ESTRUCTURA Y FUNCION DEL ADN

Lic. Evelin Urquieta

 Sinopsis de los descubrimientos más
importantes de la naturaleza del gen.
Cada uno se analiza en este capítulo.
 Cuadro: Siete características de los
guisantes de Mendel
CARACTERISTICA ALELO DOMINANTE ALELO RECESIVO
Altura de la planta Alta Baja
Color de la semilla Amarilla Verde
Forma de la semilla Redonda Angular (rugosa)
Color de las flores Púrpura Blanco
Posición de las flores A lo largo del tallo En extremos del tallo
Color de la vaina Verde Amarillo
Forma de la vaina Llena Arrugada

MENDEL: publicó sus experimentos en la Natural

History Society de Brunn (Austria) en 1866 , pero
1900 los resultados obtenidos suscitaron interés
 CONCLUSIONES
1. Las características de las plantas dependían de
factores de herencia (GENES), cada planta
poseía 2 copias del gen una derivada de cada
progenitor.
2. Cada célula germinativa (gameto) solo tenia
una copia del gen. Cada gameto contenía un
alelo dominante/recesivo.
3. En cada planta los dos alelos de un rasgo, pero
se segregaban (separaban) durante la
formación de los gametos.
4. La separación de los dos alelos de un rasgo no
tenia efecto sobre la separación de los alelos
de otro rasgo eran independientes
 Cromosomas
• Características heredadas debía pasar de una
célula a la otra en la siguiente generación.

• Walther Flemming material del núcleo

(filamentos visibles) que denominaron
CROMOSOMAS (corpúsculos coloreados).

• Theodore Boveri desarrollo normal es

dependiente de una combinación particular de
cromosomas y eso sólo puede significar que los
cromosomas debe posees diferentes
cualidades.
 1887 August Weismann Meiosis incluía una división reductora

Figura 10.2 Sucesos que ocurren después de la fecundación del nematodo Ascaris, tal y
como lo notificaron las investigaciones clásicas del siglo xix. Los gametos masculino y
femenino contienen dos cromosomas. La fusión de los núcleos del esperma y del huevo
(llamado pronúcleo) en el citoplasma del huevo (entre e y f) produce un cigoto que
contiene cuatro cromosomas. El segundo cuerpo polar que se muestra en el apartado a
es un producto de la meiosis previa, como se describe en la sección 14.3. (Imagen tomada de
T. Boveri, Jenaische Zeit 22:685, 1888.)
 Cromosomas
• 1903 Walther Sutton destacó a los cromosomas
como portadores físicos de los factores
genéticos de Mendel.

• Comprobó la existencia de cromosomas

homologos.

• Ascaris/ saltamontes
1933 Theophilus Painter
Cromosomas Politénicos 5.000
bandas, cromosomas 100 veces más
gruesos.
 Ácidos nucleícos
• 1944 Oswald Avery,
Colin MacLeod DNA GENES
Maclyn McCarty

1920-1958
 Ácidos nucleícos

• 1962 James Watson Identificación de la

Francis Crick estructura del DNA
Maurice Wilkins
** Rosalind Franklin

In 1962, Maurice Wilkins, James Watson, and Francis Crick, received the Nobel prize,
leaving out any mention of Rosalin Franklin whose vital basic work on the double helix theory - a
proving photograph - was stolen by Wilkins and given to Watson and Crick. Franklin had
conveniently died at 37 to end that controversy. She died of an ovary cancer.
1920-1958
Rosalind Franklin alcanzo sus mejores
resultados con DNA hidratado obtenido a
partir de DNA del timo de ternera.

aimed X-ray at

a vertically suspended
fiber the thickness
of a single hair
La cruz o "estructura X" Las leyes de difracción sostienen
que los rayos X que se mueven a través de una forma
helicoidal difractan En un ángulo perpendicular a la hélice
creando un patrón de difracción en forma de X
 Estructura: Ácidos nucleícos

• DNA y RNA son polímeros de monómeros

llamados nucleótidos.

• DNA: Contiene la información genética

de la célula.

