Procedimientos generales

de análisis y su evaluación

QCA ANALITICA CLINICA- 2015

 IMPORTANCIA CLÍNICA DE LOS RESULTADOS
DEL LABORATORIO.
CUALITATIVOS
• SANGRE CUANTITATIVOS
• ORINA
• L.C.R
• SALIVA
• SUDOR •DIAGNÓSTICO
• MATERIA FECAL •TRATAMIENTO
• SECRECIÓN NASAL •PRONOSTICO
• TEJIDOS •SEGUIMIENTO
• LAGRIMAS

ASEGURAR LA CALIDAD DEL ANÁLISIS

 CONTROL DE CALIDAD TOTAL.
VARIABLES PREANALÍTICAS Y ANALÍTICAS
REQUISITOS PARA ALCANZAR LA CALIDAD

• Elección, ejecución y evaluación apropiada del

método analítico

• Comprensión de los principios físico-químicos y

biológicos

• Calidad de los reactivos e instrumentos que se están

utilizando

• Recolección y conservación de las muestras

• Forma en que se informan los resultados: Siempre

deben expresarse en las unidades correspondientes
SELECCIÓN Y EVALUACIÓN DE
MÉTODOS ANALÍTICOS
Para la selección de un método se
deben tener en cuenta tres cosas:

• Las características del método

• Las metas analíticas requeridas
• El procedimiento del método
CARACTERÍSTICAS DE LOS MÉTODOS
ANALITICOS.

Requerimientos de orden práctico:

• Tamaño de la muestra
• Tiempo de ejecución del ensayo
• Entrenamiento técnico.
• Infraestructura
• Medidas de seguridad
• Eliminación de residuos
 CARACTERÍSTICAS DE LOS MÉTODOS
ANALITICOS.

Parámetros analíticos:

• Rango analítico
• Sensibilidad analítica
• Límite de detección
• Especificidad
• Interferencia
• Recuperación analítica
• Precisión
• Exactitud
 RANGO ANALÍTICO
• Rango donde el método es aplicable sin
modificación (p/ej: sin diluir).
• Debe cubrir el 95% de las muestras problemas.
• Se estima por la curva de calibración a través de
un método de linealidad.

Abs
0.115
2

0.082

1 0.065

0.045
1.2 4.5 g/l Concentración
 Sensibilidad analítica
• La IUPAC (Unión internacional de química pura y
aplicada, ahora denominada CLSI) define como
sensibilidad analítica a la pendiente de la curva de
calibración, está dada por:
• Δ Rta/Δ concentración.
• Un método es más sensible cuanto menor sea su
límite de detección y mayor su pendiente.

ABS

C
Limite de detección (XL):
• Es la mínima concentración del analito que puede
detectarse con una certeza razonable como
distinta del blanco.
• Certeza razonable: la Rta medida a ese nivel de
concentración tiene un 95% de probabilidad de ser
distinta a la lectura de los blancos.
• Formula de limite de detección: XL = XB + K S

• XL= limite de detección

• XB=lectura promedio de los blancos.
• S = desviación estándar
• K = 2 cuando hay 95% de certeza.
• K = 3 cuando hay 99% de certeza.
Especificidad analítica:
• Se define como la habilidad de un método
de reaccionar sólo con el analito en estudio
y no con otras sustancias presentes en la
muestra en estudio.

• Está relacionado con la ausencia de

reacciones cruzadas.

• Relacionado a la especificidad analítica se

encuentra el término de Interferencia.
Interferencia:
• Se define como el efecto de una sustancia
que por si misma no produce lectura o Rta,
pero sin embargo afecta la exactitud en la
medición de otro componente, algunos
actúan consumiendo los reactivos, o
secuestrando al analito en cuestión.

