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TESIS II
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Efecto in vitro del aceite esencial de las hojas de Lippia alba “pampa
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orégano” frente a Escherichia coli y Staphylococcus aureus
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TRUJILLO - PERÚ
2018
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DEDICATORIA
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A nuestros padres, por su apoyo incondicional, por
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darnos una carrera para nuestro futuro, por ser el
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motivo que nos impulsa a llegar más lejos y lograr
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Los Autores
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AGRADECIMIENTO
A nuestros profesores, que hoy pueden ver un reflejo de lo que han formado,
A nuestro asesor el Dr. Iván Miguel Quispe Díaz (Profesor Auxiliar de la Cátedra de
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Farmacología de la Facultad de Farmacia y Bioquímica) y Co-Asesora la Dra. Manuela
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Natividad Luján Velásquez (Profesora de Microbiología y Parasitología de la Facultad de
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Ciencias Biológicas), docentes de la Universidad Nacional de Trujillo, por ser excelentes
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profesores, por darnos la oportunidad de trabajar con ustedes y a la vez transmitir sus
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conocimientos hacia nosotros que han sido útiles en el desarrollo de esta tesis, por su
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Los Autores
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PRESENTACIÓN
vuestra honorable consideración y elevado criterio el presente informe final de tesis II,
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titulado:
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“Efecto in vitro del aceite esencial de las hojas de Lippia alba “pampa orégano” frente a
facultad y toda su plana docente que con su capacidad, buena voluntad y enseñanzas
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Dejamos a vuestro criterio señores miembros del jurado dictaminador la calificación del
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Loa Autores
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JURADO DICTAMINADOR
PRESIDENTE
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Dra. Marilú Roxana Soto Vásquez
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RM
JURADO
FA
ASESOR
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RESUMEN
La investigación tuvo como objetivo determinar el efecto in vitro del aceite esencial de
las hojas de Lippia alba frente a Escherichia coli y Staphylococcus aureus, para lo cual
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las concentraciones del aceite esencial diluido en polisorbato 80 y se agregó la suspensión
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bacteriana incubándose a 37°C por 48 horas. Obteniendo la CMI del aceite esencial de
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Lippia alba frente a Escherichia coli de 2.5 uL/mL, y la CMI del aceite esencial de Lippia
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alba frente a Staphylococcus aureus de 3 uL/mL. Posteriormente en la determinación de
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placa, colocando en las placas petri agar Mueller-Hinton obteniéndose la CMB del aceite
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esencial de Lippia alba frente a Escherichia coli de 2.5 uL/mL, y la CMB del aceite
DE
el aceite esencial de las hojas de Lippia alba tiene efecto antibacteriano frente a
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Palabras claves: Lippia alba, aceite esencial, Escherichia coli, Staphylococcus aureus.
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ABSTRACT
The objective of the research was to determine the In vitro effect of the essential oil of
the leaves of Lippia alba versus Escherichia coli and Staphylococcus aureus, for which
the essential oil was extracted by the method of steam distillation. For the determination
of the Minimum Inhibitory Concentration (MIC), the Brain Heart Infusion macrodilution
method (BHI) was used, after which the concentrations of the essential oil diluted in
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polysorbate 80 were added and the bacterial suspension was added, being incubated at
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37°C por 48 hours. Obtaining the MIC of the essential oil of Lippia alba versus
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Escherichia coli of 2.5 uL/mL, and the MIC of the essential oil of Lippia alba versus
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Staphylococcus aureus of 3 uL/mL. Later in the determination of the Bactericidal
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Minimum Concentration (CMB), the method of plate agar diffusion was used, placing in
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the petri plates Mueller-Hinton agar, obtaining the CMB of the essential oil of Lippia
FA
alba versus Escherichia coli of 2.5 uL/mL, and the CMB of the essential oil of Lippia
DE
alba versus Staphylococcus aureus of 3 uL/mL. Concluding that the essential oil of the
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leaves of Lippia alba has an antibacterial effect against Escherichia coli and
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Staphylococcus aureus.
