Sunteți pe pagina 1din 5

Subiectul 9 hematologie- PRACTIC

Determinarea grupelor sanguine ; teste de compatibilitate

Sistemul de grupa sanguina AB0

Exista:
-subtrante antigenice specifice de grupa=IZOAGLUTINOGENI (pe eritrocite)
-anticorpi specifici=IZOAGLUTININE (in plasma sau ser)

Grupa sangvina Aglutinogene-pe Aglutinine-in ser


eritrocite
0 - anti-A si anti B
A A anti-B
B B anti-A
AB A si B -

Determinarea grupelor sangvine AB0

Se face pe lama sau in tub ,prin doua probe obligatorii


1. determinarea aglutinogenelor(proba Beth-Vincent)
2. determinarea aglutininelor(proba Simonin)

1. Determinarea aglutinogenelor (Beth-Vincent)


-se folosesc seruri hemotest -0 (anti-A,anti –B)
-A (anti –B)
-B (anti –A)

Metoda pe lama:
-pe lama se pun succesiv ,cu pipete deosebite,cate o picatura de ser hemotest in ordinea
urmatoare:0 la stanga,A la mijloc,B la dreapta
-cu coltul unei lame se adauga o mica cantitate de sange pe fiecare picatura de
ser,schimband coltul lamei pentru fiecare picatura de ser hemotest,amestecandu se pentru
omogenizare(picatura de sange cam de 10 ori mai mica decat cea de ser)
-lama se ia in mana si I se imprima o miscare lenta rotativa.Citirea se face in primele 2-3
minute cu ochiul liber.
Interpretarea rezultatelor:
1. daca in toate 3 picaturile nu apare nici o aglutinare ,amestecurile ramanand
uniforme,colorate in roz,sangele de cercetat apartine grupei 0
2. daca apare aglutinare cu serurile 0 si B si lipsa de aglutinare cu serul A,sangele de
cercetat apartine grupei A
3. daca apare aglutinare cu serurile 0 si A,si lipsa de aglutinare cu serul B,sangele de
cercetat apartine grupei B
4. daca apare aglutinare cu toate cele 3 seruri sangele de cercetat apartine grupei AB.
Ser test 0α β Aβ Bα Eritrocit 0 A B
0I e test
0I

A II
A II

B III B III

AB IV AB IV

Determinarea aglutinogenelor Deteminarea aglutininelor


Testul Beth-Vincent proba Simonin

2. Determinarea aglutininelor(proba Simonin)


-determinarea se face punand in contact serul de cercetat cu eritrocitele test cunoscute de
grupa 0,A si B.

Metoda pe lama:
-pe o lama se pun 3 picaturi din serul de crecetat
-pe prima picatura,de la marginea stanga se adauga Er. 0,pe picatura din mijloc se adauga
Er. A,pe cea din dreapta Er. B;adaosul si amestecul pentru fiecare picatura se face cu
coltul unei lame,schimbandu –se la fiecare picatura
-citirea se face prin rotirea lenta a lamei in primele 2-3 minute ,cu ochiul liber.
Interpretarea rezultatelor:
Reactia trebuie sa fie negative co Er.0 pentru toate cele 4 posibilitati!

1. Aglutinare cu Er. A si B-serul contine aglutinine anti-A si anti-B si apartine


grupei 0
2. Aglutinarea cu Er.B-serul contine aglutinine anti-B si apartine grupei A
3. Aglutinarea cu Er.A-serul contine aglutinine anti-A si apartine grupei B
4. Nu apare aglutinare nici cu Er.A si nici cu Er.B-serul nu contine aglutinine anti-A
si anti-B si apartine grupei AB.