• RNA: Molécula intermediaria para

convertir la información en secuencias
definidas de aminoácidos en la
proteínas
Nucleósido
 Nucleótidos
• Son polímeros en los que los nucleótidos
están unidos covalentemente entre sí en
una secuencia definida.
ADN
 Propuesta de Watson y
Crick
1. La molécula esta formada por dos
cadenas de nucleótidos.
2. Las dos cadenas se enrollan en espiral
una alrededor de la otra formando un par
de hélices dextrógiras (R. Franklin).
3. Las dos cadenas son antiparalelas
5’→3’, la complementaria 3’→5’
4. Esqueleto azúcar-fosfato- azúcar-
fosfato esta en el exterior. (fosfato=carga
negativa)
 Propuesta de Watson y Crick

5. Las bases ocupan planos mas o menos

perpendiculares al eje longitudinal de la
molécula.
6. Las dos cadenas se conservan mediante
puentes de hidrogeno formado entre bases.
Hélice estructura estable.
7. Distancia entre un átomo de fosforo del
esqueleto y el centro del eje es de 1 nm (ancho
doble hélice 2 nm).
8. Una pirimidina es una cadena está siempre
pareada con una purina.
 Propuesta de Watson y Crick

9. Los átomos de N unidos al cuarto c de la

citosina y al sexto de la adenina se encuentran
de manera predominante en la configuración
amino (NH2) y no a la imino (NH).
10. Los espacios entre lo giros crean dos surcos de
diferente amplitud: surco mayor y un surco
menor.
11. La doble hélice da una vuelta completa cada 10
residuos de nucleótidos (3.4 nm) ó 150 vueltas
por cada millón de daltones de masa molecular.
12. Debido a que A-T y C-G, las cadenas de la
doble hélice son complementarias entre sí.
 IMPORTANCIA
a) Almacenamiento
de la información
genética
b) Replicación y
herencia
c) Expresión del
mensaje genético

• Figura 10.11 Tres funciones

necesarias del material genético.
(a) El DNA debe contener la
información que codifica las
características hereditarias. (b)
El DNA debe reunir la
información que dirige su propia
duplicación. (c) El DNA debe
alojar la información que dirige
el ensamble de proteínas
específicas.
Figura 10.12 DNA superenrollado. ( a,
b) Micrografías electrónicas que
muestran diferencias de conformación
entre una molécula circular relajada de
un fago de DNA (a) y el mismo tipo de
molécula en un estado superenrollado
(b). (c) Cuando una mezcla de moléculas
de DNA SV40, relajadas o
superenrolladas, se somete a
electroforesis en gel, la forma
superenrollada del DNA altamente
compactado (en la base del gel) se
mueve con mucha mayor rapidez que la
forma relajada. Las moléculas de DNA
se visualizan por tinción del gel con
bromuro de etidio, una molécula
fluorescente que se inserta en la doble
hélice. (a y b: cortesía de James C. Wang; c:
tomada de Walter Keller, Proc. Nat’l. Acad. Sci.
USA 72:2553, 1975.)
 DNA superenrollado
• Se dice que el DNA esta negativamente
superenrollado cuando tiene mas de 10
residuos (pb) por vuelta de hélice y
positivamente superenrollado cuando esta
torcido de manera excesiva.
• El superenrollado negativo permite que el DNA
de los cromosomas se compacte y llene el
núcleo.
• Superenrollamiento : topoisomerasas
a) Topoisomerasas tipo I : replicación, transcripción
b) Topoisomerasas tipo II: pueden anudar y
desanudar, necesaria para desenredar DNA antes
que los cromosomas duplicados puedan separarse
(mitosis)
 DEFINICIONES
• GENOMA: Contiene todos los
genes necesarios para construir un
organismo específico.
• GEN:
 Desnaturalizacion
• La capacidad para separarse en las dos
cadenas que la componen de denomina
desnaturalización.
• Desnaturalización térmica ó fusión del DNA
cuantifica por absorbancia de luz UV.
• La temperatura que corresponde a la mitad del
cambio de absorbancia se llama temperatura de
fusión.
• A mayor contenido de GC (%G+%C) del DNA
más alta será la Temperatura de fusión (Tm)
 Renaturalización del DNA
• 1960 Marmur y Doty (enfria con lentitud)
• Las moléculas complementarias de
cadena sencilla de DNA son capaces de
reagruparse en un suceso llamado
renaturalización.
• Ha desarrollado metodología
hibridación de ácidos nucleícos.
• La hibridación de los ácidos nucleicos:
secuenciación, clonación y
amplificación del DNA.
 Renaturalización del DNA
• Los genomas de mamífero se renaturalizan a
velocidades muy distintas, este fue indicio de
que el DNA eucariota, no es tan solo una
sucesión de genes consecutivos, sino que
posee una organización mucho más compleja.

a) Secuencias de DNA muy repetidas

b) Secuencias de DNA moderadamente repetidas
c) Secuencias de DNA no repetidas
 Secuencias de DNA muy
repetidas
1) DNA satélite: secuencias cortas (5 a pocos
cientos), forman grupos largos (millones) de
composición diferente al resto del DNA.
Secuencias variables ente spp cercanas.

