pH y amortiguadores: tampones fisiológicos

pH and shocks: physiological buffers

Alison Vanesa Benavides Garzón, Steven Ospina García

Universidad del Quindío, Facultad de Ciencias Básicas y Tecnologías, Programa de

Química, Laboratorio de Bioquímica

20 de marzo de 2017

Docente-Investigador: Clara María Mejía Doria

Resumen
En el presente informe se dará a conocer las biomoléculas que se encuentran en la leche. Se
realizarán pruebas bioquímicas como la de biuret, benedict, felhing, xantoproteica y Sudán
III, cada prueba reconoce diferentes tipos de biomoléculas (proteínas, lípidos, carbohidratos),
básicamente se puede observar la presencia de estas biomoleculas por el viraje de la
coloración en las soluciones y para corroborar el resultado obtenido se desarrollarán unas
pruebas de control.

Palabras clave: biomoleculas- pruebas bioquímicas- proteínas- lípidos –carbohidratos.

Abstract

In this report it will be released the biomolecules that are found in milk. Is will be tests
biochemical as it of biuret, benedict, felhing, xantoproteica and Sudan III, each test
recognizes different types of biomolecules (proteins, lipids, carbohydrates), basically is can
observe the presence of these biomolecules by the turn of the coloration in them solutions
and to corroborate the result retrieved is will develop some tests of control.
Key words: Biomolecules- Biochemical tests- proteins-lipids-carbohydrates

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 Introducción

Los amortiguadores químicos o tampones fisiológicos (buffers), son disoluciones formadas

por un ácido débil y la sal de este ácido con una base fuerte, donde la concentración de
hidrogeniones varía al adicionar ácidos o bases fuertes.
La utilidad de los tampones, está precisamente en la posibilidad de mantener la concentración
de iones hidrogeno dentro de límites tan estrechos, por lo que se puede considerar como
invariable.
El alcance de este taponamiento en una solución dada es función de la concentración de H+
inicial y de las constantes de disociación y concentraciones de los tampones presentes.
Cuanto más cercano sea su constante de disociación (kα) a la concentración de H+, en la cual
el tampón tiene que actuar, más eficaz será el taponamiento, porque en esta circunstancia hay
la misma concentración de la forma ácida del tampón que de la forma básica, por consecuente
existe la máxima capacidad para amortiguar cambios de acidez en cualquiera de los dos
sentidos.
Ala ecuación de disociación de cualquier tampón se puede aplicar la ley de acción de masas:
V1
Ácido Base- + H+
V2
Donde V1= K1 [Á𝑐𝑖𝑑𝑜] y V2= [𝐵𝑎𝑠𝑒][𝐻 + ]. Por lo tanto tenemos que:

𝑘1
K=

Materiales y métodos

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Los materiales y los reactivos empleados en la práctica de laboratorio fueron suministrados

por los almacenes de materiales y reactivos del Programa de Química de la Universidad del

Quindío.

Metodología.

Se procedió a realizar la reacción de la leche y el ácido acético (𝐶𝐻3𝐶𝑂𝑂𝐻), donde se formó

un precipitado (coagulación de la leche) el cual indicó la formación de la proteína.
Posteriormente se filtró el precipitado obtenido, con el objetivo de recolectar el suero para
realizar las pruebas bioquímicas, principalmente las correspondientes a la identificación de
proteínas. Consecutivamente se lavó el precipitado (obtenido anteriormente), con éter, para
así efectuar las pruebas realizadas anteriormente, con un enfoque en aquellas que
identificaran lípidos y carbohidratos. Seguidamente se realizaron diferentes pruebas
bioquímicas a proteínas, carbohidratos y lípidos para así confirmar la presencia de
biomoléculas; esto como una prueba de control al procedimiento ejecutado con la leche.

