FUNDACIÓN UNIVERSITARIA DE CIENCIAS DE LA SALUD

POST LABORATORIO DE REACCIONES DE

AGLUTINACIÓN

Grupo13

INTEGRANTES:
Diana Maria Velasco Vallejo
Luisa Fernanda Villamizar Sánchez
Matheo Yañez Rojas

Bogotá
2018
INTRODUCCIÓN

El siguiente informe que se presenta da claridad a los conceptos de antígeno,

anticuerpo y él procesos de. Aglutinación y tipos de aglutinaciones que se dan
,como también se puede evidenciar los tipos de antígenos y sus receptores y los
tipos de anticuerpos. Y tipos. De unión antígeno anticuerpo en conclusión se dan
los componentes adecuados. Para la finalización de esta práctica de laboratorio.

OBJETIVOS

 Evidenciar y comprender conceptos de aglutinación.

 Conocer diferentes métodos y pruebas de aglutinación.
 Familiarizarse con la aplicación clínica y su importancia en el diagnóstico.
1. Con respecto a las partículas de látex son estas partículas portadoras de
antígeno o anticuerpo? Explique y de un ejemplo.

Estas partículas de látex se encuentran cubiertas de anticuerpos, los cuales

permiten que al unirse a los antígenos se formen grumos visibles
macroscópicamente.

Cuando se hace una prueba de meningococo, al colocar el LCR en el porta

objetos, las partículas de látex que tienen unidos los anticuerpos anti
meningococo, el antígeno hará aglutinación.

2. Para algunas pruebas, incluso los glóbulos rojos puede jugar el papel de
las partículas de látex, explique el principio de este tipo de prueba.

Este caso se ve en la prueba Coombs de aglutinación, al ser los glóbulos los que
llevan anticuerpos, estos se comportan como las partículas de látex explicadas
anteriormente, al unirse al suero anti grupo sanguíneo, se genera aglutinación y
permiten que esta se vea.

3. Como se puede definir el factor reumatoide, como se puede determinar en

el laboratorio clínico y cuál es su utilidad clínica?

El factor reumatoide (FR) es una proteína anormal que actúa cono un

autoanticuerpo, es decir, un anticuerpo que reacciona contra las propias células
del propio organismo.

El FR-Latex Test es una prueba rápida de aglutinación basada en una

modificación de la técnica de Singer1, para la detección directa y la
semicuantificación en porta de los factores reumatoideos (FR) presentes en el
suero.

La determinación se efectúa ensayando una suspensión de partículas de látex

recubiertos con gamma globulina humana frente a los sueros problema. La
presencia o ausencia de aglutinación visible es indicativa de la presencia o
ausencia de FR en las muestras ensayadas

COMPOSICION DE LOS REACTIVOS

Reactivo FR-Latex. Suspensión estabilizada y tamponada de

partículas de látex recubiertas con gamma globulina humana.
Contiene 0,95 g/L de acida sódica.
CONTROL +
Suero humano con una actividad aproximada equivalente a 25
UI/mL. Contiene 0,95 g/L de acida sódica.

CONTROL –

Suero animal con una actividad inferior a 5 UI/mL. Contiene

0,95 g/L de acida sódica.

Precauciones: En la preparación de reactivos de origen humano,

intervienen solamente materiales que, frente a técnicas probadas, han
mostrado su negatividad frente a anticuerpos anti-HIV 1+2, anticuerpos anti-
HCV y HBsAg. Tratarlos, no obstante, como si fueran potencialmente
infecciosos.

Aviso: Los reactivos de este kit contienen acida sódica. Evitar el contacto
con la piel y mucosas.

ALMACENAMIENTO Y ESTABILIDAD
Conservar a 2-8ºC. No congelar los componentes del kit ya
que podría verse afectada la funcionalidad del test.
El Reactivo y los Controles son estables hasta la fecha de
caducidad indicada en la etiqueta.

PREPARACION DE LOS REACTIVOS

El Reactivo y los Controles están listos para su uso.

MUESTRAS
Suero claro, reciente.
Una vez separado, el suero puede guardarse a 2-8ºC durante una
semana antes del ensayo, o por un período mayor a –20ºC.

EQUIPO ADICIONAL
Pipetas de volumen variable. Solución salina (NaCl 0,9%, para técnica semi-
cuantitativa).
Agitador mecánico rotatorio de velocidad regulable a 100 r.p.m.
Cronómetro

TECNICA

Prueba cualitativa

1.Equilibrar reactivos y muestras a temperatura ambiente (Resuspender el

antígeno con suavidad.
2. Aspirar y vaciar varias veces el cuentagotas para asegurar su homogeneidad
antes del ensayo.
3. Depositar 1 gota (50 ìL) de suero problema en uno de los
círculos de la tarjeta visualizadora.
4. En círculos adicionales, depositar 1 gota de control positivo y 1 gota de control
negativo.
5. Añadir a cada círculo 1 gota de Reactivo FR-Latex, próxima a la muestra a
analizar.
6. Efectuar la mezcla con ayuda de un palillo desechable,
extendiéndola de forma que cubra por completo la superficie
interior de cada anillo.
7. Emplear palillos distintos para cada mezcla.
8. Mover la tarjeta con agitador rotatorio (100 r.p.m.) durante 2 minutos
9.Observar de inmediato con la ayuda de una luz adecuada, la aparición de
cualquier signo de aglutinación.

