyo significado es "y otros".

Autor institucional y ejemplo de publicaciones en los mismos años:


Fundación Natura (2002a) Establecimiento del estado de conservación e identificación de
áreas especiales para la conservación del Parque Nacional Sangay y su área de influencia.
Quito, Ecuador: Fundación Natura. Citar en texto como: (Fundación Natura, 2002 a).

Fundación Natura (2002b) Evaluación de la eficiencia de manejo del Parque Nacional


Sangay. Quito, Ecuador: Fundación Natura. Citar en texto como: (Fundación Natura, 2002
b).

Fundación Natura (2002c) Identificación de áreas especiales para la conservación en el


Parque Nacional Sangay y su área de influencia. Quito, Ecuador: Fundación
Natura.
Citar en texto como: (Fundación Natura, 2002 c).

Documento sin fecha:


Guerrero, M., Valarezo, J.C., Correa, J. y Vits, C. (sin fecha) Aves de Bombuscaro II. Una
guía de las aves comunes. Loja, Ecuador: Fundación Arcoiris y The Nature Conservancy.
Citar en texto como: (Guerrero et.al, n.d.).

Noten el uso de itálicas para los títulos de libros o para los nombres de revistas científicas, la
ausencia de espacios entre las iniciales de los nombres después de los apellidos, el uso de
paréntesis para el año, el uso de la raya larga (guión n “–”) para separar los rangos de páginas,
que los nombres de las instituciones que usan un acrónimo o abreviación se colocan
completos después de la ciudad y país y que los nombres de las revistas científicas se
escriben completos.

Las citas dentro del texto se tienen que ubicar, según sea apropiado, dentro o al final de una
oración. Si se ubica al final de la oración debe ser ubicado antes del punto final de la oración.
La estructura básica de una cita incluye el apellido y el año de publicación, nótese que cuando
toda la cita va en paréntesis no se coloca una coma entre el apellido del autor y el año de
publicación, el signo de puntuación va luego del paréntesis e.g.:
“Krabbe (2004) describe el comportamiento alimenticio del Matorralero Cabecipálido/Pale-
headed Brush-Finch Atlapetes pallidiceps.”
“La Gaviota Dominicana/Kelp Gull Larus dominicanus es una especie que solo en años
recientes se reproduce en Ecuador (Hasse, 1996).”

Si un autor ha publicado diferentes trabajos en el mismo año, el año del primer trabajo (en
orden alfabético de las referencias) es citado y referenciado con las letras minúsculas
sucesivas usadas en la Literatura Citada separadas por comas, e.g.: Krabbe (2002a, b) o
(Krabbe, 2002a,
b). Cuando se citan varios trabajos entre paréntesis, cada uno debe ir separado por el signo
de punto y coma, ordenados primero por el año y luego alfabéticamente, e.g.: La
avifauna de la Cordillera Oriental del Ecuador incluye varias especies endémicas o con
rangos restringidos (Fjeldså y Krabbe, 1990; Poulsen, 1996a, c, h; Granizo et al. 2002;
Krabbe, 2002; Mena-Valenzuela et al. 2002). Sin embargo cuando la cita va de corrido en el
texto, solo se necesita usar comas, e.g.: Basado en los registros publicados por Fjeldså y
Krabbe (1990), Poulsen (1996a, c, h), Granizo et al. (2002) y Mena-Valenzuela et al.
(2002) el rango de distribución de esta especie es menor a 10.000 km2.

Apéndices
Aquí se colocarán todos los datos adicionales, de respaldo o complementarios que
acompañen al texto principal.

Tablas

Todas las tablas deben ser numeradas en la misma secuencia en que aparecen en el texto. Las
leyendas deben ser autoexplicativas. Las tablas deben ser formateadas con líneas
horizontales, nunca verticales. En el texto, deben ser referidas como Tabla 1, Tablas 2 y 4,
Tablas 2–6. Utiliza el término "TABLA" como título principal.

Figuras

Las figuras deben ser numeradas consecutivamente y en el mismo orden en que son referidas
en el texto. Las fotografías en blanco y negro y/o a color deben ser digitalizadas en alta
resolución (mínimo 300 dpi). Para referirse a las figuras en el texto utilice "Fig(s)."; en las
leyendas de las figuras use "FIGURA(S)" para referirse a figuras de otra publicación use
"fig(s).". Las leyendas deben ir listadas consecutivamente antes de las figuras y cada una de
las figuras debe ir colocada en orden, una por página, al final de todas las secciones del
manuscrito.

Todos sus trabajos escritos deben ceñirse a estos lineamientos, caso contrario habrán
penalizaciones sobre su calificación.
FORMATO PARA ELABORACIÓN DE INFORMES DE LABORATORIO DE BIOLOGÍA

La siguiente es una lista de los puntos principales que deberás tomar en cuenta para la
elaboración de los informes de biología.

Título: El mismo de la práctica que estás reportando

Nombre y código de estudiante


Nombre del Instructor
Fecha: La fecha de entrega del informe. Es importante que ponga la fecha en la que se
entrega el informe ya que los informes atrasados tienen puntos menos.

Introducción: La introducción no debe ser más larga de una página y media,


deberá ser dividida en dos párrafos. En el primero debe indicar aspectos generales
sobre el tema, es obligatoria la inclusión de muchas citas bibliográficas (seguir las
recomendaciones que se expusieron en el formato anterior) de varias fuentes
consultadas a más del manual y el texto del curso. En el segundo párrafo debe
crearse la hipótesis general del tema y luego incluir los objetivos a manera de
lista en infinitivo. Aclarando en el primer o segundo párrafo se deberá redactar
incluyendo información general del tema para concluir con información específica de
la práctica realizada. Por ejemplo, si el tema fue Tejidos, deberá definir en la primera
parte los Tejidos buscando definiciones en tu texto de Biología y en textos de
Citología, y en la segunda parte se debe generar la hipótesis general del tema o de la
práctica es mejor usar los condicionales “si” y”Entonces”, luego indicar que el
objetivo fue observar tal y cual tejido de tal y cual forma. Es buena idea plantear los
objetivos en infinitivo.

Materiales: Debe ser una lista completa de todos los materiales e instrumentos que
fueron utilizados para la práctica.

Procedimiento o Métodos: Se debe indicar lo que se hizo, por lo tanto debe estar: a)
en tiempo pasado y lo más correcto es usar el modo personal (hice, realice, etc.). b)
también puede encontrarse redactado en tiempo impersonal (se hizo, se realizó, etc.).
Por ejemplo debería decir: llené un tubo de ensayo con 2 ml de saliva, 2 ml de
Benedict y 2 ml de solución de almidón al 2%, coloqué el tubo en baño María por 10
minutos a 37 grados centígrados, o en impersonal se llenó un tubo, etc… o se colocó el
tubo en…., etc. Ten mucho cuidado de no confundir el procedimiento con los
resultados, además si inicias con pasado personal debes terminar con este mismo
tiempo verbal, es decir si usas una de las dos maneras de redactar toda la redacción
deberá mantener la misma forma verbal.

Resultados: En esta sección deberás reportar los resultados buscando la forma más
adecuada. Muchas veces una tabla o un gráfico (ver ejemplo de lineamientos para
presentación de trabajos escritos), son más útiles que muchas palabras. Asegúrate de
seguir las reglas de cómo se hace una tabla y no dejes de añadir un párrafo que indique
los aspectos más importantes de los resultados. Ten cuidado de no incluir tus
conclusiones, en esta sección se redacta de igual manera que en procedimiento o
métodos, es decir en pasado personal o impersonal. En la parte inferior de la tabla
debe constar la fuente de donde obtuvieron los datos, en el siguiente
párrafo describe de qué se trata la tabla y finalmente en el último párrafo bajo la
tabla una interpretación resumida de los resultados de la tabla, ojo usar siempre
el tiempo verbal que escogiste.

Conclusiones o Discusión: En esta sección tomarás cada uno de tus resultados y los
interpretarás. Aquí es donde se debe indicar si los resultados son adecuados o no. Tú
eres el juez y debes indicar si tus resultados falsifican o no la o las hipótesis
planteadas en la introducción. Si el experimento falló, debes indicar por qué crees que
falló y cuál debió ser el resultado, redactar afirmando lo encontrado es mejor, pero lo
que siempre debe estar presente en la redacción es la seguridad con que demuestras los
análisis de tus resultados, es decir si sucedieron o no sucedieron, nunca usar
expresiones como me parece, tal vez, etc. recuerde que la conclusión es o no es.

Si deseas realizar una discusión esta debe estar siempre en relación a un párrafo citado
de cualquier autor con su respectiva cita y luego de esto afirmas o niegas el resultado
de tu experimento.

Recomendaciones: No es muy lógico que hagas recomendaciones a menos que estés


seguro(a) de que tu experiencia te permita hacerlo. Si tienes dudas es mejor omitir esta
sección.

Literatura Citada: Aquí se debe anotar todos los textos consultados incluyendo el
Manual de Laboratorio. Ten mucho cuidado de seguir las normas anteriormente
consideradas como los ejemplos de cómo escribir la literatura citada que se
encuentran al inicio del documento y al final de este anexo. Recuerda este término
Literatura Citada porque estas usando citas en la introducción, evita el término
Bibliografía.

Como último pedido, no incluyas hojas en blanco y mejor usa las hojas para
imprimirlas por ambos lados.

Recuerda que mejor que reciclar es no desperdiciar.

Bibliografía:

Day, R.A. (1983). How to Writte and Publish a Scientific Paper. ISI Press, Philadelphia.

Harrison, N.S. (1979). Understanding Behavioral Research. Wadsworth Publishing Co.Inc.


Belmont, CA. pp. 276-286.

Kirov, N. (2008). Symbiosis (Custom Laboratory Program for the Biological Sciences)
Principles of Biology 1&2. New York University. Manhattan – NY. USA.

Larsen J. (1987). A lab Manual in Biology. Stepes Publ. Co. Champaign, IL.

Pechenik, J.A. (2001). A short guide to writing about biology. Cuarta Edición. Short Guide
Series. Addison-Wesley Educational Press, Chicago, IL.

Publication Manual of the American Psyonological Association. (1988). American


Psynological Association. Washington, D.C. Publishers.

Turabbian, K.L. (1973). A Manual for Writers of Term Papers, Thesis and Dissertations.
University of Chicago

Windell, J.T. (1976). Biological Investigation. Kendall Hunt Publishing Co. Dubuque, IA.
USA.
Laboratorio I
INVESTIGACIÓN
EL MÉTODO CIENTÍFICO

Este laboratorio tiene como objetivo capacitar a los alumnos en la lógica del método
científico, desde el planteamiento del problema, la formulación de la hipótesis, la
determinación de las variables, el control experimental y captura de datos así como la
elaboración de conclusiones en base a los resultados obtenidos. Los ejercicios se plantean para
que los estudiantes logren estructurar una investigación científica ordenada. Otro
objetivo importante en esta práctica es la manera correcta de presentar un informe, para lo
cual deberán seguir paso a paso lo indicado en la detallada guía para la escritura del mismo.
Esta guía debe ser utilizada en todos los informes, deberes, trabajos y actividades que se
envíen del Laboratorio de Biología.

Introducción

La ciencia es el esfuerzo continuo de descubrimiento e incremento del conocimiento humano


a través de investigaciones sistemáticas. Estas investigaciones se conducen a través del
método científico. Este método permite colectar evidencias observables de fenómenos
naturales o sociales, registrarlos y analizarlos de manera cuantitativa y sobre todo cualitativa
para construir explicaciones teóricas de cómo estos fenómenos funcionan. El método
científico es un proceso lógico, objetivo y sistemático que pretende mejorar el entendimiento
de eventos pasados y que permite la predicción de sucesos futuros similares a aquellos
examinados. Este método puede resumirse en cinco etapas principales:

1. Observación de las características del medio natural o social


2. Reconocimiento e identificación de un evento, fenómeno o problema que será investigado
(formulación de la pregunta basada en la observación).
3. Formulación de una hipótesis sobre cómo el evento o fenómeno funcionaría (predicción).
4. Experimentación que evalúa la hipótesis bajo condiciones controladas (al menos
parcialmente).
5. Análisis y conclusión en base a los datos y evaluaciones de las hipótesis que conduzcan a la
generación de nuevos conocimientos y el planteamiento de nuevas preguntas.

El complemento final para el método científico es la publicación y difusión de la


información obtenida en la investigación permitiendo la socialización del conocimiento y que
otros científicos puedan repetirla y validarla.

Cuando un fenómeno natural se observa consistentemente y la evaluación de la hipótesis


respecto a su funcionamiento no es refutada, dicha hipótesis se considera como una teoría.
Para que una teoría sea científica, se espera que cumpla con las siguientes premisas:

Consistente.
Parsimoniosa es decir, que la explicación menos compleja para
un fenómeno es usualmente la más adecuada.
Describe y explica fenómenos observados y puede ser usada de manera
predictiva.
Se puede probar empíricamente pues se basa en observaciones directas o
indirectas como pruebas de su realidad.
Es falsificable, por lo que existe la posibilidad lógica de que pueda ser probada
como falsa. Es necesario aclarar que decir que una teoría es “falsificable” no
significa que sea falsa; lo que quiere decir es que si fuese falsa, dicha falsedad
podría ser demostrada por una observación o experimento.
Basada en múltiples observaciones.
Corregible y dinámica, pudiendo ser modificada a la luz de nuevas
observaciones.
Progresiva, al permitir el refinamiento de conocimientos previos.
Provisional o tentativa, pues está abierta a ser probada
experimentalmente y no asume una certeza total.

Muchas personas consideran a este método como algo exclusivamente técnico. Sin embargo,
el método científico es un proceso que podemos utilizar en la vida cotidiana y que de hecho
algunas veces lo habremos aplicado aún sin darnos cuenta.

Por ejemplo; en una excursión al campo alguien se pierde en el bosque. Para pasar la noche
necesita mantener el cuerpo caliente por lo que necesita encender una fogata. Nunca antes lo
había hecho así que tendría que probar varios métodos para lograr su objetivo (experimentar).
En este proceso de experimentación generará nuevos conocimientos con la aplicación del
razonamiento lógico:

1. Observar el entorno, buscando información sobre sus características, colectando materiales


que podrían ser usados para encender una fogata y ubicar un lugar que sirva de barrera
contra el viento.
2. Identificar un problema concreto: ¿Cómo prender una fogata con los materiales que tengo
para evitar el frío?
3. Establecer una solución tentativa (hipótesis): Los materiales secos se quemarán mejor y
producirán una buena fogata.
4. Experimentar con los diferentes materiales y sitios para iniciar la fogata.
5. Luego de varios intentos contará con nueva información gracias a la experimentación
(resultados) y podrá evaluar si su hipótesis inicial fue rechazada o no, es decir si
los materiales secos se prendieron mejor que otros.

Durante este proceso el excursionista se dio cuenta de varias cosas: no todos los materiales se
prenden bien y unos arden por más tiempo que otros; el lugar en donde se prende la fogata es
muy importante y debe estar protegido de la humedad y el viento. A pesar de haber
solucionado su problema inicial tiene ahora nuevas preguntas, para las cuales aplicará el
mismo procedimiento (método científico), por ejemplo para encontrar el camino de regreso a
casa.

Objetivos del Laboratorio

Después de completar esta práctica de laboratorio, Uds. deberían ser capaces de:
Identificar y caracterizar preguntas que pueden ser respondidas a través de la
investigación científica.
Definir una hipótesis y explicar cuáles son las principales características de una buena
hipótesis científica.
Identificar y describir los componentes de un experimento científico.
Resumir y presentar sus resultados en tablas y figuras.
Discutir los resultados y evaluarlos críticamente.
Diseñar un experimento científico.
Interpretar y comunicar sus resultados en un informe.

Para el esclarecimiento de ciertos elementos básicos en el uso del método científico es


primordial tener en consideración los siguientes pasos:
Variables de experimentación

Los experimentos científicos están diseñados para determinar la relación entre dos o más
variables. Una variable es algo que puede tener más de un valor. Las variables deben ser
claramente definidas y pueden ser medidas. Esto por cuanto el investigador establecerá y
definirá las variables que serán controladas en cualquier experimento. Existen dos tipos de
variables en un experimento. La variable que es directamente manipulada por el
experimentador se denomina variable independiente, esto indica que el investigador por lo
general escoge una condición específica en el experimento, la misma que va a ser
manipulada, esto es muy importante ya que mediante la variable independiente el
investigador somete a prueba sus hipótesis. Las mismas que provocarán resultados, los que
permitirán obtener respuestas a las hipótesis planteadas. Las respuestas que permiten que el
investigador continúe con su trabajo se las conoce como Variable Dependiente, la misma
actúa como respuesta a la manipulación de la variable anterior (Indepediente), esta variable
tiene su importancia particular ya que ésta será observada, medida, ponderada, descrita,
interpretada, como respuesta a las condiciones experimentales manipuladas por el
investigador en relación a las hipótesis planteadas.

La variable independiente es sólo una de las muchas condiciones que pueden afectar la
variable dependiente. La manipulación de una variable independiente es el diseño
experimental más simple. Es posible manipular más de una variable independiente al mismo
tiempo o que existan factores externos al experimento que puedan alterar las variables.

Formulación de una Hipótesis

Las hipótesis son las formas como los científicos o investigadores intentan contestar las
preguntas planteadas en una investigación con posibles explicaciones propuestas, es decir que
es normal buscar explicaciones para explicar un fenómeno o responder una pregunta. Los
científicos en busca de las posibles explicaciones a un problema, formulan una explicación
tentativa a un posible resultado de la investigación; la misma es conocida como hipótesis de
trabajo. Una hipótesis es una afirmación propuesta o tentativa para explicar la ocurrencia de
un fenómeno particular, cuya veracidad depende de los datos obtenidos durante la
experimentación. Los principales objetivos de una hipótesis son:

1. Ser una solución tentativa a un problema establecido.


2. Ser una guía de la investigación.
3. Permitir la culminación de una investigación a través de una explicación racional y
comprobable.

NOTA: La formulación de una hipótesis es fundamental para todo trabajo de investigación.


Por esta razón las hipótesis deben demostrar una relación muy clara entre las variables, deben
ser sustentadas en datos e investigaciones anteriores y ser formuladas de manera
comprobable. Para tener una idea clara sobre el planteamiento de una hipótesis, se da el
siguiente ejemplo:

Considerando como supuesto que la coloración críptica de una mariposa nocturna


disminuye su depredación y por lo tanto aumenta su supervivencia, se puede formular
la hipótesis: Una alteración en la coloración de la mariposa nocturna disminuirá
las probabilidades de supervivencia de la especie.
Generalmente en investigación se usa la Hipótesis nula siendo esta la hipótesis a ser
probada en un experimento, la misma que siempre asume que nada inusual va a ocurrir
en el experimento o estudio. Además esta admite como real que el tratamiento no va a
tener ningún efecto o que no van a existir diferencias entre los resultados que se
observan y los resultados que se esperan obtener.

(Ho): Un cambio en la coloración de la mariposa nocturna no afecta la


supervivencia de la especie.
(Ho): Las orugas NO muestran una preferencia por la dieta en la cual ellas han
sido criadas.
(Ho): La activación de una enzima intracelular particular, NO altera la tasa de
supervivencia neuronal en un cultivo celular.

La primera hipótesis planteada se la puede considerar como una hipótesis alternativa y


se encuentra redactada en forma positiva. Nótese como la hipótesis nula se encuentra
redactada, pues generalmente se la redacta en forma opuesta o negativa a la
alternativa.

Control Experimental

Durante el transcurso de un experimento, otras variables o condiciones pueden afectar la


respuesta que quiere ser medida. Una de las fuentes más frecuentes de error en un
experimento es el no poder mantener variables externas constantes.

Elaboración de Conclusiones Válidas

Una concepción errónea es que los científicos pasan sus vidas tratando de probar que las
teorías son verdaderas. Esto es erróneo porque no es posible demostrar la veracidad absoluta
de una hipótesis, pero si reunir evidencias que aceptan o rechazan una hipótesis propuesta.
Por ejemplo, si suponemos que todas las ardillas son cafés. Para probar ésta hipótesis, se
realiza una experimentación en el campo y se capturan ardillas en tres provincias cercanas, se
examinan todos los animales y se determina que todos son cafés. ¿Has probado que la
hipótesis es verdadera? No hay forma de establecer tal afirmación con una exactitud absoluta
porque, no importa cuántas veces la hipótesis es confirmada, la próxima observación puede
probar que ésta es falsa. Nosotros aceptamos que una hipótesis es verdadera si es que ha sido
confirmada razonablemente y no existe evidencia que la contradiga, pero puede ser probada
como falsa en cualquier momento.

Los siguientes ejercicios han sido creados y adaptados para que manejen y visualicen de
manera práctica el método científico.

Ejercicio# 1: Planteamiento del problema, hipótesis y variables en base a la observación


de: Gelatinas sorpresa (Agar Solidificado)

En este ejercicio plantearán el problema en base a la observación, crearán su respectiva


hipótesis e implementarán sus variables independiente y dependiente, de acuerdo con el
resultado de la búsqueda de información respecto a las soluciones y materiales entregados en
éste laboratorio. Al finalizar el primer ejercicio les permitirá comprender de manera práctica
los pasos del método científico descritos, que son, la observación, el planteamiento del
problema, la formulación de la hipótesis, el manejo de variables y finalmente con sus
resultados podrán definir su conclusión. Para ésta práctica serán entregados los materiales y
reactivos detallados a continuación.

Materiales y Métodos

Cubos de Agar
Hidróxido de Sodio
Agua destilada
Vinagre
Reglas
Cronómetros
Nota: el hidróxido de sodio será entregado en varias concentraciones para que
trabajen en varios ejercicios haciéndolo reaccionar con las gelatinas.

En este laboratorio deberán trabajar los conceptos arriba descritos.


Inicialmente, cada grupo recibirá cubos de gelatina y tres recipientes, cada uno con una
sustancia distinta: hidróxido de sodio, agua destilada y vinagre. Un cubo de gelatina deberá
ser introducido en cada recipiente, por un tiempo de 3 minutos. El trabajo de cada grupo
consistirá en:

1) Crear el Planteamiento del Problema


2) Formulación de hipótesis del experimento
3) Determinar las variables involucradas
4) Anotar los resultados
5) Obtener una conclusión para los experimentos realizados.

En una segunda instancia, se experimentará con los mismos cubos de gelatina


sumergiéndolos en hidróxido de sodio, por diferentes períodos y concentraciones (1, 2 y 4
minutos para cada concentración). De nuevo, se deben cumplir con los pasos estipulados para
el primer experimento. En cuanto a las concentraciones estas serán 1%, 5%, 10% y 20 %.

Ejercicio# 2
Morfometría o Alometría

Introducción. – La forma de los organismos depende en parte de las tasas de crecimiento


relativo del cuerpo, tanto interna como externamente, durante el desarrollo. La alometría o
morfometría implican la proporción y comparación de tamaños o magnitudes físicas o
fisiológicas similares, no temporales; es decir, es una regla de proporcionalidad. El
crecimiento alométrico se refiere al cambio relativo del crecimiento. La alometría es un
fenómeno donde las partes de un organismo crecen en diferentes rangos, generándose un
crecimiento desproporcionado de una parte del cuerpo en relación con el resto del organismo.
Es importante conocer que este efecto alométrico lo podemos encontrar también en los
humanos, en donde su crecimiento tiene correlación con el crecimiento corporal. El
crecimiento alométrico contrasta con el crecimiento isométrico, ya que estos términos son
opuestos, este último se refiere a que su tasa de crecimiento es igual para dos partes del
cuerpo. Esto se observa cuando las proporciones entre las partes del cuerpo mantienen
crecimiento constante. Esto se observa en bebes, y en adultos, pero en este caso usaremos
como datos de comparación las diferencias entre tasa de crecimiento masculino y femenino.

Materiales y Métodos

1 cinta métrica 1
regla de 30 cm.
Calculadoras

Tomando en cuenta los conceptos de isometría y alometría expuestos, en este ejercicio se deben
reunir datos para comparar la relación entre varias partes del cuerpo seleccionadas de hombres y
mujeres. Esto permitirá determinar si hay diferencias en cuanto a la proporción de esas partes
del cuerpo entre hombres y mujeres. En el proceso deben practicar el método científico,
iniciando por la observación y el planteamiento de la pregunta a resolver. También practicarán
como colectar datos y el procesamiento de la información. Con los datos que han encontrado los
distintos grupos de trabajo tendrán que discutir sus resultados y proponer sus hipótesis, en base a
esto determinar las variables independiente y dependiente. Para analizar los datos y sus
resultados deben diseñar tablas o gráficos. Recordar que en tablas o gráficos siempre deben
estar incluidos las respectivas numeraciones, títulos, y fuentes de tablas y gráficos. En este
experimento deben crear una tabla general de datos de todos los grupos, tablas individuales de
grupos, y tablas que tengan datos de sexo femenino y datos de sexo masculino. Las hipótesis
deben ser planteadas por cada grupo, al igual que el respectivo diseño experimental. Para la
presentación de resultados y análisis, deben generar una hoja en Excel y con estos datos crear
distintos gráficos, como barras, líneas, pasteles, etc.

Ejercicio# 3: Observación y diseño experimental: Formas de vida en plantas

Materiales y Métodos

Plantas de jardines
Cinta métrica

En el siguiente ejercicio ustedes deben establecer un cuadrante de 1x1 m en un área de los


jardines de la USFQ o de su casa con variedad de plantas. Buscarán y contarán todas las
plantas que se encuentren en el interior del cuadrante y compararán si existe una relación entre
la forma de vida de las plantas leñosas o herbáceas, o si existe diferencia entre estas. El
instructor les proporcionará distintas alternativas para realizar uno o varios ejercicios usando
distintas variables.
Ejercicio# 4: Observación y diseño experimental: Cálculo densidad del Agua

Materiales y Métodos

2Cubos de hielo
1Balanza electrónica (marca Ohaus)
5 Vasos de precipitación 100ml
50 ml de agua destilada
Hojas de Guillete
20 ml de agua de la laguna
20 ml de agua mineral
20ml de agua potable
10 ml de saliva
Papel indicador de pH
Bolas de diferente color y resortes

En el siguiente ejercicio ustedes deberán comprobar si es verdad o no lo aseverado en la parte


teórica sobre algunas características físicas y químicas del agua, para esto deberán trabajar en
equipos manejando muy bien los términos observar y experimentar. Para lograrlo vierta 30
ml, de agua en el vaso de precipitación y a continuación introduzca las hojas de guillete en
forma vertical, observe si rompe o no la tensión superficial, a continuación siga el mismo
procedimiento pero ahora arroje la hoja de guillete de manera horizontal observe y anote su
resultado.

En otro vaso de precipitación introduzca el hielo y registre sus observaciones resultantes,


previamente debe obtener su peso y conociendo el volumen calcular la densidad del hielo.
Para este experimento use 20ml de agua, use una balanza para obtener el peso del hielo, luego
introduzca este en el vaso de precipitados y obtenga el volumen con la lectura del
desplazamiento del agua una vez introducido este cuerpo sólido, finalmente calcule la
densidad ( d= m/v).

En el tercer ejercicio usarán la cantidad especificada en materiales de los diferentes tipos de


líquidos, el siguiente paso para anotar sus observaciones será crear una tabla de resultados,
continúe con su experimento e introduzca el papel indicador de pH y obtenga los datos para
completar su tabla, analice sus resultados e indique porque tienen similares tipos de pH o
porque son diferentes en su potencial hidrógeno; además analice y argumente que átomos son
los que están formando las soluciones, que tipos de enlaces, cual es la diferencia entre
sustancia y compuesto, como se encuentran los átomos interactuando hasta completar su
último nivel.

Con las bolas de diferente color y resortes construya varios tipos de moléculas con sus
respectivos enlaces. Dibuje y realice la respectiva distribución electrónica de los elementos
que uso para obtener las diferentes moléculas.

Actividad de Revisión

Desarrollar el informe de Método Científico

Ejercicio 1:

Realiza un ensayo sobre LA PROBLEMÁTICA DEL AGUA VS. MINERÍA EN ECUADOR.


No olvidar citar las fuentes e incorporar literatura citada, en los dos últimos párrafos se
tomará muy en cuenta su opinión sobre el trabajo realizado para generar este ensayo,
además el ensayo es personal no grupal.
Importante las fuentes consultadas deben ser con extensión “.edu”
Laboratorio Ia (ésta información es para que la comprendan y la apliquen en el uso del método
científico).