• La interferencia y la especificidad son dos

aspectos que influyen directamente sobre
la exactitud con la que un método puede
dosar una determinada sustancia.
Recuperación analítica:
• Es la habilidad de un método de medir
correctamente un analito cuando una cantidad
conocida del mismo es agregada a muestras
biológicas.
• Está relacionada a la exactitud de un método
Los ensayos de recuperación se llevan a cabo de la siguiente manera:
Una muestra se divide en dos alícuotas A y B.
A= No se agrega nada.
B= Se le agrega una concentración conocida del analito a valorar

R = % recuperación R= B –A

La concentración agregada conocida representa el

100%, el valor experimental R representa un x %
Precisión:
Precisión:
• 1-Precisión Intraensayo: La misma muestra es
analizada por duplicado 20 veces en una misma
corrida. En una serie de muestras distintas cada una
se valora por duplicado, luego se calcula la SD que
existe entre esas dos mediciones.

• 2-Precisión Diaria: El mismo material es tratado

repetidas veces en diferentes corridas pero en un
mismo día.

• 3-Precisión Interdiaria: El mismo material es tratado

repetidas veces en diferentes corridas pero en
distintos días.
Exactitud:

• Es la coincidencia entre la cantidad medida y el

valor real de la concentración o cantidad de una
sustancia en una muestra determinada por un
método de referencia.

• La diferencia entre ambos es el ERROR.

CONCEPTOS DE ERROR
• Error sistemático: Falla de exactitud o error que
provoca un desplazamiento unidireccional entre la
mejor estimación de una cantidad y su valor real.

x 

Valores observados valor real

x -  = error sistemático
Error sistemático

• Constante: cuya magnitud del error no varia con la

concentración de analito que se mide
• Proporcional :magnitud del error es un porcentaje
del valor del analito que se está midiendo.

Error al Azar
Error Total
Error Total: Sumatoria de los dos componentes
(aleatorio y sistemático) considerando que ambos
son aditivos.
Comparación de métodos

Y = a X +b

a  0 y b =1  error sist.cte.
a = 0 y b 1  error sist. prop.
a  0 y b  1  ambos errores.
a = 0 y b = 1  no error sist.
Comparación de métodos
SELECCIÓN Y EVALUACIÓN DE
MÉTODOS ANALÍTICOS
Para la selección de un método se
deben tener en cuenta tres cosas:

• Las características del método

• Las metas analíticas requeridas
• El procedimiento del método
DETERMINACIÓN DE LAS METAS
ANALITICAS REQUERIDAS.
• Estas metas analíticas requeridas van a asegurar un
desempeño o performance aceptable, es decir
una ejecución aceptable del método.
• errores tolerables según las necesidades, es decir,
la magnitud de error que no va a invalidar el uso
que el médico le va a dar a esa información.

El uso que el medico le dé a esa información.

Nivel de concentración crítica (Xc)

 Imprecisión y desvío promedio deseable del laboratorio por determinación

DETERMINACION Imprecisión aceptable Desvío aceptable

(%) (%)
Albúmina 5 15
Colesterol 5 6
Glucosa 7.5 7
Urea 9 9.1
CRITERIOS PARA JUZGAR LA ACEPTABILIDAD
DE LOS ERRORES

ERROR EXPERIMENTO CRITERIO

ALEATORIO REPETICIÓN Sobs < SA ; 4 x Sobs < ETA

PROPORCIONAL RECUPERACIÓN R - 100 XC < BA

100

CONSTANTE INTERFERENCIA
B  < BA

COMPARACIÓN
SISTEMÁTICO (a + bXc) - Xc< BA
MÉTODOS

REPETICIÓN Y
TOTAL 4 x Sobs + (a + bXc) - Xc< ETA
COMPARACIÓN
CRITERIOS DE SEGURIDAD
DIAGNÓSTICA.
VALOR CLÍNICO DE LOS PROCEDIMIENTOS
ANALÍTICOS – SEGURIDAD CLÍNICA
• Existen diferentes motivos por los cuales se requiere
conocer el resultado de un análisis.
• Determinar presencia de una enfermedad –
(screening)
• Conocer naturaleza y origen de la enfermedad –
(fisiopatología)
• Confirmar diagnóstico presuntivo.
• Determinar la gravedad de una enfermedad –
(pronóstico)
• Monitorear la evolución de un tratamiento o de
enfermedad.
MODELO DE VALOR PREDICTIVO
Permite evaluar la performance diagnóstica
en términos de:

