INSTITUTO POLITECNICO NACIONAL.

ESCUELA NACIONAL DE CIENCIAS BIOLOGICAS.

DEPARTAMENTO DE INGENIERIA BIOQU IMICA.
ACADEMIA DE FERMENTACIONES.

LABORATORIO DE BIOINGENIERIA I.

PRACTICA 3: OBTENCION DE LAS CONSTANTES

DE MODELOS CINETICOS DE CRECIMIENTO Y
CONSUMO DE SUSTRATO.

INTEGRANTES:

 Contreras Reyes Edwin.

 Desiderio Alvarado Addi.
 García Bernabé Amado Jovanni.
 Rangel Olguín Juan Ángel.
 Valdés Zárate Vanesa.
 Villa Pérez Vanesa.

GRUPO: 7IV1.

PROFESOR: M. en C. María Isabel Ambriz Mexicano.

Octubre, 2017.
OBJETIVOS

Determinar las constantes cinéticas de los modelos de crecimiento y consumo de sustrato

de Candida utilis Y-900 en cultivo continuo.

RESULTADOS

Cuadro 1. Parámetros cinéticos de crecimiento en cultivo continuo de Candida utilis Y-900

X[g/L] S[g/L] D(h- Sr-s qs[gsust/gcelL] Rc Yxs 1/µ 1/S

1) (gcel/Lh) (gcel/gsus)

1.235 0.011 0.116 1.989 0.1868 0.1432 0.6209 8.6206 90.909

1.22 0.0115 0.165 1.9885 0.2689 0.2013 0.6135 6.0606 86.9565

1.17 0.03 0.222 1.97 0.3738 0.2597 0.5939 4.5045 33.333

1.11 0.053 0.25 1.947 0.4385 0.2775 0.5701 4 18.8679

1.26 0.06
1.24
0.05
1.22
0.04
1.2

S[g/L]
x[g/L]

1.18 0.03
1.16
0.02
1.14
0.01
1.12
1.1 0
0 0.05 0.1 0.15 0.2 0.25 0.3
D(1/h)

Biomasa sustrato

Figura 1. Gráfico de biomasa y sustrato en función de la velocidad de dilución

 0.3

0.25
Rendi,iento celular (gcel/Lh)

0.2

0.15

0.1

0.05

0
0 0.05 0.1 0.15 0.2 0.25 0.3
D(1/h)

Figura 2. Gráfico rendimiento celular contra dilución

10
9
y = 0.0499x + 2.9243
8
7
6
1/µ

5
4
3
2
1
0
0 20 40 60 80 100
1/S

Figura 3. Gráfico ecuación de Monod

 0.5
0.45
y = 1.8618x - 0.0335
0.4
0.35
qs[gsust/gcelL] 0.3
0.25
0.2
0.15
0.1
0.05
0
0 0.05 0.1 0.15 0.2 0.25 0.3
D(1/h)

Figura 4. Consumo de sustrato en función de la velocidad específica

Valor de dilución a la cual se obtuvo la máxima productividad

D= 0.25(h-1) → (RcMáx.= 0.2775gcel/gsus)

Energía de mantenimiento

Para calcular este valor utilizamos la gráfica de qs = f(D), en donde la ordenada al origen
es igual a la energia de mantenimiento, por lo tanto:

m = -0.0335 gsustrato/gcélulas

Determinación del valor de Yg

Para calcular este valor utilizamos de igual forma la gráfica de qs = f(D), en donde la
1 1 1
pendiente es igual a 𝑌𝑔, por lo tanto 𝑌𝑔 = 1.8618, teniendo así que Yg = 1.8618.

Yg= 0.5371 gcélulas/gsus

Determinación de los valores de µmáx y Ks

Para calcular estos valores utilizamos la gráfica o relación de µ = f(S), que está
representada por la figura 3 mostrando así el modelo de Monod. En donde:
1 𝐾𝑠 1 1
= •𝑆 +
µ µ𝑚𝑎𝑥 µ𝑚𝑎𝑥

1 1
Si µ𝑚𝑎𝑥 = 2.9243 entonces 2.9243 = µ 𝑚𝑎𝑥 , por lo tanto µmáx = 0.3419 (h-1)

𝐾𝑠
Si = 0.0499 y µmáx = 0.3419 (h-1) , entonces 𝑲𝒔 = 0.0499 𝑥 0.3419 = 0.017
µ𝑚𝑎𝑥

Cuadro 2. Resultados finales

Constantes cinéticas Valor
D (dilución a la cual se obtuvo la máxima productividad) 0.25 h-1
m (energía de mantenimiento) -0.0335 gsustrato/gcélulas
Yg (rendimiento máximo celular) 0.5371 gcélulas/gsustrato
µmáx (velocidad específica máxima de crecimiento) 0.3419 (h-1)
Ks (constante de afinidad por el sustrato) 0.017 g/L

DISCUSIONES

En la figura 1 podemos observar que al aumentar la dilución en el reactor la biomasa

disminuía gradualmente, obteniéndose un valor máximo de biomasa en la dilución menor
utilizada en el reactor; mientras que al aumentar la dilución utilizada la glucosa residual en
el medio aumentaba, esto significa entonces que al aumentar la dilución la velocidad de
entrada de medio de cultivo al reactor y por consiguiente la entrada de sustratos era
mucho más rápido que la velocidad de consumo de sustrato del microorganismo, por lo
tanto parte de la biomasa salió del birreactor, obteniéndose así valores menores de
biomasa pero mayores de sustrato residual.