LA QUÍMICA Y EL AGUA EN LA BIOLOGÍA

Antes de cada práctica de laboratorio lea el manual, cumpla con los ejercicios y
contribuya con sus ideas.

Este es su primer laboratorio de Biología, esperamos que sea placentero y divertido. En todos
los laboratorios se desarrollarán temas importantes y relevantes. En ésta sesión se tratarán
temas de especial relevancia para la comprensión de la Biología, éste tópico es llamado
Primer de Química con especial énfasis en el estudio de la teoría atómica y estructura de los
átomos, como parte fundamental de toda la materia orgánica e inorgánica. Se reforzarán y
actualizarán sus conocimientos sobre las propiedades químicas de algunos de los elementos
básicos para el origen y desarrollo de la vida, se toma como elemento vital para el origen y
mantenimiento de sistemas vivos, a una molécula fundamental que calma nuestra sed, calor, y
que la usamos en todo momento, ya sea en estado sólido, líquido o gaseoso, cuyo nombre es
por todos conocido, y es el agua llamada también como “la molécula de la vida”.

El principal objetivo en este laboratorio se refiere a que en base de las lecturas y


manipulación de algunos elementos puedan reforzar algunos conceptos ya adquiridos,
considerando la íntima relación que tiene la química con los seres orgánicos, y su
indispensable nexo o relación con la biología, es así como sus diferentes procesos y
reacciones dan lugar al origen del fenómeno de la vida. Será de importancia visualizar como
este fenómeno vital debe funcionar, siempre teniendo un pilar fundamental para que se
cumplan los diferentes ciclos vitales, este pilar referido es el AGUA, en donde se producen un
sin fin de procesos biológicos y finalmente se constituye como la base del sostenimiento de la
vida y buena salud del planeta.

Otro objetivo está referido a la creación de conciencia sobre la importancia de la


conservación del agua. Tarea fundamental será el cuidado del recurso desde sus fuentes
primarias y cómo podemos contribuir en el mantenimiento de la misma.

Con la ayuda de tu instructor revisarás nuevamente algunos conceptos y posiblemente


aprenderás otros. Aprovecha de esta práctica para realizar todas las preguntas necesarias para
aclarar estos temas. Durante el laboratorio se cubrirán:

QUÍMICA
• Fundamentos químicos de las células
• Estructura atómica
• Átomos: electrones, protones y neutrones.
• Moléculas
• Tipos de enlaces
• Reacciones químicas
• Los elementos y la tabla periódica
• Elementos “vitales” (compuestos de carbono)

EL AGUA
• Estructura química
• Tipo de enlace
• Puentes de Hidrógeno
• Propiedades físicas y químicas
• Potencial de Hidrógeno (pH)
• Soluciones Buffer
Laboratorio II
MOLÉCULAS ORGÁNICAS
La química del carbono es la química de la vida, porque la mayoría de compuestos químicos
presentes en los seres vivos contienen cadenas de átomos de carbonos unidos por enlaces
covalentes. Junto al carbono, el hidrógeno es el elemento más común en las moléculas
orgánicas. La adición de grupos funcionales, que contienen otros elementos, en especial
oxígeno, nitrógeno, fósforo y azufre, confiere a las moléculas orgánicas sus distintas
propiedades. Se distinguen cuatro tipos de macromoléculas orgánicas: carbohidratos,
proteínas, lípidos y ácidos nucléicos. Ellas cumplen con diversas funciones que incluyen ser
componentes estructurales, almacenar y transferir energía, catalizar y regular reacciones
metabólicas y transmitir información.

Nuestro enfoque sobre las macromoléculas es simplificado por tres factores:

Son comunes a todas las células y comparten propiedades comunes entre sí.
Cada tipo de macromolécula está compuesta por un número limitado de subunidades
repetidas unidas para formar largas cadenas. Cada subunidad se denomina
monómero, y al unirse entre ellas forman una molécula mayor conocida como
polímero. Las sub-unidades de polisacáridos son los azúcares. Las de los ácidos
nucléicos son los nucleótidos y las de las proteínas, aminoácidos. En lugar de tratar
con átomos individuales de los cuales estas moléculas están compuestas, que pueden
llegar a cientos de miles, tratamos con un número mucho menor de subunidades.

En todos los tipos de macromoléculas las sub-unidades están unidas a través del mismo
mecanismo, mediante la eliminación de una molécula de agua (deshidratación)
entre la unión de cada molécula. De esta manera, cada macromolécula puede romperse
en sub- unidades por el proceso inverso, mediante la inserción de una molécula de
agua entre cada par. Este último proceso se llama hidrólisis.

Algunos grupos funcionales de importancia en el estudio de las macromoléculas orgánicas se


encuentran a continuación (R representa el resto de la molécula):

Hidroxilo: R-OH Metilo: R-CH3

Amino: R-NH2 Fosfato: R-H2PO3

R-CO-R ó R-COH (carbono unido a oxígeno por doble enlace)


Carbonilo:

Carboxilo: R-COOH Sulfhidrilo: R-SH


CARBOHIDRATOS

Están compuestos por átomos de carbono, hidrógeno y oxígeno en


proporción 1:2:1, que se expresa de la forma (CH2O)n. Los carbohidratos
más sencillos están formados por una unidad de azúcar (monosacáridos),
la cual tiene entre tres y siete átomos de carbono. Los grupos carboxilo y
carbonilo presentes en éstos azúcares les confieren un carácter hidrofílico.
La glucosa, la fructosa y la galactosa son ejemplos de monosacáridos. La
unión de dos monosacáridos se conoce como disacárido; y la unión de
muchos, como polisacárido. La sacarosa es un ejemplo de disacárido y
está compuesta por glucosa y fructosa. Entre los polisacáridos se
encuentran el almidón, el glucógeno y la celulosa.

Estructura de los Carbohidratos Fuente: Wikipedia.org


Básicamente todos los carbohidratos están compuestos por monosacáridos o azúcares
simples. Un monosacárido está compuesto por una cadena de carbonos donde cada carbono
está unido a un grupo hidroxilo y cualquiera de los carbonos extremos o el segundo está unido
por doble enlace a un oxígeno. Los más comunes son aquellos que tienen una cadena de seis
carbonos. A estos se los conoce generalmente como hexosas. La fórmula química o empírica
de un azúcar hexosa es C6 H12 O6. La hexosa, glucosa, tiene el grupo hidroxilo del tercer
carbono en dirección opuesta a todos los demás grupos hidroxilos de la molécula.

La posición del grupo carbonilo e hidroxilo en la molécula de azúcar es la distinción entre los
diferentes monosacáridos. Muchos azúcares tienen la misma fórmula química pero una
fórmula estructural diferente que les confiere propiedades diferentes. A éstos se los llama
isómeros.

Se pueden encontrar monosacáridos dentro de las células como unidades simples


(monómeros) ejemplo, la glucosa o unidos, formando polímeros. Un polímero de azúcar se
llama polisacárido. Un polisacárido está formado por la eliminación de agua de los
monosacáridos y la unión de estos últimos. Los polisacáridos en los sistemas vivos son por lo
general unidades similares de un sólo tipo de monosacárido como la glucosa.

Otra forma en que los monosacáridos pueden existir es la de disacáridos, dos monosacáridos
unidos. La glucosa y la fructosa, dos monosacáridos, que cuando se unen forman la sacarosa
(azúcar común). Dos moléculas de glucosa unidas forman el disacárido maltosa (azúcar de
malta), una glucosa con la galactosa forman el azúcar de la leche, Lactosa.

La función principal de los carbohidratos en las células es proveer energía. La energía que
une los átomos de carbono es grande. Muchos carbohidratos son almacenados como
polisacáridos uno de estos es el almidón en los vegetales y glucógeno en los animales. Esto
asegura que la energía estará disponible cuando la planta o el animal la necesiten.

LÍPIDOS

Están
formados
por
cadenas

extensas
de
enlaces
carbono-

carbono
y
carbono-

Grafico Estructura de los ácidos grasos Fuente:


Boletín Oncológico Marzo 31 2009.
hidrógeno. El contener en su mayoría enlaces no polares, los
convierte en moléculas hidrofóbicas.
Existen tres tipos de lípidos: los

aceites, grasas y ceras, que contienen solo carbono,


hidrógeno y oxígeno; los
fosfolípidos, que contienen además fósforo y nitrógeno; y
los esteroides, que tienen una conformación característica
de 4 anillos de carbono fusionados,

diferenciándose por la longitud y estructura de las cadenas


laterales que se originan de

aquellos anillos. El colesterol y la testosterona son ejemplos


de esteroides. La unidad fundamental de los dos primeros grupos
es el ácido graso, que

consiste en una cadena de carbono e hidrógeno con un


grupo carboxilo terminal. Las grasas, ceras y aceites están formados por triglicéridos, es decir,
tres ácidos grasos unidos a una molécula de glicerol. Uno de los ácidos grasos más común es el
ácido palmítico que tiene la fórmula química C16H32O2. En la formación de lípidos los tres
ácidos grasos mantienen su integridad y se unen individualmente al glicerol, otra de las
particularidades es el hecho de que son solubles en solventes orgánicos y no en solventes polares
como es el caso del agua.

Los lípidos también sirven como fuente de energía para las células. A pesar de que los enlaces
químicos de las grasas contienen más energía que la de los carbohidratos su uso es secundario.
Esto se debe a que se requiere más energía de la célula para extraer la energía de estos enlaces
y convertirla a una forma utilizable.

Los fosfolípidos tienen una estructura similar a la de los triglicéridos, en sustitución a uno de
los ácidos grasos, tienen un grupo fosfato unido a otro grupo polar corto. La membrana celular
está formada por una doble capa de fosfolípidos, en la que la región hidrofóbica se orienta
hacia el interior, y la región hidrofílica hacia el exterior.

PROTEÍNAS

El monómero de las proteínas es el aminoácido. La estructura típica de un aminoácido


consiste en un átomo de carbono central enlazado a: 1) un grupo amino; 2) un grupo
carboxilo; 3) un hidrógeno; y 4) un grupo variable distintivo de cada aminoácido. Existen
unos 20 aminoácidos comúnmente presentes en las proteínas. Los aminoácidos se enlazan por
una reacción de deshidratación; este enlace se conoce como enlace peptídico. Se denomina
polipéptido a la cadena de aminoácidos. Las proteínas tienen cuatro niveles estructurales,
siendo el primero la secuencia de aminoácidos por la que está constituida. La estructura
secundaria de un polipéptido se produce por la formación de puentes de hidrógeno entre
átomos de distintos aminoácidos, dando como resultado dos tipos de conformación: hélices y
láminas plegadas. El ambiente celular, interacciones entre grupos R cargados y los puentes
disulfuro que se forman entre aminoácidos cisteína, interactúan para doblar las hélices o
láminas plegadas en una estructura terciaria. Por último, la estructura cuaternaria está
determinada por la asociación de dos o más polipéptidos. Los anticuerpos y las enzimas son
ejemplos de proteínas.
Gráfico Estructura y organización de las proteínas, Fuente: Madison Area Technical
College, 2009

La integridad estructural y la actividad biológica de cada forma de vida dependen de sus


proteínas.
Las proteínas forman la base de la estructura orgánica y es un componente destacado de las partes
funcionales de
la célula. Un
ratón y un
elefante poseen
carbohidratos y
lípidos con la
misma
estructura. La
glucosa
mantiene su
estructura
Imagen obtenida de la Fuente: Wikipedia.org
química así se encuentre en una ameba o en un árbol de
pino. Las proteínas en cambio, varían considerablemente.
Las proteínas están constituidas por unidades
de aminoácidos. Los aminoácidos se componen de un
grupo amino y de un grupo carboxílico, estos dos grupos
son extremos, ya que en la zona central se encuentra un
carbono alfa, sitio al que se unen una variedad de
moléculas orgánicas e inorgánicas,
permitiendo de esta manera la formación de los aminoácidos. En la formación de una
proteína, varios aminoácidos se unen para formar un polímero de cadena larga. Un polímero
que no es lo suficientemente grande para ser considerado una proteína se conoce como
polipéptido. El enlace de aminoácidos se da por la unión del grupo ácido de un aminoácido
con el grupo amino del siguiente. En esta unión se elimina una molécula de agua
(deshidratación), el enlace por el cual se unen los aminoácidos se los conoce como
peptídicos.

Existen aproximadamente 20 aminoácidos que se encuentran frecuentemente en la estructura


proteínica de la materia viva. El orden en que estos aminoácidos aparecen en la cadena, el
tamaño de la misma, el aminoácido específico que se utiliza y la orientación física
determinan el tipo de proteína que se forma.

Este orden es tan específico que una simple sustitución en la cadena puede resultar en una
proteína no funcional de un sistema particular como ocurre en el caso médico de la anemia
falciforme.

ÁCIDOS NUCLEICOS

Los ácidos nucléicos son polímeros de nucleótidos. Un nucleótido está compuesto por un

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azúcar de cinco carbonos, un grupo
fosfato y una base nitrogenada. El
ADN y ARN son ácidos nucléicos.
En ellos, los nucleótidos están
unidos por enlaces fosfodiéster, que
consiste en un grupo fosfato y los
enlaces covalentes que lo unen a los
azúcares de dos nucleótidos
contiguos. El ADN es un ácido
nucléico de doble cadena; ambas
cadenas de nucleótidos se unen
a través de puentes de hidrógeno que
un en las bases nitrogenadas.
Los ácidos nucléicos
contienen información
hereditaria y son
determinantes en la producción de proteínas de una célula. Existen además ciertos
nucleótidos que cumplen funciones muy importantes como las de transferencia de energía y la
regulación del funcionamiento celular. Por ejemplo, el Trifosfato de Adenosina o ATP, está
involucrado en procesos de transferencia de energía a través del desprendimiento y adición de
sus grupos fosfato.

En esta sesión del laboratorio se tratará de identificar y separar algunas de las


macromoléculas que se encuentran en distintas sustancias con el fin de aprender sobre sus
propiedades y las unidades que las componen.

Cada célula contiene un complemento completo de moléculas biológicamente activas. Su


presencia en todo caso puede ser tan reducida que está muy por debajo del nivel de detección
al alcance de un estudiante de laboratorio. Debido a su función especializada ciertas células
son particularmente ricas en una o más de estas sustancias bioquímicas y son aptas para la
experimentación.
Actividades de Revisión 1:

Ejercicio: debes revisar cada molécula y si ésta se encuentra completa la dejas así caso
contario completa sus enlaces.
a) el grupo hidroxilo: - OH
H H
│ │
R - C - C – O-H
│ │
H H
b) el grupo carboxilo (ácido orgánico) (COOH).
H
│ O
R - C -C
│ OH
H

2) El Nitrógeno puede insertarse en la cadena de carbono formando un grupo amina


secundario.
H H H H H
│ ││ │ │
R-C-N-C-N-C-H
│ │ │
H H H
3) El nitrógeno puede unirse al final de una cadena de carbono.

H H
│ │
R-C-N
│ │H
H

Este es el grupo amino. De esta manera pueden formarse una variedad infinita de moléculas
orgánicas.

Asegúrese que tiene una idea de cómo se escriben las fórmulas estructurales.

COMPOSICIÓN QUÍMICA DE LA CÉLULA

Un análisis químico detallado del protoplasma es una tarea de gran dificultad teórica y
tecnológica. Es una tarea que no ha sido completada hasta hoy en día. La dificultad se agranda
cuando no sólo se quiere determinar qué compuestos específicos están presentes, sino la
cantidad en que se encuentran. Por otro lado, si un analista no está en busca de detalles y
cantidades específicas y solamente está interesado en determinar la clase general de
compuestos protoplasmáticos puede emplear efectivamente ciertas pruebas sencillas. La
mayor parte del trabajo en la actualidad involucra usar reactivos en tubos de ensayo y
observar los resultados, ya sea una coloración específica o la formación de un precipitado.
PRECAUCIONES IMPORTANTES PREVIO AL TRABAJO CON SOLUCIONES
OXIDANTES O CORROSIVAS.

Se deben observar algunas precauciones elementales para reforzar principalmente la


seguridad personal, pero también para asegurar la efectividad de los experimentos:

1. Tratar todos los reactivos con mucho cuidado como si todos fueran peligrosos.
Muchos de ellos lo son. Pueden ser ácidos o sustancias alcalinas fuertes o venenos
protoplasmáticos. Pueden ser volátiles o inflamables o pueden emitir gases tóxicos.
Saque las soluciones lentamente. Si cualquiera de los reactivos se riega, lávese las
manos inmediatamente y avise a su instructor. Mantenga los reactivos lejos de la llama
y de superficies calientes. Proteja sus ojos y nariz de las mezclas reactivas. Retire su
cara del reactivo tanto como sea posible.

2. Cuando caliente una solución en un tubo de ensayo, sostenga el tubo ligeramente


inclinado cuidando de no apuntar la boca del tubo hacia otra persona. Cuando la
solución comience a hervir, sea muy cuidadoso; muchos reactivos hierven
repentinamente y pueden explotar si la temperatura sube demasiado. Si usted calienta
un tubo de ensayo siempre muévalo circularmente sobre la llama. Nunca coloque una
solución fría directamente en una que ha sido recientemente hervida porque puede
producirse una reacción explosiva. Revise que las sustancias a mezclarse tengan la
misma temperatura aproximadamente.

3. Previo al inicio de los experimentos utilice gafas de seguridad, cerciórese que estas se
encuentren limpias, caso contrario limpie sus lentes protectores antes de cada
experimento. Acostúmbrese a usar cepillos para tubos, jabón y agua. Cuando termine
el experimento asegúrese que los lentes protectores estén completamente limpios.
Recuerde que otros estudiantes probablemente los usarán.

4. Siempre revise dos veces el nombre del reactivo que vaya a utilizar (y el que está
utilizando). Los envases de los reactivos deben estar correctamente etiquetados y
cuando no lo estén notifique a su instructor inmediatamente. Los envases de reactivos
deben permanecer cerrados todo el tiempo excepto cuando se esté sacando la
solución. NUNCA devuelva reactivos a sus envases. Lo que se saca de ellos debe ser
utilizado o desechado.

5. Cuando requiera cantidades pequeñas de una solución de un envase grande, nunca pase
el contenido directamente de ese envase al tubo de ensayo. Utilice un recipiente más
pequeño. Si requiere cantidades verdaderamente muy pequeñas use una pipeta.

6. Cuando exista la necesidad de mezclar una solución nunca use su dedo. Para una mejor
mezcla agite el tubo cuidadosamente, utilice una varilla o tape el tubo con un corcho o
tapón de caucho y agite.

7. Los reactivos necesarios se pueden encontrar en su mesa o en el lugar de


almacenamiento del laboratorio. Si el reactivo es parte del stock de la clase, tome solo
lo que necesite.
La palabra clave aquí es consideración para sus compañeros estudiantes.
EJERCICIOS DE COMPOSICIÓN QUÍMICA DE LAS CÉLULAS

Tomado y modificado de Larsen 1987 por Nelson


A. Zabala, PhD.
Pablo Riera Dr.

Ejercicio# 2

ESTUDIO DE LOS CARBOHIDRATOS

TEST DE BENEDICT

Introducción. – El reactivo de Benedict es una mezcla de carbonato de sodio, citrato de sodio


y sulfato de cobre. Si esta mezcla se calienta en presencia de una sustancia reductora, el cobre
divalente del CuSO4 se reduce a cobre monovalente en forma de óxido cuproso (Cu2O).
Este último compuesto forma un precipitado rojo (el que cede electrones se oxida y el que
acepta se reduce).

La reacción puede utilizarse cuantitativamente para medir la cantidad de la sustancia


reductora presente. El color resultante de la mezcla va de verdoso a naranja a rojo o café
dependiendo de la cantidad de la sustancia reductora presente.

En el protoplasma las únicas sustancias reductoras de importancia presentes son los


aldehídos. La mayor parte de los aldehídos son parte de las moléculas de azúcar. Por lo tanto
el reactivo de Benedict puede usarse para identificar los azúcares reductores.

Por definición, todas las aldosas, aldehídos y cetonas contienen el aldehído o quetonas
necesarias para reaccionar con el reactivo de Benedict. El test de Benedict también distingue
entre monosacáridos y disacáridos.

Los monosacáridos cambian a color rojo mientras que los disacáridos y polisacáridos no lo
hacen.

Materiales y Métodos

Azúcares reductores (Test de Benedict)


Marcar seis tubos de ensayo (T, G, S, C, P, L).
En el tubo T (testigo) colocar 2 ml de agua destilada.
En el tubo G colocar 2 ml de la solución (sol) de glucosa.
En el tubo S colocar 2 ml de solución de sacarosa (azúcar común).
Con una pipeta tomar 2 ml de solución de cebolla y colocarla en el tubo C. Tenga
precaución de no tomar del fondo del vaso por qué puede tapar la pipeta.
Repita el paso anterior con la solución de papa y colóquela en el tubo P.
De igual manera que en los tubos anteriores obtén 2ml. De leche y colócalo en el tubo
L
A cada tubo añade 0,5 ml de reactivo de Benedict. Registra en la tabla que color tiene
cada tubo antes de aplicar calor.

Lleva los tubos e introduce en el Baño María por 5 minutos. Retíralos y anota los cambios si
estos se producen.
REACCIONES COLORIMÉTRICAS OBSERVADAS

SOLUCIONES

Color Antes Color con Benedict Color con Benedict con


del Benedict sin Temperatura Temperatura

Control (agua)2ml

Glucosa 2ml

Sacarosa 2ml

Cebolla 2ml

Papa 2ml

Leche 2ml

Materiales y Métodos
Polisacáridos-almidón (Test de Lugol)

Marcar seis tubos de ensayo (T, A, S, G, L y P).


En el tubo T colocar 2 ml de agua destilada.
En el tubo A colocar 2 ml de solución de almidón.
En el tubo S colocar 2 ml de solución de sacarosa.
En el tubo G colocar 2 ml de solución de glucosa.
En el tubo L colocar 2 ml de solución de Lactosa. En
el tubo P colocar 2 ml de solución de papa.

A continuación añadir dos gotas de Lugol a los tubos A, S, T, G, L y P. Observar


el cambio de color en los tubos.

Una reacción positiva dará tonalidades que van del violeta leve al morado intenso
dependiendo de la cantidad de polisacáridos presentes.
REACCIÓN COLORIMÉTRICA OBSERVADA
Color con Lugol
Color previo al Color con Lugol con temperatura
SOLUCIONES Lugol sin temperatura
Control (agua)
2ml

Almidón 2ml

Sacarosa 2ml

Glucosa 2ml

Lactosa 2ml

Papa 2ml

Ejercicio# 3
ESTUDIO DE LAS PROTEÍNAS

Introducción. – Las proteínas pueden identificarse con una variedad de reacciones de


coloración producidas cuando se mezclan con ciertos reactivos, o por sus propiedades de
coagulación bajo ciertas condiciones y la correspondiente formación de precipitados.

Materiales y Métodos

Albúmina (Test del ácido nítrico)


Marque 3 tubos de ensayo T, A y L.
En el tubo T coloque 2 ml de agua destilada
En el tubo A coloque 2 ml de la solución de albúmina de huevo al 1%.
En el tubo L coloque 2 ml de la solución de lactosa
Añada dos gotas de ácido nítrico (OJO, es muy corrosivo) a los tubos T, A y L.

Diseña una tabla para ingresar los resultados

Ejercicio# 4
ESTUDIO DE GRASAS/ LÍPIDOS
Introducción. – Las grasas están constituidas de una molécula de glicerol unida a tres ácidos
grasos. Los ácidos grasos son largas cadenas de carbonos cuyos enlaces están satisfechos por
hidrógenos. El extremo terminal contiene un grupo ácido.

Gracias a que existen preparaciones comerciales disponibles en el mercado se vuelve


innecesario proceder a la extracción. Aceites para ensaladas y las margarinas se extraen de
vegetales y la mantequilla de fuentes animales.

En este análisis se utilizará aceite para ensalada. La manera más simple de identificar estos
compuestos es utilizar sus conocidas propiedades para producir marcas de grasa en el papel.
De cualquier manera, esto solo resultará si la grasa está altamente concentrada. Algo más
sensible es la prueba basada en la propiedad de ciertos tintes antes de disolverse en grasas.

Materiales y Métodos
Aceite vegetal (Test del Sudán IV)
Marcar seis tubos de ensayo (A, B, C, D, E y F)
En los tubos A y B colocar 2 ml de aceite vegetal y 2 ml de agua.
En los tubos C y D colocar 4 ml de agua destilada.
En los tubos E y F colocar 4 ml de aceite
Añadir dos gotas de Sudán IV en los tubos A, C y E.
Tener la precaución de hacer rodar las gotas por las paredes del tubo de tal modo que
pueda observar lentamente que tipo de reacción tiene el reactivo Sudán con las
sustancias del tubo.
Añadir dos gotas de tinta roja en los tubos B, D y F.
Debes tener la precaución de hacer rodar las gotas por la pared del tubo de tal modo que se
pueda observar lentamente que tipo de reacción tiene la tinta con las sustancias del tubo.

Debes hacer una tabla para anotar tus resultados utilizando los modelos anteriores.
TEST DE ALIMENTOS.
Materiales y Métodos

Verificar los siguientes elementos:


Una rodaja de papa.
Una rodaja de cebolla.
Una rodaja de yuca.
Una rodaja de huevo duro.
Un pedazo de queso.
Varios granos de maní.
- Corta en 5 partes iguales la yuca, papa, cebolla, huevo y queso. Separa por la mitad tres
granos de maní.
- Toma las cajas Petri y en cada una incluye un pedazo de yuca, un pedazo de cebolla, uno de
papa, uno de huevo y una mitad de maní.
- En cada caja Petri vas a utilizar un reactivo diferente. Sigue la tabla para que verifiques el
procedimiento.
- Toma en cuenta que no hacemos el test de Benedict en el maní ni el huevo. ¿Por qué?
- Con la tinta y el Sudán IV es importante que observes si éstos penetran o no en el producto.

REACTIVO APLICADO EN CADA ALIMENTO


CAJAS BENEDICT LUGOL ACIDO SUDAN TINTA
PETRI NÍTRICO IV CHINA
ROJA

YUCA

CEBOLLA

PAPA

QUESO

HUEVO

ZANAHORIA

MANI

PLATANO
MANZANA

NOTA: Lava todos los tubos, las cajas de Petri y vasos de precipitación después de tus
experimentos. No arrojes los alimentos o desperdicios en los lavabos, utiliza el tacho de la
basura. Deja el material limpio sobre la mesa de trabajo.

ACTIVIDADES DE REVISIÓN

PREGUNTAS EJERCICIOS DE CARBOHIDRATOS

¿Reacciona el reactivo de Benedict sin calor?

¿De qué color se tiñe el Benedict con el calor siempre y cuando haya un
monosacárido?
¿La Glucosa qué tipo de azúcar es?

¿La sacarosa qué tipo de azúcar es?

¿Qué tipo de azúcar da origen a los polisacáridos?

¿Se requiere de calor para que exista una reacción positiva en los polisacáridos?

¿Tanto para disacáridos como para polisacáridos son sometidos a calor y a ácidos
fuertes, en base a esta consideración me puedes explicar cómo afectan estos factores
mencionados en la estabilidad de estos carbohidratos?

Describa y realice una ruta metabólica sobre el inicio y finalización del


aprovechamiento de carbohidratos una vez que los hemos ingresado a nuestro
organismo en los alimentos.

PREGUNTAS DEL EJERCICIO DE PROTEÍNAS

¿Qué color toma la albúmina y la lactosa al reaccionar con el ácido nítrico?

¿Qué crees que ha sucedido cuando observas las soluciones sin HNO3 y con HNO3?

¿En la dieta de los organismos vivos es necesario el ingreso de proteínas? Si, no, porqué.
Argumente científicamente sus respuestas, también mencione en donde se produce la
transformación de aminoácidos a proteínas en los seres vivos y cuál es su mecanismo.

PREGUNTAS DEL EJERCICIO DE LÍPIDOS Y TEST DE ALIMENTOS

Toma en cuenta que no hacemos el test de Benedict en el maní ni el huevo. ¿Por qué?

¿Cómo puedes estar seguro de la presencia de monosacáridos sin utilizar el calor?

La tinta roja es soluble en agua. ¿Qué compuesto no reacciona con la tinta?

¿Cuál es tu interpretación sobre los resultados del Sudán IV y aceite así como el agua, aceite y
Sudán IV?