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Key words: Lippia alba, essential oil, Escherichia coli, Staphylococcus aureus
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ÍNDICE
DEDICATORIA ................................................................................................... i
AGRADECIMIENTO .......................................................................................... ii
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JURADO DICTAMINADOR .............................................................................. iv
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RESUMEN ........................................................................................................... v
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ABSTRACT ......................................................................................................... vi
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I. INTRODUCCIÓN .................................................................................... 1
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V. CONCLUSIONES .................................................................................... 28
ANEXOS .............................................................................................................. 34
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I. INTRODUCCIÓN
En la naturaleza existen dos clases de células, las procariotas y las eucariotas; las
primeras son evolutivamente más antiguas, sólo se hallan como seres unicelulares y
Las bacterias, que son las células más pequeñas, sólo se pueden visualizar con ayuda
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de un microscopio. Las bacterias de menor tamaño miden sólo 0,1-0,2 µm de diámetro,
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mientras que las bacterias más grandes pueden alcanzar varias micras de longitud1,2,3,4.
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Las bacterias pueden sobrevivir y, en algunos casos, crecer en entornos hostiles, en los
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que la presión osmótica en el exterior de la célula es tan baja que la mayor parte de las
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células eucariotas se lisarían, con temperaturas extremas (tanto cálidas como frías), en
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condiciones1,2,3,4.
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las Gram positivas, sólo poseen peptidoglicano y las Gram negativas, tienen adosada
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bacterias tienen una cápsula rodeando la pared; también pueden poseer flagelos, que
división en dos células iguales; este proceso se conoce como fisión binaria1,2,3,4.
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capsular y las proteínas de los flagelos, son antigénicas, por lo que inducen la
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el oxígeno resulta letal (bacterias anaerobias) y algunas pueden multiplicarse tanto en
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presencia como en ausencia de oxígeno (bacterias facultativas) 1,2,4.
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Del número de especies bacterianas existentes en la biosfera, sólo unas pocas
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colonizan las superficies cutáneomucosas del hombre, y un número aún más limitado
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Entre estas especies esta Escherichia coli, una especie del género Escherichia, que es
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facultativo, no forma espora, fermentan la glucosa, reducen los nitratos, son catalasa-
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facultativos en el ser humano del tracto gastrointestinal, donde la mayor parte de ellos
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adhesinas y exotoxinas1,2,5.
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presentar una disposición típica en forma de racimos de uvas, denominado así por sus
lo que explica en parte que puedan desarrollarse y sobrevivir en las secreciones nasales
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y en la piel1,5.
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La enfermedad la produce mediante la liberación de toxinas o a través de la invasión
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directa y la destrucción del tejido. Entre las toxinas que produce figuran cinco toxinas
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citolíticas que dañan la membrana (alfa, beta, delta, gamma y leucocidina de Panton-
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estafilococos y síndrome del shock tóxico), mientras que otras afecciones son
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En los últimos años las diversas enfermedades ocasionadas por agentes patógenos e
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inadecuados comportamientos en los distintos estilos de vida del hombre moderno,
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creando muchos problemas de salud y la necesidad de buscar nuevas alternativas de
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tratamiento7.
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procariontes y que no afecten las células eucariontes humanas. Estos dos tipos
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de actividad microbiana como la penicilina G que afecta a las bacterias Gram positivas,
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Los antibióticos que actúan sobre una amplia variedad de bacterias Gram positivas y
microflora normal del huésped que normalmente suele competir con los patógenos o
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crecimiento)1,8.
Habría que concebir las moléculas de antimicrobianos como ligandos cuyos receptores
primera vez por Ehrlich, define la fracción química activa del fármaco que se une al
receptor microbiano. Las proteínas microbianas en las que actúa el antibiótico son
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componentes esenciales de reacciones bioquímicas en los microorganismos, y la
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interferencia en sus vías fisiológicas termina por destruirlos. En la medida en que un
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antimicrobiano actúe de manera específica en una proteína que no se expresa de forma
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extensa en otras bacterias, el fármaco tendrá un efecto relativamente selectivo como
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antimicrobiano8.
