Espectrómetros Raman

• La mayoría de los espectrómetros Raman que se comercializan son

instrumentos de transformada de Fourier

• Hasta los años ochenta, tenían diseños semejantes y utilizaban el mismo

tipo de componentes que los instrumentos dispersivos ultravioleta-
visible clásicos

IMPORTANTE:
La línea de difusión de Rayleigh es a menudo seis ordenes de magnitud
mayor que las líneas Raman del desplazamiento de Stokes, por tanto, es
necesario reducirla al mínimo antes de que llegue al trasductor.

Se hace necesario filtros ópticos para eliminar la luz parásita procedente del
rayo laser para evitar saturar los trasductores.
Monocromador:

Se debe separar la dispersión elástica de la dispersión Raman, evitando daños

en el detector

• Sistema de doble o triple monocromador: elimina la dispersión Rayleigh,

mejora la resolución espectral pero disminuye la intensidad.

• Sistema de monocromador y filtro holográfico, estos filtros de interferencia se

ubican en la trayectoria del haz dispersado hacia el detector, no hay
disminución de la intensidad, se elimina la necesidad de monocromadores de
redes múltiples
Detectores

Fotomultiplicadores: son fotocátodos que emiten e- cuando un

fotón lo impacta.

CCD, charge coupled device, son detectores ópticos basados en

semiconductores silicio-metal.
Ventajas: bajo ruido, elevada eficiencia cuántica y elevada
sensibilidad en un amplio rango de trabajo (120 a 1000 nm, desde
UV hasta IR)

Detectores para FT-Raman, de arseniuro de In y Ga son

sensibles, pero no puede detectar desplazamientos Raman
superior a 3000 cm -1. Los de germanio alcanzan a 3500 cm -1
Espectrómetros Raman de transformada de Fourier

Fotoconductores In-GaAs
Ge

Ventaja: Mediciones de alta resolución que con instrumentos dispersivos ordinarios

(FT). El uso de una fuente de 1064 nm (1.064 μm) elimina virtualmente la fluorescencia
o la foto descomposición de las muestras. Se puede analizar colorantes y compuestos
fluorescentes
Desventaja: El agua absorbe en la región de 1000 nm (no se pueden usar soluciones
acuosas)
Aplicaciones
 Análisis de compuestos inorgánicos

• Se pueden utilizar soluciones acuosas

• Dado que las energías de vibración de los enlaces metal-ligando se encuentran
por lo general entre 100 y 700 cm-1, pueden ser estudiados con este tipo de
espectroscopia.
• Numerosos complejos de halógenos y halogenoides presentan espectros Raman
• Los enlaces metal-oxigeno también son activos en Raman
• La espectroscopía Raman muestra ser una herramienta con futuro en la
comprobación teórica y los estudios estructurales de sistemas inorgánicos.
Análisis de compuestos orgánicos

Los espectros Raman son semejantes a los espectros de infrarrojo en cuanto

a que presentan regiones útiles para la detección de grupos funcionales y
regiones de “huella dactilar” que permiten identificar compuestos específicos.

Sirve como información complementaria ya que algunas vibraciones no son

activas en IR y si en el Raman.

Análisis de sistemas biológicos

Se aprovecha la ventaja de que se presenta una mínima interferencia del agua

y el tamaño de la muestra puede ser muy pequeña.
Aplicaciones cuantitativas

Ventajas respecto a IR

• Los espectros tienden a mostrar menos amontonamientos de bandas,

menos probable el traslape de picos en las mezclas, y las medidas
cuantitativas son más sencillas.
• Los portamuestras en Raman no están sujetos al ataque de la
humedad
• Las pequeñas cantidades de agua presentes en la muestra no
interfieren.
• Como los haces láser se pueden enfocar con mucha precisión, es
posible efectuar análisis cuantitativos de muestras muy pequeñas

Asignar exposición: TIPOS DE ESPECTROSCOPIA RAMAN

Espectrometría molecular por luminiscencia

Fluorescencia (Fl)
Fosforescencia (FF)
Quimioluminiscencia (Ql)
Características de los diagramas de niveles de energía