Las grasas que ingerimos en nuestros alimentos son las responsables de que se formen los
depósitos grasos en los cuerpos de los organismos. Si, No, explique.
Entrega los resultados del test de alimentos en base a las reacciones y resultados que
registraste en el laboratorio e indica la respectiva interpretación de resultados obtenidos y que
se encuentran en la tabla.
Laboratorio III
EL MICROSCOPIO Y SU USO

En esta práctica usaremos distintos tipos de microscopios para conocer su manejo y cuidado.
Desde su descubrimiento y construcción, el microscopio permitió conocer una parte del
mundo a la que no podíamos tener acceso con nuestra visión normal. El microscopio apareció
en la época del renacimiento y fue mejorado y diversificado a lo largo de la historia hasta
contar en la actualidad con potentes microscopios electrónicos, que permiten observar y
conocer características de estructuras internas y externas de las células.

Introducción

La Biología es una ciencia vasta, cuyo ámbito de estudio abarca procesos vitales a toda escala.
Debido a que muchos fenómenos biológicos suceden a una escala tal, que se encuentran fuera
del alcance de los sentidos de los seres humanos, se han desarrollado instrumentos capaces de
extender tanto el rango de sensibilidad de los mismos, como el espectro de organismos,
estructuras y procesos biológicos que pueden ser objeto de investigación. El microscopio de
luz es un ejemplo de estos instrumentos ya que revolucionó el pensamiento biológico y abrió
la puerta al mundo de lo invisible.

Consideramos a la célula como la unidad biológica fundamental. Todos los procesos que
toman lugar dentro de un organismo dependen directamente de su composición unicelular o
multicelular. Cada acción ejecutada por cada forma de vida sobre este planeta está
íntimamente conectada con el trabajo metabólico de la célula. Por lo tanto para un buen
entendimiento del proceso de la vida se requiere del conocimiento de las estructuras y del
funcionamiento de la célula.

El uso del microscopio permitió echar luz sobre los procesos evolutivos que condujeron,
primero a la aparición de seres unicelulares, y luego, hacia el desarrollo de organismos
multicelulares. La evolución hacia seres multicelulares parece haberse producido más de una
vez en las células eucariotas y brindó una oportunidad para la radiación adaptativa extensa de
organismos especializados y diversificados, con el tiempo dando lugar a hongos, plantas y
animales.

Este medio de imagen ampliada ha contribuido enormemente al desarrollo de varias


disciplinas biológicas, constituyéndose así como un elemento fundamental en el progreso de
la ciencia. Es importante conocer que los investigadores en distintos campos de la biología
como genética, biología molecular, neurobiología, biología celular, evolución y ecología
utilizan distintos tipos de microscopio en su trabajo de rutina, entre ellos el microscopio
compuesto, también conocido como microscopio de luz o de transmisión.

Muchos de los logros de la biología moderna no hubieren podido ser alcanzados sin la ayuda
de este instrumento. Además, con seguridad alguna vez en su carrera profesional deberán
hacer uso de este instrumento. Es por esto que en este laboratorio aprenderán cómo usarlo de
manera correcta y qué cuidados se deben tomar.

Objetivos del Laboratorio


- Conocer uno de los instrumentos más importantes para la Biología como es el
microscopio, de luz o de transmisión (compuesto) y el de disección
(estéreomicroscopio).
- Conocer su funcionamiento y modo correcto de utilización.
- Identificar las partes de un Microscopio compuesto y estéreomicroscopio.
- Describir correctamente los distintos procedimientos para la preparación de
muestras para observación con el microscopio compuesto.
- Reconocer las diferencias entre las estructuras de células vegetales y animales, así
como las similitudes.

- Distinguir las estructuras a ser observadas usando la luz transmitida y luz


reflejada.
- Discutir la significancia evolutiva del incremento de complejidad de la
organización unicelular y multicelular.
- Usar correctamente en las preparaciones los diferentes tipos de colorantes que se
usan para distinguir las diferencias entre las estructuras celulares.

Para lograr el cumplimiento de los objetivos que se plantean, se realizarán varios ejercicios
que lograrán generar la destreza en los alumnos así como la familiarización con esta tan útil
herramienta y las distintas técnicas de montaje de las muestras biológicas recolectadas.

Ejercicio#1
Operación de los Microscopios

Materiales y Métodos

1 Microscopio de luz
1 estéreomicroscopio

PARTES Y OPERACIÓN DE UN MICROSCOPIO

Es muy probable que ya hayas utilizado un microscopio. Sin embargo es importante revisar y
recordar algunos detalles sobre sus partes y correcta utilización. La Figura 1 detalla las
principales partes de este instrumento. Es importante recordar que el uso apropiado y
confortable del instrumento requiere de práctica, pero antes dedica unos minutos a reconocer
y entender para qué sirve cada parte de tu microscopio.
Figura 1. Partes de un microscopio. Fuente: www.kalipedia.com

NOTA: Un microscopio compuesto es un instrumento caro y delicado y debe ser


tratado con cuidado. Recuerda que al finalizar la práctica debes entregar el
microscopio exactamente como lo recibiste: déjalo siempre en el menor
aumento y con el cable enrollado en el brazo.

¡Transporta siempre el microscopio sujetándolo del brazo y sosteniendo la base con la


otra mano!

¡Si ves que los lentes están sucios, por favor pide ayuda a tu instructor no uses paños,
papel, ni tela!

PARTES DEL MICROSCOPIO

El Brazo: sostiene a un cuerpo vertical en forma de un tubo, que a su vez sostiene a los
elementos de magnificación del microscopio.
Lente ocular: es uno de los elementos de magnificación y por lo general removible.
Lentes objetivos: son los otros elementos de magnificación y se encuentran en el
extremo inferior del tubo y son los que trabajan captando y magnificando la imagen,
la misma que es llevada hacia el prisma interno en donde se refleja nuevamente la
imagen. Estos lentes generalmente se encuentran organizados en un sistema de
revólver y, junto al ocular, constituyen el sistema de magnificación del
microscopio.
La platina: es la estructura en donde se colocan las placas a ser examinadas. El
condensador: (en algunos microscopios puede estar ausente) sirve para concentrar la
luz reflejada hacia arriba a través de un espejo que se encuentra en la parte inferior.
Fuente de luz: La fuente emite una luz hacia arriba, que atraviesa la abertura de la
platina y la muestra en la placa de esta manera se magnifica la imagen y es
reflejada a través del prisma hasta llegar a los lentes, estructuras ópticas que el
observador usa en la definición de la imagen. Es crítico ajustar cuidadosamente la luz
y su intensidad para obtener una correcta observación.
El diafragma: es parte del condensador o si éste no existe esta directamente bajo la
platina. Este es uno de los principales controles del microscopio ya que regula el paso
de la luz.
Perillas macro y micrométricas: Así como cuando se observa con una lupa, el
observar un objeto con un microscopio requiere, que el lente esté a una determinada
distancia del objeto y el objeto pueda ser enfocado. Estas se encuentran
generalmente en el brazo del microscopio. Mueve estas dos perillas, dándote cuenta
como cada uno de estos afecta la posición de los objetivos. El macrométrico es
utilizado para obtener un enfoque aproximado y el micrométrico para
obtener un enfoque exacto y claro.

NOTA: El efecto de las perillas es similar al de las rodelas del lente de una cámara de vídeo o
fotográfica, que busca enfocarse sobre el objeto que quieres fotografiar. Práctica con las
perillas hasta que te sientas cómodo enfocando objetos durante tus ejercicios.

MAGNIFICACIÓN Y AUMENTOS

El poder de aumento en los microscopios está determinado por los lentes objetivos y oculares
y se encuentra marcado en los mismos lentes junto a una X que representa el número de
aumentos. Por ejemplo, la marca 10X en la parte superior del ocular significa que este
aumenta la imagen 10 veces.

NOTA: Recuerda que los lentes trabajan juntos. Por ejemplo, el objetivo forma una imagen
(dentro del cuerpo del microscopio) que es 10 veces más grande que el objeto en realidad; el
ocular 10X a su vez aumenta esta imagen primaria otras 10 veces. La imagen que finalmente
alcanza al ojo ha sido aumentada entonces 100X su tamaño original. El aumento total de un
microscopio se obtiene de cada una de las combinaciones entre los oculares u objetivos que
tiene el microscopio utilizado.

Calcula el poder de magnificación de tu microscopio colocando en los espacios el


aumentos de tus lentes objetivos de manera ascendente (de menor a mayor aumento):

Lente Ocular Lentes Objetivos Total

10X X (Búsqueda inicial)


10X X (Bajo poder)
10X X (Alto poder)
10X X (Aceite de inmersión)

Ejercicio # 2
Enfoque, Resolución de imágenes y Profundidad de campo

Materiales y Métodos

1 microscopio de luz
1 trozo de papel periódico con la letra “e”
3 hilos de color
1 portaobjeto
1 cubreobjeto
1 gota de agua

Una forma más exacta de decir que las células o microorganismos son normalmente
invisibles para nosotros, sería decir que el ojo humano normalmente no puede resolver puntos
dentro de los límites de dimensión de la mayoría de células.
Las letras impresas en esta página son fáciles de resolver a distancias usuales de lectura, pero
si tú alejas la hoja, será cada vez más difícil el discernir entre las diferentes letras con
exactitud, particularmente si hay letras que se parecen a otras. Tu percepción de las letras y
palabras depende de la habilidad que tienen tus ojos de separar puntos diferentes del patrón de
la tinta que forma cada letra.

El sistema de amplificación de imagen de un microscopio tiene un grado de resolución mayor


que el de tus ojos. Este hecho se denomina el poder de resolución. El poder de resolución de
los lentes es descrito por un número llamado abertura numérica, calculada a partir de ciertas
propiedades físicas de los lentes y los ángulos a los cuales la luz entra y sale.

La abertura numérica generalmente está marcada en cada objetivo. A distancias normales de


lectura y a una luz normal, la letra “e” es fácilmente resuelta por tus ojos, esto es, tu percibes
las partes de la letra como líneas distintas entonces reconoces una “e”. A mayores distancias,
las líneas que forman la letra “e” no son tan distintas y tus ojos pueden comenzar a
confundirla con una letra “c”. A una mayor distancia será imposible distinguir estas dos letras.
Esto pasa porque la retina, o la parte sensible a la luz de tu ojo, contiene un número
limitado de células sensoriales. Cuando imágenes de dos puntos separados entran en la
misma célula sensorial, los dos puntos son percibidos como uno. Mientras más alejes a dos
puntos de tus ojos, más cerca estarán en la retina.

PROFUNDIDAD DE CAMPO

El centro de enfoque de los lentes se mantiene fijo en un punto, mientras se aumenta o


disminuye el aumento del microscopio. Para que un objeto pueda ser enfocado este debe estar
en el área inmediata sobre o bajo el centro de enfoque, esto se conoce como profundidad de
campo, o campo de enfoque, esto es porque la imagen no es plana es tridimensional.

Para los ejercicios acostúmbrate a observar con los dos ojos abiertos a través del microscopio,
a una distancia más o menos de 2 cm de los oculares, además debes abrir los oculares de
acuerdo a la distancia que tengas entre tu ojo derecho e izquierdo.

¡Recuerda la profundidad de campo!, enfoca siempre primero con el objetivo de menor


aumento (4x).

Nota: Ten cuidado en el enfoque. Primero enfoca con el macrométrico, luego define la
imagen con el micrométrico, mueve todo muy despacio y observa la distancia de tus
lentes objetivos con el portaobjetos. Movimientos bruscos pueden romper el
portaobjetos (placa) con el lente y este puede dañarse mediante rayones producto de
estas rupturas.

MÉTODOS PARA: Resolución, Ajuste de luz, enfoque y profundidad de campo.

1. Ajustando la luz:

Coloca el microscopio sobre una base firme, con el brazo hacia ti. Abre el diafragma o su
equivalente completamente.

Luego regula el paso de luz desde el condensador, subiendo o bajando la luz usando el
reóstato que se encuentra en la base del microscopio.

También debes usar el condensador bajándolo para disminuir la intensidad de la luz que puede
ser perjudicial para tu vista.

2. Cambio de Aumentos:
Primero enfoca usando el tornillo macrométrico, luego con el micrométrico, defines o
mejoras la calidad de la imagen. Para observar las estructuras con más detalle, debes cambiar
a objetivos de mayor aumento. Antes de hacer esto, centra el detalle que tú quieres examinar
justo en la mitad del campo de visión del objetivo. El círculo de la imagen es conocido con el
nombre de campo óptico; la imagen o estructura que tú deseas observar debe ser colocada
justo en el centro del mismo, antes de cambiar a un objetivo de mayor aumento. Con el fin de
cambiar los lentes de menor a mayor aumento rota el revólver que tiene insertados a los
objetivos hasta que oigas el “click”, que indica que el nuevo objetivo está en la posición
correcta.

Nuevamente, usa el micrométrico para que la imagen del objeto esté enfocada y definida
claramente. A no ser que el objeto que se esté observando sea demasiado grueso o que el
microscopio no esté equipado con objetivos para focales (ve la nota al final de
este tema), generalmente no es necesario hacer cambios mayores para enfocar nuevamente,
se requiere simplemente hacer ajustes pequeños utilizando el micrométrico.

Al utilizar el objetivo de mayor aumento, se tiene que tener cuidado de que éste no
entre en contacto con el porta y cubreobjeto, pues puede producir la ruptura de la placa
causando un posible daño a los lentes del microscopio.

Nota: La mayoría de microscopios tienen sus objetivos de tal forma que se encuentran firmes
en su posición, por lo que no es necesario hacer mayores cambios para lograr el enfoque
cuando se cambia de aumento. A los objetivos que están arreglados de esta forma se los llama
parafocales. Si tu microscopio estaba muy bien enfocado en un aumento menor y se cambia a
un aumento mayor, no será necesario enfocar nuevamente usando el macrométrico lo que se
requiere es un ajuste pequeño usando el micrométrico. Si tú eres observador, te habrás dado
cuenta de que este tornillo funciona subiendo la platina hacia el lente con un ajuste de
milímetros, por este motivo lo que se obtiene finalmente es una imagen definida y clara, y se
lo mejora usando el condensador y el reóstato bajado la intensidad de luz.
3. Enfoque

Para obtener un buen enfoque es necesario que los lentes oculares se encuentren ajustados a la
distancia que tienes entre tus ojos, esto se logra moviendo los oculares hasta que se ajusten a
tus ojos, luego enfoca centrando el cubreobjeto con el lente objetivo de menor
aumento(4X), el siguiente paso es cambiar al lente de 10X y finalmente al de 40X, siempre en
cada cambio se realiza un pequeño ajuste con el micrométrico, además se debe calibrar el
condensador acercando o alejándolo de la platina, siempre es mejor usar la menor cantidad de
luz posible, para lograr observar las imágenes bien definidas.

Materiales y Métodos

- Un pedazo de papel periódico con la letra minúscula “e”


- Portabobjeto
- Cubreobjeto
- Agua

Usa el pedazo pequeño de papel periódico que tenga la letra minúscula “e”. Coloca el papel en
un portaobjetos, sobre este agrega una gota de agua y usa un cubreobjetos, luego colócalo en
la platina de tal forma que la letra esté en la mitad de la abertura esta y la imagen se la vea en
el centro del campo óptico, usando el lente de 4x.

Coloca en posición el objetivo de menor aumento (4x) y, utilizando el macrométrico, enfoca la


imagen hasta que se observe clara y nítidamente la letra “e”.

Nota: Si no logras enfocar la letra, puede ser que no haya estado centrada en la abertura de la
platina, o hayas “perdido” sin darte cuenta la correcta distancia de trabajo al mover muy
rápidamente el macrométrico. Intenta nuevamente, asegurándote de no mover el objetivo, lo
que se debe mover es la platina con el fin de centrar el objeto de observación en el campo
óptico, luego de obtener la imagen centrada se procede al cambio de lente objetivo.

NOTA:
Estos fenómenos son llamados inversiones, que se dan por el mecanismo óptico del
microscopio. La imagen del objeto y sus movimientos están invertidos. Práctica moviendo el
papel en diferentes direcciones, escribe y observa diferentes letras hasta que te acostumbres a
las inversiones.

Solucionando posibles problemas:

Si “pierdes” el objeto cuando lo cambias a un mayor aumento, puede ser que tus
objetivos no sean parafocales, o que tú no centraste apropiadamente el objeto que
querías examinar.

Si los objetivos no son parafocales, tienes que enfocar nuevamente, cada vez que
cambies de objetivo. Si no centraste apropiadamente, intenta mover el objeto
delicadamente o regresa nuevamente al objetivo de menor aumento y centra el objeto
otra vez.

Si la imagen que obtienes no es clara, el portaobjetos, el espejo o los diferentes tipos de


lentes requerirán seguramente ser limpiados. Pregunta a tú instructor sobre la
forma apropiada para limpiar estos elementos.

Si la imagen que tú obtienes parece estar enfocada y si el limpiar no ayuda para aliviar
la apariencia opaca o borrosa, seguramente no estás utilizando la cantidad correcta de
luz. Usa el diafragma para regular la intensidad de la luz.
4. Profundidad de Campo

En este ejercicio se usan los hilos de color y una gota de agua, para lo cual debes colocar tres
o cuatro hilos de diferentes colores en un portaobjetos, debes cruzarlos y luego adiciona 2
gotas de agua para humedecerlos. Observa al microscopio en el menor aumento y encuentra el
punto en donde los hilos se entrecrucen.

Realiza un ajuste ligero, mueve el enfoque hacia arriba y hacia abajo. Nota que al hacer esto,
diferentes partes de los hilos y diferentes hilos se enfocan y desenfocan. Cuando el del centro
está enfocado, los otros, el de arriba y el de abajo, se ven borrosos. Si continúas enfocando a
través de toda la muestra, se puede percibir la dimensión de profundidad que no es evidente
cuando se enfoca en un sólo punto. Enfocando los hilos, determina el orden de éstos en los
diferentes puntos de enfoque.

Examina los hilos a mayor aumento, y nota que puedes ver considerablemente menor
profundidad que a menor aumento. Ciertamente, no podrás distinguir claramente un hilo
entero en un aumento mayor. A medida que aumentes la magnitud, la percepción de la
profundidad disminuirá.

La distancia vertical que permanecerá enfocada en cualquier punto en particular, se llama


profundidad de enfoque o campo de profundidad. Este es un valor constante para cada uno de
los objetos.

Ejercicio # 3

Montajes Húmedos.

Introducción. – Muchas de las muestras que serán examinadas estarán montadas en agua o
algún colorante sobre un portaobjetos de vidrio. Estos montajes se realizan colocando un trozo
pequeño de la muestra a observar sobre la placa de vidrio grueso denominado portaobjetos y
añadiendo una gota o varias gotas de líquido sobre la mencionada muestra. Si el objeto a
observar se encuentra en una solución, se coloca únicamente una mínima cantidad de ésta
sobre el portaobjetos. Después se coloca sobre la preparación un cubreobjetos, que es un
pedazo fino de vidrio o plástico. Así se previene que la muestra se seque. Aplana la
preparación para evitar la refracción irregular que puede darse si la luz pasa a través del tope
de la gota de fluido. También en estos montajes es usual el uso de colorantes, los mismos que
marcarán o definirán claramente las distintas estructuras de las células u organismos,
permitiendo su fácil reconocimiento.

Materiales y Métodos

1epidermis de cebolla
1 epidermis de matacallo
1 hoja de Elodea
2 gotas de agua empozada Colorantes:
Azul de metileno
Safranina
Lugol

Epidermis de la cebolla:
Parte una cebolla en cuartos u octavos con una hoja de afeitar, y de la parte interior de estos
pedazos desprende la epidermis de la cebolla, luego corta un pequeño pedazo de ésta
epidermis.
Coloca la epidermis en un portaobjetos y añade una gota de agua. Ten cuidado que no se
formen pliegues.

Cubre la muestra con un cubreobjetos, evitando que se formen burbujas de aire. Observa la
muestra al microscopio, utilizando primero el lente de menor aumento, regulando la
intensidad de la luz adecuadamente. La epidermis de la cebolla es un tejido compuesto de
muchas células (agregación de células similares tanto en estructura como en función). Enfoca
una célula a varias profundidades observando la placa en un lente de mayor aumento e
identifica y dibuja las siguientes estructuras:

Pared celular: es la gruesa membrana que rodea a la célula. Es rígida y porosa,


compuesta de celulosa y de otras substancias. Las paredes celulares conceden la
rigidez a las plantas, algo que no ocurre en las células animales.
Capa del citoplasma: Está en el interior de la pared y contiene gránulos muy
pequeños y casi transparentes.
Vacuolas: es un saco largo lleno de líquido y está ocupando la mayor parte central de
la célula. A veces contiene un pigmento rojo y frecuentemente está atravesada por fino
hilos de citoplasma.
Núcleo: Estructura esférica localizada en el citoplasma, cerca de las paredes
citoplasmáticas. El núcleo contiene algunos cuerpos pequeños, denominados
nucléolos.

Repetir el método, pero ahora usando azul de metileno, Lugol y safranina, y debes dibujar la
imagen en 10x y 40x.

Matacallo: esta es una hoja suculenta, es decir las células del tejido de esta planta tienen o
almacenan bastante líquido. De igual manera proceder con la hoja de matacallo, y realizar
preparaciones con azul de metileno, observar y dibujar la imagen con 40x

Elodea: es un género de planta acuática, generalmente usada como planta de peceras y


estanques. En ella podremos observar clara y definidamente los cloroplastos.

Obtén una hoja de Elodea y colócala en un portaobjetos, y sobre esta deposita una o dos
gotas de agua obtenida del mismo recipiente de la planta, a continuación usar sobre la
preparación un cubreobjeto, y enfoca con 4x luego pasa a 10x. Finalmente observa
detenidamente la estructura, forma y color de la célula y reconoce también los cloroplastos
con el lente de 40x. Dibuja lo que observas.

NOTA: La observación del protozoo, Paramecium, es una prueba crítica para establecer tu
habilidad de buscar, encontrar, enfocar y observar objetos con el microscopio y percibir la
profundidad de enfoque y campo óptico.

Euglena: es un género de protozoos, que pertenece al grupo de los Euglenozoos o de los


flagelados. Es un organismo unicelular, que en su interior presenta cloroplastos. En la parte
anterior de su cuerpo presenta un flagelo, el cual al ser movido a manera de látigo le sirve para
su movilización. Paramecium: se trata de un protozoario unicelular que tiene como
característica su cuerpo cubierto de flagelos en forma de un cepillo; a estos flagelos se los
conoce con el nombre de cilios.

Prepara un montaje húmedo de Paramecium mezclando una gota del cultivo disponible entre
las soluciones disponibles en el laboratorio, describe y dibuja su silueta y además completa
con estructuras que indicadas en el laboratorio respectivo.

Con un palillo mezclar totalmente dos gotas de la solución, tapar la muestra con un
cubreobjetos. Examine al microscopio en un aumento bajo y localizar algunos individuos y
subir el aumento usando los lentes objetivos, finalmente grafique lo observado e indique los
diferentes campos ópticos con el aumento que se uso.
Comparar la estructura del protozoo, y revisar las características estructurales en la
Figura 1.
Será necesario que utilices continuamente el micrométrico para lograr un enfoque apropiado.
Además, para ver todas las características tendrás que observar a varios individuos y utilizar
un aumento mayor. Un protozoo en una posición puede no enseñar las mismas estructuras de
otro en posición diferente.

Dibuja tu observación usando el respectivo campo óptico. (Es posible que veas otros
protozoarios. Dibújalos y compáralos con la Figura 2.

Figura. 1y 2. Foto y esquema de un Paramecium. Obtenido de Curtis H.2002

Ejercicio # 4

Células animales
Introducción. – Las células animales difieren de las células vegetales en varios aspectos: no
poseen pared celular, no encontramos lignina y hay ausencia de cloroplastos.

Las células animales se organizan en 4 tipos de tejidos: epitelial, conectivo, muscular y


nervioso. En esta práctica daremos un vistazo a células de tejido epitelial. Este tipo de tejido
se encuentra tanto externa como internamente en nuestro organismo: en la capa externa de la
piel, en los revestimientos de las vías respiratorias, el tubo digestivo, las cavidades
excretorias y reproductivas. La piel cumple varias funciones: evitar la pérdida de agua,
protegernos contra daños mecánicos y químicos y contra invasores que se encuentran en el
ambiente como bacterias, hongos y parásitos.

La sangre, por otro lado es un tejido circulante, que permite la interacción entre tejidos y
órganos, transportando células y moléculas entre ellos. En los mamíferos la sangre contiene,
glóbulos rojos, glóbulos blancos y plaquetas, todos ellos suspendidos en el plasma. Éste
último está compuesto por diversas sustancias y moléculas disueltas en agua. En esta
práctica, tendrás la oportunidad de observar células Sanguíneas representadas por glóbulos
rojos (eritrocitos).

Materiales y Métodos

1 palillo de dientes
1 lanceta
Azul de metileno
Lugol
Muestra de células epiteliales
Suero fisiológico
Agua

Células epiteliales humanas:

Raspa suavemente el interior de tú mejilla con un palillo de dientes limpio. Coloca el raspado
en un portaobjetos limpio y seco.

Deja que el raspado se seque y luego añade una gota de agua.


Toma un cubreobjetos por sus filos, para evitar huellas digitales en él, y coloca, un extremo
del cubreobjetos en el borde de la gota de agua.

A continuación prepara dos placas más una con azul de metileno y otra placa usando el
mismo procedimiento con Lugol. (Para el uso del colorante azul de metileno es necesario
seguir la siguiente recomendación: Coloca el portaobjetos sobre un pedazo de papel higiénico
y añade una o dos gotas del colorante azul de metileno sobre el frotis seco de las células
epiteliales. Después de dos minutos, lava el colorante con un chorrito suave de agua y
observa la placa al microscopio).

Permite que el cubreobjetos caiga libremente sobre la gota de los colorantes y agua. Notarás
que el agua corre regularmente por debajo del vidrio.

Con un poco de práctica aprenderás a regular la cantidad de agua que se pone en el


portaobjetos. La cantidad de agua dependerá del tamaño y grosor del espécimen. Si se añade
demasiada agua, el cubreobjetos flotará sobre el fluido, y si se utiliza muy poca agua, una
parte del área bajo el cubreobjetos permanecerá seca. Se puede añadir más líquido con un
gotero en el borde del cubreobjetos, o puede retirar el exceso de líquido absorbiéndolo con un
pedacito de papel filtro o higiénico.

Examina las placas primero con el menor aumento, recordando disminuir la intensidad de la
luz si es necesario. Para ello debes utilizar el diafragma. Obtuviste algunas células epiteliales
que forman la superficie protectora interna de la boca. Como otras células del resto del
cuerpo, éstas están en continuo desgaste y por lo tanto son reemplazadas por células nuevas
del mismo tipo. Estas células generalmente salen del interior de la mejilla en masas,
entonces busca grupos de células en el portaobjetos. Cuando hayas encontrado un grupo de
éstos, observa la placa con un mayor aumento para que identifiques las células individuales
del epitelio interno de la boca.

Localiza el núcleo, que es un cuerpo esférico y pequeño en el centro de la célula y el


citoplasma (término que se refiere colectivamente a todo el contenido celular
excluyendo el núcleo).

La membrana plasmática que rodea al núcleo es muy fina para ser observada con un
microscopio de luz, sin embargo podrás ver el límite donde el citoplasma termina. La
estructura del citoplasma es muy compleja, formada por arreglos de membranas y
organelos, pero muy poco de estas estructuras finas pueden ser vistas con un
microscopio compuesto.

Generalmente, es de gran ayuda incrementar el contraste de ciertas estructuras celulares para


que éstas puedan ser observadas más claramente. Existe una gran variedad de colorantes;
algunos colorean todas las partes de las células más o menos indiscriminadamente, mientras
que otros actúan más específicamente sobre estructuras particulares o con compuestos
químicos de la célula.

Luego de realizar la observación de las células epiteliales examina una gota de sangre. Para
obtenerla, desinfecta un dedo escogido de un voluntario de tu grupo y con una lanceta realiza
una punción en él. Inmediatamente deposita una gota de sangre sobre un portaobjetos y luego
adiciona dos gotas de solución salina al 0.9%. Antes de enfocar mira detenidamente tu placa y
localiza un área más clara que el resto de la placa (esto quiere decir que ahí no habrá mucha
concentración de células sanguíneas), enfoca con el lente de menor aumento, pasa al
siguiente lente y finalmente realiza tus dibujos con la imagen del lente de 40x.

