INSTITUTO NACIONAL DE MÉXICO

INSTITUTO TECNOLÓGICO DE
MINATITLAN

ESCUELA SUPERIOR DE INGENIERIA (QUÍMICA)

Practica No. 3

Espectrofotometría: curvas de calibración.

Docente: Rosa María Haces Márquez

Análisis instrumental

Equipo 2 A

 Yesenia Paul Reyes

 José Luis Molina Alonso
 Juan Manuel Castillo Ramírez

12 de septiembre de 2016 Minatitlán Veracruz

ESPECTROFOTOMETRÍA: CURVAS DE CALIBRACIÓN.

Objetivo
Determinar la longitud analítica de onda analítica de las muestras proporcionadas,
a través de la construcción de una curva de absorción.

Generalidades
La interacción de una onda electromagnética con la materia se puede
estudiar por medio de dos parámetros: La transmitancia y absorbancia.
La absorbancia está definida como el logaritmo de la inversa de la
transmitancia

Lambert estudió la influencia de la longitud del paso óptico en la absorbancia

y encontró que guardan una relación directamente proporcional. De la misma
manera Ver estudió la relación entre la concentración de la solución y la
absorbancia, dando así mismo una relación directamente proporcional. De la
combinación de ambos estudios surge la ley de Lambert–Beer, en la cual se
establece que la absorbancia tiene una relación directamente proporcional
tanto con la longitud del paso óptico como con la concentración del analito.

Equipos, materiales y reactivos.

Nota importante: antes de solicitar y revisar el material de trabajo, realizar el paso
1 de la metodología.

Equipo

 Espectrofotómetro UV-VIS marca Genesys 20 en un rango de trabajo de 325

a 800 nm.

Reactivos ( por grupo)

 Solución 5X10-4 M K2Cr2O7 ( 100ml)

 Solución 5X10-4 M KMnO4 ( 100 ml)
 H2SO4 concentrado
Materiales

 5 vasos de precipitado de 50 ml.

 1 pizeta con agua destilada.
 3 celdas para lectura.
 2 pipetas graduadas.
 Papel aluminio para forrar dos vasos de precipitado de 50 ml.
  Guantes de látex (por integrante de equipo de trabajo).
 1 paño limpio y suave de algodón para limpiar celdas (si es posible, conseguir
1 paño para limpieza de lentes).
 Una franela para limpiar el área de trabajo.

METODOLOGÍA
1. Encender el espectrofotómetro UV-VIS marca Genesys 20, siguiendo
el protocolo de encendido indicado por el profesor. Esperar 30 minutos
para que la lámpara alcance su máxima intensidad.
2. Forrar con papel aluminio dos vasos de precipitado de 50 ml,
elaborando una pequeña tapa para evitar que la luz haga contacto con
los reactivos que se depositarán en cada vaso. Depositar en un vaso
de precipitado de 50 ml, aproximadamente 10 ml de solución 5X10 -4
M de K2Cr2O7; de igual manera, en el otro vaso de precipitado,
depositar 10 ml de solución 5X10-4 M KMnO4.
3. Habiéndose colocado previamente los guantes, tomar
cuidadosamente las celdas, revisando que están limpias; manejarlas
con cuidado evitando rayarlas. Si es necesario, enjuagar con agua
destilada dejándolas secar previamente.

NOTA: si se manejan celdas de cuarzo, y llegaran a estar sucias,

enjuagar cuidadosamente con una solución 1:! De HCl 3 N y alcohol
etílico absoluto, aplicando un enjuague final con solo alcohol etílico y
dejando secar al aire.
4. Transcurrido los 30 minutos indicados en el punto 1, tomar una
primera celda con cuidado y llenar con agua destilada hasta la marca,
cuidando que no se formen burbujas, sujetando la celda por la parte
esmerilada, limpiar el exterior con un paño limpio y suave, evitando
rayarla.
5. Enjuagar las dos celdas restantes con peñas porciones de la solución
correspondiente, una con solución 5X10-4 M de K2Cr2O7 y la otra con
solución 5X10-4 M KMnO4, cuando menos tres veces. Después de
haberlas enjuagado, llenar con cada celda con la solución respectiva
hasta la marca, evitando la formación de burbujas y limpiándolas con
un paño limpio y suave.

