UNIVERSIDAD LAS FUERZAS ARMADAS - ESPE

CARRERA DE INGENIERIA EN CIENCIAS AGROPECUARIAS - IASA

GUÍA PARA LA PRACTICA DE LABORATORIO DE BIOQUÍMICA

PRACTICA No 4

TEMA: Reconocimiento de proteínas

OBJETIVO GENERAL:

Reconocer proteínas básicas en muestras de:

……………………………………………………………...

OBJETIVOS ESPECÍFICOS:

 Observar los diferentes porcentajes de proteínas presentes en la leche, huevos,

hígado, carne de res y gelatina sin sabor.
 Observar las distintas formas de aglutinación o coagulación de las proteínas al
agregar el ácido oxálico y ácido cítrico como buffers de separación
EQUIPOS, MATERIALES Y REACTIVOS

 Probetas
 Tubos de ensayo
 Vortex
 Huevos
 Hígado
 Leche
 Gelatina sin sabor
 Ácido cítrico
 Acido oxálico
 Reactivo biurette

PROCEDIMIENTO:

Preparación de los buffers de separación: Disuelva por separado 1 g de ácido cítrico,

ácido oxálico y NaCl, en 40 cc de agua.
Prepare 8 tubos de ensayo grandes para añadir en ellos las muestras y los buffers
Antes de añadir las muestras para determinar proteínas prepare alícuotas de cada una de
ellas
En dos tubos de ensayo agregue aproximadamente 20 ml de leche
En otros dos tubos de ensayo agregue aproximadamente 20 ml gelatina sin sabor
En otros dos tubos de ensayo agregue aproximadamente 20 ml de la clara de huevo
separada
En otros dos tubos de ensayo se agregue aproximadamente 20 ml de la solución de
hígado triturado y/o carne de res.
En un mortero coloque un trozo de hígado y/o carne (1 g), y con una pequeña cantidad de
agua destilada triture, la muestra, luego filtre la solución.
Preparada las muestras de hígado coloque en dos tubos de ensayo la solución filtrada
vaya añadiendo 4 ml del buffer de separación (ácido oxálico y ácido cítrico) agite
manualmente y deje en reposo por unos minutos. “observe”.
En otros tubos de ensayo coloque leche y añada de 4ml en 4 ml los buffer de ácido
oxálico y ácido cítrico, deje en reposo y observe la separación o/y aglutinación de la
proteína.
Realice el mismo proceso, con los 20 ml de gelatina sin sabor, clara del huevo y observe
los resultados, de ser necesario para apreciar un mejor resultado, centrifugue la muestra
por 5 min.

GRÁFICOS
Muestra Observaciones Figuragrafías

Leche La leche utilizada es Figura 1: Leche en Tubos de Ensayo

industrializada, no es
completamente natural.

Clara de La clara de Huevo fue Figura 2: Clara de Huevo en Tubo de

Huevo colocada directamente ensayo
en el tubo de ensayo

Clara de La presencia del ácido

Huevo oxálico en la clara de
huevo permitió
identificar a las
proteínas
ovoalbúminas a
Figura3: Clara de Huevo con ácido oxálico en tubo de
manera de pequeños
ensayo.
grumos en el tubo de
ensayo.

Leche Con ácido cítrico no se

consiguió separar a la
muestra para identificar
sus proteínas

Figura 4: Leche con ácido cítrico en tubo de ensayo

Hígado Se identificó a las
proteínas del hígado
ante la presencia de
ácido oxálico
principalmente.
Figura 5: Hígado triturado con agua en tubo de ensayo

Hígado y Se observó claramente

Clara de la separación
Huevo bioquímica mediante la
presencia de los
ácidos, mismos que
permitieron identificar
las proteínas tanto en
el hígado como en la Figura 6: Proteínas de Clara de Huevo e Hígado en
clara de huevo. tubos de ensayo

Leche La leche fue separada

luego del proceso de
centrifugación.

Figura 7: Proteína de Leche en cápsula petri

Conclusiones

 Resultó más factible la identificación de proteínas en hígado y clara de huevo

debido a su origen natural sin la presencia de otros compuestos como
persevantes, edulcorantes y colorantes que puedan alterar la composición
química de la muestra. Caso contrario ocurre en la leche, porque presenta otros
componentes adicionales, mismos que dificultan la identificación de proteínas
mediante ácidos oxálico o cítrico. Por lo que es necesario utilizar procesos de
centrifugación para la observación clara de proteínas en el laboratorio.
 El ácido oxálico resulta ser más efectivo para identificar proteínas en las muestras
utilizadas porque promueve la coagulación identificando albuminas en clara de
huevo. Sin embargo la prueba de Biuret es más general para identificar las
uniones peptídicas por aparición de coloración violeta en la muestra.