Dibuja lo que observas.

SECCIONES Y CORTES PARA OBSERVACIÓN

Solamente los objetos muy pequeño, delgados y en ocasiones transparentes (por ejemplo el
Paramecium) pueden ser observados en su totalidad sin la necesidad de un corte. Pero por lo
general es necesario realizar cortes y montarlos en las placas portaobjetos para observarlos.
Estos cortes se llaman secciones y son nombradas de acuerdo al plano en el cual fueron
cortadas:

•Corte transversal (c., c.s., o x.s.): corte en ángulos rectos con respecto al eje longitudinal del
objeto.
•Sección longitudinal (l.s.): corte paralelo con respecto al eje longitudinal del objeto.
•Sección media (med. o m.): corte a lo largo de la mitad del objeto.
•Tangencial (Tg): corte en forma diagonal a lo largo del objeto.

Cada sección muestra claramente sólo una parte de la estructura de un objeto, por lo que el
observador debe saber que sección está viendo. Esta información generalmente está indicada
(frecuentemente abreviada) en la etiqueta del portaobjetos, junto con otra información como
el nombre vulgar del organismo y la forma en que el corte fue preparado (por ejemplo:
“montaje entero”, “sección”, “calabaza”, etc.).

Ejercicio # 5

MICROSCOPIO DE DISECCIÓN
Introducción. – Este microscopio es también conocido como estéreomicroscopio. Tiene un
bajo poder de magnificación que puede ir desde 1x a 4x y es usado para la magnificación de
objetos macroscópicos. Tiene una mayor distancia de trabajo y su observación es en tres
dimensiones: la luz incide directamente sobre la muestra a ser observada (luz reflejada). En lo
referente a los lentes oculares es similar al microscopio compuesto; el aumento total se
obtiene multiplicando el aumento de los lentes oculares y objetivos.

Materiales
1 bisturí
1 zanahoria
1 pepinillo

MICROSCOPIO DE DISECCIÓN

Este tipo de microscopio que utilizarás es el microscopio binocular de disección. Como el


término lo señala, este microscopio tiene un par de oculares, uno para cada ojo. La mayoría de
microscopios de disección también tienen un doble sistema de objetivos arreglados de tal
forma que ofrecen una imagen estereoscópica (tres dimensiones). Nota que la distancia entre
los oculares puede ser ajustada. Sepáralos o únelos hasta que obtengas una correcta
posición para tus ojos.

(Si tu microscopio tiene un ocular en donde el enfoque puede ser ajustable, observa primero
por el ocular no ajustable, con tu otro ojo cerrado, y obtén un enfoque claro del objeto que
quieres observar. Luego abre el ojo cerrado, cierra el que estaba abierto, observa a través del
ocular ajustable y rota la perilla hasta que obtengas una imagen clara).

Ya que el aumento en el microscopio de disección es más bajo que en el microscopio


compuesto, la distancia de trabajo es mayor, y por lo tanto objetos más grandes pueden ser
examinados. Algunos microscopios de disección tienen objetivos de diferentes aumentos
montados en un sistema de revólver. Si tú microscopio es de éste tipo, determina el aumento
de cada objetivo. Otros microscopios pueden tener una perilla dial en vez del sistema de
revólver, o un botón de ajuste, que al moverlos permitirán un cambio continuo del aumento
dentro del rango indicado en el botón o perilla. Este tipo de microscopio es llamado “zoom”.
Determina en tú microscopio cómo se cambia de aumento.

Uso del microscopio de disección:

Realiza varios cortes sean estos longitudinales, transversales o tangenciales, tanto de


zanahoria como de pepinillo luego colócalos sobre la platina del microscopio de
disección y observa con el aumento de 1x y dibuja lo que se observas.

La luz que pasa a través de un objeto y luego en el microscopio es luz trasmitida, mientras que
la luz que va directamente de la fuente al objeto (y reflejada por el objeto al microscopio) es
luz reflejada. Una de las decisiones que se debe hacer es usar luz transmitida o luz reflejada.

Si usas luz reflejada o luz trasmitida va a depender del tamaño y opacidad del espécimen. Si
decides utilizar luz reflejada, hay que recordar que la iluminación debe ser usualmente más
intensa ya que mucha de la luz se pierde por dispersión antes de que llegue a los lentes del
microscopio.

Dibuja lo observado

SELECCIÓN DEL MICROSCOPIO ADECUADO


La utilidad del microscopio depende del sentido común de la persona que utiliza el
instrumento. El usuario es el que decidirá cuándo se debe usar un microscopio compuesto, un
microscopio de disección y cuando otro tipo de microscopio (si éstos se encuentran a
disposición). Decidirá también que aumento se debe usar, de acuerdo a los aumentos que
tenga un determinado microscopio.

Preguntas a resolver: observar una hoja de planta con un microscopio compuesto (sin
cubreobjetos) y con microscopio de disección. ¿Cuál de estos instrumentos es el mejor para
observar la hoja, que es un objeto opaco, de tres dimensiones y lo suficientemente grande
como para poder ser visto a simple vista? ¿Qué instrumento usarías para determinar la
estructura celular de una hoja de cualquier planta?

Materiales
1 papa
Bisturí
Lugol
2 flores de diferente clasificación

Realiza las siguientes observaciones, indicando en cada caso cuál es el microscopio más
apropiado:

Con el bisturí, realiza secciones muy delgadas, si es posible transparentes, de una papa,
y examina las células que componen a la papa. Los cuerpos ovales en estas células
son los órganos de almacenamiento del almidón, llamados leucoplastos.
Colorea una sección con Lugol y nota el color resultante de los leucoplastos, este color
es un test positivo para determinar la presencia de almidón.

Para que tu preparación tenga éxito coloca sobre la placa 1 gota de agua y luego
adiciona ½ gota de lugol, cubre y enfoca con 4x, luego pasa al siguiente aumento para
finalmente observar y graficar en aumento de 40x.

Realiza cortes transversales y longitudinales de los estambres de una planta y


obsérvalos para tener una idea general de su apariencia y de su estructura celular.

Dibuja lo que observaste, con los campos ópticos respectivos, etiquetando los
lentes objetivos y aumento total usado.

OTROS MICROSCOPIOS

Uno puede ajustar un microscopio de luz para usarlo con luz polarizada, campo oscuro,
fluorescencia, contraste de fase, etc. De este modo, existen varios tipos de microscopios que
muestran algunos componentes celulares muy claramente. Como ya conoces, las células
tienen una “fina estructura interna”. Las limitaciones de la luz como un medio refractante y
los problemas prácticos de elaborar lentes extremadamente finos hace imposible lograr
aumentos mayores que 2000X en los microscopios compuestos. La mayoría del conocimiento
que se tiene acerca de la estructura fina proviene del microscopio electrónico, que maneja el
mismo principio que el microscopio de luz, pero que utiliza electrones y no elementos
incandescentes que provocan luz visible, y magnetos en lugar de lentes de vidrio. Las
oscilaciones de los electrones tienen una longitud de onda mucho más pequeña que la luz
visible, y se refractan con los magnetos produciendo resoluciones de entre varios centenares a
varios millares mayores a las obtenidas con un microscopio de luz convencional.

ACTIVIDADES DE REVISIÓN

Ejercicio #1
Describe la manera correcta para usar el microscopio compuesto y el microscopio de
disección.

Mediante un gráfico explica las semejanzas y diferencias que existen entre estos 2 tipos
de Microscopios.

Cuál de los dos Microscopios tiene mayor distancia de trabajo.

Con qué tipo de Microscopio se observan las imágenes NO invertidas y con cuál las
imágenes invertidas.

Ejercicio #2

- ¿Qué porción de la letra “e” puedes observar en mayor aumento en relación con lo
que viste utilizando un menor aumento?
- ¿Cómo cambia el brillo de la luz cuando se cambia de objetivos?.
- Cuál es el motivo para incrementar la intensidad de luz después de cambiar los
objetivos (como sucede con frecuencia), ¿Cómo explicarías esto?
- ¿Qué apariencia tiene la letra “e” en el objetivo de menor aumento?
- ¿Está la imagen invertida hacia arriba o hacia abajo?
- ¿Si tú mueves el papel hacia la derecha, mientras estás observando a través del
microscopio en qué dirección parece que la imagen se mueve?
- ¿En qué dirección se mueve la imagen cuando tú mueves el papel hacia ti y lejos
de ti?
- ¿Cómo se llama la distancia en que se encuentran el lente objetivo y la placa en la
platina?

Ejercicio #3

Observa el núcleo de algunas células. ¿Se encuentra siempre en la misma posición?


¿Puedes ver alguna evidencia de que el núcleo está conectado directamente a partes
del citoplasma?

Ejercicio #4

¿Qué parte de la célula se encuentra con mayor concentración de colorante?


¿Qué parte del núcleo se observa con mayor absorción del colorante?
¿Qué observas en el citoplasma de los tipos de células y existe semejanza o
diferencia? ¿Por qué?

Ejercicio #5 Las preguntas están relacionadas con el funcionamiento y estructura del


microscopio de disección.

¿Cuál es el aumento de los oculares del Microscopio de Disección? ¿Cuál


es el aumento mayor y cuál es el menor?

Estas preguntas son para la opción de uso del microscopio adecuado

¿Qué color se tiñe el almidón con la solución de lugol?


¿Cómo se observan las células de la papa?
¿Cuál es la forma del leucoplasto y la coloración cuando esta con agua o teñido con el
lugol?
Dibuja lo observado:

PREGUNTAS GENERALES

¿Qué se entiende por el término parafocal?

¿Qué se entiende por profundidad de enfoque?

¿Con qué objetivo del microscopio compuesto que tú usaste en esta práctica se
obtiene la mayor profundidad de enfoque?

¿Qué otra fuente, a parte del diafragma, puedes utilizar para controlar la luz que entra
al microscopio compuesto?

¿Por qué es necesario enfocar un detalle primero con un aumento menor antes de pasar
a aumentos mayores?

¿La pared celular que característica les da a las células de las plantas?

Supón que coloca una pelota de Ping-Pong en la mitad de una masa de pan que luego
hornea.
¿Se podrá ver o encontrar la pelota, mediante algún tipo de corte?

¿Se podría encontrar la pelota con un corte longitudinal mediano?


Haz un dibujo de cómo se vería la pelota en el corte de pan de acuerdo a cada tipo de
corte explicado anteriormente.

Bibliografía:

Kirov, N. (2008). Symbiosis (Custom Laboratory Program for the Biological Sciences)
Principles of Biology 1&2. New York University. Manhattan – NY. USA.

Kaeton, W.T.. (1983). Laboratory Guide for Bio Siencies. W.W. Norton & Co., N.Y. USA.

Peifer, R.W. (1997). Introduction to Biology: Laboratory exercises (Seventh Edition).


Burgués Publising. USA
Laboratorio IV
PROCESOS CELULARES: DIFUSIÓN, ÓSMOSIS Y DIÁLISIS

Existen algunos fenómenos físicos que explican ciertos procesos que ocurren dentro de las
células y en los que participan las membranas celulares. Estos procesos referidos son
fácilmente observables dentro y fuera de la célula. Las cuatro manifestaciones de actividad
molecular que estudiaremos en este laboratorio son: el movimiento Browniano, difusión,
ósmosis y permeabilidad selectiva.

Ejercicio# 1

MOVIMIENTO BROWNIANO

Introducción. – En 1827 Robert Brown, un botánico escocés, observó que las partículas
pequeñas suspendidas en un fluido
muestran un movimiento vibratorio
aleatorio. Él pensó,
equivocadamente, que este fenómeno
se debía a la actividad vital. En los
tiempos actuales conocemos que este
movimiento Browniano es el resultado
del choque al azar o aleatorio de
partículas que están en constante
desgaste de energía. Las partículas
muy grandes no son afectadas por
estas pequeñas fuerzas, pero sí los
cuerpos pequeños de tamaño coloidal
(1/1’000.000 a 1/10.000 mm.), que son empujados en diferentes
direcciones, de arriba a abajo, de adelante a atrás, y mantenidos en
suspensión.

El movimiento Browniano ayuda a mantener las partículas coloidales suspendidas


dentro de la célula, evitando que éstas no
precipiten, sin embargo, estas partículas no pueden quedarse suspendidas solamente por esta
fuerza.

Las partículas coloidales se mantienen dispersas debido principalmente a las cargas eléctricas
que se repelen.

Para comprobar las causas y efectos del tema, examinaremos el citoplasma de células que
mecánicamente hemos roto por lo tanto tendremos material celular recién extraído, usaremos
además para este estudio la tinta china. Se prepararán dos placas con estos materiales según
las indicaciones del instructor de laboratorio.

Materiales & Métodos

•Recipiente con hojas molidas de Espinaca o Apio

•Recipiente con hojas molidas y hervidas de Espinaca o Apio

•Tinta china

•Microscopio

•Placas y cubreobjetos
1. En dos partes de una misma placa coloca una gota con dos de los materiales indicados
(hojas de espinaca molidas, hojas de espinaca molidas y hervidas). Cubre cada gota con un
cubreobjetos diferente. En otra placa adiciona una gota de agua y una mínima cantidad de
tinta china cubre la preparación cuando observes un aspecto turbio, si observas la placa de
color negro intenso debes preparar otra placa.

2. Registra tus observaciones para el informe del laboratorio y grafícalas.

Ejercicio# 2

DIFUSIÓN

Introducción. – La difusión es el movimiento neto de moléculas de un área de mayor


concentración a un área de menor concentración. Este movimiento eventualmente equilibra la
concentración de una solución. Una molécula específica en una solución se mueve
aleatoriamente en todas las direcciones, pero cuando se mueve hacia un área de mayor
concentración su probabilidad de colisión es más elevada. El reducido número de moléculas
obstructivas en un área de concentración menor favorece el movimiento de moléculas hacia
esa área.

Figura 1. Difusión de los solutos a través de una membrana. Obtenido de Campbell, N. 2007

La tasa de difusión es una función de la velocidad a la cual la molécula se mueve y la


velocidad es una función del peso molecular.

Materiales y Métodos

Ejercicios de Difusión

Estudiaremos el efecto del peso molecular en la tasa de difusión colocando cristales de dos
compuestos diferentes en una gelatina. Se usará azul de metileno y permanganato de potasio.
El peso molecular del azul de metileno es 319.85 gr. y del permanganato de potasio 158 gr.
Además anotaremos en porcentajes el grado de difusión del permanganato de potasio en tres
soluciones que han sido preparadas con antelación.
Materiales

• Cristales de permanganato de potasio y azul de metileno.


• Una caja de Petri con gelatina.
1. Selecciona cristales de cada uno de los compuestos del experimento y colócalos en la
superficie de la gelatina con una separación de 5 cm, y ubícalos de tal forma que los
cristales de permanganato de potasio y azul de metileno, se encuentren uno frente al otro.

2. Examina la caja Petri cada 10 minutos durante 1hora y media y mide la extensión o halo de
difusión.

3. Registra los resultados para el informe del laboratorio y grafícalo.

4. Realiza la observación de tres probetas que están en una de las mesas del laboratorio, y que
en su interior se encuentran cristales de permanganato de potasio. Toma nota sobre la hora
en que fueron preparadas éstas probetas y señala el porcentaje de difusión que presenta
cada una de ellas. Crea una tabla de difusión con la toma de datos cada 20 minutos durante
una hora y media y grafica tu observación.

Ejercicio# 3

ÓSMOSIS

Introducción. – La ósmosis es la transferencia neta de un solvente a través de una barrera de


difusión (membrana celular), que es selectivamente permeable o semi-permeable. Existen tres
tipos de soluciones de acuerdo a como se difunden los solventes implicados, estas son:
solución hipertónica, solución hipotónica y solución isotónica.
La solución hipertónica posee una mayor concentración de solvente afuera de la membrana, es
por ello que tiene una mayor osmolaridad.
La solución hipotónica presenta mayor concentración de solvente dentro de la membrana, es
por ello que tiene una menor osmolaridad.
La solución isotónica es aquella que tiene concentraciones equilibradas, es decir la
concentración es la misma fuera y dentro de la membrana. Existe la misma osmolaridad a
ambos lados de la membrana.
Figura 2. Ósmosis a través de una membrana. Obtenido de Campbell, N. 2007.
Materiales y Métodos

Zanahoria
Estilete
2 vasos de precipitación
Glicerina
Agua destilada
Alfileres
Sacabocados
Una papa cortada
longitudinalmente en la mitad
Una caja petri Sal de mesa.

Toma una zanahoria y usando un estilete o algún instrumento adecuado realiza un corte
transversal en las porciones superiores e inferiores de tal manera que la zanahoria pueda
mantenerse vertical.

Luego, con el sacabocados procede a vaciar la zona central de la zanahoria; este vaciado debe
tener una profundidad máximo de 3 cm. Debes tener la precaución de no lastimar los tejidos
de los bordes externos.

Retira la delicada epidermis de la zanahoria. Marca con alfileres las porciones interna y
externa, manteniendo los alfileres a la misma altura creando un nivel similar en las dos
porciones, el mismo servirá como marca para llenar externamente con agua destilada.
Introduce la zanahoria lista con las marcas en un vaso de precipitación de 250 ml y procede a
llenar hasta la marca externa del alfiler con agua destilada.

Ahora con cuidado llena hasta la marca interna del alfiler con glicerina sin regar nada en la
superficie externa. Asegúrate de que la abertura en la zanahoria esté fuera del agua. Esperar y
revisar durante y hasta el final de la práctica mientras realizas otros experimentos. Examina el
nivel de la glicerina cada 20 minutos durante el tiempo que dure la práctica.

Para finalizar y completar esta observación, debes dejar en un lugar seguro tú experimento y
tomar nota al día siguiente, con el fin de obtener tus datos finales y conclusiones.
Previamente a todos los experimentos debes usar los pasos del método científico.

Crear una tabla de datos y resultados, además grafica tus observaciones.

Para la segunda parte de este experimento de ósmosis, vas a usar la papa. Realiza en ella un
hoyo con el sacabocados, teniendo precaución de no dañar o romper las paredes de la papa,
especialmente la zona inferior.
Luego, en una caja petri vierte una mínima cantidad de agua destilada.
En ella introduce la papa a la que previamente hiciste un hoyo y vierte más agua hasta el borde
de la caja petri, siempre cuidando de no derramarla.

Ahora procede a colocar una cantidad pequeña de sal. Toma nota de lo que sucede cada 10
minutos hasta el final de la práctica, para este fin debes crear una tabla de datos.

Si existe la posibilidad de tener un capilar y un poco de plastilina procede a sellar y observar


que sucede con este capilar e interpreta el resultado, además debes graficar tu observación
previa y final.
Osmómetro:
Este aparato tiene un tubo graduado conectado a una membrana semipermeable. La
membrana está en contacto con agua destilada la misma que está en un vaso de precipitación.
Dentro de la membrana se ha puesto una solución de sacarosa con safranina para dar
contraste.

La membrana permite el paso del agua pero no el paso de la sacarosa con safranina. El
objetivo es medir la taza de ósmosis cada 15 minutos, es decir la velocidad en unidades de
ml/min en la que el agua se desplaza. Tu instructor dará indicaciones sobre el procedimiento y
en tu reporte deberás presentar los resultados en una tabla y calcular la taza de ósmosis.

Ejercicio#4

PRESIÓN DE TURGENCIA

Introducción. – La presión de turgencia es la presión que ejerce el protoplasto a la pared


celular para conseguir agua. Esta presión es de gran importancia para la actividad de la planta,
por ejemplo en células jóvenes causa el crecimiento ya que la pared celular se va
expandiendo. Una alta presión de turgencia puede prevenir futuros movimientos de agua hacia
la célula. Este proceso es un buen ejemplo de interacción entre osmolaridad y presión con el
fin de determinar la dirección neta del agua.

Materiales y Métodos
Tinas con soluciones hiper e hipotónicas
Vegetales
Hojas de Elodea
Microscopio compuesto
Porta y cubreobjetos
Soluciones hipo, iso e hipertónicas.

En el laboratorio tendrás algunos ejemplos de algunos vegetales carnosos como lechuga, apio,
etc. Estos vegetales han sido dispuestos en agua dulce unos y otros en agua salada. Observa
detenidamente las condiciones físicas de las muestras vegetales. Usa tu tabla de datos y
grafica.

ÓSMOSIS Y PRESIÓN DE TURGENCIA EN CÉLULAS VIVAS

El movimiento neto de agua dentro y fuera de la célula se debe a la diferencia de


concentración de partículas osmóticamente activas en el interior y exterior de dicha célula. Por
definición, si el agua se mueve hacia dentro de la célula se dice que el medio es
hipotónico respecto a la célula. Si el medio es hipertónico el agua sale de la célula. En un
medio isotónico la célula no experimenta ninguna ganancia o pérdida de agua. Estas
condiciones serán estudiadas en el siguiente experimento.
Prepara un montaje húmedo usando una hoja de Elodea y una gota de agua. Observa las
células y reconoce sus estructuras. Describe y dibuja la pared celular, los cloroplastos y las
vacuolas. Si es posible lograrás distinguir el movimiento de los cloroplastos denominado
ciclosis.

Ahora levanta con la ayuda de un palillo de dientes el cubreobjeto y añade una gota de
solución salina donde están sumergidos los vegetales. Deja caer el cubreobjeto y por el
extremo opuesto al que se añadió la solución salina, aplica levemente la presión de un papel
absorbente (papel higiénico) para retirar el exceso de agua.
Prueba añadir agua del mismo recipiente donde estaba la Elodea y verifica si las células se
restituyen. Anota tus observaciones y trata de explicar la razón o razones por las que la célula
cambió de aspecto, o si fue o no reversible el cambio, porqué no es reversible el cambio. No
olvides utilizar en tu explicación las palabras hipertónicas, hipotónicas e isotónicas.
Repite las dos operaciones anteriores, esta vez usando agua destilada en lugar de la solución
salina. Anota tus observaciones en una tabla de datos creada para este experimento.

Grafica lo Observado e interpretalo, relacionándolo con la presión de turgencia y el cambio


de concentraciones entre el medio interno y el medio externo de las células de la Elodea.

PRELABORATORIO: PREGUNTAS GENERALES DEL TEMA PARA ENTREGA AL


INICIO DEL LABORATORIO:

Estas preguntas no son para incluirlas en el informe, pero se deben resolver y entregar al
profesor. El objetivo de las mismas es que puedas usar esta información para la interpretación
de tus resultados y las correspondientes conclusiones:

Explica la difusión en términos moleculares. ¿La difusión ocurre solamente en los


seres vivos, o solamente en los seres inanimados, o en ambos?
Define permeabilidad y permeabilidad selectiva.
Nombra algunas membranas de seres vivos selectivamente permeables.

2) Define difusión, ósmosis y diálisis.


Para cada movimiento molecular, explica la dirección en que se mueve el agua y en que
direcciones se mueven las partículas transmisibles disueltas.
¿Qué pasa con partículas disueltas no transmisibles?
Muestra también como la concentración de agua y la concentración de partículas cambia
desde el estado inicial al terminal. Dibuja tú idea para contestar esta pregunta

3) Define los términos isotónico, hipertónico e hipotónico.


Define presión osmótica.
Define un coloide.
¿Cuál es el rango de tamaño para que una partícula pueda formar un coloide?
Menciona diferentes tipos de coloides con ejemplos de cada uno.

4) ¿A qué se debe el movimiento browniano?


¿Tienen las partículas coloidales este tipo de movimiento?
Explica usando la evidencia de sus experimentos.
¿Por qué las partículas coloidales no se asientan?
5) ¿Qué previene que ocurra la hemólisis bajo las condiciones normales de nuestro cuerpo?
6) ¿Qué rol desempeña generalmente la permeabilidad en las actividades vitales? Discute
ampliamente.

Tomado y adaptado de: Benson y Gunstrem 1970. Por.


Zabala N. y Riera P.

Bibliografía:
Benson H., Gunstrem S. 1970. Anatomy & Physiology Lab Text Book. WmC. Brown
Co.Pub. Iowa y Larsen, J. 1987. A Lab Manual in Biology. Stipes Publ.

Co. Champaign, Ill. Campbell, N, Reece, J. (2010). Biología. Editorial Medica

Panamericana. Madrid, España.


ACTIVIDADES DE REVISIÓN

PREGUNTAS DEL EJERCICIO # 1

¿Cómo se mueven las pequeñas partículas en las hojas molidas sin hervir?

¿Cómo se mueven las pequeñas partículas de las hojas molidas y hervidas?

¿Cómo se mueven las partículas en la tinta china?

PREGUNTAS DEL EJERCICIO # 2

¿Qué sucede con el KMnO4 a medida que pasa el tiempo?

¿Qué crees que sucedería si continúas observando los dos experimentos por varios días?

¿Crees qué es reversible este proceso de difusión tanto de Azul de metileno y Permanganato
de Potasio? Explica tu respuesta. Si opinas que sí, ¿qué se requiere para revertirlo?

En tus propias palabras indica ¿Qué es la difusión?

PREGUNTAS DEL EJERCICIO # 3

¿Qué pasó con el experimento de la zanahoria y de la papa?

¿Qué se puede concluir de las propiedades físicas del tejido de la zanahoria, qué le sucedió?

¿Por qué razón la columna del osmómetro sube en lugar de bajar?

¿Cuál es la dirección de la ósmosis y por qué motivo toma esta dirección?

PREGUNTAS DEL EJERCICIO # 4

¿Cómo reconoces a los vegetales que presentan presión de turgencia?

¿Qué te dice esto con relación a la preparación de ensaladas frescas?

¿Cómo diferencias una reacción hiperosmótica de una hiposmótica?


Laboratorio V
ENZIMAS Y ACCIÓN

Introducción. – Las células de todos los organismos presentan la capacidad de efectuar con
gran rapidez diferentes tipos de reacciones químicas, las mismas que no se llevarían a cabo
espontáneamente y a velocidades apreciables. Para que estas sean posibles es necesario la
presencia de ciertas moléculas proteicas que funcionan como catalizadores biológicos
denominados enzimas.

Estas reacciones son importantes ya que son las encargadas del mantenimiento de las
condiciones adecuadas de energía y del ciclo de vida de la célula, ahora es importante
recordar brevemente cuales son las características de un catalizador. El catalizador es un tipo
de proteína que actúa sobre la velocidad de una reacción sin alterar el equilibrio de la misma,
y no se gasta en el curso de la reacción además se usan cantidades muy pequeñas en relación
de los compuestos cuya transformación cataliza.

Por lo tanto el que una reacción AB A + B tenga lugar o no, dependerá de la


diferencia de energía potencial en los reactantes y productos del sistema, así si la energía
potencial de AB es mayor que la de A + B, la reacción tenderá a desplazarse en el sentido de A
+ B; pero si el caso es contrario se iniciará la formación AB a partir de A + B, para que estas
reacciones se den espontáneamente y de ser posible a cierto tipo de velocidad las moléculas
de los reactantes deben activarse, para lo cual es necesario la energía de activación.

Imágenes tomadas de Campbell 2007.

Cuanto mayor sea la proporción de moléculas con energía suficiente para sobrepasar la
energía de activación, más rápido se desarrollará la reacción. Un catalizador actúa
disminuyendo esta energía de activación, necesaria para que se de la reacción. De esta
manera aumenta el número de moléculas con energía suficiente para sobrepasar la energía de
activación por lo que aumenta la velocidad de reacción.

Imágenes tomadas de Campbell 2007.

La presencia del catalizador aumenta tanto la velocidad de la reacción directa como la de


reacción inversa, esto no influye sobre el equilibrio de la reacción.

Las enzimas son específicas por lo tanto catalizan solo un determinado tipo de reacción, la
misma que depende de la estructura molecular y forma de la enzima correspondiente, puesto
que una enzima solo podrá actuar sobre una substancia cuya estructura sea complementaria a
la suya, por lo tanto los reactantes serán denominados como sustrato, y centro activo a una
pequeña región de la enzima que interaccionará con el sustrato.
Imágenes tomadas de Campbell 2007.

Tanto la enzima (centro activo) y sustrato se adaptan uno a otro como una cerradura y su llave,
o de manera más gráfica se puede indicar que el sustrato encaja dentro de la enzima como la
mano dentro del guante, esto es debido a que la estructura de la enzima no es rígida sino
flexible, y la presencia del sustrato es la que estabiliza una conformación determinada.