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Los procesos bioquímicos que suelen inhibirse incluyen síntesis de las paredes y de
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carboxipeptidasas) que son miembros de una gran familia de serina proteasas. Estas
penicilinas (PBP), porque son las dianas de los antibióticos b-lactámicos. Los cuales
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Entre los antibióticos b-lactámicos tenemos las penicilinas, muy eficaces con una
lactamasa1,8.
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También las cefalosporinas son antibióticos b-lactámicos derivados del ácido 7-
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aminocefalosporánico siendo más estables a la hidrólisis por las b-lactamasas. Otras
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clases de antibióticos b-lactamicos son los carbapenems y los monobactams5,10.
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proteínas. Entre estos están los aminoglucósidos, estos antibióticos ejercen su acción
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de proteínas al unirse de modo irreversible a las proteínas ribosómicas 30S. Esta unión
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También están los inhibidores de la síntesis de ácidos nucleicos como las quinolonas
Entre otros antibióticos esta la clofazimina, un antibiótico lipófilo que se une al DNA
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Cuando se comenzaron a usar en seres humanos, los antimicrobianos se consideraron
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curas milagrosas. Sin embargo, poco después del descubrimiento de la penicilina se
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advirtió que aparecía en forma rápida resistencia, lo que ponía fin al milagro. Esta
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situación grave persiste con cada antimicrobiano nuevo y amenaza con terminar con
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Una especie sometida a presiones químicas o de otro tipo que amenazan con su
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extinción, suele desarrollar mecanismos para sobrevivir bajo tal tensión excesiva. Los
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fármacos1,5.
procesos por los que el fármaco llega y se combina con el sitio en que actúa. De este
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antibiótico en el interior del patógeno, mayor expulsión del antibiótico desde la célula
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bacterias poseen una membrana externa que está por encima de la capa de
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peptidoglucano. La penetración de los antibióticos b-lactámicos en el interior de los
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bacilos Gram negativos requiere el paso a través de unos poros en esta membrana
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externa. Los cambios en las proteínas (porinas) que forman las paredes de los poros,
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pueden alterar el tamaño del orificio del poro o la carga de estos canales y dar lugar a
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lactámico a la PBP. Esta modificación puede estar mediada por una hiperproducción
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una PBP existente por recombinación o una mutación puntual. Por último, las bacterias
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similares a factores de elongación que protegen el ribosoma 30S. Cuando así sucede,
proteica1,5.
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50S1,5.
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En los macrólidos lo más frecuente es que la resistencia se origine de la metilación del
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ARNr 23S, impidiendo la unión por el antibiótico. Otros mecanismos de resistencia
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mecanismos incluyen una menor captación del fármaco causada por mutaciones en los
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eflujo que de modo activo eliminan el fármaco. Cada uno de estos mecanismos está
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En los últimos años se han realizado investigaciones dirigidas a buscar nuevas terapias
debido a la alta tasa de resistencia que presentan los patógenos microbianos en todo el
mundo. Este importante problema de salud pública involucra a todos los países debido
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patologías9.
podrían diseñar alternativas de tratamiento. Uno de los organismos con los cuales se
está trabajando para obtener nuevos compuestos antimicrobianos son las plantas9.
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Desde tiempos remotos es sabido que las plantas han sido utilizadas para una amplia
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variedad de propósitos. Las plantas medicinales nos ofrecen recursos potencialmente
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útiles en el tratamiento de enfermedades, representando una estrategia prometedora en
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muchas enfermedades. Recursos que serán utilizadas como materia prima para la
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La medicina natural hoy es un campo terapéutico que constituye una vía para
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tenemos:
siendo de 3,701 mg/mL mientras que para Staphylococcus aureus fue 15,167 mg/mL.
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También se precisó la CMB (Concentración Mínima Bactericida) de Escherichia coli
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siendo de 4,186 mg/mL, mientras que para Staphylococcus aureus fue 16,259
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mg/mL11.