Velocidades de absorción y de emisión

Absorción 10-14 a 10-15 s

Emisión Fluorescente 10-5 a 10-15 s

Emisión Fosforescente 10-4 y 10 s o mas

Emisión no radiante >10-12 s

Procesos de desactivación
Emisión no radiante (calor)
E*  Eo Entre niveles vibracionales
S2  So Varias etapas
S1  So
T1 So Emisión de fotones
• Fluorescencia
• Fosforescencia
Procesos de desactivación

El camino más rápido y óptimo S*  So es el que reduce el tiempo de vida de S*

Competencia entre Fluorescencia (Fl) vs Emisión no radiante (ENR)

Si v desactivación Fl > v desactivación ENR  Fluorescencia

Si v desactivación ENR > v desactivación Fl  Leve o nula fluorescencia

La luminiscencia esta limitada a sistemas con características estructurales y

ambientales que hacen que v ENR disminuya hasta que los procesos de emisión
fotónica (Fl, FF) puedan competir cinéticamente con ellos.
 Procesos de desactivación

Emisión no radiante (calor) Relajación vibracional

E*  Eo Entre niveles vibracionales
S2  So
S1  So
Emisión de fotones Conversión interna
T1 So
• Fluorescencia Conversión externa
• Fosforescencia Cruce entre sistemas

Relajación vibracional

• Generada por colisiones entre moléculas excitadas y las del solvente

• Trasferencia de energía rápida
• Aumento minúsculo de la T solvente
• >10-12 s
• Produce que la banda de Fl se desplace hacia mayores λ, menor energía
(desplazamiento Stokes).
Conversión interna

• Procesos intermoleculares por los cuales la molécula pasa a un estado de más

baja energía sin emitir radiación.

• Cruce entre dos estados de la misma multiplicidad (S2S1)

• Solapamiento de niveles energéticos vibracionales (Energías potenciales similares

– Favorece)

• Genera procesos de predisociación (𝑒ҧ se mueve un estado electrónico superior a

un nivel vibracional superior de un estado electrónico mas bajo). Un cromóforo
absorbe, ocurre la conversión interna de energía electrónica a vibracional muy alta
generando el rompimiento del enlace. Competencia pre-disociación vs
fluorescencia.

• Para algunas moléculas, los niveles vibracionales de S0 se superponen con los de

S1, lo que provoca una desactivación muy rápida que no da lugar a la fluorescencia
(moléculas alifáticas).
Conversión externa

• Generada por la interacción y la transferencia de energía entre la molécula

excitada y el solvente u otros solutos
• Evidencia:
Marcado efecto del solvente en la fluorescencia
Baja temperatura y mayor viscosidad – Menores colisiones entre partículas
disminuye la fluorescencia

Cruce entre sistemas (da origen a la fosforescencia)

• Cruce entre estados electrónicos de multiplicidad distinta (más común S1T1).

• La probabilidad del cruce entre sistemas aumenta si los niveles vibracionales de
los dos estados se superponen.
• Es más común para moléculas con átomos pesados (I, Br) – Las interacciones
spin – orbita aumentan, favoreciendo el cambio de spín.
• La presencia de especies paramagnéticas (O2) favorece el cruce entre sistemas,
disminuyendo la fluorescencia y favoreciendo la fosforescencia.
• Los procesos de conversión interna y externa compiten con la fosforescencia –
Se necesitan de condiciones adecuadas (Temperaturas bajas, viscosidades altas
o bajo técnicas especiales para proteger el estado triple)
 Factores que afectan a la fluorescencia y fosforescencia

Tanto la estructura molecular como el entorno químico determinan que una

sustancia sea o no luminiscente y así mismo su intensidad.

Relación entre la cantidad de moléculas que manifiestan luminiscencia y el

numero total de moléculas excitadas

∅ ⁓0, No es luminiscente
∅ ⁓1, Altamente luminiscente (Fluoresceína)
El rendimiento cuántico va a depender de las velocidades relativas para
cada proceso de desactivación.

