Benemérita Universidad Autónoma de Puebla

PRÁCTICA 5. ACTIVIDAD ENZIMATICA

¿El CN- y Pb- inhiben la actividad de la enzima catalasa?

Introducción Materiales y reactivos

Reacción de la enzima catalasa DISCUSIÓN
ENZIMAS Son proteínas globulares responsables de la mayor parte de la actividad química de los organismos vivos. Actúan como catalizadores, que son sustancias que
aceleran las reacciones químicas sin ser destruidas o alteradas durante el proceso (a menos que estén contacto con un inhibidor). Las enzimas son extremadamente
-H2O2 -2 goteros
eficientes y se pueden utilizar una y otra vez repetidamente. Una enzima puede catalizar miles de.reacciones.en.cada.segundo.
Enz (Por-FeIII) + H2O2 → Compuesto I (Por+•-FeIV-O) + H2O

¿Cuáles son sus características distintivas?

❶ Compuesto I (Por+•-FeIV-O) + H2O2 → Enz (Por-FeIII) + H2O + O2 -Papa -pinzas pequeñas
❷ Compuesto I (Por+•-FeIV-O) + CH3CH2OH → Enz (Por-FeIII) + CH3CHO + H2O

 Son proteínas.
 Son los catalizadores más eficientes que se conocen. La mayor parte de las reacciones celulares ocurren a una velocidad alrededor de un millón de veces -hígado de pollo - papel absorbente
más alta de lo que serían en ausencia de enzimas.
 La mayoría de las enzimas se distinguen por su especificidad, lo que significa que cada conversión de un reactivo (llamado sustrato) en un producto es


catalizada por una enzima determinada.
Las acciones de muchas enzimas están reguladas de modo que pueden cambiar de un estado de baja actividad a uno de alta actividad, dependiendo de
-manzana -cuchillo
las condiciones celulares en las que se encuentren.

En 1960 se creó la Comisión Internacional de Enzimas quien propuso: -14 tubos de ensayo - gradilla
➢ El uso de un nombre propio. ➢ El uso de un nombre descriptivo.
➢ El uso de un nombre sistemático. ➢ El uso de un número de clasificación. -pipetas - baño María 100°C
NÚMERO DE CLASIFICACIÓN DE LA ENZIMA
-cianuro de sodio al 5% - Nitrato de plomo al 5%
El número de clasificación de las enzimas consta de 4 dígitos separados por puntos. A . B . C . D.

El primer dígito es la CLASE. Indica el tipo de reacción.

Desarrollo
El segundo dígito es la SUBCLASE. Indica el sustrato.

El tercer dígito es la SUB SUB CLASE. Indica el con su sustrato.

El cuarto dígito es el NÚMERO DE ORDEN. La comisión internacional de las enzimas ha clasificado a las enzimas en 6 clases que son:

Conclusión

INACTIVACION ENZIMATICA El plomo y el cianuro sí actúan como inhibidores de la catalasa, reducen su

Factores que afectan la actividad enzimática: La pérdida de actividad de una enzima se puede lograr por desnaturalización, ya que se trata de una proteína y por lo tanto le
afectan pH, temperatura, agitación vigorosa, por citar algunos agentes. Las enzimas presentan un comportamiento diferente frente a los cambios de pH dependiendo del
comportamiento ácido-base de la enzima y el sustrato. Estos comportamientos pueden explicarse por: actividad enzimática relacionándose con el grupo HEM en el caso del cianuro
…………………………………………………..’’9999999999999999999999999999999999999999999999999
1. Una alteración de la carga neta de la proteína que repercute en la solubilidad.¿¿¿¿¿¿¿¿¿¿¿¿¿¿¿¿¿¿¿¿¿¿¿¿¿¿¿¿¿
2. Alteración de la conformación de la proteína al afectar los niveles 3º y/o 4º lo cual repercute en una mayor o menor y con los SH en el caso del plomo. Debido al efecto de la temperatura sobre
actividad.¿¿¿¿¿¿¿¿¿¿¿¿¿¿¿¿¿¿¿¿¿¿¿¿¿¿¿¿¿¿¿¿¿¿¿¿¿¿¿¿¿¿¿¿¿¿¿¿¿¿¿¿¿¿¿¿¿¿¿¿¿¿¿¿¿¿¿¿¿¿¿¿¿¿¿¿¿¿¿¿¿¿
3. Un efecto del pH sobre el sustrato.¿¿¿¿¿¿¿¿¿¿¿¿¿¿¿¿¿¿¿¿¿¿¿¿¿¿¿¿¿¿¿¿¿¿¿¿¿¿¿¿¿¿¿¿¿¿¿¿¿¿¿¿¿¿¿¿¿¿¿¿¿¿¿¿
4. Una combinación de los efectos anteriores.’’’’’’¿¿¿¿¿¿¿¿¿¿¿¿¿¿¿¿¿¿¿¿¿¿¿¿¿¿¿¿¿¿¿¿¿¿¿¿¿¿¿¿¿¿¿¿¿¿¿¿¿¿¿¿¿¿ RESULTADOS las proteínas estas sufren desnaturalización a lo que conlleva que la catalasa
Efecto de la concentración. La velocidad maxima se presenta debido a la ocupación del sitio activo de todas las enzimas presentes es decir se han saturado los sitios activos.
Otra forma de hacer que la actividad de una enzima se pierda o disminuya es a través del uso de inhibidores.
pierda su actividad biológica y por lo tanto ya cumple su función.
Inhibidores: Una forma de hacer que la actividad de una enzima se pierda o disminuya es a través del uso de inhibidores. Los inhibidores producen disminución en la
actividad enzimática, a través de interacciones con el centro..activo.
Reversible:.Los.inhibidores.se.unen.en.forma.no.covalente.
Irreversible:.Los.inhibidores.se.unen.en.forma.covalente.
Dependendiendo.de.la.cantidad.de.enzima.o.inhibidor.la.inhibición.puede.ser.
Total:.La.concentración.de.inhibidor.es.igual.o.mayor.que.la.enzima. Parcial: La concentración es menor
que la enzima.