• Sensibilidad diagnóstica.
• Especificidad diagnóstica.
• Valor predictivo.
• Eficiencia diagnóstica.
Performance diagnóstica
Supongamos que hay una población
• SANA no chagásica y otra
• ENFERMA chagásica.
Cuando se hacen los análisis sobre esta población se obtiene:

CLASIFICACION DEL
POBLACION RESULTADO TEST
RESULTADO
NEGATIVO (N) NEG. VERDADERO (NV)
SANA
POSITIVO (P) POSITIVO FALSO (PF)
NEGATIVO (N) NEG. FALSO (NF)
ENFERMA
POSITIVO (P) POS.VERDADERO (PV)
Sensibilidad Diagnóstica
A partir de esto se define:
Sensibilidad diagnóstica
Es la frecuencia de resultados positivos en
una población enferma o porcentaje de
positividad en una enfermedad.

Se calcula como: PV x 100

PV + NF

PV + NF : Población total enferma

Especificidad diagnóstica:
Es la frecuencia de resultados negativos en
una población sana o el porcentaje de
negativos en ausencia de enfermedad.

Se calcula como: NV x 100

NV + PF

NV + PF: Población total sana.

Valor predictivo
Es la probabilidad de que un valor positivo
corresponda a una persona enferma y un valor
negativo a una persona sana.

Valor predictivo positivo:

Probabilidad que un resultado positivo corresponda
a una persona enferma ó porcentaje de pacientes
con resultados positivos que están enfermos.
VPP = PV x 100 PV + PF: Todos los positivos.
PV + PF
Si el VPP es del 100% permite decir que todos los resultados
positivos son verdaderos
Valor predictivo
Valor predictivo negativo
Probabilidad que un resultado negativo
corresponda a una persona sana ó porcentaje de
pacientes con resultados negativos que están
sanos.
VPN = NV x 100 NV + NF: Todos negativos.
NV + NF

Eficiencia diagnóstica
Porcentaje de pacientes correctamente
identificados por la prueba como sanos o
enfermos. Se calcula como:

ED = PV + NV x 100
PV + NV + PF +NF
 EFECTO DE LA FRECUENCIA DE UNA ENFERMEDAD EN
LA POBLACION EN ESTUDIO
El valor predictivo de un determinado test varía con la
población estudiada

• Incidencia: Es el nº de casos que aparecen en un

determinado periodo de tiempo, en una
determinada población. P/ej: La incidencia de
hepatitis en Cba es de 10 casos al año en una
población de 1000 personas.

• Prevalencia: Es la frecuencia de una enfermedad

en una población determinada y en un
determinado momento. P/ej: Prevalencia de SIDA
en el hospital Rawson es del 10% en este momento.
TEORIA DE BAYES
Permite calcular el valor predictivo de una
prueba conociendo la prevalencia de la
enfermedad que se quiere diagnosticar en
la población en la cual se quiere aplicar.

Cuanto mayor es la prevalencia de una enfermedad,

mayor será el valor predictivo de la prueba.

V.predictivo: (prevalencia) (sensibilidad)

(prev) (sens) + (1- prev) (1- sens)
VALORES DE REFERENCIA
Cuando se interpretan los resultados de laboratorio se
hace por comparación de éstos con un rango de
referencia establecido para individuos sanos.

Valor de referencia:
Se define como el rango de valores de un
determinado analito o sustancia, valorado por un
método determinado, y en una población
determinada, y es usado para comparar el
resultado obtenido para ese analito en un paciente
con el objeto de tomar decisiones.

Valores Ref:
CO2 en Recién Nacidos (RN): 13-22 mmol/L
Adultos: 22-29 mmol/L.
DETERMINACION DE LOS VALORES
DE REFERENCIA

• Definición clara del grupo de referencia a

elegir

• Condiciones en las que se obtiene y

procesa la muestra

• Métodos adecuadamente estandarizados

y bajo suficiente control de calidad

• Análisis estadístico de los datos obtenidos.

VALORES DE REFERENCIA
Criterios de exclusión:
• Factores de riesgo
• Estados fisiológicos como embarazo
• Enfermedades crónicas o agudas
• Consumo de fármacos, alcohol, cigarrillos, etc.

