CURSO: Laboratorio Clínico

Clase 9: Urocultivo.
Introducción

La meta del Laboratorio de Microbiología en el

manejo de la Infección Tracto Urinario (ITU) es
reducir la morbilidad y la mortalidad a través del
diagnostico exacto y a tiempo con la apropiada
prueba de susceptibilidad a los antimicrobianos.
¿Que es una Infección Urinaria (IU)?

 Infección Urinaria :
es la invasión
microbiana de
cualquiera de los tejidos
que se extienden desde
el orificio uretral hasta la
corteza renal
El laboratorio de Microbiología
en las Infecciones Urinarias (IU)
Infecciones del Tracto urinario

Cultivo de Orina

BACTERIURIA SIGNIFICATIVA
Bacteriuria Significativa

 Bacteriuria: La presencia de bacterias en la orina,

independientemente de su origen.
 Bacteriuria Significativa (BS): concepto de
laboratorio que se refiere al hallazgo (por técnicas
microbiológicas), en una orina correctamente
obtenida y conservada, de un numero de bacterias
que indique que existe una infección del tracto
urinario y que no es solo contaminación.
 BACTERIURIA SIGNIFICATIVA

Infección Contaminación

ADULTOS ≥ 100,000 ufc/ml

Chorro medio

NIÑOS ≥ 10,000 ufc/ml

Excluir contaminación vaginal
Bacteriuria Significativa
Stam y col. N Engl J Med. 307:463-468, 1982

 Orina de mujeres con signos de

disuria y bacteriuria, con 102 a 105
UFC/ml. estaban asociados a
clínica de ITU
 Microorganismos: Escherichia coli
y Staphylococcus saprophyticus
Contaminación

 Bajo recuento o varias especies bacterianas crecen

en los cultivos de orina.
 Microorganismos contaminantes:
 Lactobacillus
 Especies de Corynebacterium
 Gardnerella
 Estreptococs α-hemoliticos
 Confirmar ITU por cateterizacion o punción
suprapúbica.
Bacteriuria: recuentos bajos

 50% de mujeres con ITU sintomático tienen ≥ 105

ufc/ml.
 Fase temprana de ITU
 Recuentos entre 102 y 104 ufc/ml tienen bacterias
típicas de ITU (E. coli, S. saprophyticus).
 La bacteria entra transitoriamente a la vejiga.
 Incremento de flujo urinario.
 Recuento significativo ≥ 102 ufc/ml en pacientes
sintomático.
Bacteriuria Asintomática

 Dos cultivos de orina (chorro

medio) con más de 100,000
UFC/ml con el mismo
microorganismo.
 Con o sin piuria
 Ausencia de síntomas de
infección.
 Importantes en embarazadas,
ancianos y pacientes
intervenidos urologicamente
 Clasificación de IU

 Por su localización
 Por su evolución
• Por su origen
• Por su características clínicas
• Por su gravedad
 Por su gravedad

 ITU no complicado: infección bacteriano o por

levadura en un tracto urinario normal
estructuralmente y neurológicamente.
 ITU complicada: infección bacteriano o por
levadura en un tracto urinario con anormalidades
funcionales o estructurales.
 sonda urinaria
 Calculo urinario
 Transplante renal
 Diabetes mellitus
 Sintomatología

 Del Tracto Bajo (Cistitis)

– Disuria (ardor al orinar)
– Poliaquiuria (frecuencia y urgencia)
– Tenesmo vesical (poco volumen de orina)
– Incontinencia
 Del Tracto Alto (Píelonefritis)
– Fiebre
– Dolor lumbar
– Malestar general, dolor de cabeza, nausea.
Epidemiología

Grupo de Edad % V/M Factor de Riesgo

Anormalidad anatómica
Neonatal 1.0 1.5:1 o funcional

Anormalidades
Preescolar 1.5 – 3.0 1:10 congénitas
Reflujo vesicoureteral
Escolar 1.2 1:30
Reproductiva 2.5 1:50 Actividad sexual

Incontenecia,
Geriátrica 10 - 30 1:1 hipertrofia prostática,
cirugía.
Etiología de las IU

 Infecciones por Gram-negativos

– Escherichia coli
– Klebsiella spp.
– Proteus spp.
– Enterobacter spp.
– Serratia spp.
– Pseudomonas aeruginosa
– Acinetobacter baumannii
Etiología de las IU

 Infecciones por Gram-positivos

– Staphylococcus saprophyticus
– Enterococcus faecalis
– Corynebacterium urealyticum
– Aerococcus urinae
– Streptococcus agalactiae
– Staphylococcus aureus
– Candida spp.
 Bacterias inusuales en los
urocultivos
 Ureaplasma urealyticum
 Mycoplasma hominis
 Gardnerella vaginalis
 Bacteroides fragilis
 Haemophilus influenzae
 Corynebacterium urealyticum