En el curso de la reacción como se observa en los gráficos correspondientes deben


combinarse la enzima con su sustrato o sustratos, de esta manera disminuye la energía de
activación de la reacción y ésta puede verificarse a mayor velocidad. Cuando se inicia la
reacción vemos como los sustratos se enlazan entre sí para al final ser liberados como
productos y la enzima se separa y recupera intacta.

Cofactores

Una gran cantidad de enzimas se encuentran ligadas a compuestos no proteicos que


intervienen en la catálisis y son los denominados cofactores, parte de estos son de naturaleza
orgánica y reciben el nombre de coenzimas, muchas de estas son derivadas de algún tipo de
vitamina (especialmente de las tipo B), esto nos demuestra claramente la importancia de las
vitaminas en la alimentación. También tenemos algunos metales como Fe, Cu, Zn, etc. que
actúan como cofactores de determinadas enzimas.

Inhibidores Competitivos

Estos se tratan de ciertos compuestos que tienen la capacidad de combinarse con las enzimas,
aunque no sean sustratos de la reacción que cataliza esta enzima, al tener estos compuestos la
capacidad de combinarse da inicio a una competición por el sitio activo con los sustratos, y
como parte de las moléculas de la enzima ya no se encontrarán libres para ligarse con el
sustrato, la velocidad de reacción disminuirá. Por lo tanto estos compuestos que
específicamente disminuyen la velocidad de reacción por competir con el sustrato reciben el
nombre de inhibidores competitivos.
Inhibidor competitivo
Enzima Inhibidor no competitivo

Sitio Activo

substrato
Nota: Rotular o unir con flechas los elementos de esta fotografía, que representa la estructura básica de la enzima.

Efecto de la temperatura sobre la actividad enzimática

Al subir la temperatura en una reacción se encuentran mayor número de moléculas que


alcanzan la cantidad de energía necesaria para reaccionar, puesto que se incrementa la
velocidad de reacción química, pero la pregunta es ¿qué ocurre cuando esta reacción es
catalizada por una enzima? Por una parte se da el mismo fenómeno que una reacción
química, al aumentar la energía de los sustratos, con la tendencia de acelerar la reacción, pero
por otro lado si sobrepasa el límite de la temperatura media con la que funciona la enzima y al
ser una proteína corre el riesgo de desnaturalizarse. Ocurre lo contrario con la temperatura
relativamente baja, pues la velocidad de reacción se incrementa a medida que aumenta la
temperatura. Existen enzimas que soportan de manera distinta los picos de temperatura,

mismos que si sobrepasan, la enzima se inactiva y la actividad disminuye con frecuencia de


forma bastante brusca. A más de los efectos de la temperatura sobre las enzimas también
tenemos que el pH provoca la desnaturalización de las mismas por lo tanto un pH alto o bajo,
las enzimas trabajan en un estrecho margen denominado pH óptimo.
Los nombres de las enzimas indican generalmente sobre los sustratos que actúan y el tipo de
reacción que catalizan como es el caso de los siguientes ejemplos: el piruvato descarboxilasa
actúa descarboxilando al piruvato, la glucosa oxidasa está oxidando a la glucosa, note que
siempre las enzimas tienen la terminación asa, en algunos casos se mantienen algunos
nombres antiguos que se usaron antes de tener la respectiva nomenclatura como es el caso de
la pepsina; esta es una enzima digestiva que provoca hidrólisis a proteínas o el caso de la
catalasa que actúa sobre le peróxido de hidrógeno que se forma en la actividad celular y lo
transforma en agua y oxígeno.

Hemos usado el término catálisis y en realidad ¿qué significa?, pues relaciona a la


combinación temporal de la enzima con el sustrato, apareciendo el complejo enzima-sustrato
y finalmente el producto y liberación de la enzima la misma que puede ser usada nuevamente
y recuerde que una pequeña cantidad de enzima puede catalizar una gran cantidad de
reacciones, con la particularidad de que esta no sufre cambios y puede ser reutilizable en una
nueva reacción. La enzimas trabajan en la hidrólisis y síntesis de enlaces peptídicos, sin
embargo el equilibrio de las reacciones se inclina hacia la hidrólisis y como la reacción
normalmente ocurre en medio acuoso, casi siempre termina en una reacción irreversible.

Hay casos que en la célula se dan reacciones energéticamente desfavorables pero parecen que
son reacciones continuas, lo que no es verdad, se produce debido a que son reacciones
continuas o en secuencia de parejas de manera que el producto de la reacción desfavorable es
removido inmediatamente, y convirtiéndose en sustrato para la siguiente reacción y se
produce sucesivamente, un ejemplo de esto lo tenemos en la secuencia de la formación de
succinato, fumarato, malato, etc. en donde el succinato es eficientemente convertido a
fumarato porque éste es removido inmediatamente por una segunda reacción, este principio de
reacción energética desfavorable, es importante en bioquímica.

Ejercicio # 1
Prueba de la acción enzimática

Introducción. – de acuerdo con la información al inicio de ésta práctica, las enzimas


corresponden a un tipo especial de proteínas presentes en todos los sistemas vivientes. Estas
proteínas aceleran los cambios químicos que tardan mucho más en ocurrir si no estuvieran
presentes. El almidón es un polisacárido formado por muchas moléculas de glucosa
(monosacárido) éstas moléculas están unidas en una larga cadena. Normalmente no pueden ser
divididas rápida ni fácilmente en moléculas de glucosa. Si la enzima adecuada es añadida al
almidón este sufrirá una reacción rápida para convertir el almidón en moléculas de glucosa,
esta enzima que provoca este cambio es la llamada AMILASA.

Materiales y Métodos

Cocineta (estufa)
Baño María
Vaso de precipitación
Agua
Solución de Lugol
Solución de almidón
Solución de Benedict
Goteros (4)
Marcador
Parafilm (obtención de amilasa)
Tubos de ensayo

Pinzas para tubo de ensayo


Procedimiento:

Parte A: Información del modelo de almidón


Examine la siguiente figura que representa el modelo de una molécula de almidón. Note que
se puede describir a ésta molécula como una cadena formada de moléculas de glucosa unidas.

Parte B: Ensayo de las propiedades del almidón

Llene el vaso de precipitación con agua hasta la mitad.


Coloque el vaso de precipitación en la estufa hasta que el agua alcance el punto
de ebullición.
Etiquete dos tubos de ensayo (B1, B2)
En el tubo de ensayo B1, añadir 1 gota de lugol y 20 gotas de la solución de
almidón. En el tubo de ensayo B2, añadir 20 gotas de solución de Benedict y
20 gotas de la solución de almidón.
Sumerja solo el tubo B2 en el agua caliente durante 5 minutos.
Luego de haber sumergido el tubo B2, registre el color de los dos tubos de
ensayo. Observe que al momento de añadir las gotas de yodo es posible que
exista un cambio de color, es decir, la solución puede tornarse violeta
intenso, violeta, así como también, no puede haber cambios.
El color violeta intenso indica que el almidón se encuentra en mayor cantidad,
mientras que, el color violeta muestra baja prevalencia de almidón. Si no hay cambios
de color como los descritos, se asume la ausencia de almidón pero es posible la
presencia de glucosa.

Parte C: Ensayo de la combinación de almidón con la enzima amilasa

Procedimiento:
Etiquete dos tubos de ensayo (E1, E2)
En los dos tubos (E1 y E2), añadir 20 gotas de amilasa y 20 gotas de la solución de almidón.
Luego agitar lentamente los dos tubos con en el fin de mezclar la solución. Espere 10 minutos
para notar algún cambio.

Después de los 10 minutos, en el tubo de ensayo E1 agregar 1 gota de lugol, mientras que, en
el segundo tubo de ensayo E2 añadir 20 gotas de la solución de Benedict.
A continuación, someta a calor el tubo E2 en el agua caliente 5 minutos y déjelo reposar por
8 minutos. Finalmente, registre los cambios de color de los dos tubos.

Tabla No. 1

Reacción de almidón con To y almidón con amilasa


TESTIGO QUIMICO ALMIDÓN ALMIDON CON AMILASA
TEST DE SOL. DE LUGOL Tubo B1 Tubo E1
TEST DE SOL. DE Tubo B2 Tubo E2
BENEDICT
Parte D: Actividad de la Catalasa

Materiales y Métodos

Catalasa (preparada previamente de Hígado de pollo)


1 vaso de precipitación
2 tubos de ensayo
Peróxido de hidrógeno
Agua destilada

Procedimiento:

A continuación marque 2 tubos de ensayo como A y B.


En el tubo A vierta 2 ml de peróxido de hidrógeno.
En el tubo B vierta 2 ml de agua destilada.
En los 2 tubos añadir 2 ml de la solución enzimática.
Observe y registre sus resultados en una tabla que será resultado de su
diseño personal.

Tabla No. 2

Reacción de la Catalasa
Hígado de pollo más H2O2 Más calor Más H2O2

Hígado de pollo más H2O Más calor Más H2O2

ACTIVIDADES DE REVISIÓN

Cuestionario parte A1:

Represente gráficamente como se obtendrían moléculas de glucosa luego de la acción de una


enzima(use el esquema inicial de la práctica).

Cuestionario parte B1:


Describa que color tomo la solución luego de agregar lugol al almidón.

¿Qué color tomó la solución después de añadir la solución de Benedict al tubo de


ensayo con almidón y de haberlo calentado durante 5 minutos?

¿Qué conclusión podría dar en cuanto a la presencia o ausencia de almidón de acuerdo


con el experimento? (Revisar la parte B en caso de ser necesario).

Cuestionario parte C y D:

Describa que color tomó la solución después de haber agregado lugol a la solución de
almidón y amilasa.

¿Qué color tomó el tubo de ensayo luego de haber añadido las gotas de la solución de
Benedict a la solución de almidón y amilasa y calentándolo por 5 minutos?
¿Qué conclusión podría dar en cuanto a la presencia o ausencia de almidón de acuerdo con
el experimento? (Revisar la parte B en caso de ser necesario).

¿En cuanto a la presencia o ausencia de glucosa, qué podría concluir?

¿Por qué motivo reacciona la enzima con el H2O2?

¿Cuál es la ecuación luego de la acción de la catalasa sobre el H2O2?

¿En qué organelo citoplasmático encontramos esta enzima?

En la fotografía que se encuentra al final de la teoría de la práctica, luego de inhibidores


competitivos indique la estructura enzimática que está representada en la fotografía, para
esto una los sitios específicos con los rótulos usando flechas.

Tomado y adaptado de: Hummer, Kennedy y Oram 1989. Por.


Riera P.

Hummer P., J. Kennedy, R. Oram. 1989. Laboratory Biology. Investigating living system.
Merrill Publishing Company. Albert Kaskel Evanston Township High School
Evanston, IL.
Laboratorio VI

RESPIRACIÓN CELULAR

Introducción. – La respiración en las células y en los seres vivos proporciona energía para
crear, mantener y producir moléculas y procesos vitales para todos los organismos. La
respiración se entiende como una serie de reacciones químicas que liberan la energía
contenida en los enlaces químicos de la glucosa.

La energía se extrae a través de una serie de reacciones de óxido-reducción que involucran la


entrada y salida de HIDRÓGENO. Este proceso finalmente transforma la mayoría de la
energía en una estructura química que se denomina ATP (Trifosfato de Adenosina).

La capacidad de extraer ATP de la glucosa varía dependiendo de los organismos. Algunos


pueden oxidar totalmente la glucosa y producir CO2 y agua, mientras que otras solamente
logran extraer una cantidad limitada de energía. Aquellos organismos que utilizan el
OXÍGENO para producir energía se denominan AERÓBICOS, mientras que los que no
pueden utilizar oxígeno en sus procesos respiratorios se conocen como ANAERÓBICOS.

El proceso de respiración celular ocurre en 4 fases principales, que se distinguen por los
productos que producen y el lugar en donde ocurren.

• Glicólisis (citoplasma, otro término es Glucólisis)


• Ciclo de Krebs (mitocondria)
• Sistema de Transporte de Electrones (mitocondrias)
• Fosforilización de ADP (mitocondrias)

Estas reacciones metabólicas empiezan con reactantes y concluyen con productos. A través de
estos procesos químicos se producen sustancias que se denominan intermediarios. Otras
sustancias importantes de estas reacciones son los PORTADORES DE ENERGÍA (ATP),
enzimas, proteínas de transporte, entre otras.

La energía comienza a ser extraída en la GLICÓLISIS (proceso anaeróbico) en esta fase DOS
moléculas de ATP (Trifosfato de Adenosina) reaccionan con UNA molécula de GLUCOSA,
esta primera parte de la respiración es esencial porque proporciona la energía para activar el
resto de los procesos de extracción energética.

Cuando la molécula de glucosa avanza hacia las siguientes fases, los electrones se retiran de
manera gradual, y se transmiten a una COENZIMA que se denomina NAD+, la cual al recibir
los electrones del Hidrógeno se convierte en NADH.

NOTA: La transferencia de electrones al NAD+ es una reacción de REDUCCIÓN, y la


remoción de electrones de la glucosa es una reacción de OXIDACIÓN. Durante este proceso
se libera suficiente energía para generar CUATRO moléculas de ATP durante un proceso
denominado FOSFORILACIÓN. De esta forma al final de la glicólisis luego de utilizarse los
DOS ATP producidos, se ha logrado una ganancia neta de DOS moléculas de ATP junto a
otros subproductos como el ÁCIDO PIRÚVICO.

ES EN ESTE PUNTO EN DONDE LOS PROCESOS METABÓLICOS SE IRÁN POR


EL CAMINO ANAERÓBICO O AERÓBICO.

Si no existe oxígeno algunas células convertirán el ácido pirúvico en ALCOHOL ETÍLICO a


través de una FERMENTACIÓN ALCOHÓLICA (así se producen licores como el vino). Por
otra parte otras células como bacterias y las musculares también utilizan procesos
anaeróbicos, pero estos además de la energía producida, producirán ÁCIDO LÁCTICO.
NOTA: En ambas reacciones de fermentación la única fuente de producción de ATP es la
glicólisis, y solamente se producirán dos moléculas.

LAS REACCIONES ANAERÓBICAS PUEDEN PRODUCIR EN LOS ANIMALES


ENERGÍA VITAL EN CASOS EXTREMOS (PARA UNA PRESA HUYENDO, UN
DEPREDADOR CAZANDO, O UNA TORTUGA MARINA QUE SE QUEDÓ MUCHO
TIEMPO BAJO EL AGUA SIN OXÍGENO).

Luego de un gran esfuerzo físico. ¿Cómo se sienten los músculos de tu cuerpo al día
siguiente?

Si hay oxígeno, la célula continúa con los procesos de extracción de energía en la


MITOCONDRIA. Las moléculas de ácido pirúvico permiten que inicie el CICLO DE
KREBS, en donde se forman tres moléculas de NADH + H+ que es una molécula altamente
energética, deben tener muy en cuenta que todas las reacciones que corresponden tanto a
respiración como a fotosíntesis son de tipo oxido-reducción.

En la siguiente fase de la respiración aeróbica las moléculas entran en contacto con una serie
de moléculas que forman parte del SISTEMA DE TRANSPORTE DE ELECTRONES que
realizan una sucesión de intercambios de electrones y liberan energía. Finalmente, la
respiración entra en su última fase, conocida como FOSFORILIZACION DEL ADP, en la
cual se crean nuevas moléculas de ATP.

Introducción. – El azul de Bromotimol es un indicador de pH muy sensible. En un medio


ácido tiene una coloración amarillenta, en tanto que en un medio básico es de color azul. El
cambio de coloración se da cuando el pH es cercano a Neutro, o pH7.

La respiración produce Dióxido de Carbono que al combinarse con el agua produce ácido
carbónico, por tanto, el medio cambia a un pH ácido. Si está en presencia de un indicador
sensible de pH como es el Azul de Bromotimol, cambiará de coloración de azul pálido a un
color amarillento.
Fig1. Estructura del Azul de Bromotimol
Materiales y Métodos

Azul de Bromotimol
Frascos
Agua destilada
Elodea
Caracoles de Agua
Sorbete

En un vaso de precipitados vierta 50 ml de agua destilada, y añada dos gotas de Azul


de Bromotimol.
Por medio de un sorbete haga burbujas dentro del agua, hasta que obtenga el viraje
de color. Explique, y entregue a su instructor su deducción de ¿Por qué hay un
cambio de color?

En este mismo ejercicio de RC, cada grupo de trabajo posee cuatro frascos con tapa. Cada
frasco se llenará completamente con agua destilada y se añadirá 2 (dos) gotas de azul de
Bromotimol, la coloración obtenida debe ser de un color azul claro.

En el primer frasco se colocará una rama de Elodea (Elodea canadensis), se lo


etiquetará con el nombre de los integrantes del grupo, la fecha, la hora y se lo
guardara en un lugar muy iluminado, de preferencia con luz solar, por un lapso no
menor a 24 horas.

En el segundo frasco se colocará una rama de Elodea (Elodea canadensis), se lo


etiquetará con el nombre de los integrantes del grupo, la fecha, la hora y se lo
guardara en un lugar oscuro, por un lapso no menor a 24 horas.

En el tercer frasco se colocará un pez, se lo etiquetará con el nombre de los


integrantes del grupo, la fecha, la hora y se lo guardará en un lugar oscuro por un lapso
no menor a 24 horas.

En el cuarto frasco se colocará un pez, se lo etiquetará con el nombre de los


integrantes del grupo, la fecha, la hora y se lo guardará en un lugar muy iluminado por
un lapso no menor a 24 horas.

Nota: LOS EXPERIMENTOS DE Elodea, se encuentran relacionados tanto con


fotosíntesis como con respiración celular.

Ejercicio 2
Introducción
La respiración celular consiste en la oxidación de sustancias provenientes de alimentos como
hidratos de carbono, grasas y, en menor proporción, proteínas, el resultado o consecuencia de
ésta oxidación es liberación de energía, dióxido de carbono y agua. Esta reacción es todo lo
contrario a Fotosíntesis debido a que las reacciones son más de tipo Anabólico (reacciones
endergónicas). Esta fotosíntesis por ser anabólica se inicia a partir de agua y dióxido de
carbono y por la acción de la luz solar, en las reacciones no dependientes de la luz (ciclo de
Kalvin) se forman azúcares como la glucosa, en la respiración celular, por el contrario esta
es una reacción de tipo catabólico en donde, la glucosa, en presencia de oxígeno, se
descompone y da como producto agua y dióxido de carbono con reacción exergónica (cuál
es el significado de estos dos términos endergónica y exergónica).

Factores que influencian la respiración de la levadura

Materiales y Métodos

- Levadura en solución
- Tubos de ensayo de 10 ml
- Retenedores de un solo hueco para colocar los tubos de ensayo
- Solución de glucosa al 20%
- Agua fría
- Hielo
- Agua tibia
- Termómetro de 120 oC
- Marcador para vidrio

- Contenedores para:
- Levadura- comida A
- Levadura- comida B - Levadura- comida C
- Levadura- comida D
- Papel Toalla

Procedimiento:
Parte A: Influencia de la temperatura en el rango de la respiración de la levadura

Tomar dos tubos de ensayo y marcar como GL1 y GL2, A cada uno de los tubos de ensayo,
añadir 2ml de levadura y 3 ml de solución de glucosa al 20%.
Mezclar vigorosamente los dos contenidos de los tubos de ensayo.
Coloque un retenedor con gotero en cada tubo de ensayo, observar que estén ajustados y
sellados.
Coloque el tubo de ensayo GL2 dentro de un recipiente lleno casi por completo de agua y
hielo, asegúrese de tomar la respectiva temperatura que debe estar en los rangos entre 0 y
10 °C.

Coloque el otro tubo de ensayo GL1 en el otro recipiente, lleno casi por completo con agua
tibia. Regular la temperatura del agua entre 38 y 45 °C, añadiendo agua caliente y fría si es
necesario.

Sumergir completamente los tubos de ensayo en cada uno de los recipientes.

Mantenerlos durante 5 minutos al cabo de 2 minutos (estos 2 minutos servirán de reposo y


que la temperatura permita el inicio de la reacción), iniciar el contaje de burbujas que se
producen cada minuto hasta el final del minuto 5.
Realice su reporte usando una tabla de resultados diseñada por ustedes.

PARTE B: La influencia de diferentes alimentos en la respiración de la levadura

Prepare cuatro retenedores y cuatro tubos de ensayo tal como fue indicado en la Parte A.
Añada 2 ml de levadura y 2 ml de solución de cada alimento en los tubos previamente
etiquetados con las letras A, B, C y D, mezcle el alimento y solución de levadura
vigorosamente en cada tubo mencionado.

Coloque los tubos de ensayo A, B, C y D en un otro recipiente, lleno casi por completo con
agua tibia. Regular la temperatura del agua entre 38 y 45 oC, añadiendo agua caliente y fría
si es necesario.

Mantenerlos durante 12 minutos al cabo de 2 minutos iniciar el contaje de burbujas que se


producen cada minuto hasta el final del minuto 12. Se recomienda que siempre deban
controlar que la temperatura se mantenga en los rangos establecidos desde el inicio hasta
el final del tiempo estipulado (12 minutos).

Finalmente llene su tabla de resultados con el número de burbujas contabilizadas en el


tiempo solicitado, el número de burbujas que deban constar serán las que observen a partir
del minuto 3 que en su tabla será el minuto 1 y en cada minuto se seguirán contando el
número de burbujas hasta el final del minuto 12 que en su tabla será el minuto 10.
Nota: cada grupo es responsable de contar el número de burbujas de los tubos de ensayo

Parte C: comparación de datos individuales y de la clase

Complete la tabla escribiendo el total de burbujas que se contaron de las dos partes de la
práctica, en parte A y parte B.

El dato de burbujas totales de todos los grupos deberá ser escrito en la pizarra y el
promedio de la clase será determinado por ustedes. Se deberá considerar datos tanto de la
parte A y parte B.

Nota: Crear sus propias tablas para registrar resultados.

Tomado y adaptado de: Peifer 1997.


Por. Ronald Reese

Bibliografía:

Peifer R.W. 1997. Introduction to Biology: Laboratory exercises (Seventh Edition). Burgués
Publising. USA

Starr C. y Taggart R. 2004. Biología: la unidad y diversidad de la vida (Décima edición).


Thomson. Méjico.

ACTIVIDADES DE REVISIÓN

Mediante una tabla de resultados interpretar las reacciones que se dieron al soplar
mediante el sorbete en el interior del vaso de precipitados.

Elaborar t a b l a s de r e s u l ta d o s para reacciones de los ejercicios parte A y B.


Representar la glucólisis y ciclo de Krebs usando todas las enzimas y coenzimas para la
obtención de ATP, la representación se la hará mediante la entrega de una maqueta que
represente estos procesos de oxido-reducción, es importante que este claramente
especificado que elementos se oxidan y cuales se reducen.
Laboratorio VII
FOTOSÍNTESIS

Introducción. – La fotosíntesis y la respiración celular son caras opuestas de una misma


moneda. La respiración extrae la energía de compuestos orgánicos, mientras que la
fotosíntesis captura energía mediante la producción de compuestos orgánicos, que son
considerados combustible para la respiración.

Se recalca que la fotosíntesis es el fenómeno opuesto a la respiración celular, por lo tanto en


este caso en lugar de usar energía química la fotosíntesis la crea, mediante el uso de
moléculas inorgánicas que son el producto de la respiración de organismos heterótrofos y
autótrofos (ciclos a la luz y obscuridad), de esta manera se produce una serie de intercambios
entre los organismos autótrofos y la atmósfera, ya que liberan O2, y de la atmósfera atrapan
CO2, en cuanto al aporte energético de la fotosíntesis este es muy alto, pues como producto
final se generan moléculas de carbohidratos que serán usados por los heterótrofos para sus
ciclos vitales y funcionamiento metabólico celular. Es importante establecer que los dos
mecanismos tanto de Fotosíntesis como de Respiración Celular representan a una serie de
reacciones de tipo Redox, es decir de óxido reducción, para que se genere energía química y
se libere CO2 y O2.

(Complete la ecuación antes de iniciar el laboratorio e indique la dirección de


fotosíntesis y la dirección de respiración celular en la ecuación).

6O2 + C6H12O6

La fotosíntesis es un proceso vital para la vida del Planeta, ya que produce energía y carbono.
La mayor parte de estas reacciones ocurren en los CLOROPLASTOS (Tilacoides, Granas),
presentes en las células vegetales a través de pigmentos como la CLOROFILA.

Las reacciones que ocurren durante este proceso pueden ser clasificadas en REACCIONES
DEPENDIENTES DE LUZ y REACCIONES OSCURAS (INDEPENDIENTES DE LUZ).

REACCIONES EN PRESENCIA DE LUZ + REACCIONES OSCURAS


FOTO+SÍNTESIS

REACCIONES DEPENDIENTES DE LUZ

Estas reacciones están relacionadas con el inicio del proceso fotosintético, ya que capturan luz
solar y la transforman en ENERGÍA QUÍMICA. Como resultado de éstas reacciones parte de
la energía se almacena en forma de ATP o NADPH que son los principales productos
de estas reacciones.

La energía que ha sido absorbida de los FOTONES por un pigmento, se emite nuevamente en
forma de luz fluorescente, que si no fuese atrapada se escaparía en forma de luz y calor. Sin
embargo, esto no ocurre y los pigmentos cosechan y transportan esta energía de manera
“aleatoria“, pero parte de la energía se pierde como calor, mientras el resto es concentrada
solamente en el CENTRO DE REACCIÓN (molécula de clorofila A) del fotosistema, que
posteriormente enviará la energía a través de TRANSFERENCIA DE ELECTRONES
(enzimas y coenzimas).
La energía que atraviesa el sistema permite la creación de moléculas de ATP, y mediante otros
procesos NADPH.

Fig2. Esquema de la Fotosíntesis en presencia de la luz

REACCIONES OSCURAS

Esta es la parte de “síntesis” en la fotosíntesis. Ocurren a través de un movimiento cíclico de


energía denominado CICLO DE KALVIN-BENSON. Estas reacciones son impulsadas por
ATP. Las moléculas de NADPH proporcionan los electrones y el hidrógeno necesarios para la
producción de AZÚCARES. El CO2 del aire o agua suministra carbono y oxígeno a las
células fotosintéticas.

Estas reacciones se conocen como oscuras o independientes de luz, ya que no requieren la


presencia de luz solar para ocurrir y pueden darse en la oscuridad, siempre que exista la
presencia de ATP y NADPH.

Esquema del ciclo de Kalvin


Metabolismo ácido de las Crassulaceae

Introducción. – El metabolismo ácido de las Crassulaceae (CAM) es un tipo de metabolismo


que se da en plantas y que se descubrió en la familia de las Crassulaceae, de ahí su nombre. El
nombre de metabolismo ácido hace referencia a la acumulación de ácidos orgánicos durante la
noche por las plantas que poseen este mecanismo de fijación de carbono.

Esta vía metabólica es semejante a la vía C4 (vía de 4 carbonos), sin embargo en la vía CAM
la separación de las dos carboxilaciones no es espacial, como ocurre en las plantas C4, sino
temporal.

Estas plantas tienen dos carboxilaciones separadas temporalmente:

* Fijación nocturna de CO2. Esta primera fase se da en la noche (vía de 4 carbonos), cuando
tienen los estomas abiertos. A través de ellos la planta capta CO2 atmosférico y la
fosfoenolpiruvato carboxilasa lo incorpora por carboxilación al fosfoenolpiruvato (PEP) que
se transforma en oxalacetato (OAA) con el desprendimiento de un grupo fosfato; el
oxaloacetato formado de la prefijación de CO2 es reducido en el citosol a malato mediante la
NAD-malato deshidrogenasa, el malato es bombeado con gasto de energía a las vacuolas,
donde se va acumulando como ácido málico y es almacenado, provocando que el contenido
vacuolar sea muy ácido (cerca de pH 3) durante la noche.

* Con la salida del sol, los estomas se cierran previniendo la pérdida de agua e impidiendo la
adquisición de CO2. El ácido málico sale de la vacuola y se descarboxila liberando el CO2 y
ácido pirúvico el cual es devuelto al ciclo tras ser fosforilado con ATP, produciendo
nuevamente fosfoenolpiruvato. Una vez que los estomas están cerrados, el CO2 liberado
internamente no puede escapar de la hoja y en lugar de esto es reducido a carbohidrato por la
operación del ciclo C3. La concentración elevada en el interior de CO2 suprime
efectivamente la oxigenación fotorespiratoria de la ribulosa 1,5-bifosfato y favorece la
carboxilación.
Este mecanismo de concentración de dióxido de carbono permite disminuir la probabilidad de
que entre un O2 en el sitio activo de la RuBisCo por lo que la eficiencia fotosintética es
mayor.