La capacidad de localizar secuencias de

DNA satélite (hibridación de ácidos
nucleícos).
 1969 Pardue y Gall Hibridación fluorescente
in situ y localización del DNA satélite

• Figura 10.19 Hibridación fluorescente in situ y localización de DNA satélite. (a)

Pasos para llevar a cabo la hibridación fluorescente in situ. En esta técnica, ciertos
nucleótidos de la sonda de DNA se unen con enlaces covalentes a una pequeña
molécula orgánica, casi siempre biotina. Después de la hibridación, la localización del
DNA marcado con dicha molécula unida puede visualizarse al tratar la preparación
con avidina fluorescente, una proteína que se une a la biotina con una gran afinidad.
Los cromosomas en estas preparaciones suelen aparecer en rojo debido a que se han
contrateñido con yoduro de propidio.
Figura 10.19 Hibridación fluorescente in situ y localización de DNA satélite.
(Continuación) (b) Localización de DNA satélite en el centrómero de los
cromosomas humanos. La ubicación del DNA satélite marcado con biotina se
revela por la fluorescencia amarilla, la cual contrasta con el fondo rojo de los
cromosomas. La fluorescencia aparece sólo en el sitio donde está constreñido
cada cromosoma, lo cual señala la localización del centrómero. (b: tomada de
Huntington F. Willard, Trends Genet. 6:414, 1990, con autorización de
Elsevier.)
 Secuencias de DNA muy
repetidas
2) DNA minisatélite: tamaño de 10-100 pb y se
encuentran en grupos de hasta 3000
repeticiones, ocupan tramos cortos del
genoma que las secuencias satelite.
Inestables, el # varia de una generación a
otra.
La longitud de un locus minisalélite es
variable (polimórficas son la base mediante
perfiles de DNA)
 Identificación genética. En esta técnica, se emplea para
determinar la identidad de un individuo a partir de la muestra.

• El DNA se digiere con nucleasas específicas

(endonucleasas de restricción) y los fragmentos de DNA
se separan mediante electroforesis en gel, con base en su
tamaño. La localización de los fragmentos de DNA en el
gel que contienen secuencias específicas de DNA se
determina con sondas marcadas de secuencias
complementarias a las que se buscan.

• Los fragmentos de DNA que se unen a estas sondas

varían en longitud de una persona a otra debido a la
presencia de números variables de repeticiones en tándem
cortas (STR) en el genoma.

• La probabilidad de que dos individuos puedan tener STR

idénticas en este locus es astronómicamente pequeña
 Figura Identificación genética. Caso criminal, presunto culpable
acusado de apuñaló a una joven mujer
• En medicina forense analizan alrededor
de 13 loci de STR que se sabe que son
altamente polimórficos.
• En los perfiles de DNA que se observan,
las manchas de sangre en los
pantalones y la camisa del acusado se
compararon con muestras estándar
conocidas de sangre de la víctima y el
acusado. El DNA de las manchas de
sangre encontradas en la ropa del
presunto asesino no coincidió con sus
propias muestras sanguíneas, pero sí
con las de la víctima. Los carriles 1, 2, 3,
9 y 10 son muestras testigo de DNA que
sirven como puntos de control de
calidad; el carril 4 tiene DNA de la
sangre del acusado [A]; en el pozo 5 se
agregó DNA de las manchas de sangre
de los pantalones del acusado; los
carriles 6 y 7 contienen DNA de las
manchas de sangre de la camisa del
acusado; y en el pozo 8 se agregó DNA
de la sangre de la víctima [V]. Con la
aparición de técnicas de amplificación
(p. ej., PCR) muestras minúsculas de
DNA para estos estudios. (Cortesía de
 Secuencias de DNA muy
repetidas
3) DNA microsatélite: Secuencias muy cortas
(1-9pb) , en segmentos de 10-40 pb, están
esparcidas en todo el DNA, pueden existir
problemas al copiar por lo que su longitud
cambia entre generaciones.
Se utiliza para analizar relaciones entre
poblaciones de grupos étnicos.
 Secuencias de DNA
moderadamente repetidas
• En el genoma de las plantas y los animales
varia de un 20 a 80 % del DNA total (según el
organismo).