Fairley K F, and Birch D F. Detection of Bladder Bacteriuria in Patients with

Acute urinary Symptoms. J. Infect Dis, 159 (2).: 226-231, 1989.
METODOS DIAGNOSTICO DE
LABORATORIO
CULTIVO DE ORINA
Cultivos de Orina: Indicaciones

 Cultivo no siempre es necesario en mujeres con

disuria y piuria (ITU no complicada).
 Cultivos son indicadas en las siguientes situaciones:
 ITU complicada o características clínicas inciertas.
 ITU en pasadas 3 semanas indicando posible recaída
 Síntomas por mas de 7 días
 Reciente hospitalización, indicando posible IIH
 Embarazo
 Diabetes
 Obtención de Muestras
Tipo de
Muestras

Métodos Métodos no
invasivos invasivos

Punción Cateterización Chorro Bolsa Sonda

suprapúbica vesical medio colectora urinaria

Rev Chil Infect (2001); 18 (1): 57 - 63

 Uso de bolsa colectoras (adhesivas)
 Sensibilidad del 100%
 Especificidad 14 -84%
Si cultivo de orina es
negativo descarta ITU

Si cultivo es positivo
requiere descartar con
cateterización o punción
suprapúbica
A method comparison study to assess the reliability of urine collection pads as a means of obtaining
urine specimens from non-toilet-trained children for microbiological examination.
Farrell M. y col. J Adv Nurs 2002 Feb;37(4):387-393.
 Métodos Invasivos

Cateterización Punción suprapúbica

 Conservación de la muestra

 Hasta 2 horas a temperatura ambiente.

 Mantener la muestra en refrigeración a 4oC (hasta
por 24 horas).
 NO CONGELAR
 En caso de tener que transportarla por espacios de
tiempo mayores de 1 hora se recomienda el uso de
recipientes térmicos con hielo para mantener la
muestra fría.
 Conservadores no recomendable (ac. borico).
 Recolección de la muestra

 Condiciones:
 NO ESTAR
RECIBIENDO
ANTIBIOTICO
 Suspender de 3 a 5
días antes del cultivo.

Detección del Poder

Residual Antimicrobiano
(PAR test)
 Cultivo de orina (Urocultivo)

 Cuantificar el numero de bacterias por ml (UFC/ml)

 Un UFC representa una bacteria viable en la orina.

Staphylococcus

El numero de UFC es inferior al

numero real de bacterias en al
muestra
 Técnica de cultivo: asa calibrada
Volumen del
asa 0.001 ml.

Muestra Placa de agar

de orina CLED
 Técnica de cultivo: asa calibrada
 El volumen de orina en
el asa calibrada
depende:
• El ángulo con el
cual el asa es
introducido en la
orina.
• El diámetro del
recipiente de la
muestra.
Recuento de Colonias (UFC/ml)

 El asa calibrada carga

0.001 ml de orina
(factor 1000)
 El numero de colonias
es 100.
CALCULOS:
RC: 100 x 1000
RC: 100,000 UFC/ml.

La cifra real: (100 ± 20) x 1000 UFC/ml (p=0.05)

¿Que medios de cultivo utilizar?
Agar Sangre y Agar MacConkey
 Agar CLED
Usado para el aislamiento, recuento y identificación presuntiva de uropatógenos

• Cisteina: para engrandecer el

crecimiento de coliformes
dependientes de cisteina
(“dwarf colony”)
• Lactosa: fermentación de
lactosa
• Deficiente en Electrólitos:
previene el swarming del
Proteus
Colonia lactosa positiva
 Medios cromogénicos

Chromogenic UTI Medium CHROMagar Orientation

CPS ID2
Medios comerciales
 ¿Cuándo utilizar agar chocolate?
• Utilizar para el aislamiento
de microorganismos
exigentes.
• Especies de Haemophilus.
• Utilidad en el diagnostico
de ITU en niños con
anormalidades del tracto
urinario.
Agar Chocolate
Tiempo de incubación del cultivo de orina: 1 dia vs 2 dias
RESULTADOS:
Un día de incubación es confiable si:
(1) las muestras se incuban por un total de 24 horas
(2) las muestras con < de 104 ufc/ml se incuban por un
nnndia mas para mejorar el recuento
(3) Pacientes con sospecha de funguria, incubar por un
nnnminimo de 2 días
Diagnostico de Laboratorio de las
Infecciones del Tracto Urinario

Pruebas de Tamizaje
Métodos rápidos para
predecir resultados
Métodos para predecir resultados

 Microscopia de la orina
– Leucocitos
– Bacterias
 Pruebas bioquímicas
– Leucocito esterasa
– Nitrito urinario
 Orina centrifugada: Sedimento
Urinario
 Porcentaje de sedimento recobrado:
 Hematies – 60% son recobrados en el sedimento
 Leucocitos – 73% son recobrados en el sedimento
 Células Epiteliales – 84% son recobrados en el
sedimento
 Cilindros – 88% son recobrados en el sedimento
 Bacterias – 40% son recobradas en el sedimento
¿Porque tiene el mayor error analítico?
Volumen no constante Tiempo y Velocidad Subjetividad
de la Muestra No siempre ideal y cansancio

Hannemann-Pohlin. Chem Lab Medicine, 1999

Bacteriuria: evaluación microscópica

 ¿En que tipo de muestra?