Precaución: depositar los residuos de reactivos químicos utilizados (K2Cr2O7 y

KMnO4) en el lugar indicado por el profesor para la gestión de residuos peligrosos
realizada por el laboratorio.
6. Introducir en el portaceldas del espectrofotómetro, en primer lugar el
blanco.
7. Seleccionar en el espectrofotómetro una longitud de onda de 330 nm.
8. Calibrar el blanco a 0 Abs/ 100º T.
9. Después de retirar del portaceldas que contiene el blanco, colocar en
primer lugar la celda que contiene la solución de K2Cr2O7. Leer la
absorbancia correspondiente y anotar su valor. Repetir el
procedimiento de lectura, pero ahora con la solución de KMnO4 . Nota:
si fuera necesario, verificar la calibración del blanco entre las lecturas
de cada solucion.
10. Repetir los pasos 8 y 9 veces, pero variando la longitud de onda en
incrementos de 20 nm, desde 330 hasta 610nm.
11. Después de haber realizado las mediciones, enjuagar varias veces las
celdas utilizadas con agua destilada y dejarlas secar.
CÁLCULOS Y RESULTADOS

Longitud CURVAS DE CALIBRACION

de onda Absorbancia
330 0.443
350 0.385 0.8
390 0.293 0.7
390 0.186 0.6

ABSORVANCIA
0.5
410 0.132 0.4
430 0.109 0.3
450 0.11 0.2
470 0.161 0.1
0
490 0.269 -0.1 0 200 400 600 800
510 0.403 LONGITUD DE ONDA
530 0.495
550 0.455
570 0.266
590 0.069

GRAFIA Y DATOD DEL KMnO4

GRAFICA Y DATOS DEL K2Cro7

Longitud de
onda Absorbancia CURVAS DE CALIBRACION
330 0.422
350 0.689 0.8
390 0.7 0.6
ABSORVANCIA

390 0.394 0.4

410 0.12
430 0.062 0.2

450 0.042 0
470 0.014 0 100 200 300 400 500 600 700
-0.2
490 -0.01 LONGITUD DE ONDA
510 -0.027
530 -0.031
550 -0.032
570 -0.03
590 -0.026
OBSERVACIONAES
Al comenzar en los vaso
precipitados de 50 ml metimos 10ml
de cada muestra patrón.

Después de eso nos fuimos a

cuarto de balance donde ya estaban
instalados para su uso los
espectrofotómetros.

Este mismo, al principio lo

calibramos con el blanco el cual fue
agua destilado y lo calibramos al
inicio a una onda de longitud de 330
nm.

Y utilizando este mismo blanco se

calibraba la muestra caves que se
inserta la solución Patrón

Primero, colocábamos en el
espectrofotómetro, el permanganato
de potasio y después el dicromato
de potasio

Al principio notábamos que las dos

soluciones arrojaban resultados
diferentes
 La longitud de onda se cambiaba,
cada vez que las dos soluciones
patrones se le hacia el análisis.

Se fue aumentando la longitud de

onda de 20 en 20.

Pudimos observar que la absorbancia es muy diferente para ambas muestras

patrón, en la del permanganato de potasio no nos dio resultados positivos
después de 490 nm, caso contrario con el dicromato de potasio que nos
arrojó resultados negativos.
CONCLUSIONES:

JUAN MANUEL CASTILLO RAMÍREZ

En esta práctica me pareció muy interesante hacer todos los cálculos con
referente a la determinación de las longitudes de absorción de las soluciones
del K2Cr2O7 y KMnO4. Puedo concluir que el uso del espectrofotómetro
UV-VIS para determinar las longitudes analítica de dichas soluciones debe
realizarse con mucha organización y control, para que al momento que
estemos realizando el procedimiento, los resultados salgan los más exactos
posible. Obviamente cuidado y manejando el equipo de manera correcta.

JOSE LUIS MOLINA ALONSO

En esta practica nos pudimos dar cuenta de como varian la absorvancia
con forme va pasando el nivel de logitud de onda y pudimos ocervar
que cambia mucho referente a las dos contraciones la cuales se pueden
ver afectadas por el ruido y otras cuestiones que pueden ser anlisadas
al momento del analisis.

YESENIA PAUL REYES

Pudimos observar que el cambio de las curvas de calibración es muy
continua para ambas soluciones y esto puede deber al margen de error
y al igual que conforme íbamos aumentando la longitud de onda la
absorbancia iba cambiando considerablemente
REFERENCIAS

https://es.scribd.com/doc/23620266/Espectrofotometria-Del-Visible-y-Ultraviolet-A

http://quimica-experimental.blogspot.mx/2013/05/practica-25-
espectrofotometria.html