Tipos de inhibición reversibles:

Competitiva: Las sustancias que se comportan como inhibidores competitivos, suelen tener una estructura semejante a la del sustrato.
Acompetitiva: El inhibidor solo se une al complejo enzima-sustrato, y no a la enzima libre. No
competitiva: La adición de más sustrato a la reacción da lugar a un aumento de la velocidad de reacción, pero no hasta el grado notado en las reacciones sin inhibir. Cuestionario
Catalasa: La catalasa es una enzima antioxidante presente en la mayoría de los organismos aerobios. Cataliza la dismutación del peróxido de hidrógeno (H2O2) en agua y AGUA DESTILADA
oxígeno. La mayoría de estas enzimas son homotetrámeros con un grupo hemo en cada subunidad. Se ha determinado la estructura de nueve catalasas. Algunas catalasas
tienen subunidades pequeñas (masa molecular ≈ 60 kDa) y otras grandes (masa molecular > 80 kDa). Se han identificado tres grupos de catalasas: i) las catalasas Reducción del nivel de electrolitos, irritación en 1. ¿Cuál es el efecto de la temperatura sobre la actividad enzimática?
monofuncionales, que contienen hemo y están presentes tanto en los organismos procariotos como en los eucariotos, ii) las Mn-catalasas, que son enzimas hexaméricas
que no tienen hemo, tienen Mn en el sitio activo y sólo están presentes en algunos organismos procariotos anaerobios y iii) las catalasas-peroxidasas, que tienen actividad PELIGROS individuos alérgicos, mareos, vómito
de catalasa y de peroxidasa, contienen hemo y sólo están presentes en las bacterias y los hongos. R= Al ser proteínas, a partir de cierta temperatura, se empiezan a
MEDIIDAS PREVENTIVAS Lavar con agua
desnaturalizar por el calor. La temperatura a la cual la actividad catalítica es
máxima se llama temperatura óptima
Catalasa a nivel estructural: Es un tetrámero de cuatro cadenas polipeptidicas, cada una larga cadena con 500 aminoácidos. contiene cuatro grupos hemo porfirinicos
(hierro) que llevan a la enzima a reaccionar con el peroxido de hidrógeno. El pH óptimo para la catalasa es aproximadamente de 7, la temperatura varia por especie. El
centro activo de la catalasa es una proteína hemo denominada citrocromos. El hemo de la catalasa es un complejo de hierro y porfirina de alto giro de protoporfirina lX. La
protoporfirina es una nomenclatura alternativa para el grupo hemo de la catalasa; define sus propiedades químicas.
2. ¿Qué es el factor Q-10?
Inhibidores
Cianuro de sodio: Inhibidor competitivo irreversibleSe coordina muy fuertemente con el ion Fe (III).
R= Es el coeficiente de temperatura Q10 es la medida de la tasa de variación de
Esto hace que el ion Fe (III) no tenga la capacidad de reaccionar con el oxígeno extra del peróxido
de hidrógeno, y entonces no cumpla su función. El cianuro se une por en laces covalentes al grupo
sistemas químicos o biológicos como consecuencia del incremento de 10 °C de
funcional de la enzima,
La acción dela catalasa es por vía de la reacción directa del ión Fe(III) con el oxígeno, para liberar la temperatura.
el peróxido y formar agua. La elevada constante de formación de complejos de hierro trivalente y
divalente con aniones cianuro es debida al fuerte enlace sinérgico originado por la suma de dos
- Donación de e- por parte del ligando en enlace s. efectos: 3. Escribe el complejo que se forma con el Fe y CN
- Retrodonación de e- por parte del metal en enlace p. Ya que el cianuro se une por en laces covalentes al grupo funcional de la enzima, su inhibición es irreversible

Nitrato de plomo: Inhibidor irreversible: puede lograr una sustitución del ion Fe (III) por la del ion Pb (II). Cuando se logra la sustitución, la enzima queda desactivada, pues
el plomo (ahora en la enzima) no tiene la cantidad de orbitales vacíos para cumplir con la misma función del hierro. La adición de ion cianuro tiene un modo diferente de
R= Se forma [Fe(CN)6] que es una molécula de importancia biologica
actuar. La unión del plomo a la catalasa se da en los grupos sulfhídrico-libres de las cisteínas que contiene la enzima, de forma covalente, por lo que su inhibición sobre la
enzima es irreversible.
La manera en que estos inhibidores se unen es que el sustrato, en este caso el peróxido de hidrógeno se unen a los aminoácidos catalíticos y de jfijación que es donde se
llevan a cabo las interacciones con el sustrato

Bibliografía
Ayudas didácticas
www.farmacopea.org.mx/Repositorio/Documentos/110.pdf