– Sedimento de orina centrifugada
– Orina no centrifugada
 ¿Coloreado Gram o no coloreado?
 ¿Cuantas bacterias son muchas?
 Coloración de Gram
 Preclasificar del microorganismo a aislar :
 El tipo,
 La agrupación y
 La reacción al Gram
 Permite determinar la cantidad
Una 1 bacteria/campo de inmersión en el Gram de una
gota de orina sin centrifugar, correlaciona con un cultivo de
mas de 105 UFC/ml. de orina.
 Presencia de reacción inflamatoria y contaminación
con secreción vaginal.
Sensibilidad: 96.0% VPN: 98.7%
Especificidad: 99.2% VPP: 97.67%
Recuento de colonias de 104 a 105 UFC/ml
Observación de > 1 bacteria/campo de inmersión
HOSPITAL SAN BARTOLOME
HOSPITAL SAN BARTOLOME
HOSPITAL SAN BARTOLOME
HOSPITAL SAN BARTOLOME
 Valor predictivo de las pruebas de
laboratorio en el diagnostico de UTI
en niños
Prueba Sensibilidad ( %) Especificidad (%)
Tiras de orina:
Nitrito 50 98
Leucocito esterasa 83 84
Leucocito esterasa o nitrito 88 93
Sedimento (leucocitos > 5 / campo 40x) 67 79
Contaje hemocitometro ( > 10 / mm3) 77 89
Coloración de Gram 93 95
Diagnosis and Management of Pediatric Urinary Tract Infections . Zorc JJ y col. Clinical Microbiology
Reviews 2005 (18); p: 417 - 422
INTERPRETACION DEL UROCULTIVO

Agar McConkey Agar Sangre

Relevancia microbiológica del crecimiento

BACTERIURIA SIGNIFICATIVA

IDENTIFICACION ANTIBIOGRAMA
¿Que datos mínimos son importantes
para la interpretación ?
 Método de recolección de la muestra.
 Chorro medio
 Punción suprapúbica
 Cateterización
 Paciente presenta síntomas.
 Volumen sembrado.
 Si el aislamiento es un probable patógeno o
contaminante.
 ¿Como debemos interpretar un
cultivo de orina ?
 La mayoría de los cultivos de orina son fáciles de
interpretar.
 Ningún crecimiento
 Contaminación grosera (mas de 3 tipos de bacterias).
 Cultivos puros de uropatógenos (> 105 ufc/ml).
 Cultivos puro con bajos recuentos (< 105 ufc/ml) de
muestra obtenidas por punción suprapúbica o por
cateterización transitoria.
 Cultivos de orina con flora mixta y recuentos
variables puede ser difícil interpretar.
 Guía General en la Interpretación de
los cultivos de orina
 Una sola especie de Enterobacteria recuperada a
> de 105 ufc/ml de orina: con pacientes sintomático
para ITU, 95% de probabilidad de bacteriuria
verdadera.
 Una sola especie de Enterobacteria recuperada
entre 104105 ufc/ml de orina: con pacientes
sintomático para ITU, 33% de probabilidad de
bacteriuria verdadera.
 Guía General en la Interpretación de
los cultivos de orina
 Uropatogenos Gram positivos , hongos, bacterias
exigentes, se recuperan frecuentemente en
recuentos bajos 104105 ufc/ml de orina.
 Comensales de la uretra recuperados a < 104 ufc/ml
 Estafilococos coagulasa negativo (excepto S.
saprophyticus)
 Estreptococo viridans y estreptococos no hemoliticos
 Difteroides (Corynebacterium, excepto C. urealyticum)
 Lactobacillus
 Criterios Practicas de Bacteriuria
Significativa
 102 UFC/mL de E. coli o  105 UFC/mL de
Enterobacterias en mujeres sintomáticas
 103 UFC/mL en varones sintomáticos
 105 UFC/mL en pacientes asintomáticos en dos
muestras sucesivas
 103 UFC/mL en pacientes portadores de catéter
sintomático
Cualquier recuento obtenido por punción
suprapúbica
 ¿Como debemos informar un
resultado de cultivo de orina ?
 Si el cultivo es POSITIVO, reportar el recuento de
colonias de cada uropatogeno separadamente
seguido por la identificación con la susceptibilidad.
 Si el cultivo es NEGATIVO, ha de completarse
señalando el limite de detección,
 CULTIVO NEGATIVO (< 1000 UFC/ml)
si se utilizo una asa de 0.001 ml
 CULTIVO NEGATIVO (< 100 UFC/ml)
si se utilizo una asa de 0.01 ml