Criterios de partición: permiten particionar la población

en subpoblaciones de acuerdo a:
• Edad
• Sexo
• Factores genéticos: raza, grupo sanguíneo, etc.
• Factores fisiológicos: embarazo, vejez, menopausia.
CONTROL DE CALIDAD
PROCEDIMIENTOS QUE ASEGURAN
LA CALIDAD
a- VARIABLES PREANALITICAS.

• Identificación correcta del paciente y de

las muestras biológicas.
• Preparación del paciente :indicaciones. Por
escrito
• Recolección, transporte y conservación de
las muestras
• Preparación de la muestra para someterla
al análisis
PROCEDIMIENTOS QUE ASEGURAN
LA CALIDAD
b- VARIABLES ANALÍTICAS.
• Generales: Que afectan a todas las
determinaciones que uno hace en el
laboratorio. P/ej: mala calidad de H2O,
tensión fluctuante de la energía eléctrica,
etc.
• Particulares: Debidas al método en
particular. P/ej: correcta elección del
método, entrenamiento del personal que lo
ejecuta, calibración del método y testigos
que utiliza.
MÉTODOS ANALITICOS
De acuerdo a la calidad del resultado se
clasifican en tres tipos:

• MÉTODOS DEFINITIVOS: Son los de máxima calidad,

generalmente están basados en una propiedad
física de la materia, P/ej: masa. (SRMs)

• MÉTODOS DE REFERENCIA: Tienen una muy buena

calidad, son ejecutados por personal altamente
entrenado.

• MÉTODOS DE RUTINA: Es el que habitualmente de

usa en el laboratorio y debe cumplir con las
necesidades médicas de exactitud y precisión.
Control de calidad
Determinar la media y la desviación estándar

• La media se calcula como la suma de todas las

observaciones dividido por el número de
observaciones.

 Xi
X = 
n

• La desviación estándar se calcula como la raíz

cuadrada de la varianza
(Xi - X)2
SD = S2 = (n-1)
CONTROL DE CALIDAD

• Rechazar los valores que se hallen

fuera de la media + 3SD.
• Recalcular la media y la SD.
• Calcular la media +2SD y la media
-2SD.
• Asignar el intervalo aceptable, que
es igual al de la media + 2SD.
PREPARACION DE LAS GRAFICAS DE
PARED
 INTERPRETACION DE LOS RESULTADOS.
Comportamiento estadístico de los valores del control

• Los resultados analíticos de los sueros control

deberían caer el 95% de las veces dentro de
las línea de la media – 2SD y la media + 2SD.
En otras palabras, 19 de 20 análisis deberían
caer dentro de la línea media + 2SD o en el
límite.

• Los valores deberían distribuirse casi

uniformemente a ambos lados de la línea
media. No es posible que haya más de 5
determinaciones consecutivas a un mismo
lado de la línea media, a menos que haya
algún error.
INTERPRETACIÓN DE LOS RESULTADOS

• No puede haber un incremento o

disminución en los valores control por más
de cinco análisis consecutivos.

• Los valores consecutivos no deberían caer

fuera de la media + 2SD.

• Ningún valor debería caer fuera de los +

3SD.
• Cuando una sola observación se aparta en más de 2
SD se lo considera como una señal de alarma para los
próximos ensayos (debido a la probabilidad estadística
de que esto ocurra, y para evitar falsos rechazos).
Cuando una sola observación excede más de 3 SD, el
ensayo se rechaza.

• Si dos observaciones consecutivas exceden el valor de

2 SD en el mismo sentido se rechaza el ensayo. Puede
tratarse de la misma señal en dos ensayos
consecutivos, o bien el mismo testigo colocado dos
veces en el mismo ensayo.

• Si una misma señal colocada más de una vez en el

ensayo difiere de sus resultados en más de 4 SD, el
ensayo se rechaza.
ACEPTACION O RECHAZO DE SERIES
ANALÍTICAS
• Si cuatro observaciones consecutivas de
una misma señal exceden el mismo límite,
en el mismo sentido, y este es menor a
2SD, se tomará como señal de alarma.

• Más de diez ensayos consecutivos del

mismo lado de la media, se tomará como
señal de alarma.
CARTAS DE CONTROL
CARTAS DE CONTROL
CARTAS DE CONTROL