Lectura
Reacción negativa: Suspensión uniforme sin cambio visible
alguno, tal como se presenta en el control negativo.
Reacción positiva: Aglutinación débil o intensa, fácilmente
visible macroscópicamente.

Prueba semi-cuantitativa
1.Para cada muestra a analizar se utilizan 6 círculos de una
tarjeta pipeteando 50 ìL de solución salina (0,9%) en cada uno
de ellos.
2. Pipetear sobre el diluyente del primer círculo 50 ìL de muestra,
y empleando la misma punta, mezclar mediante aspiraciones y
expulsiones repetidas, transfiriendo 50 ìL de la mezcla
resultante sobre el diluyente del segundo círculo.
3. Continuar con la serie de dobles diluciones hasta el sexto
círculo, desechando los 50 ìL provenientes del mismo. Las
diluciones finales obtenidas serán: 1:2, 1:4, 1:8, 1:16, 1:32, 1:64.
4. Ensayar cada una de las diluciones tal como se describe en la Prueba
cualitativa.

SIGNIFICADO CLINICO
Los factores reumatoides son un grupo de anticuerpos,
mayoritariamente de la clase IgM, dirigidos contra determinantes
de la porción Fc de la inmunoglobulina IgG del paciente.
Aunque presentes en diversas enfermedades se hallan elevados
principalmente en pacientes con artritis reumatoidea.
En el diagnóstico clínico, los resultados de la determinación de los
factores reumatoideos deben ser considerados siempre en relación
a los hallazgos clínicos y otras pruebas de laboratorio.

LIMITACIONES DEL PROCEDIMIENTO

Se han descrito reacciones positivas en condiciones clínicas
distintas a la artritis reumatoidea como la mononucleosis,
hepatitis, sífilis, infecciones diversas y en personas de edad
 avanzada. La mayoría de estos casos, cuando se ensayan
cuantitativamente, presentan títulos de FR muy bajos.
Pueden darse reacciones negativas falsas tanto en la fase
temprana como en la fase crónica sub-clínica de la enfermedad.

4. De la prueba de Coombs directa e indirecta explique en un gráfico en que

consiste, las razones por la que se realiza el examen y el significado de una
prueba positiva.

La prueba de Coombs, permite la detección e identificación de globulinas ligadas

inmunológicamente a los hematíes.
La adición del reactivo antiglobulina a los mismos ocasiona su aglutinación.
Si los glóbulos se encontraran sensibilizados por las inmunoglobulinas, el suero de
la prueba se combinara con ellos y generaría aglutinación.

PRUEBA DIRECTA

Prueba de Coombs Directo se usa para diagnosticar:

- Enfermedad hemolítica del recién nacido

- Anemia hemolítica autoinmune
- Reacción hemolítica post-transfusional

Schematic diagram of the Coombs A. Rad 1

 Cuando la prueba de Coombs directa da positivo, esta detectando anticuerpos que
se encuentran unidos a los eritrocitos.

PRUEBA INDIRECTA

Prueba de Coombs Indirecto se usa para el diagnostico de :

- Detección de anticuerpos irregulares

- Pruebas de compatibilidad
- Determinación de fenotipos
- Identificación y titulación de anticuerpos

Ilustración 1 Schematic diagram of the Coombs A. Rad January 2006

Cuando la prueba indirecta resulta positiva indica anticuerpos libres que pueden
reaccionar con los hematíes que presentan antígenos específicos.

5. Desarrolle un mapa conceptual que involucre la determinación de

antígenos y anticuerpos mediante la aglutinación directa e indirecta y sus
diferencias básicas
6. Si al hemoclasificar un individuo encuentra que su sangre no aglutina con
Anti-A ni con Anti-B, pero al transfundirle con sangre O hace hemólisis,
¿Cuál es el grupo sanguíneo al que probablemente pertenece este paciente?
¿Este grupo se caracteriza por la ausencia de qué antígenos de superficie?

Este paciente pertenecería al grupo h, esto es conocido como fenotipo Bombay,

los hematíes de este grupo no tienen antígenos de superficie anti-A ni anti –B, y
suelen ser mal hemoclasificados en grupo O- pero al realizar transfusiones hacen
hemolisis debido a que presentan el anticuerpo para H y lo reconocen,

7. Enumere algunos agentes infecciosos importantes, que son detectados

por la prueba de aglutinación de látex.

 Cryptococcus Neoformans.
 Staphylococcus Aureus Resistente A La Meticilina (SARM)
 Estafilococos Coagulasa Negativos Resistentes A La Meticilina
 Factor Reumatoide
 Trypanosoma Cruzi
 Antiestreptolisina O

8. Explicar la importancia de las partículas de látex en los niveles clínicos?

¿Qué es el Efecto pro zona ?

La importancia de las partículas de látex a nivel clínico radica en la posibilidad de

unir a ellas los anticuerpos para el reconocimiento de antígenos, al ser partículas
insolubles permitir ver una aglutinación, esto permite la realización de diversas
pruebas para distintos diagnósticos.

El fenómeno de zona, conocido técnicamente como fenómeno de pro zona, es la

ausencia de aglutinación o presencia de aglutinación completa en las diluciones
altas

BIBLIOGRAFÍA

 Ruiz J.. (1995). Fundamentos de hematología. Buenos aires:

Panamericana.
 Rodak. (2002). Hematología: fundamentos. Buenos Aires: panamericana.

 Abbas. A (2015). Inmunología Celular y molecular. Barcelona. Elsevier.