Las plantas CAM suelen ser gruesas (suculentas, no todas) y relegadas a ambientes secos
(también existen CAM acuáticas); esto es debido a su bajo rendimiento total fotosintético (ya
que la absorción de dióxido de carbono está limitado a la cantidad de MA que se puede
almacenar en la vacuola) por lo que son malas competidoras con las plantas C3 o C4.

Existen plantas CAM constitutivas o adaptativas (estas últimas sólo tienen metabolismo ácido
de crasuláceas bajo estrés hídrico, etc.). Estas plantas resuelven el problema de pérdida de
agua durante la fotosíntesis al abrir sus estomas solo durante la noche cuando la temperatura
es menor y la humedad del ambiente es comparativamente alta.

De manera que el mecanismo CAM le permite a la planta maximizar la eficiencia en el uso de


agua. Típicamente una planta CAM pierde de 50 a 100 gramos de agua por cada gramo de
CO2 ganado, comparado con los 250 a 300 gramos de la C4 y los 400 a 500 gramos de la C3.

Por lo tanto las CAM tienen una ventaja competitiva en ambientes con poca agua (Taiz 1991),
comúnmente se asocian a climas desérticos, pero incluso en ambientes tan húmedos como el
bosque tropical es posible encontrarlas en forma de epifitas tales como las orquídeas (Hans-
Walter 1999), dado que la cantidad de agua sobre los troncos de sus huéspedes es menor a la
registrada sobre el suelo.
Las plantas CAM exhiben un patrón de apertura y cierre de estomas que es opuesto al de las
llamadas plantas C3, es decir, los abren durante la noche y los cierran durante el día.
Por la noche, toma el CO2 a través de estomas y se forman ácidos orgánicos que se acumulan
en las vacuolas. Durante el día, los ácidos orgánicos salen hacia el hialoplasma y se
descarboxilan.

Como consecuencia, liberan CO2 que se reduce en el ciclo de Calvin. El CO2 queda retenido
en la hoja y no puede salir debido a que están cerrados los estomas. De este modo se reduce
además la pérdida de agua, lo que explica la buena adaptación a condiciones de sequía que
muestran las plantas CAM.

Fig.1 Metabolismo Ácido de las Crasuláceas


Ejercicio#1

FOTOSÍNTESIS

Introducción. –
En relación al mantenimiento y equilibrio de ecosistemas globales este proceso es de vital
importancia ya que mediante este mecanismo de fotosíntesis los autótrofos pueden capturar y
secuestrar uno de los principales gases invernadero que está creando serios problemas
ambientales que inciden en el cambio climático.

Para poder visibilizar más detenidamente este mecanismo de fotosíntesis se ha creado este
ejercicio en donde se usan hojas de plantas verdes.

Materiales & Métodos

Papel filtro
Extractos de clorofila roja y verde
Lápiz de papel
Regla
Capilares
Grapadora
Vaso de precipitación
Solvente orgánicos éter de petróleo-acetona 9:1
Fuente de luz negra

La actividad que realizarán en cada grupo es la siguiente:

Recorten un rectángulo de papel filtro, de tal manera que al unirlo por los extremos forme un
cilindro de diámetro de por lo menos 2 cm menor a la del vaso de precipitados de 100 ml y
dos más alto que el mismo vaso.

El rectángulo de papel filtro estírelo sobre la mesa, trace una línea con lápiz en uno de sus
lados más largos a un cm. del borde.

Tome un tubo capilar y llénelo con uno de los dos extractos (verde o rojo) simplemente
sumergiéndolo verticalmente de 10 a 20 segundos, luego de ello cubra el extremo superior del
capilar con un dedo y sáquelo de la clorofila.

Deslice el capilar con el extracto (verde) sobre la línea previamente dibujada con el
lápiz.
Una vez realizada la línea de clorofila, déjela secar mediante un abaniqueo por 2
minutos aproximadamente, repita este procedimiento 5 veces sobre la línea (para
agregar el extracto siempre el papel filtro debe estar seco) al final de la quinta vez
proceda a cerrar los extremos con ayuda de grapas para formar el cilindro descrito
inicialmente (realice el mismo procedimiento con el extracto rojo y un nuevo
rectángulo de papel filtro).

En el vaso de precipitados coloque hasta una altura de 3 a 4 mm Acetona Éter de


Petróleo 9:1.

Luego coloque el cilindro de papel filtro dentro del vaso de precipitados, espere 5
minutos y sáquelo.
Déjelo secar por 2 minutos y luego saque las grapas, estire el papel filtro sobre la
mesa, compare el resultado que usted obtuvo en esta cromatografía en que se usaron
los dos tipos de extractos.

Los extractos de clorofila se obtienen moliendo hojas de color verde y hojas de color
rojo en un medio de etanol al 80% siempre por separado cada extracto.

Al finalizar el ejercicio anterior proseguir con la determinación colorimétrica de los


extractos en luz blanca y luego bajo los efectos de luz negra.

También se determinarán las estructuras celulares de hojas de plantas c3,c4 y cam,


usando cortes y microscopio.

Ejercicio#2

En el ejercicio 2b, el instructor, indicará dos tubos de ensayo con tapa rosca y llenos cada uno
hasta el borde con cada extracto, rotula y observa detenidamente las reacciones de estos
extractos en presencia de luz ultravioleta y luz blanca en un sitio totalmente obscuro.

Explica lo que observas y el porqué de tus ideas expuestas.

Tomado y adaptado de: Peifer 1997. Por.


Ronald Reese
Bibliografía:

Peifer R.W. 1997. Introduction to Biology: Laboratory exercises (Seventh Edition). Burgués
Publising. USA

Starr C. y Taggart R. 2004. Biología: la unidad y diversidad de la vida (Décima edición).


Thomson. Méjico.

ACTIVIDADES DE REVISIÓN

Ejercicio

Investigar sobre las semejanzas y diferencias entre plantas C3 y C4 e incorporar 3


ejemplos de plantas según su metabolismo C3, C4 y CAM. Incluir en un listado al menos
5 plantas de la flora Ecuatoriana con la taxonomía de cada una, por lo tanto debe
incluir: familia, género, especie, nombre científico, común y citar fuentes de donde
obtuvieron la información, sin esto su trabajo no será tomado en consideración para
evaluarlo.
PREGUNTAS DEL EJERCICIO # 1

Realizar una tabla de resultados en donde se observen sus conclusiones del experimento del
pez y Elodea tanto a la obscuridad como a la luz.

PREGUNTAS DEL EJERCICIO # 2

Realice un gráfico con sus resultados y establezca a que pigmentos corresponde cada curva
presente en la cromatografía, además indique cuales pigmentos son hidrofóbicos y cuales
hidrofílicos.

Redacte una investigación corta sobre la importancia de los pigmentos presentes en la


fotosíntesis sin excluir los pigmentos que encontraron en sus cromatografías. Además analice
los resultados de los pigmentos sometidos a diferentes tipos de luz, realice una curva de
relación entre las dos longitudes de onda usadas en su práctica. Argumente su resultado e
indique que sucederá con las longitudes de onda del espectro de luz.
Laboratorio VIII
MITOSIS

La vida en la Tierra empezó a desarrollarse a partir de la formación de células individuales.


Aunque algunos organismos permanecen como células individuales, en muchos casos esta
célula inicial se divide y empieza a multiplicarse y reproducirse en un proceso que continúa
hasta que se desarrolla un organismo pluricelular.

NOTA: Las células que forman el cuerpo se denominan somáticas (diploides) y aquellas cuya
función es la reproducción se conocen como sexuales o germinales (haploides).

Cuando tienen una caída y se lastiman, el crecimiento y reparación del tejido afectado se
cumple a través de la división y multiplicación de células somáticas. Esta división significa
una división nuclear (mitótica) y una citoplasmática (citocinética), también conocida como
MITOSIS (del griego mitos = hilos).

El proceso es diferente para las células sexuales, que son las encargadas de producir gametos:
óvulos en las hembras y espermatozoides en los machos. Por eso antes de que las células
sexuales puedan tomar parte en la reproducción deben pasar por una serie de cambios que
implican algunas divisiones celulares. El proceso completo por el cual estas células sexuales
se vuelven funcionales se conoce como gametogénesis.

La parte más importante de la gametogénesis ocurre casi al final del proceso y comprende dos
divisiones nucleares conocidas como MEIOSIS (del griego meioun = hacer más
pequeño).

El objetivo de esta práctica es entender las diferentes etapas, procesos y fases de la mitosis, la
citocinesis, y la meiosis. La primera parte tratará de las fases de la mitosis, luego de lo cual se
comparará con la meiosis, para el cumplimiento del objetivo recibirán placas preparadas en las
cuales debe identificar las diferentes fases de la división celular. (RECUERDE LO QUE
APRENDIÓ EN LABORATORIOS ANTERIORES).

Mitosis: División de las Células Somáticas

Introducción. – En una división celular normal cada célula se divide en dos con el mismo
contenido nuclear que la célula madre y aproximadamente con la misma cantidad de
citoplasma. En el proceso mitótico los cromosomas se dividen en forma tal que las células
hijas resultantes tengan la misma cantidad y el mismo tipo de cromosomas presentes en la
célula original.

Después de la división celular, las células hijas generalmente crecen a través de la síntesis de
protoplasma hasta alcanzar el tamaño de la célula madre. En organismos unicelulares los
productos de la mitosis se separan y se vuelven organismos independientes. En las plantas o
animales pluricelulares las células hijas se mantienen juntas aumentando de esta manera el
tamaño del organismo.

NOTA: ¿QUÉ TAN RÁPIDO SE DIVIDEN LAS CÉLULAS?

Un ciclo celular dura lo mismo para las células iguales, pero cambia de acuerdo al tipo de
célula y las condiciones del medio. Las NEURONAS se detienen en G1 de la Interfase y no
suelen dividirse después. Entre 2 a 3 millones de ERITROCITOS se forman cada SEGUNDO
para reemplazar a las células desgastadas de la sangre.
A continuación describiremos los procesos de cada una de las fases de la MITOSIS. La Figura
1. Grafica con claridad los cambios durante la división celular.

INTERFASE (PRE-MITOSIS)

En esta fase la célula se prepara para dividirse. La masa celular aumenta y se duplica el ADN
(material genético). En la mayoría de los casos esta es la fase más larga del proceso y se
divide en tres partes: G1 (intervalo de crecimiento); S (síntesis y duplicación de ADN); G2
(segundo intervalo preparación para división).

PROFASE (INICIO DE LA MITOSIS)

Durante esta fase la cromatina del núcleo se condensa en cromosomas, y se reconoce a la


profase porque los cromosomas se hacen visibles en el microscopio de luz, a manera de hilos.
Cuando la división nuclear se inicia los cromosomas se acortan y engrosan. El nucléolo
desaparece y la membrana nuclear comienza a desvanecerse.

En la etapa temprana de la Profase cada cromosoma se compone de dos partes llamadas


cromátidas que se encuentran asociadas a lo largo de su longitud. Las cromátidas están unidas
en una región conocida como centrómero. La posición del centrómero varía en los diferentes
cromosomas, algunas veces se encuentra en el centro y otras veces cerca de uno de los
extremos.

NOTA: Con colorantes especiales se puede apreciar el centrómero como una estructura más
brillante en el cromosoma, pero ni los centrómeros, ni la naturaleza doble de los cromosomas
podrán ser vistos en las placas de este laboratorio.

Los centriolos inician la migración hacia los extremos de la célula mientras que el huso
mitótico y el áster (centrosoma en células animales), empiezan a aparecer. Este huso mitótico
está formado por microtúbulos que se unen a ambos centriolos o de un centriolo a un
centrómero. El áster es un compuesto de microtúbulos que se prolongan fuera del centriolo.
La unión de centriolo y áster se conoce como centrosoma.

METAFASE

Cuando termina el enrollamiento, los cromosomas aparecen como estructuras en forma de “V”
o de bastón dependiendo de la posición de los centrómeros. Desaparece cualquier señal de
enrollamiento. En esta etapa los cromosomas se presentan claramente duplicados, aunque la
replicación actual de los filamentos de cromosoma se haya dado anteriormente (en la
Interfase). Los cromosomas se arreglan en la mitad del huso (plano ecuatorial), y se unen por
sus centrómeros. Las dos partes del cromosoma doble están listas para separarse y moverse a
los polos. El huso mitótico es una estructura bipolar dando una apariencia de ser una
estructura fibrosa.

ANAFASE.

Al comienzo de esta etapa el centrómero de cada cromosoma se divide en dos partes.


Siguiendo su orientación en el plano ecuatorial del huso mitótico, los duplicados o
cromosomas hijos se separan por el centrómero. Los cromosomas hijos empiezan a moverse a
los polos opuestos dirigidos por sus centrómeros. Ya que los centrómeros van adelante, se
forma una “V” o una “J”. Podrá observar y reconocer todas las fases en las placas que serán
entregadas.

TELOFASE (FIN DE LA MITOSIS)


En este punto la división celular está casi completa. Durante la telofase, comienza la
reorganización de los contenidos de las células hijas. Esta etapa empieza cuando los
dos grupos de cromosomas idénticos llegan a los polos opuestos del huso mitótico.

Se separan más definidamente y una membrana nuclear empieza a rodear cada grupo. Los dos
grupos empiezan a desenrollarse y a crecer. El nucléolo reaparece y el núcleo regresa a su
apariencia de interfase. Mientras tanto el huso mitótico va desapareciendo y se da la
citocinesis. Eventualmente las células hijas resultantes se han separado completamente y
pasan a la interfase.

En células de plantas y animales cada núcleo resultante de la división mitótica tiene el mismo
número de cromosomas que la célula de la cual provino. Este hecho será difícil de observar en
las placas que estudiarás porque ambos organismos tienen un número relativamente
grande de cromosomas. La cebolla por ejemplo tiene 16 cromosomas en cada núcleo y la
blástula de ciertos peces tiene 60.

CITOCINESIS (DIVISIÓN DEL CITOPLASMA)

La citocinesis o la división del citoplasma parecen ocurrir por diferentes mecanismos en las
plantas y en los animales. En los animales aparece una ranura en la región ecuatorial de la
célula durante la telofase. Esta se vuelve cada vez más profunda hasta que las dos células
están completamente divididas (Pueden mantenerse adheridas después de la división). En la
división citoplasmática de los vegetales se presenta una fina placa en el huso mitótico. Esta
placa crece hasta que atraviesa la célula y forma la lamela intercelular (laminilla media).
Luego las células hijas depositan paredes de celulosa a cada lado de la lamela, siendo el inicio
de la pared celular de la joven célula.

Figura 1. Etapas de la Mitosis en una célula somática.


Debes reconocer el error existente de acuerdo a la lectura, ¿en qué fase este gráfico tiene
el error y compáralo con el siguiente gráfico e indica las semejanzas o diferencias entre
estos dos tipos de células?

EJERCICIOS

Debes bosquejar las etapas típicas de la mitosis para las células de la blástula (célula animal) y
de la cofia de la cebolla (célula vegetal). Más allá de la calidad de tu dibujo, identifica las
características de cada una de las fases (Sin embargo se recomienda para estas prácticas
traer lápices de colores en especial azul, rojo ó verde).

Ejercicio# 1

REPRESENTACIÓN MACROSCÓPICA DE LAS DIFERENTES ETAPAS DE LA


MITOSIS

Materiales y Métodos

• 4 pedazos de plastilina de colores distintos para representar cromosomas paternos y


maternos
• Hoja de papel con esquemas de la célula.
• 1 hoja de papel blanco en donde realizará su representación usando la plastilina.

Nota: pueden realizar el ejercicio con diferente color de plastilina para representar los
cromosomas con sus respectivas cromátidas y como estos caracteres son heredados y
transmitidos de los padres a su progenie. Representa cromosomas heredados del padre
(azul) y de la madre (rojo). El tamaño representa dos distintos tipos de cromosomas
también represente las cromátidas y cromátidas hermanas.

Coloque un pedazo de plastilina uno corto y otro largo a cada uno de los dos colores (4
cromosomas) dentro del núcleo del esquema celular denominado Mitosis.

Inicie simulando la Interfase: Aparea cada uno de los cuatro cromosomas (plastilina)
anteriores con otro trozo de plastilina igual y junte cada par de la misma longitud y color con
una bolita de plastilina (el centrómero).
Coloque estos cuatro pares de cromosomas pareados en el núcleo del esquema celular
denominado Profase.

Mueva los cuatro pares de cromosomas pareados a los esquemas celulares y libres en el
citoplasma Profase tardía.

Metafase colóquelos en orden y distribuidos en la línea media del citoplasma es decir en el


plano ecuatorial.

Separe los cromosomas (plastilina con forma de cromosomas) de cada pareja por los
centrómeros de plastilina y en el esquema celular denominado Anafase, muévalos sobre el
huso cromático en dirección a los centrómeros (cuatro en cada dirección).

Mueva los cuatro cromosomas a los núcleos celulares del esquema denominado Telofase (cada
núcleo de las células hijas debe tener dos cromosomas de los progenitores, esto quiere decir
que tendrá dos pares de cromosomas de diferente color y la distribución de los mismos debe
encontrarse en los extremos de la célula, adicionalmente se debe representar las huellas del
huso cromático y la placa celular que inicia la ruptura del citoplasma, o inicio de la división
citoplasmática. Posteriormente representar la citocinesis en donde se encuentren las células
hijas con su respectiva pared celular diferenciando las paredes primarias y secundarias.

Ejercicio# 2

OBSERVACIÓN DE LAS FASES DE LA MITOSIS EN LA RAÍZ DE CEBOLLA


Materiales y Métodos

Microscopio de compuesto
Raíz de cebolla
Ácido clorhídrico
Aceto-carmín u Orceína Acética o Azul de Metileno
Portaobjetos y cubreobjetos
1. Toma una pequeña sección de raíz de cebolla que creció en agua con un inhibidor mitótico
(colchicina) y sumérgela en una solución de ácido clorhídrico (hidrolización).

2. En un portaobjetos coloca un trocito de esta raíz y cúbrelo con dos gotas del colorante
acetocarmín, o el colorante dispuesto por el instructor, se puede usar también orceína acética o
azul de metileno.

Añade colorante si este se evapora.

Cubre la muestra de raíz coloreada con un cubreobjetos y presiona levemente con el tapón de
goma o el borrador de un lápiz (esto se llama squash).

Coloca el portaobjetos con su cubreobjetos entre los pliegues de un papel absorbente


presionando suavemente y evitando que el cubreobjetos se mueva (absorber el exceso de
líquido).
3. Busca las células en mitosis en el microscopio de transmisión usando el aumento
necesario. Encuentra y dibuja todas las fases de la mitosis antes estudiada y que se observen
en las placas.

NOTA: pregunta a tu instructor ya que algunas de estas etapas de preparación de la muestra


pueden haber sido ya efectuadas antes del laboratorio. Además presta atención a las
instrucciones debido a que el protocolo de la práctica puede tener variaciones.
EL RESULTADO DE LA MITOSIS ES CELULAS HIJAS, SIMILARES A LA CÉLULA
MADRE.

Tomado y adaptado de: Larsen 1987. Benson y Gunstrem 1970. Keeton 1968. Kirov 2008.
Por: David Romo, Pablo Riera y Ronald Reese.

Ejercicios diseñados y modificados por David Romo y Pablo Riera

Bibliografía:

Larsen, J. 1987. A Lab Manual in Biology . Stipes Publ. Co. Champagne, IL.

Benson H., Gunstrem S. 1970. Anatomy & Physiology Lab Text Book.WmC. Brown Co. Pub.
Iowa

Keeton, W. 1968. Lab Guide for Biological Science. W.W. Norton & CO. New York.

Kirov, N. 2008. Symbiosis (custom laboratory program for the biological sciences) Principles
of Biology 1&2. New York University. Manhattan – NY. USA

Imágenes tomadas y Modificadas de:

www.biosci.uga.edu/almanac/bio_103/notes/apr_3.html.

www.memo.com.co/fenonino/aprenda/biologia/biolog5

ACTIVIDADES DE REVISIÓN

Ejercicio # 2

1. Grafique de manera realista las observaciones de placas de mitosis tanto raíz de


cebolla como de Ascaris, siempre usando el respectivo campo óptico, en el que
conste el número de aumento del objetivo y el aumento total.

2. Revise los conceptos de mitosis y clonación y deduzca si la mitosis es o no una


clonación.
Laboratorio IX
MEIOSIS

Meiosis: división de las Células Sexuales

Introducción. – La división celular que se produce en las gónadas y que genera las células
germinales masculinas y femeninas se denomina MEIOSIS. Esta división es de carácter
reductivo por cuanto el número total de cromosomas de la célula, que es una característica
constante para cada especie, se divide a la mitad.

Para comprender mejor este fenómeno es necesario entender con claridad lo que sucede
durante la mitosis que fue el tema de nuestra práctica anterior. Si no estás seguro, debes
repasar ahora para evitar las confusiones.

La meiosis comienza en la misma forma que la mitosis, esto es con la duplicación de los
cromosomas durante la Interfase.

NOTA: Sí tomamos en cuenta que los organismos primitivos no tienen reproducción sexual y
que la única división que efectúan es la mitosis, es fácil relacionar este hecho con la historia
evolutiva de los seres vivos.

La evolución nos lleva a pensar que la meiosis es un proceso que ocurrió partiendo de la
mitosis y por ello es que la meiosis requiere de una doble separación de los cromosomas, es
decir que sucede en dos etapas.

A continuación describiremos los procesos de cada una de las fases de la MEIOSIS.


La Figura 2. Grafica con claridad los cambios durante la esta división celular.

INTERFASE (misma que en la MITOSIS)

PROFASE I

Los cromosomas se condensan y cada cromosoma está conformado por las cromátidas her-
manas, las mismas que se crean a partir de la fase G1 continúa en S y G2 y estas terminan de
formarse en profase I durante las subfases de profase I, esto es en Leptoteno, Zigoteno,
Paquiteno, Diploteno y finalmente la Diacinesis.

Para que un cromosoma sea homólogo debe tener la misma secuencia de genes, es decir
codificar para las mismas características aunque los alelos sean diferentes. Por lo tanto, los
cromosomas homólogos son del mismo largo, tienen el centrómero en la misma posición y
tienen los mismos locus.

En esta fase también comienza a desaparecer la membrana nuclear y se comienza a formar el


huso meiótico.

Durante esta fase puede darse el entrecruzamiento de las cromátidas hermanas y producir la
recombinación de los genes, esta fase también es importante porque se produce el crossing-
over, además de la formación de las tétradas, debido a que se juntan los pares homólogos y se
produce la duplicación de los cromosomas, esta duplicación y unión en tétradas se las conoce
como Sinapsis, y como se encuentran unidos estos cromosomas homólogos duplicados, pues
en este proceso se forman unas estructuras de cromatina a las que se los denomina quiasmas.
Se produce la Variabilidad Genética
METAFASE I

Los pares homólogos haploides bivalentes se ubican en el plano ecuatorial de la célula y las
cromátidas apuntan a cada polo.

ANAFASE I

Los cromosomas haploides bivalentes se separan y hacia cada polo se desplaza un


cromosoma Homólogo que contiene las cromátidas hermanas, en esta fase se distribuyen
completamente al azar tanto los cromosomas paternos y maternos con su respectivo
entrecruzamiento, no hay una organización u orden que indique cuál de los cromosomas debe
separarse para dirigirse a cualquier extremo, generándose el efecto de biodiversidad.
TELOFASE I

Los cromosomas se descondensan ligeramente, se forma una membrana nuclear y lo que es


más importante se forma una membrana celular por lo que el resultado de esta primera etapa
es la producción de dos células que ya son haploides, pero aún siguen siendo bivalentes (con
cromátidas duplicadas) por lo que se da la meiosis II para llegar a tener células haploides, con
características distintas a las de los progenitores.

Luego de la telofase I en algunos organismos se da un leve proceso de Interfase II o


Intercinesis, pero en otros organismos no se puede dar esta fase y pasa directamente a profase
II.

FIGURA 2. Etapas de la MEIOSIS

Nota: observa y compara con lo observado en su práctica si este esquema está bien
representado o tiene que realizar correcciones, en el espacio siguiente dibuja la
secuencia como crees que debe ser.
NOTA: luego de la TELOFASE I las fases de la segunda etapa de la MEIOSIS son muy
similares a la MITOSIS, pero con algunas diferencias, puedes comprobar esto en la TABLA 1.
Así también puede verificar las imágenes que se encuentran al final de su manual.

PROFASE II

Los cromosomas se condensan y cada uno está formado por la unión de las cromátidas
hermanas. Ahora cada célula contiene la mitad del número total de cromosomas. La
membrana nuclear se desintegra y el huso meiótico se comienza a formar. Los centríolos se
ubican en los polos.

METAFASE II

Los cromosomas se ubican en el plano ecuatorial. Cada cromátida hermana apunta hacia el
polo respectivo.
ANAFASE II

Las cromátidas hermanas se separan y viajan hacia los polos, en esta fase las células se
convierten en haploides, debido a que las cromátidas hermanas y los cromosomas homólogos
que daban el carácter de duplicación se individualizan, por lo tanto se separan las cromátidas
hermanas que llevan consigo el respectivo entrecruzamiento de cada cromosoma,
permitiendo la formación de 4 futuros núcleos que contendrán el número haploide de
cromosomas.

TELOFASE II

Los cromosomas se distribuyen en los extremos de la célula, aparece la placa que divide el
citoplasma, se mantienen las huellas del huso cromático, a medida que pasa el tiempo la
telofase II se vuelve tardía y con su característica pues los cromosomas se descondensan, la
membrana nuclear se forma y la membrana celular empieza a cerrarse.

CITOCINESIS

El resultado final es la producción de cuatro células, cada una haploide, es decir con la mitad
del número de cromosomas de la célula madre. En esta fase se observan la individualización
de las células debido a la presencia de las paredes celulares que separan a las 4 células hijas.

Ejercicio# 1

REPRESENTACIÓN MACROSCÓPICA DE LAS DIFERENTES ETAPAS DE LA


MEIOSIS

Materiales & Métodos

Plastilina de diferentes colores


Cartulina
Representaciones gráficas del manual y del libro de teoría

Usa el gráfico y reconstruye las fases partiendo de una célula diploide de cuatro cromosomas,
es decir dos pares homólogos.

Ejercicio# 2
FORMACIÓN DEL POLEN EN ANTERA DE Lilium

Materiales y Métodos

Placas preparadas con fases de Meiosis I y II de antera de lirio


Microscopio

Deberás observar las placas preparadas de las anteras de Lirio (Lilium sp.) donde podrás
distinguir y reconocer las características presentes en las diversas fases de la división
meiótica.

Después de haber desarrollado un esquema general de las fases de la Meiosis, ahora veremos
los detalles en una planta del género Lilium.

En la antera de esta planta, ciertas células pasan por una división meiótica para producir polen.
El polen es análogo al espermatozoide de los animales pero tiene una morfología diferente.
Estas diferencias se harán evidentes cuando estudie las plantas con flores.

La meiosis en el Lilium ocurre de una manera similar que en un Ascaris. Durante la primera
profase de la meiosis se aparean los cromosomas homólogos. La cromatina que durante la
interfase está despiralizada y dispersa más o menos uniformemente empieza a espiralizarce y
a volverse visible como pequeños hilos. Observe la placa de la profase temprana del Lilium.

Luego dos filamentos homólogos de cromatina se unen paralelamente y la sinapsis de las


partes homólogas comienza. Los cromosomas siguen acortándose y engrosándose. En este
punto cada cromosoma está formado por dos cromátidas.

Por esta razón se pueden observar tétradas formadas de cuatro cromátidas. En este momento
ocurre el entrecruzamiento entre los pares de cromosomas. La condensación de la cromatina
ocurre hasta el final de la profase. El entrecruzamiento es fácilmente visible en la metafase de
la primera división y puede ser visto en una de las placas.

El resto de la primera y de la segunda división ocurre como se describió anteriormente,


excepto en que todas las divisiones celulares son iguales y las cuatro células resultantes tienen
el mismo tamaño. Esto se produce tanto a nivel de células animales como vegetales, sin
embargo existe una condición especial en la formación de las células que forman el
gameto femenino animal, pues en meiosis I termina con la formación de una Ovocito
primario y una célula con poco citoplasma, conocida como I cuerpo polar, a partir de la
fecundación se produce meiosis II y se forma el óvulo y el II cuerpo polar.