En la figura 2, podemos observar que a la dilución mayor se obtuvo un rendimiento celular

mayor comparado con los demás valores de dilución, esto quiere decir, que en este punto
las células tuvieron un mayor crecimiento por unidad de sustrato consumido. Sin
embargo, en este punto es donde se obtiene una menor cantidad de biomasa.

En la figura 3 podemos analizar el comportamiento de la velocidad de crecimiento µ con

respecto a la concentración de sustrato en el medio, esto es representado por la ecuación
de Monod. En esta grafica pudimos analizar que a concentraciones mayores de sustrato
en el medio se obtienen mayores velocidades de crecimiento, esto quiere decir que la
velocidad de crecimiento µ es directamente proporcional a la cantidad de sustrato en el
medio, y que se depende de otros factores como la µmáx y Ks. Al realizar el análisis
matemático pudimos encontrar que la µmáx es igual a 0.3919 (h-1) por lo que al aumentar
las concentraciones de sustrato y tener un sistema saturado la máxima velocidad
específica de crecimiento de la levadura en glucosa es 0.3919 (h-1). También se
determinó el valor de Ks el cual representa la afinidad de la célula para consumir cierto
sustrato, en nuestro caso es glucosa, el valor obtenido es de 0.017 g/L, esto quiere que
decir que a esa concentración de sustrato se alcanza la mitad de la velocidad especifica
máxima de crecimiento, este valor también nos dice que la glucosa es un sustrato
altamente metabolizable por la levadura, esto también si lo comparamos con un valor de
Ks respecto al etanol para la misma levadura según la literatura (2), por lo tanto a menores
valores de Ks la célula crecerá más rápido a menores concentraciones de sustrato.

Finalmente, en la figura 4, al analizar el comportamiento de la velocidad especifica de

consumo de glucosa (qs) en función de la velocidad de dilución (D), pudimos notar que al
aumentar la velocidad de dilución se aumentó la velocidad especifica de consumo de
𝜇
glucosa, esto esta descrito por la siguiente ecuación 𝑞𝑠 = 𝑚 + 𝑦 . En donde m
𝑔

representa la energía de mantenimiento celular, esto se refiera a la energia que es

utilizada para otras funciones que no son el aumento de la biomosa o crecimiento celular,
por lo que cuando se tiene valores muy pequeños de sustrato, las celulas utilizan el
sustrato solo como fuente de energía para sus funciones vitales como el recambio de
ARN (se recambia hasta 4 veces en un tg) recambio de enzimas, proteínas, componentes
de pared celular, transporte de iones, mantenimiento de gradientes de
concentración (pH o presión osmótica), movilidad, etc. Al analizar nuestra grafica
encontramos que nuestra energía de mantenimiento m es igual a -0.0335 gsustrato/gcélulas ,
esto quiere decir que el crecimiento está limitado a la adición de sustrato al medio. El
valor del mantenimiento celular depende del microorganismo utilizado y puede ser
modificado por factores del entorno como, pH, fuerza iónica, temperatura. De igual
forma y por ultimo también pudimos calcular el rendimiento celular máximo teórico el cual
tuvo un valor de 0.5371 gcélulas/gsustrato . Es importante señalar, que tanto Yg como m son
esencialmente constantes matemáticas derivadas de un modelo, por lo que es más
conveniente la utilización del término “rendimiento teórico” ya que resulta menos
ambiguo ya que el único rendimiento “verdadero” es aquel que se mide
experimentalmente.

CONCLUSIONES

 Se determinaron las constantes de modelos cinéticos de crecimiento y consumo

de sustrato para Candida utilis Y-900.
 Se analizo el crecimiento de la levadura comparándolo con el modelo de Monod.
 La velocidad especifica de crecimiento máxima µmáx = 0.3419 (h-1)
 La constante de afinad Ks = 0.017 g/L
 La velocidad de dilución en la cual se obtuvo la máxima productividad fue de 0.25
h-1
BIBLIOGRAFIA

1. Evaluación de los parámetros cinéticos de la ecuación de Monod. Alberto Duarte

Torres. Universidad Nacional de Colombia. Bogotá.
2. Análisis del crecimiento de la levadura Candida utilis en un biorreactor tambor
rotatorio continuo. María Caridad Julián-Ricardo*, Luis Beltrán Ramos-Sánchez.
Departamento de Ingeniería Química, Universidad de Camagüey.
3. Mantenimiento Celular. http://studylib.es/doc/181579/mantenimiento-celular