• Incluye secuencias repetidas de cualquier parte

del genoma, de pocas a varias decenas de
miles de veces.

• Se encuentran secuencias que codifican

productos conocidos de genes (moléculas de
RNA o proteínas), y secuencias no
codificadoras.
 Secuencias de DNA
moderadamente repetidas
1. Secuencias de DNA repetidas con
funciones codificadoras
Genes que codifican los RNA ribosómicos (abundantes)
Genes para proteínas cromosómicas (histonas)
Repeticiones son idénticas y se disponen en tándem.

2. DNA repetidos sin función codificadora

Secuencias dispersas en el genoma
a) Elementos cortos intercalados (SINE, short interspersed
elements)
b) Elementos largos intercalados (LINE long inerspersed elements)
 Secuencias de DNA no
repetidas
• Secuencias de DNA no repetidas (copias
únicas), incluyen genes que poseen
patrones de herencia mendeliana. (1,5 %
proteínas humanas)

• Siempre se localizan en un sitio

específico de un cromosoma en
particular.

• Contiene la mayor cantidad de

información genética.
 Gen
• Una unidad de herencia que regula
el carácter de un rasgo en particular
(No molecular).

• Es un segmento de del DNA que

contiene la información para un solo
polipéptido o molécula de RNA,
incluidas las regiones transcritas,
pero que no codifican.
 Estructura de un gen
procariótico

• Secuencias regulatorias en la región

5’ (no transcripta).
• Secuencias regulatorias en la región
5’ (transcripta, pero no traducida)
Estructura de un gen
procariótico
 COMPARACION DE
GENOMAS
Entre las células eucariotas cuyos genomas ya
se conocen, el número de genes codificadores
de proteínas (barras azules) varía desde unos 6
200 en la levadura hasta 57 000 en las
manzanas; se cree que los vertebrados tienen
alrededor de 20 000. (El gran número de genes
en la manzana refleja una duplicación
relativamente reciente del genoma en su
totalidad.) Un dato muy interesante es que los
incrementos manifiestos en la complejidad de
los organismos no se reflejan en aumentos
impresionantes en el número de genes. Por
ejemplo, no se acompañan de cambios
importantes en el número de genes que
codifican proteínas, fenómenos como: (1) la
transición de eucariotas unicelulares, como las
Chlamydomonas, a animales multicelulares más
sencillos como las esponjas, ni (2) la transición
de invertebrados a vertebrados. Aunque el
número de genes codificadores de proteínas
varía poco entre las células eucariotas, la
cantidad de DNA en un genoma (barras rojas)
cambia mucho, alcanza valores de 90 000
millones de pares de bases en algunas
salamandras (se desconoce el número real de
genes de estos anfibios). Mbp = millones de
REPLICACION DEL DNA
REPLICACION DEL DNA

• Watson y Crick 1953 propuesta

de autoduplicación tipo
cremallera
REPLICACION DEL DNA
REPLICACION DEL DNA
REPLICACION DEL DNA
REPLICACION DEL DNA
BACTERIANO
REPLICACION DEL
DNA
REPLICACION DEL DNA
REPLICACION DEL DNA
REPLICACION DEL DNA
REPARACION DEL DNA
• DNA escencial que permanezca sin
cambio .
• Molécula susceptible al daño
ambiental.
• DNA radiación ionizante sufre
roturas, alterar su estructura.
• Cuando se someten a la radiación UV las
pirimidinas adyacentes en las cadenas de DNA
tienden a interactuar entre sí para formar
complejos covalentes y crear un dímero.
 LESIONES DEL DNA
• Cada célula de mamífero pierde
alrededor de 10 000 pb /día.
• Falla en la reparación produce
anomalías permanentes ó
mutaciones en el DNA.
• Mutación –gameto alteración pasa
a otra generación.
• Células somáticas interfieren en la
transcripción y la replicación
 REPARACION DEL DNA
• Células procariotas y eucariotas
poseen una variedad de proteínas
que recorren extensos tramos de
DNA y buscan alteraciones
químicas o distorsiones sutiles del
DNA.
ESCISIÓN DE NUCLEOTIDOS Y
REPARACION
REPARACION POR
ESCISIÓN DE
BASES
REPARACION POR
ESCISIÓN DE
BASES
 REPARACION DEL DNA
• Reparación de la unión deficiente
• Reparación de la rotura de doble
cadena
Estructura de un gen
procariótico