Nu se admite determinarea grupei decat prin aplicarea obligatory a celor doua


probe,Beth-Vincent si Simonin
Cand exista un dubiu trebuie sa se repete determinarea grupei ,cu un alt lot de seruri
hemotest si cu alte eritrocite test.
Sistemul Rh

Definitie:
Factorul Rh este un antigen specific de grupa sangvina present pe eritrocitele omului
si ale maimutei Macaccus Rhesus.
-prezenta factorului pe eritrocie-indivizi Rh pozitivi
-absenta lui-indivizi Rh negativi

-factorul Rh nu e present la toti oamenii-85% Rh pozitivi,15% Rh negative

Imunizarea fata de factorul Rh:

-spre deosebire de sistemul AB0,la care se gasesc in mod natural aglutininele α sau β
,pentru factrul Rh nu exista in mod spontan o aglutinina anti Rh.Anticorpii anti- Rh apar
numai prin izoimunizare, in urmatoarele conditii:
1.prin transfuzia de sange Rh pozitiv indivizilor Rh negative
2.prin sarcina,cand o mama Rh negativ naste
3.prin grefa tisulara izologa

Determinarea pe lama a factorului Rh

Observatii:
-sangele de cercetat se recolteaza din pulpa degetului
-pe o lama se pune o picatura mare de ser anti- Rh care se amesteca cu o picture sin
sangele de cercetat;se omogenizeza cu coltul unei lame
-pe o a doua lama se repeta aceeasi operatie cu eritrocite cunoscute Rh positive si Rh
negative
-lamele se aseaza intr o cutie Petri,pe doua baghete de sticla.Pe fundul cutiei Petri se afla
ohartie de filtru umezita cu apa rezultand o camera umeda care evita uscarea picaturilor
de sange.Totul se pune in thermostat si rectia se citeste dupa 1-2 ore la 37 C.

Interpretarea rezultatelor:

-daca sangele de cercetat este aglutinat,e Rh pozitiv


-daca nu e aglutinat ,e Rh negative
-in picatura de control,eritrocitele- pozitive trebuie sa fie aglutinate
-negative-nu trebuie sa fie agglutinate

Reguli importante privind transfuzia de sange

Trebuie sa ne asiguram ca exista compatibilitate de grupa intre primitor si donator!

1. Determinarea grupei AB0 si a factorului Rh(D)


2. Transfuzia se face obligatoriu izogrup
3. Cercetarea Ac iregulari in sangele primitorului este obligatorie in urmatoarele
situatii:
• Bolnav Rh negative
• Femei multigeste sau multipare
• Bolnavi care au prezentat reactii dupa transfuzii anterioare
• Bolnavi care au primit transfuzii in trecut
• Bolnavi la care se practica exsanguinoperfuzia sau circulatia extracorporeala
4. Bolnavii Rh negative primesc sange Rh negative
5. Efectuarea probei de compatibilitate directa cu ajutorul eritrocitelor papainate
inaintea fiecarei transfuzii
6. Ultimul control obligatoriu la patul bolnavului cu ajutorul serurilor hemotest,se
face inaintea instalarii perfuziei ,o verificare agrupei sangvine ,a bolnavului si a
sangelui din flaconul donat

Teste de compatibilitate

Testul Coombs e testul ideal pentru compatibilitate transfuzionala cuprinzand toti


izoanticorpii cu importanta clinica.

A. Testul cu papaina

-serul primitorului…3 picaturi


-suspensie 5% in ser fiziologic de eritrocite papainate de donator…3 picaturi
Centrifugare 1 minut la 1000 rpm.
Se citeste aglutinarea.

B. Testul Coombs

-serul primitorului…3 picaturi


-suspensie 5%de eritrocite de donator…3 picaturi
Incubare 30 minute la 37 C.
1. Se spala de 3 ori cu ser fiziologic
2. Dupa ultima spalare se adauga peste sedimentul eritrocitar 2 picaturi de ser
antiglobulinic cu spectru mare se omogenizeaza bine
3. Se centrifugheaza minut la 1000 rpm
4. Se citeste aglutinarea

Orice transfuzie noua trebuie sa fie precedata intotdeauna de un nou control serologic
privind compatibilitatea,chiar daca bolnavul a suportat bine transfuziile anterioare si
chiar daca se utilizeaza sange de la acelasi donator.