Resultados

pruebas Benedict Fehling Biuret xantoproteica Sudan III

I Se descarto Positiva Negativa Negativo Negativa
II Se descarto Negativa Positiva positiva Negativa
III Se descarto Negativa Negativa positiva Positiva
IV Se descarto Negativa Negativa positiva positiva
Tabla 1. Pruebas bioquímicas para el reconocimiento de biomoleculas presentes en la
leche.

prueba Benedict Fehling Biuret xantoproteica Sudan III

Lactosa Se descarto Positiva Negativa Negativa Negativa
Caseína Se descarto Negativa Positiva Negativa Negativa
Fenilalanina Se descarto Negativa Negativa Positiva Negativa
Aceite Se descarto Negativa Negativa Negativa Positiva
vegetal
Glucosa Se descarto Positiva Negativa Negativa Negativa
Agua Se descarto Negativa Negativa Negativa Negativa
sacarosa Se descarto negativa negativa negativa Negativa
Tabla 2. Pruebas bioquímicas de control

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 Discusión de resultados

En la tabla 1 se puede observar las diferentes pruebas bioquímicas que se le efectuaron a la

leche. En el tubo I que contenía el suero, dio prueba positiva para la reacción con el reactivo
de fehling debido a que en el suero está presente la lactosa, la cual es un azúcar reductor;
reacción que también debe dar positiva con el reactivo de Benedict (esta prueba se descartó,
ya que el reactivo presentaba interferencias), pues estas dos pruebas son específicamente para
identificar azucares reductores. Con el reactivo de fehling se observó inicialmente una
coloración azul, que al someterla a calentamiento viro a un color rojo ladrillo, debido al oxido
de cobre.

El tubo II, el cual tenía el sólido, arrojó prueba positiva para Biuret, la cual se fundamenta en
el reconocimiento de proteínas como la caseína, presente en el precipitado obtenido. Dicha
reacción procede porque los iones cúpricos generan un complejo de coordinación con los
pares de electrones no enlazantes del N, el cual se encuentra en los aminoácidos de las
proteínas, esto se puede observar por una coloración purpura. Además se contempló un
resultado positivo con la prueba de xantoproteica que se basa en el reconocimiento de
proteínas con aminoácidos que tengan en su estructura grupos radicales fenilo, como es el
caso de la caseína.

El tubo III y IV que contenían el precipitado previamente lavado con éter, dieron positivos
para sudan III, este colorante es específicamente para reconocer los lípidos, por su baja
polaridad puesto que posee más afinidad con los lípidos que con el solvente empleado para
la disolución. Se confirma una prueba positiva por la coloración roja de la solución.
Asimismo como se registró en la tabla 1 la prueba de xantoproteica da efectiva para ambos
tubos, porque a pesar de haber lavado el precipitado con éter, quedaron trazas de caseína.

En la tabla 2 se registraron diferentes pruebas bioquímicas, con el fin de corroborar la

identificación de biomoleculas como azúcares (lactosa, glucosa y sacarosa), proteínas
(caseína, fenilalanina) y lípidos (aceite vegetal), confirmando así un resultado positivo
experimentalmente para las pruebas realizadas en la tabla 1.
La fenilalanina presentó interferencias; esta es una proteína con un radical fenilo por lo que
debe dar positiva para la prueba de xantoproteica.
La sacarosa como se puede observar en la tabla 2, da negativa para todas las pruebas
realizadas, puesto que Benedict y fehling son para azucares reductores y la sacarosa es un
azúcar no reductor.

Conclusión
Se determinaron la biomoleculas presentes en la leche con ayuda de diversas pruebas
bioquímicas como felhing, benedict, xantoproteica, sudan III y biuret, cada una de estas, para
biomoleculas diferentes. Se elaboró un control, el cual permitió confirmar la presencia de
carbohidratos, proteínas y lípidos que con apoyo de la literatura se verificó los diferentes
grupos funcionales presentes en estas.

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Referencias bibliográficas
1. José M. Macarullla, Félix M. Goñi. Biomoléculas: lecciones de bioquímica
estructural. Pág. 1. Illustrated. Reverte, 1993
2. Experimentos de química orgánica. ELIZCOM S.A.S. Pág. 183
3. Nuria Bolaños V., Giselle Lutz C., Carlos H. Herrera R. Química de Alimentos:
Manual de laboratorio. Pag 12. Editorial Universidad de Costa Rica, 2003.
4. Domingo Agustín Vázquez. Diccionario de ciencias. Pag 437. Editorial
Complutense, 2000