𝑘𝑓 = 𝐹𝑙𝑢𝑜𝑟𝑒𝑠𝑐𝑒𝑛𝑐𝑖𝑎 𝑘𝑖𝑐 = 𝐶𝑜𝑛𝑣𝑒𝑟𝑠𝑖ó𝑛 𝑖𝑛𝑡𝑒𝑟𝑛𝑎

𝑘𝑝𝑑 = 𝑃𝑟𝑒𝑑𝑖𝑠𝑜𝑐𝑖𝑎𝑐𝑖ó𝑛 𝑘𝑒𝑐 = 𝐶𝑜𝑛𝑣𝑒𝑟𝑠𝑖ó𝑛 𝑒𝑥𝑡𝑒𝑟𝑛𝑎
𝑘𝑑 = 𝐷𝑖𝑠𝑜𝑐𝑖𝑎𝑐𝑖ó𝑛 𝑘𝑖 = 𝐶𝑟𝑢𝑐𝑒 𝑒𝑛𝑡𝑟𝑒 𝑠𝑖𝑠𝑡𝑒𝑚𝑎𝑠

Dependen de la estructura química Dependen del entorno

 Transiciones electrónicas involucradas

Rara vez se observa fluorescencia debida

a transiciones 𝜎 ՜ 𝜎 ∗

• Este tipo de transiciones requieren alta E

que es capaz
• Promueven la desactivación por
disociación y pre-disociación
Niveles de energía moleculares
electrónicos ¿Qué tipo de moléculas presentan este tipo
de transiciones?
Fl y FF Transiciones de menor energía

Fl  𝜋 ՜ 𝜋 ∗ ¿Qué tipo de compuestos son los que

FF  𝑛 ՜ 𝜋 ∗ presentan este tipo de transiciones?

Compuestos con dobles enlaces y electrones no

enlazantes (electrones libres)
Fluorescencia y estructura

1- Alta intensidad: Compuestos que contienen grupos funcionales aromáticos

con transiciones 𝜋 ՜ 𝜋 ∗ de baja energía.
Mayor cantidad de anillos y grado de condensación  mayor ɸ

2- Fluorescencia (menor Aromáticos): compuestos con grupos carbonilo en

estructuras alifáticas y alicíclicas o estructuras con dobles enlaces altamente
conjugados

3- Los heterocíclicos sencillos, como la piridina, el furano, el tiofeno y el pirrol no

presentan Fl

Pero heterocíclicos condensados si presentan fluorescencia

La sustitución en el anillo bencénico provoca desplazamientos en la longitud de onda de los
máximos de absorción, cambios correspondientes en la emisión de fluorescencia y afecta
con frecuencia la eficacia cuántica.
• Sustitución grupo alquilo Aumento intensidad de Fl
• Sustitución con halógeno  Se disminuye drásticamente la Fl, efecto más marcado con
el aumento de la masa molar (mayor para el sustituyente –I, Intensidad 0). – Predis.
• Sustitución con nitroderivados –NH3+ Disminuye Intensidad de la Fl. –Predis.
• Sustitución –COOH, -C=O  Inhibe la fluorescencia
Efecto de la rigidez estructural
Desde el punto de vista empírico, se tiene que la fluorescencia se ve favorecida
sobre todo en moléculas que poseen estructuras rígidas

ɸ=1,0 ɸ=0,2

La falta de rigidez de una molécula tal vez cause un aumento de la velocidad de

conversión interna y el correspondiente aumento en la probabilidad de
desactivación sin radiación.

Efectos de la temperatura y del solvente

Aumenta la frecuencia de las colisiones, aumenta

T ɳ Fl la probabilidad de desactivación por conversión
externa
 Solventes con átomos pesados o de solutos con dichos átomos
Fl en su estructura; Ej: tetrabromuro de carbono y el yoduro FF
de etilo.

Efecto del pH en la fluorescencia

• Se requiere de un control estricto del pH ya que las formas protonadas y
desprotonadas pueden generar o nó fluorescencia.
• Para compuestos aromáticos, es probable que tanto la longitud de onda
como la intensidad de emisión sean diferentes en las formas protonadas y no
protonadas del compuesto.

Las formas resonantes adicionales

ocasionan un primer estado excitado
mas estable; la consecuencia es una
fluorescencia en la región ultravioleta

**Se ha utilizado para detectar puntos finales en titulación acido base.

Ej: la Fl de la forma fenólica del acido 1-naftol-4-sulfonico no es detectable por
el ojo humano, al agregarle una base, se transforma en ion fenolato que
fluoresce en la región del visible.
Relación entre la concentración y la intensidad de emisión

F= K*c