Las cuatro células son el resultado de las la tétradas de polen. Las cuatro se separan y forman
un grano individual de polen. Sería bueno en esta parte revisar lo que ha visto para estar
seguro de que comprende los aspectos claves de la meiosis.

EL RESULTADO DE LA MEIOSIS: CÉLULAS HIJAS CON CARACTERES


VARIADOS, SE PROMUEVE LA VARIACIÓN ENTRE DESCENDIENTES.

Segregación Independiente

A pesar de que los temas de genética se cubrirán en la siguiente práctica de laboratorio, es de


suma importancia referirnos a la Ley de Mendel, la Segregación Independiente. Esta indica
que dos características diferentes como el color de las flores y la textura de la semilla no están
ligadas al mismo cromosoma y por lo tanto en el momento de la fecundación pueden darse
una gran cantidad de combinaciones. Es este proceso el que se destaca en la Meiosis, de no
ser así todos seríamos iguales a nuestros padres…clones.
Reflexiona y piensa que lo más destacado de las Leyes es el hecho que Mendel nunca vio un
cromosoma, ni tenía una idea exacta de lo que era un gen, pero revolucionó la Biología actual
con sus estudios y trabajo.

En esta figura podrá comprender gráficamente el proceso resumido de la meiosis I y II así


como su inicio diploide, y en qué fase se observan los cromosomas haploides, bivalentes y en
qué fase finalmente se han reducido a cromosomas haploides.

Se ha adicionado también esta otra gráfica para proyectar de mejor manera el proceso de la
división meiótica, y como al final de la telofase las células aún no se encuentran
individualizadas, esto ocurre luego de la respectiva citocinesis, que sigue luego de meiosis II,
observándose claramente en la representación gráfica de las 4 células finales.

Tomado y adaptado de: Larsen 1987. Benson Gunstrem 1970. Keeton 1968. Kirov 2008. Por:
David Romo, Pablo Riera y Ronald Reese.

Ejercicios diseñados y modificados por David Romo y Pablo Riera

Bibliografía:

Larsen, J. 1987. A Lab Manual in Biology . Stipes Publ. Co. Champagne, IL.

Benson H., Gunstrem S. 1970. Anatomy & Physiology Lab Text Book.WmC. Brown Co. Pub.
Iowa
Keeton, W. 1968. Lab Guide for Biological Science. W.W. Norton & CO. New York.

Kirov, N. 2008. Symbiosis (custom laboratory program for the biological sciences) Principles
of Biology 1&2. New York University. Manhattan – NY. USA

Imágenes tomadas y Modificadas de:


1. www.biosci.uga.edu/almanac/bio_103/notes/apr_3.html.
2. www.memo.com.co/fenonino/aprenda/biologia/biolog5
Laboratorio IXA
GENÉTICA, LA HERENCIA

¿A quién te pareces más a tu papá o mamá?


¿Tienen ellos los lóbulos de las orejas pegados o separados?

Las respuestas de estas preguntas son estudiadas por la GENÉTICA, ya que los lóbulos de tus
orejas, así como el color de tus ojos, tu tipo de pestaña, los hoyuelos de las mejillas y muchas
otras características de tu cuerpo dependen directamente de los genes que heredaste. Esto
sucede en todos los seres que se reproducen sexualmente.

Nota: Fue gracias a Gregor Mendel que muchos de los misterios de la genética empezaron a
ser entendidos.

Introducción. – Los GENES, son la unidad de herencia, y representan segmentos enrollados


de ADN llamados CROMOSOMAS. Un solo cromosoma puede contener miles de genes
diferentes, la posición de cada gen en el cromosoma se denomina LOCUS (o LOCI en plural).
Existe un máximo de dos loci para el mismo gen en cada CROMOSOMA HOMÓLOGO, es
decir en dos cromosomas que tienen la misma distribución de genes. Los dos loci pueden ser
idénticos (influencian un característica de la misma forma), pero también puede influenciar
características de manera independiente, en este caso se denominan ALELOS.

No todos los alelos influencian a las características de igual forma. Existe un alelo
DOMINANTE que es aquel que se expresará sobre el otro alelo denominado RECESIVO. Los
alelos dominantes se expresan con letras mayúsculas (A) y los recesivos con minúsculas (a), y
son estos los que determinan el FENOTIPO y el GENOTIPO.

• El genotipo se refiere a la composición de los alelos y puede tener tres alternativas:


Homocigoto dominante (AA), homocigoto recesivo (aa) y heterocigoto (Aa).

• El fenotipo se refiere a la apariencia que tendrá la descendencia. Por ejemplo color de pelo. Si
tomamos un caso específico y analizamos una sola característica tendremos solo dos al-
ternativas: negro o rubio

ES MUY IMPORTANTE QUE TENGAS MUY CLARO TODOS LOS CONCEPTOS


DADOS. REVISA EL CAPÍTULO CORRESPONDIENTE AL TEMA EN EL LIBRO
PARA AUMENTAR EL CONOCIMIENTO Y ACLARAR CUALQUIER DUDA Y
PREPARA UN PEQUEÑO ENSAYO Y PRESÉNTALO ANTES DEL INICIO DEL
LABORATORIO.

Volvamos a MEIOSIS un momento. Ahora podemos comprender mejor lo que sucede


durante la fecundación y la eventual producción de “hijos” (progenie). La Ley de Mendel se
refiere a la Segregación Independiente, la misma que dice que dos características diferentes
como el color de las flores y la textura de la semilla no están ligados al mismo cromosoma y
por lo tanto en el momento de la fecundación pueden dar un sin número de combinaciones.
Fuente Curtis ,1993

Ejercicio # 1

ENTRECRUZAMIENTOS MONOHÍBRIDOS Y DIHÍBRIDOS

Introducción. – Luego de haber comprendido la meiosis y su característica en la transmisión


hereditaria es tiempo de llevar los conceptos a la práctica, por lo tanto realizarán varios
ejercicios relacionados con el cruzamiento entre dos organismos que tengan una sola
característica diferente. Entendiendo el resultado de este cruzamiento y diferenciando los
términos homocigoto, heterocigoto, dominante, recesivo, alelo, fenotipo y genotipo,
continuaremos con el análisis de cruzamientos en donde se comparen dos características
fenotípica y genotípicas, es decir la comparación del cruzamiento entre dos pares de alelos por
progenitor, también es necesario comprender el significado de parental 1 y 2, o filial 1 y 2.
La característica del cruzamiento monohíbrido está relacionada con el cruzamiento entre
líneas puras. Línea pura: población que produce descendencia homogénea para el carácter
particular en estudio; todos los descendientes producidos por autopolinización o fecundación
cruzada, dentro de la población, muestran el carácter de la misma forma.

En base a las características de las líneas puras se crea la primera Ley de Mendel o Ley de la
uniformidad de los híbridos de la primera generación (F1): la misma que presenta
características lógicas y predecibles; cuando se cruzan dos variedades o individuos de raza
pura ambos para un determinado carácter, toda la filial 1 será híbrida en primera generación,
por lo tanto son iguales. Ahora bien ustedes en base al ejercicio deberán establecer que sucede
con la segunda generación o filial2.

En cuanto al cruzamiento entre 2 pares de alelos por cada progenitor se producen en la


primera generación o filial 1, descendientes híbridos, esto tomando en consideración que los
alelos parentales o progenitores 1, se encuentren en homocigosis dominante y recesiva.

Esta característica hereditaria determina el análisis de la ley conocida como Ley de la


recombinación de los genes (transmisión independiente de los genes), o Ley de la
distribución, segregación o disyunción Independiente: en ésta ley se establece que cada uno de
los caracteres hereditarios se transmite a la progenie con total independencia de los restantes.
Es decir, cuando en profase I se produce el entrecruzamiento o la recombinación
independientemente, dándose inicio a la diferenciación del descendiente en relación al
progenitor, y ésta se acentúa aún más cuando en anafase I se da la segregación, distribución,
disyunción o separación independiente de las características genéticas (hereditaria) de los
progenitores.

Ejercicio # 1

Materiales y Métodos

Mazorca de maíz relación 3:1


Mazorca de maíz relación 9:3:3:1
Cuadros de Punnet

Una vez que se hayan conformado los grupos de trabajo, serán distribuidos en cada grupo
mazorcas de maíz dihíbridas.

Realizar el respectivo conteo de los granos de maíz amarillos y blancos, al final se obtendrá el
respectivo resultado.

Con estos datos deben calcular la respectiva frecuencia, para el cruzamiento de descendientes
híbridos.
Con el resultado crear una tabla para tabular los resultados totales de los grupos, así tendrán la
posibilidad de contrastar sus resultados con el resultado general obtenido en todos los grupos.

Determinar si sus resultados son probabilidades exactas y establecer conclusiones sobre la


inexactitud o exactitud de las frecuencias obtenidas por sus grupos.

Deben realizar el ejercicio para lo cual deben completar los respectivos cuadros de punnet.
La metodología para obtener el resultado en cuanto a frecuencia, genotipo y fenotipo en F2, es
el mismo que hicieron con los maíces monohíbridos con la diferencia que ahora deben trabajar
con los maíces dihíbridos.

Ejemplo
Supongamos que tenemos dos conejos y tomamos los alelos de color de pelo:
Negro (dominante N) y uno Blanco (recesivo n). ¿Qué pasaría con la primera descendencia
(F1) del conejo si los cruzamos?
Conejo Homocigoto Negro: NN x Conejo Homocigoto Blanco: nn
¿F1: será una progenie totalmente de color negro?

¿Pero qué pasa con el alelo blanco, este desaparece o tiene opción de reaparecer en futuras
generaciones? Para ello, debemos cruzar dos conejos de la F1. Toma los gametos diferentes de
cada padre y llévalos a un cuadro de Punnet. Determina qué clase de progenie obtendrás y en
qué frecuencia, tanto fenotípica como genotípicamente.

Conejo heterocigoto. Nn x Conejo heterocigoto Nn

Ahora bien, llevemos este ejemplo a la práctica. En la mesa de laboratorio tenemos una
mazorca que representa el F2. Los padres del F1 fueron un maíz de grano morado y liso
cruzado con un maíz de grano amarillo y rugoso. Los maíces del F1 fueron todos morados y
lisos.

¿Qué alelo de cada característica es dominante y qué alelo es recesivo?

Color dominante recesivo


Textura dominante recesiva

Tu tarea es contar los granos de acuerdo a las características y llevar la información para hacer
la primera parte de tu deber.

Cada grupo debe contar el número de maíces que contiene cada mazorca y calcular la
respectiva frecuencia con los resultados que obtuvieron del cruce tanto monohíbrido como
dihíbrido.

DEBER DE GENÉTICA

Característica Número de granos


Morado liso
Morado rugoso
Amarillo liso
Amarillo rugoso

Para tu deber debes contestar las siguientes preguntas:

1. Utilizando este formato de clase representa la meiosis de los padres de la F1, crea tu
propio diseño para la representación de la meiosis y el cruzamiento F1 dihíbrido. Luego
representa la meiosis de los padres de la F2, es decir los maíces de la F1. Utiliza tu propio
diseño para representar el cruzamiento y la relación con la meiosis.

http://www.efn.uncor.edu/
2. Lleva cada uno de los gametos diferentes a un cuadrado de Punnet y llénalo, pero
previamente contesta que está representando el cuadro de Punnet y qué fases de la meiosis
se encuentran representadas en este cuadro.

3. Determina las frecuencias fenotípicas y genotípicas.

4. Determina la relación fenotípica de los granos que contaste en clase.

5. Compara la frecuencia real con la pronosticada basada en el cuadro de Punnet y explica


por qué es diferente.
6. ¿Qué deberías hacer para que los resultados sean más cercanos?

7. Indica con el respectivo argumento que es un transposon y si estos se encuentran


normalmente en las células en proceso de división celular.

Además de este problema, deberás resolver los siguientes en los que puedes utilizar cualquier
método de resolución. Cada problema debe ir acompañado de un cuadrado de Punnet y las
respectivas respuestas.

1. De la cruza de un cuy negro con uno blanco nacieron 12 cuyes negros. Cuando se cruzó un
cuy blanco con uno de los descendientes del cruce anterior (es decir uno negro), nacieron 7
negros y 5 blancos.
¿Cuál es la mejor explicación para esta situación genética?
Indica los genotipos de los padres, de los gametos y de los descendientes.

2. El pedigrí a continuación indica la forma de heredar la alkaptonuria (un desorden


bioquímico). Los individuos afectados (son los cuadros o círculos obscurecidos) no pueden
digerir una sustancia llamada alkapton, la misma que da color a la orina y mancha los
tejidos del cuerpo.

¿Según esta información el alelo responsable de ésta condición es dominante o recesiva?

Llena los genotipos de los individuos que tienes certeza de saber e indica cuales son los
posibles genotipos para los individuos en los que hay varias posibilidades.

3. La pseudohipertrofia muscular es un desorden que causa el deterioro gradual de los


músculos. Esta enfermedad se expresa únicamente en muchachos nacidos de padres
aparentemente normales y por lo general desencadena en la muerte de los jóvenes durante
la adolescencia.
¿La pseudohipertrofia muscular es causada por un alelo dominante o recesivo?
¿Su herencia está ligada al par sexual o es autosómica?
¿Cómo lo sabes?
Explica porque este desorden sólo se observa en hombres y no en mujeres.

4. Un gallo con plumas azules (en realidad grises) se cruza una gallina del mismo fenotipo.
Entre los hijos 15 tienen plumaje azul, 6 tienen plumaje negro y 8 son blancos.
¿Cuál sería la explicación más simple para este fenómeno?
¿Qué tipo de descendencia esperaría del cruce de un gallo negro con una gallina blanca?
5. El daltonismo (no poder ver los colores rojo y verde) es una enfermedad causada por un
alelo recesivo ligado al par sexual. Un hombre daltónico se casa con una mujer con visión
normal cuyo padre era daltónico.
¿Cuál es la probabilidad de que esta pareja tenga una hija que sea daltónica?
¿Cuál es la probabilidad de que el primer hijo de esta pareja sea daltónico? (nota que las dos
preguntas son ligeramente diferentes).

Tomado y adaptado de: Peifer 1997, Starr y Taggart 2004, Karp 2005, Curtis 1993. Por
Pablo Riera y Ronald Reesse.

Bibliografía:

Curtis H. 1993. Biología. Editorial Médica Panamericana. Buenos Aires. Argentina.

Karp, G. 2005. Biología Celular y Molecular. Conceptos y Experimentos. Mac Graw-


Hill.899p

Peifer R.W. 1997. Introduction to Biology: Laboratory exercises (Seventh Edition). Burgués
Publising. USA.

Starr C. y Taggart R. 2004. Biología: la unidad y diversidad de la vida (Décima edición).


Thomson. Méjico.

ACTIVIDADES DE REVISIÓN

EJERCICIOS DE MEIOSIS

Grafique la MI y MII de la antera de Lirio, en la que consten todas las fases de este forma de
reproducción, usando de la misma manera el campo óptico y los elementos relacionados que
uso para mitosis.

Debe desarrollar su informe relacionado con las prácticas de Mitosis, Meiosis y Herencia.

En otro documento debe completar y desarrollar el deber de genética y los ejercicios que pide
que se realicen de acuerdo a los datos para los cruzamientos pertinentes y al final llenar la
tabla sobre alelos dominantes y recesivos.

Laboratorio X
ABIOGÉNESIS Y EVOLUCIÓN

ABIOGÉNESIS
Para iniciar con esta práctica es importante conocer que el origen de la vida se da en un
planeta inhóspito, en formación, y con características de planetoide. No se tenía una
verdadera atmósfera. Su superficie aún estaba totalmente caliente debido a que el planeta aún
estaba en un proceso de enfriamiento. Se encuentran una serie de gases importantes para la
formación de moléculas vitales, tales como el metano, el acetileno, dióxido de carbono, vapor
de agua, compuestos nitrogenados. Estos gases estuvieron sometidos a presiones externas
como son las impresionantes descargas eléctricas, erupciones volcánicas, a más de los efectos
de los rayos UV e infrarrojos. Finalmente el planetoide estaba bajo los efectos que causan la
caída de meteoritos y asteroides dando un aspecto lunar al naciente planeta. Este tétrico
panorama descrito corresponde a nuestro planeta, que tiene una antigüedad de
aproximadamente 4 mil millones de años. Así vemos que las condiciones químicas y
ambientales de la Tierra temprana eran muy diferentes a las actuales y fueron cambiando a lo
largo de miles de millones de años.

Los primeros fundamentos de una explicación sobre el origen de la vida bajo estas
condiciones adversas del planeta Tierra en formación, abiogénesis, fue expuesta por A.I.
Oparin y J. Haldane, y recibió cierto soporte experimental por Stanley Miller en el año de
1953. En la mencionada teoría se indicaba que por efecto de la presencia de moléculas
inorgánicas y por efecto de energía tanto interna como externa, y la exposición a los rayos UV
e infrarrojos se obtuvieron nuevas moléculas: moléculas orgánicas. Miller obtuvo en sus
experimentos aminoácidos, que son las moléculas orgánicas clave que forman las proteínas, a
partir de moléculas inorgánicas como las que existieron en el ambiente primitivo de la tierra.
Así se probó que moléculas orgánicas se pueden formar de moléculas inorgánicas.
Posteriormente se han detectado aminoácidos en cuerpos estelares. Así la Tierra temprana
estaba llena de moléculas orgánicas, los bloques de la vida. Tales moléculas fueron luego de
un largo proceso abiótico formando las primeras protocélulas.

En la presencia de ácidos grasos y bajo las condiciones correctas de pH y temperatura


se originan vesículas permeables a sustancias más pequeñas. Estas vesículas también pueden
incorporar más ácidos grasos libres y así crecer. Estas vesículas al crecer adquieren una
forma tubular cuya superficie crece más rápido que su volumen. Estas vesículas son
susceptibles a romperse por fuentes de estrés exterior tales como olas, corrientes, choques con
rocas, etc. En este rompimiento mecánico no se pierde el contenido.

El origen del material genético es más complejo. En el principio existía una cantidad
de ácidos nucléicos que constituyen monómeros orgánicos que bajo ciertas condiciones
pueden auto polimerizarse. A través de interacciones como los enlaces de hidrógeno estos
polímeros se pueden autocopiar constituyendo una replicación abiótica y continuaron
extendiéndose. Esta replicación a veces no es una copia exacta (¿reproducción?). Así si unos
cuantos ácidos nucléicos quedaban atrapados al interior de una vesícula continuando con su
polimerización. Estas cadenas de ácidos nucléicos al someterse a cambios cíclicos de
temperatura tales como las encontradas en fumarolas hidrotermales marinas podían
fácilmente replicarse. Curiosamente vesículas con más polímeros de ácidos nucléicos son
más estables. Así vesículas más estables roban los lípidos de otras vesículas con menos
polímeros por tanto menos estables (procesos termodinámicos). En conclusión la formación de
entidades, estas vesículas, que se comportan con algunas de las características que usualmente
damos a organismos vivos tales como que requieren de energía, se nutren, se desarrollan, se
reproducen originando organismos no exactamente iguales, es posible.

Estos polímeros de ácidos nucléicos presentes en una vesícula autoreplicante no


contenían ninguna información. Sin embargo, algunos de estos polímeros eran más estables,
más adaptables a condiciones cambiantes del ambiente y así promovían que algunos sean más
perdurables que otros. Las mutaciones junto a la selección de que solo las más aptas
sobreviven, producen un incremento en la información, tanto en calidad como en cantidad.
Algunos de estos polímeros que subsistieron formaron estructuras secundarias que muestran
actividad catalítica (aceleran reacciones). De esta manera se da el paso para la creación de una
protocélula (protobionte o coacervado), en donde ARN podía no solo replicarse pero tenía
función de una enzima, a la que Cech la llamó ribozima. Vale aclarar que la teoría de la
evolución no tiene que ver con el origen de la vida y por ende, no trata de explicarlo.

Este ARN autoreplicante facilitó a través de un proceso de evolución la aparición de


las primeras células que contenían un ADN primitivo y que posteriormente dio origen a las
nuevas formas de vida, especialmente bacterias del tipo de cianobacterias, o a algunas
bacterias termófilas. Un ejemplo de fósil viviente son las kakabekias aún existentes en la
actualidad. También tenemos que ancestros muy similares a las cianobacterias actuales han
dejado su firma fósil en formaciones conocidas como estromatolitos, que no son más que
sedimentos generados por estos tipos de bacterias.

Debido a la actividad de estos organismos (por ejemplo cianobacterias) es que se


empieza a producir un cambio sustancial en nuestra atmósfera la que cambia de reductora a
oxidante y se inicia la formación del escudo protector de ozono. Es importante indicar que la
ausencia del oxígeno en la atmósfera primitiva permitió que las reacciones químicas
necesarias para la formación de las moléculas orgánicas pudiesen ocurrir. Con la nueva
atmósfera oxidante y procesos evolutivos se dan las condiciones donde se puede generar una
nueva serie de organismos unicelulares con núcleo. Muchas de estas formas de vida
primitiva son los ancestros comunes de los organismos actuales.

Evolución

Introducción. – Evolución es cualquier proceso de cambio, en biología es el cambio en las


características genéticas de una generación a otra en una población.
La evolución explica fenómenos como:
•El origen de la gran diversidad de organismos en el Planeta.
•El inmenso set de adaptaciones desarrolladas por las diferentes especies.
•El cambio de las especies fósiles a través de los estratos geológicos y su diferencia con las
especies vivientes (Valle 2008).

Evidencias de Evolución:
Evolución como teoría (mecanismos): En términos generales está bien establecida pero en
términos específicos y a una micro escala siempre está en proceso de refinamiento y
descubrimiento.

Evolución como Hecho (observado/ inferido): se manifiesta en el hecho de que las especies
cambian y que descienden de un ancestro común: Ej. Fósiles y organismos vivientes (Valle
2008).
• Fósiles: evidencian la evolución mediante el hecho de la extinción, la ‘Ley’ de la Sucesión,
líneas (linajes) evolutivos.
• Órganos vestigiales: se manifiestan
en características anatómicas (órganos y
estructuras), en el desarrollo embrionario y a
nivel molecular (pseudo genes). Ej. Cóccix en
los humanos.

Fotografía 1: Fósil de Caracol Puacamarca San


Cajamarca Perú (Marceliano, 2011)

Evidencias del ancestro común se han obtenido a partir de estudios de:


• Biogeografía
• Homologías: el mismo órgano bajo diferentes formas y funciones en diferentes animales
como lo mencionó Richard Owen.
• Árbol Filogenético: muestra las relaciones de evolución entre varias especies u otras
entidades que se cree que tuvieron una descendencia común Ej. Pinzones de Darwin.

El Origen de las Especies

Antes de Darwin y Wallace existieron otros científicos que realizaron estudios sobre
evolución. Por ejemplo, en la antigua Grecia ya se explicaban el origen de la vida en las
ideas de filósofos como Anaximandro, Aristóteles, o Empédocles (Valle 2008). Otros
científicos que estudiaron la evolución posteriormente fueron Platón, Tomas de Aquino,
George-Louis Leclerc, Carolus Linnaeus.

Jean Baptist de Lamarck formuló las primeras ideas de la teoría de la evolución postulando
como mecanismo de evolución una modificación gradual y un ancestro común (Valle 2008).

En 1831 Charles Darwin se integró como naturalista a la tripulación del barco de la marina
inglesa “HMS Beagle”, que realizaría una expedición de exploración alrededor del mundo
durante 5 años. Este viaje fue esencial en el pensamiento de Charles Darwin.

En las islas Galápagos, Charles Darwin quedó muy impresionado por las especies de
animales que vio y, sobre todo, por las sutiles diferencias entre los pájaros (Pinzones) de las
islas del archipiélago. A partir de estas observaciones, Darwin se dio cuenta que estas
diferencias podían estar conectadas con el hecho de que cada especie vivía en un medio
natural distinto, con distinta alimentación. En ese momento comenzó Darwin a delinear sus
dos básicas ideas acerca de la evolución:

1. Descendencia con modificación: todas las especies han descendido, sin interrupción, de una
o pocas formas originales de vida.

2. Selección Natural: cuando hay una característica variable, en una población donde los
descendientes son numerosos y no todos pueden sobrevivir, características específicas
pueden conferir un nivel de aptitud evolutiva diferente. Para esto es necesario que la
característica variable sea hereditaria. Cada forma de la característica corresponde a un alelo
distinto.

Ejercicio # 1

Materiales y Métodos

Representación de plastilina de un organismo X

Una vez recibido el material deberán trabajar usando las instrucciones en el laboratorio para
obtener organismos diferentes a los progenitores, en donde se evidencie los cambios
relacionados evolución, es decir deberán aplicar los conceptos de analogías, homologías,
biogeografía, selección natural.
Tomado y adaptado de: Valle, 2008.
Por Roland Reese

Bibliografía:

Valle, C. 2008. Maestría de Ecología. Universidad San Francisco de Quito. Documentación


clases Evolución.

ACTIVIDAD DE REVISIÓN

Como parte de la tarea para esta práctica deberás traer ejemplos y significado de los
Analogías, Homologías, Selección Natural, Biogeografía, Ecosistemas, Hábitat.
Laboratorio XI
LA CLASIFICACIÓN DE LOS SERES VIVOS (TAXONOMÍA, CLAVES
TAXONÓMICAS, CLASIFICACIÓN ACTUAL EN BASE A DOMINIOS)

Introducción. – La taxonomía es, la ciencia de la clasificación. Habitualmente, se emplea el


término para designar a la taxonomía biológica, la ciencia de ordenar a los organismos en un
sistema de clasificación compuesto por una jerarquía de taxones anidados.

Se sabe que en la tierra existen más de 5 millones de especies, de las cuales nosotros los seres
humanos sólo conocemos la ínfima parte de estos. La taxonomía ordena, describe y clasifica a
todos los seres vivos, teniendo como la unidad de una clasificación a la especie.

Estudiosos como Aristóteles clasificaban a los organismos


en 3 reinos, luego Carlos Linneo los clasificó en 3
categorías rigiéndose por la creación divina, dándole
prioridad al hombre. La Taxonomía de Linneo o
Taxonomía Linneana clasifica a los seres vivos en
diferentes niveles jerárquicos, comenzando originalmente
por el de Reino.

Hoy, se considera el Dominio como una jerarquía suprarreinal, dada la reciente necesidad de
incluir también a Bacterias y a Arqueas.

Los reinos se dividen en Filos o Phyla (en singular, Phylum)


para los animales, y en Divisiones para plantas y otros organismos.

Éstos se dividen en Clases, luego en Órdenes, Familias, Géneros y Especies.

La clasificación se basa en registros fósiles, estudios moleculares de ADN, colecciones de


campo, entre otros. Por esta razón la clasificación que se expone a continuación debe ser
considerada como una referencia sujeta a cambios.

Una clasificación general en taxones superiores para los seres vivientes puede ser:

Ejemplos Clasificación Taxonómica


Reino: Animalia (Organismos heterótrofos eucariotas sin pared celular y pluricelulares)
Phylum: Chordata (Organismos, primitivamente, con notocorda)
Clase: Mammalia (Organismos con glándulas mamarias, funcionales en las hembras, que
secretan leche para la nutrición de la cría. Homeotermos y con pelo)
Orden: Primates (Ojos frontales, pulgar oponible)
Familia: Hominidae (Cerebro desarrollado y con neocórtex, visión estereoscópica)
Género: Homo (Espina dorsal curvada, posición bípeda permanente)
Especie: Homo sapiens (huesos craneales delgados, capacidad vocalizadora)

REINO: Animalia
PHYLUM: Chordata
SUBPHYLUM: Vertebrata CLASE:
Reptilia.
ORDEN: Squamata.
SUBORDEN: Sauria (Lacertilia).
FAMILIA: Iguanidae.
GÉNERO: Iguana
ESPECIE: iguana.
Nombre común: Iguana, iguana verde, iguana común.

Reino: Animalia Phylum:


Chordata Subphylum:
Vertebrata Clase:
Chondrichthyes Subclase:
Elasmobranchii Orden:
Orectolobiformes Familia:
Rhincodontidae Género:
Rhincodon Especie: typus
Nombre común: Tiburón Ballena

Taxonomía Moderna

A causa de las dudas que puedan surgir por los métodos tradicionales se aplican diferentes
técnicas como: metodología fenética numérica y metodología cladística.

Fenética numérica: Se agrupan a los organismos de acuerdo a sus características, luego toda
esta información se ingresa a computadoras, luego se comparan y se ven sus posibles
relaciones. La diferencia entre homología y analogía no se tienen en cuenta.

Un ejemplo para explicar esto es el siguiente: un cocodrilo se parecería más a un hombre que
a una serpiente por poseer 5 dedos, el cocodrilo se parecería a la serpiente al ver las demás
características.

Cladística: Estudia las relaciones evolutivas, incluyendo a todos los descendientes que
tengan las características de un ancestro común (taxón holofilético). La cladística se basa en la
parsimonia que son dos hipótesis, donde es más probable de ser cierta aquella que presente
menos cambios evolutivos.

La excesiva simplificación de características en realidad no son sencillas y discretas, en las


características evolutivas intervienen múltiples procesos y órganos que no son tomados en
cuenta.

Desde el 2000 se ha vuelto a poner de moda la ciencia taxonómica en el ambiente científico,


debido en parte a las aproximaciones revolucionarias a los problemas taxonómicos
proporcionados por el análisis de ADN, y en parte debido a la conciencia de su utilidad,
debido a la crisis de biodiversidad que estamos viviendo. Las nuevas herramientas
disponibles generan un debate acerca de la utilidad de las reglas de la taxonomía tal como
está hoy en día, y se preguntan acerca de la necesidad de reformar los Códigos de
Nomenclatura Zoológica y Botánica.

Las secuencias de ADN se utilizan cada vez más en los análisis filogenéticos debido a que
unos pocos cientos de bases, con su cantidad enorme de combinaciones potenciales, bastan
para hacer análisis de identificación y parentesco. Por eso algunos autores proponen un rol
central del ADN en la definición de las especies, de forma que una muestra de ADN y la
lectura de su secuencia de bases deberían ser uno de los caracteres del espécimen tipo, y una
especie de marca para el taxón al cual pertenece el espécimen.

CLADOGRAMA
Un cladograma es una diagramación de la clasificación taxonómica de un grupo de
organismos. A través de un análisis cladístico indica las relaciones entre especies a través del
tiempo y se constituyen en importantes herramientas para entender procesos evolutivos y
filogenéticos. Se diferencian de un pedigrí o un genograma porque contienen solamente
descendencias hipotéticas de varias especies y no de una sola. Observa los ejemplos a
continuación de dos cladogramas tomados de Wikipedia.com

Clasificación Binomial

Esta es una forma de clasificación que distingue a los individuos a través de la elección de
entre dos posibilidades hasta llegar a un resultado final (que en la práctica sería el de
ESPECIE) cuando se ha elaborado un árbol filogenético o cladograma es más factible la
construcción de las claves, esto debido a que siempre se van elaborando en base a dos ramas
por cada clado. En el ejercicio entenderás esto con claridad.

Clave Pareada
Ejemplo
1. De material de hierro........................................................... 2
1. De otro material que no es hierro........................................ 6
2. Largo.................................................................................... 3
2. Redondo............................................................................... 5
3. Sin cabeza........................................................................... Pedazo alambre
3. Con cabeza.......................................................................... 4
4. Liso...................................................................................... Clavo madera
4. Con rosca............................................................................ Tornillo metal
5. Orificio central liso............................................................. Arandela lisa
5. Orificio central estriado.......................................................Tuerca hexagonal
6. Redondo sin orificios centrales............................................ Botón ornamental
6. Con cuatro orificios centrales............................................... Botón camisa

División del Filum Artropoda en Taxones

Ejemplo
Clasifique los cinco artrópodos tomados en cuenta utilizando la clave pareada que los separa
en las distintas clases. (Araña, escarabajo, camarón, cien pies, mil pies)

1. Tórax con tres pares de patas articuladas........................ Insecto


(Segmento colocado entre la cabeza y el abdomen, o cefalotórax)
1. Más de tres pares de patas.............................................. 2
2. Cuatro pares de patas articuladas................................... Arácnida
2. Más de cuatro pares de patas.......................................... 3
3. Dos pares de antenas...................................................... Crustácea
3. Un par de antenas.......................................................... 4
4. Dos pares de patas en cada segmento del cuerpo........... Diplopoda
4. Un par de patas en cada segmento del cuerpo................ Chilopoda

MANEJO DE CLAVES

Como hemos explicado las claves son instrumentos indispensables para el análisis
taxonómico. Constituyen una representación de los caracteres propios de un conjunto de taxa,
que organizados de una manera determinada, permiten ubicar, separar o diferenciar cada uno
de esos taxa.

En la elaboración de una clave se deben evaluar, seleccionar y organizar los caracteres de una
manera cuidadosa, respetando en lo posible las normas que se detallan a continuación:

• Una clave debe ser estrictamente dicotómica, es decir, utilizar solamente dos alternativas
excluyentes en cada una de las entradas. Se deben emplear caracteres externos, fácilmente
conservables y que sean constantes, expresados de manera que no se presten a ambigüedad.

• La clave debe poder aplicarse a todos los individuos de un taxón (especie, género, familia,
etc.) sin distinción de edad o sexo. Estos requisitos raramente se cumplen plenamente, pero la
clave refleja el conocimiento que su autor tiene sobre los taxa que trata de separar, por lo cual
es arbitrario y solo representa un medio práctico de asegurar la determinación de un taxón
cualquiera.
Es necesario distinguir entre las operaciones de clasificar y de identificar. La clasificación su-
pone la construcción de un sistema de taxones dispuestos en una jerarquía y el
establecimiento de los caracteres respectivos de cada uno de los taxa subordinados.

La identificación consiste en la ubicación de uno o más ejemplares problema en los taxones de


una determinada clasificación preexistente, para lo cual es sumamente útil la utilización de las
claves taxonómicas.

Podemos distinguir dos tipos de claves taxonómicas que se basan en los mismos datos, pero
que se ordenan de forma diferente: claves de alternativas subordinadas (también llamadas
claves dentadas) y claves de alternativas apareadas (claves pareadas).

A continuación, se dan ejemplos de los dos tipos de claves para dos casos distintos. Observe
que las claves de alternativas subordinadas agrupan a taxa con características similares de tal
manera que se pueden visualizar como un mismo grupo, mientras que las claves con
alternativas no pareadas siempre llevan un par de proposiciones contrastantes una después de
la otra.

Clave dentada I
1A.Tallo lignificado...................................................................... 2
2A. hojas simples....................................................................... 3 3A.
hojas opuestas...................................................... especie a
3B. hojas alternas....................................................... especie c
2B. hojas compuestas....................................................... especie d
1B.Tallo no lignificado..................................................... especie b

Clave pareada I
1A.Tallo lignificado.................................................................. 2
1B.Tallo no lignificado............................................................. especie b
2A.Hojas simples...................................................................... 3
2B.Hojas compuestas................................................................ especie d
3A.Hojas opuestas..................................................................... especie a
3B.Hojas alternas....................................................................... especie c

Nota: En la clave pareada las parejas de números pares pueden indentarse si prefieren (ver
clave pareada II).

Clave dentada II
1A.Flor Actinomorfa............................................................... 2
2A. Ovario apocárpico......................................................... especie c
2B. Ovario sincárpico.......................................................... especie a
1B.Flor zigomórfica................................................................. 3
3A. Flor trímera.....................................................................especie b
3B. Flor tetrámera.................................................................especie d

Clave pareada II
1A.Flor actinomorfa....................................................................... 2
1B.Flor zigomorfa.......................................................................... 3
2A.Ovario apocárpico................................................................. especie c
2B.Ovario sincárpico...................................................................especie a
3A.Flor trímera............................................................................especie b
3B.Flor tetrámera.........................................................................especie d
Tabla de caracteres
Esta tabla de caracteres es de suma importancia, pues la podemos usar para obtener
características de los organismos y luego pasarla a la elaboración de claves taxonómicas
representadas anteriormente a este cuadro.

Ejercicio # 1

Materiales y Métodos

Material plástico con invertebrados


Material plástico con la clase Anfibia

Una vez organizados los grupos se procederá a entregar el material referido.

Los grupos deben iniciar su trabajo con la respectiva observación de cada muestra, con el
fin de extraer caracteres similares o caracteres disímiles, e ir listando.

Luego de obtener la lista de caracteres, ir armando la clave de identificación que servirá


para que cada grupo intercambie sus claves y puedan ir identificando las muestras que
tienen en cada grupo.

Una vez terminadas las claves cada uno debe tener su clave y entregar al profesor una
copia de las claves elaboradas en cada grupo.

Observa las muestras de tu mesa de laboratorio y escoge tres características para cada una de
las muestras que pudiesen servir dentro de una clave de identificación, luego escoge dos más
comunes o lo opuesto.

Encontraste en el campo algunos especímenes del Reino Animal. Explica que características
morfológicas podrías usar para distinguir a un pez, de un mamífero, de un reptil y de un ave.
Recuerda MORFOLÓGICAS, compáralos en un cuadro de caracteres.

CARACTERÍSTICAS DE DOMINIO, REINO, FILUM

CLASIFICACIÓN DE LAS CÉLULAS

Introducción. – Las células se han clasificado en dos grandes grupos de acuerdo a la


presencia o ausencia de núcleo verdadero: células procariontes y células eucariontes.
Procariontes
Los procariotas conforman el grupo más antiguo y abundante sobre la Tierra.

Pueden sobrevivir en muchos ambientes que no toleran otras formas de vida, por ejemplo en
las extensiones heladas
de la Antártida, en
las oscuras profundidades
del océano y en las aguas casi
hirvientes de las fuentes
termales naturales pueden
sobrevivir sin oxígeno libre,
obteniendo su energía por
procesos anaerobios y si las
condiciones le son
desfavorables, pueden formar
esporas de paredes gruesas
(formas resistentes inactivas)
que les ayuden a permanecer
latentes durante años.

El éxito de los procariotas se debe a su gran diversidad metabólica y a su rápido ritmo de


división celular.
Desde un punto de vista ecológico, son los más importantes descomponedores que degradan el
material orgánico para que pueda ser utilizado por los vegetales.

Desempeñan un papel importante en el proceso de fijación del nitrógeno. Aunque este abunda
en la atmósfera, los eucariotas no son capaces de utilizar el nitrógeno atmosférico, por lo que
el primer paso crucial en la incorporación del nitrógeno a los compuestos orgánicos depende
principalmente de ciertas especies de procariotas. Algunos procariotas son fotosintéticos, y
unas pocas especies son a la vez fotosintéticas y fijadoras de nitrógeno como es el caso de
algunas cianobacterias.

Eucariontes

Las células eucariotas son el tipo de células menos antiguo que existe. Se cree que estas
surgieron por evolución de algún tipo de célula procariota primigenia, gracias a un
mecanismo denominado endosimbiosis. Las características de este tipo de células son:

-Puede formar tanto organismos unicelulares (protistas) como pluricelulares (hongos,


vegetales y animales).

-Poseen un núcleo diferenciado, rodeado por una membrana nuclear, dentro del cual se
encuentra todo el material genético agrupado en cromosomas. -Se alimentan por endocitosis.
-Poseen una cantidad elevada de orgánulos diferentes, cada uno con una función
determinada: ribosomas, mitocondrias, cloroplastos, aparato de Golgi, centríolos, lisosomas,
etc.

-Se reproducen por división celular (mitosis), en la cual se produce un reparto equitativo de
material genético y orgánulos entre las células resultantes del proceso de división.

-En las células de los hongos y los vegetales hay pared celular, sin embargo en el resto de las
células eucariotas no existe pared celular. En estos casos solo una membrana celular separa el
medio interno del externo en una célula.
Origen de los eucariotas: Existen varias propuestas e hipótesis acerca de este tema, siendo la
más aceptada aquella denominada hipótesis de los simbiontes (hipótesis endosimbiótica).
Según la misma, los orgánulos provistos de ADN de los eucariotas (mitocondrias y plastos) se
habrían originado a partir de procariotas que vivían libremente y que, probablemente por
fagocitosis, se introdujeron en las células de eucariotas primitivos como simbiontes
intracelulares.

Las células fagocitadas quedan rodeadas por una doble membrana en el plasma de la célula
depredadora. Esta doble membrana corresponde: su parte interna a la membrana plasmática de
la célula depredadora para rodear a la célula fagocitada. Tras la fagocitosis, las partículas
alimenticias absorbidas suelen ser digeridas por los lisosomas, formándose vacuolas
digestivas, sin embargo en algunos casos las células fagocitadas sobreviven en la célula
depredadora en forma de simbiontes o parásitos, logrando incluso multiplicarse en ella. Así se
originarán los plastos y mitocondrias limitados por una doble membrana.

Según la hipótesis endosimbiótica, formulada inicialmente por Andreas Franz Wilhelm


Schimper en 1883, las diferentes estructuras y orgánulos de los eucariotas se habrían
originado como se explica a continuación.

1. Las mitocondrias de los eucariotas tienen su origen en eubacterias, antiguamente de vida libre,
que respiraban y poseían su propio ADN.

2. Los plastidios de los eucariotas tienen su origen en proclorófitos (cloroxibacterias) o


cianófitos (cianobacterias).

3. Las membranas dobles de las mitocondrias y plastidios corresponden, las externas a las
membranas fagocíticas de las vacuolas y las internas a las plasmáticas de las células
procarióticas fagocitadas.

Los procariotas (protocitos) son los hipotéticos organismos en cuyas células se introdujeron
los procariotas que posteriormente dieron origen a los orgánulos celulares provistos de ADN.
Por tanto, sus células carecerían de plastos y de mitocondrias aunque presentarían ya las
características esenciales de las células eucarióticas. Algunos indicios llevan a suponer que los
procariotas han evolucionado a partir del grupo de arqueobacterias.

La hipótesis endosimbiótica no se pronuncia sobre ciertos cambios que debieron de tener lugar
al mismo tiempo que la aparición de los orgánulos celulares mencionados, como son, entre
otros, la creación del núcleo, la aparición de cromosomas o la capacidad de realizar la mitosis
y meiosis. No obstante, esta hipótesis ha tenido una enorme difusión y ha arrojado cierta luz
acerca de la aparición de los actuales organismos, en la que intervendrían no sólo fenómenos
de mutación y/o recombinación genética, sino también la formación esporádica de
endosimbiosis estables.

Los hechos a favor de la hipótesis o teoría endosimbiótica, se puede desglosar en los


siguientes apartados:

• La capacidad de multiplicación independiente de plastidios y mitocondrios.


• La estructura de la membrana externa de una célula eucariótica es distinta de las de los
plastidios y mitocondrios.
• Mitocondrios y plastidios tienen su propio ADN (distinto al del núcleo), el cual, con su
forma filamentosa, correspondería a las moléculas circulares de ADN de los procariotas
recientes.

ESTRUCTURA TÍPICA DE CÉLULA VEGETAL

ESTRUCTURA TIPICA DE CELULA ANIMAL

DOMINIO DE BACTERIAE (EUBACTERIA)

Reino de las Eubacterias


A las eubacterias también se les conoce como “bacterias verdaderas”, son organismos
microscópicos que tienen células procariotas. A causa de sus células procariotas, tienen una
pared celular rígida pero no tienen mitocondria u otros organelos grandes; tan sólo tienen un
cromosoma, el cual no se encuentra en el núcleo. La mayoría de ellas se reproducen
asexualmente.
Las cianobacterias, también conocidas como algas verdeazules, son eubacterias que han
estado viviendo sobre nuestro planeta por más de 3 mil millones de años. Esta bacteria crece
en esteras y montículos en las partes menos profundas del océano. Hoy en día sólo se las
encuentran en algunas regiones, a pesar de que hace miles de millones de años las había en tan
gran número que eran capaces de añadir, a través de la fotosíntesis, suficiente oxígeno a la
primitiva atmósfera de la Tierra, como para que los animales que necesitaban oxígeno
pudieran sobrevivir.
Ciertos tipos de eubacteria representan un problema para la salud de las personas. Por
ejemplo, la bacteria estreptococo puede ser responsable de una angina. Si un estafilococo
llegara a penetrar en la piel a causa de una cortada, podría causar una infección llamada
infección por estafilococo. Algunas veces, en carnes y huevos mal cocidos, hay unas
bacterias llamadas Escherichia.coli y Salmonella, éstas pueden hacer que las personas
enfermen.

Los fila principales de Eubacteria son:

1. Cianobacterias: Bacterias fotosintéticas rodeadas por una cubierta pigmentada, son


comunes en tierra y océanos.
2. Espiroquetas: Estos organismos se mueven por movimientos espirales y son causantes de
muchas enfermedades.
3. Bacterias Proteolíticas: Un grupo grande de bacterias aeróbicas y anaeróbicas gram negativas,
son de vida libre.

DOMINIO DE LAS ARQUEOBACTERIAS (ARCHEOBACTERIAS)

Reino de las Archeobacterias

Las arqueas son microorganismos unicelulares que carecen de núcleo y son por tanto
procariontes, pero las diferencias a nivel molecular entre arqueas y bacterias las clasifica en
grupos distintos. Actualmente se considera que las archaea están filogenéticamente más
próximas a los eucariontes que a las bacterias.

Las archaea fueron descubiertas originariamente en ambientes extremos, pero desde entonces
se las ha hallado en todo tipo de hábitats y podrían contribuir hasta el 20% de la biomasa. Son
particularmente comunes en los océanos y pueden ser uno de los grupos más abundantes de
organismos en el planeta.

Archaea constituye uno de los dominios en los que se dividen los seres vivos. Antiguamente se
clasificaban como reino Mónera en la taxonomía tradicional de los cinco reinos.

La sistemática de las arqueas no está completa y las diferencias entre algunos grupos son muy
grandes.

Se conocen unos 100 géneros y unas 300 especies de archaea. Se proponen cuatro filos
comprendiendo los dos primeros la mayor parte de las especies conocidas:

• Crenarchaeota. Comprende a la mayoría de las especies hipertermófilas. Muchas son


autótrofas quimiosintéticas, constituyendo los únicos productores primarios en ciertos
hábitats inhóspitos.
• Euryarchaeota. Comprende a las que se encuentran en concentraciones salinas altas y que
pueden obtener su energía de la luz, sin ningún pigmento clorofílico. También se clasifican
dentro de este clado los metanógenos que habitan los sedimentos acuosos y en el tracto
digestivo de diversos animales.
• Korarchaeota. Es un pequeño grupo de hipertermófilas (encontradas en el parque
Yellowstone), filogenéticamente diferentes a las Crenarchaeotas y que se consideran las
archaea más primitivas.

• Nanoarchaeota. Es un taxón especialmente creado para la especie Nanoarchaeum equitans,


descubierta en 2002 y cuyas relaciones de parentesco son inciertas.

Se debe tomar en cuenta que, aunque los dos primeros filos están firmemente establecidos, los
dos restantes comprenden pocas especies mal conocidas y son dudosos. Dado el escaso
conocimiento actual sobre las especies de este dominio, el número de filos puede aumentar
con rapidez. Muchos de estos hipotéticos grupos son conocidos por una única secuencia de
ARNr, lo que indica que la gran mayoría de la diversidad de estos organismos sigue siendo
completamente desconocida. Este problema de cómo abordar el estudio y clasificación de
microorganismos (bacterias) no cultivados es común en todos los procariontes.

DOMINIO DE LAS EUCARIOTAS (EUKARYA)

Reino de los protistas

El grupo de organismos que se encuentran en este dominio es de suma importancia, además


muy diverso, e incluye tanto a protozoarios como algas unicelulares o pluricelulares incluidas
en este grupo debido a un tipo de estructura simple y su relación con las formas unicelulares,
comparten características específicas de los Eucariotas, es decir presentan entre sus organelos
un núcleo verdadero. El término fue usado por Ernst Heinrich Haeckel debido a las
similitudes que poseen y la dificultad para separar a unicelulares animales de vegetales.

Estos organismos los encontramos como unicelulares, agregados celulares o pluricelulares con
una increíble diversidad de formas, comparten características fundamentales de organización
celular, bioquímica y a nivel molecular (estructura de los lípidos, proteínas y genoma) y
comparten un origen común).

Los protistas no tienen una línea establecida en donde se inicia el taxón, tampoco en donde
finaliza, pues abarca un grupo muy grande que tiene muchas diferencias por ejemplo en la
forma de nutrición, así algunos tienen un tipo autótrofo de nutrición al parecerse a las plantas
y realizar fotosíntesis, otros son heterótrofos al fagocitar su alimento o al absorber nutrientes
similar a los hongos. Presentan diversas estructuras para su movimiento como la formación
de pseudópodos (extensión o retracción de la membrana celular ayudados por proteínas),
también aparece la presencia de flagelo o grupo de flagelos, o la presencia de cilios que
recubren todo el cuerpo del organismo unicelular.

La gran mayoría tiene respiración aeróbica, sin embargo existen algunos protistas que
presentan una respiración anaeróbica, al presentar alguna adaptación a ambientes pobres en
oxígeno. En cuanto a su reproducción pude ser sexual (meiosis), asexual (mitosis), o como en
el caso de las algas, de acuerdo con las condiciones de su hábitat, pueden reproducirse
sexualmente o a veces asexualmente, esta condición se la conoce como alternancia de
generaciones.

Las encontramos en ambientes acuáticos o también desarrollándose en ambientes terrestres


húmedos.

Reino Plantae
Inicialmente la diversidad de los seres vivos fue categorizada como perteneciente
exclusivamente a dos reinos: el de los animales (“Animalia”) y el de las plantas (“Plantae”).
Hasta fines del siglo XIX eran los dos únicos reinos en los que se agrupaban los seres vivos, y
cada grupo nuevo era catalogado bien como animal, o bien como planta. Debido a eso, fueron
circunscriptos como “plantas” una diversidad de grupos que actualmente están
ubicados en otros reinos, porque conjuntamente poseían la única característica común de no
ingerir alimentos como lo hacían los animales.

Con el advenimiento del conocimiento de que ni todos los autótrofos, ni todos los
heterótrofos que fagocitan o ingieren tenían un respectivo antecesor común porque esas
formas de vida se habían generado muchas veces entre los seres vivos, el uso de técnicas más
avanzadas como la microscopía de luz junto con el uso de técnicas bioquímicas para la
identificación de organismos, surgió la necesidad de modificar el número de reinos para
agrupar organismos que ya no eran tan similares según la nueva visión. Así fue rápidamente
aceptada la existencia de 5 reinos.

De los tradicionales reinos Animalia y Plantae se fueron escindiendo los reinos Mónera, que
agrupa a todos los procariotas incluyendo a las cianobacterias; Fungi, que agrupa a todos los
comúnmente conocidos como “hongos”, y Protista, que agrupa a todos los eucariotas
unicelulares.

Por lo tanto, los primeros grupos en ser “desterrados” del Reino Plantae fueron las
cianobacterias y los hongos que fueron derivados a otros Reinos; así como algunos
organismos que eran fotosintéticos pero unicelulares fueron ubicados en el reino Protista.

Debido a las dificultades para estudiar a las Protistas, y a la falta de análisis genéticos que
dieran idea de sus posibles parentescos, Protista fue creado más para ubicar en algún lugar a
los organismos que no se sabía qué parentesco tenían con el resto, y no porque se creyera que
tuvieran un antecesor común.

Plantas terrestres y algas

Entonces quedó como parte del reino Plantae lo que comúnmente conocemos como “plantas
terrestres y algas”. Definir al reino Plantae a través de sus características se volvió más fácil:
pertenecen al reino Plantae todos los organismos eucariotas multicelulares que obtienen la
energía para crecer y realizar sus actividades de la luz del Sol, energía que toman a través del
proceso de fotosíntesis, proceso que ocurre en sus cloroplastos con ayuda de alguna forma de
clorofila. Esto no es óbice para que algunas de ellas, secundariamente, hayan evolucionado
hacia una adaptación al saprofitismo, al hemiparasitismo o al parasitismo.
Fig1. Filogenia de Dominios hasta plantas verdes
Reino Fungi

En biología, el término Fungi (latín, literalmente “hongos”) designa un reino que incluye a los
organismos celulares sin cloroplastos y por lo tanto heterótrofos que poseen paredes celulares
compuestas por quitina y células con especialización funcional actualmente se consideran
como un grupo heterogéneo, polifilético, formado por organismos pertenecientes por lo menos
a tres líneas evolutivas independientes. La especialidad de la medicina y de la botánica que se
ocupa de los hongos se llama micología donde se emplea el sufijo mycota para las divisiones
y mycetes para las clases.

Los hongos son organismos eucarióticos que realizan una digestión externa de sus alimentos,
secretando enzimas, y que absorben luego las moléculas disueltas resultantes de la digestión.
A esta forma de alimentación se le llama osmotrofia, la cual es similar a la que se da en las
plantas, pero, a diferencia de aquéllas, los nutrientes que toman son orgánicos. Los hongos son
los descomponedores primarios de la materia muerta de plantas y de animales en muchos
ecosistemas, y como tales se ven comúnmente en alimentos en descomposición.

Los hongos pueden estar simbiotizados, basados en asociaciones con algas líquenes o con otro
grupo en forma de micorrizas, los hongos acompañan a la mayor parte de las plantas,
residiendo en sus raíces y ayudándolas a absorber nutrientes del suelo. Se piensa que esa
simbiosis fue esencial para la conquista del medio terrestre por las plantas y para la existencia
de los ecosistemas continentales.

Clasificación actual del reino de los hongos

* Quitridiomicetes (división Chytridiomycota).


* Zigomicetes (división Zygomycota).
* Glomeromicetes (división Glomeromycota).
* Basidiomicetes (división Basidiomycota).
* Ascomycetes (división Ascomycota).
Fig2. Formas y estructuras de los Hongos
Reino Animalia

El reino Animalia (animales) constituye un amplio grupo de especies eucariotas, heterótrofas y


pluricelulares pero existen grupos parásitos y detritívoros. Se caracterizan, en general, por su
capacidad para la locomoción, por la ausencia de pared en sus células y de clorofila y por su
desarrollo embrionario que atraviesa una fase de blástula y determina un plan corporal fijo
aunque muchas especies pueden sufrir posteriormente metamorfosis. Los representantes del
reino animal se reproducen de manera sexual, pero existe también la reproducción asexual.

Los animales tienen cuerpos diferenciados en tejidos separados. Estos incluyen músculos, que
pueden contraerse para controlar el movimiento, y un sistema nervioso, que envía y procesa
señales. Suele haber también una cámara digestiva interna, con una o dos aberturas. Los
animales con este tipo de organización son conocidos como Eumetazoos, en contraposición a
los Parazoos y Mesozoos, que son niveles de organización más simples dentro de los
Metazoos ya que carecen de algunas de las características mencionadas.

Todos los animales tienen células eucariontes, rodeadas de una matriz extracelular
característica compuesta de colágeno y glicoproteínas elásticas. Ésta puede calcificarse para
formar estructuras como conchas, huesos y espículas. Durante el desarrollo del animal se crea
un armazón relativamente flexible por el que las células se pueden mover y reorganizarse,
haciendo posibles estructuras más complejas. Esto contrasta con otros organismos
pluricelulares como las plantas y los hongos, cuyas células permanecen el sitio mediante
paredes celulares, que desarrollan un crecimiento progresivo.
Todos los animales son heterótrofos, es decir no son capaces de producir su propio alimento,
siendo esta característica lo que lo diferencia del reino vegetal. Los animales se clasifican en
dos grandes grupos: vertebrados e invertebrados.

ACTIVIDADES DE REVISIÓN

Entregue los resultados en relación a semejanzas y diferencias encontradas por usted en


la práctica, y en base a éstas generar la respectiva clave taxonómica para los dos grupos
con los que trabajaron. Adicionalmente obtener de datos electrónicos un clado de
dinosaurios y elaborar la respectiva clave taxonómica con las características de estos
grandes reptiles.
Explica y contesta lo siguiente:

•Autótrofo (ejemplo)
•Heterótrofo (ejemplo)
•Detritívoro (ejemplo)
•Omnívoro (ejemplo)
•Un ejemplo de reproducción asexual en animales.
•Un ejemplo de reproducción asexual en plantas.
•Dos ejemplos de reproducción asexual en protistas
•Sedentario
•Taxón
•Un ejemplo con las categorías taxonómicas de cada dominio y reinos.

Entregar un resumen del contenido de este laboratorio al inicio de la práctica respectiva


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Bacteria Archaea Eukarya !"
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Bacteria Myxomycota a,
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Clanobacteria Ciliophora

Planctomyces Thermoproteus Flagelados


Pyro di cticu
Bacteroides_
Trlcomonadas
Cytophaga
Mlcrosporidlas
-
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Thermotoga - ' Olplomonadas

Aquifex
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