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aceite esencial de Aloysia triphylla reveló inhibición del desarrollo de todas las
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de 10-50 μg/mL12.
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afirma que los aceites esenciales de Aloysia citridora mostraron una actividad
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antimicrobiana significativa contra bacterias Gram negativas y Gram positivas con una
respectivamente13.
muestra que el extracto etanolico de las hojas secas de Lantana cámara, frente a
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mg/mL14.
aureus, Escherichia coli, Pseudomona aeruginosa, otros), mientras que los extractos
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El estudio desarrollado en la Universidad Juárez del Estado de Durango de Mexico,
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muestra que el extracto etanólico de Lippia graveolens tiene un fuerte poder
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inhibitorio contra Staphylococcus aureus, además que en combinación con Propolis
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Dentro de la misma familia de estas plantas se encuentra Lippia alba que es originaria
FA
Libertad; Pasco; Ucayali y San Martín. Conocida también por otros nombres como:
TE
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pampa orégano, cidra, cidraero, orégano, sideraca, sideraera, erva cidreira, salsa brava,
BL
salva, salvia17.
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La Lippia alba, es una hierba arbustiva muy ramificada, de 1 a 2 m de altura, con olor
castaño claro con ramas nuevas pubescentes y las viejas glabras, hojas elípticas hasta
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corola lila y blanquecina con fondo amarillo. Fruto drupa o cápsula seca con exocarpo
de color violeta oscuro. Raíz axial, fasciculada, con más o menos 25 cm de largo17.
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como tricomas glandulares. El aceite esencial de Lippia alba está compuesto
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principalmente por dos tipos de compuestos químicos, los terpenoides y los
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fenilpropanoides. Aunque existe un gran número de quimiotipos18.
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El aceite esencial de Lippia alba, está constituido por siete quimiotipos. Pertenecen al
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quimiotipo I los aceites que poseen citral, linalol, -cariofileno como sus principales
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propiedades que tienen sus aceites esenciales. Planteamos esta investigación para
ampliar nuestros conocimientos científicos en el valor que tiene Lippia alba con sus
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investigación orientado a determinar el efecto in vitro del aceite esencial de las hojas
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de Lippia alba ”pampa orégano” frente a Escherichia coli y Staphylococcus aureus,
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con la finalidad de proporcionar una alternativa de solución a este problema con
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recursos que estén al alcance de la población. Es por ello que se plantea el siguiente
Y
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problema:
AC
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¿Cuál es el efecto in vitro del aceite esencial de las hojas de Lippia alba “pampa
FA
El aceite esencial de las hojas de Lippia alba tiene efecto antibacteriano, medido por
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Objetivos
Objetivo general
Determinar el efecto in vitro del aceite esencial de las hojas de Lippia alba pa pa
Objetivos específicos
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Escherichia coli.
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Determinar la Concentración Mínima Inhibitoria (CMI) del aceite esencial de las
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hojas de Lippia alba, por el método de macrodilución en caldo BHI frente a
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Staphylococcus aureus.
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Escherichia coli.
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Staphylococcus aureus.
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2.1. Materiales
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identificada y depositada con el código N° 59148 en el Herbarium Truxillense
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de la Universidad Nacional de Trujillo (Anexo 1).
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2.1.2. Material biológico
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Se utilizaron cepas de Escherichia coli (ATCC 25992) y Staphylococcus aureus
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(ATCC 25923). Estas cepas fueron proporcionadas por el Laboratorio de
IA
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- Agar Mueller-Hinton
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2.1.4. Medicamento
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2.1.5. Equipos
- Congeladora (Coldex)
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2.1.6. Solventes
2.1.8. Reactivos
- Agua destilada
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2.1.9. Otros
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- 6 Jeringas de 1 cc
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- 7 frascos de 10 cc, color ámbar.
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- 500 g de algodón hidrofílico. BI
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- Caja de guantes estériles
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- Gradilla
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- Mascarillas
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- Mechero de alcohol
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- Cocina eléctrica
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- Papel Kraft
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- Placas petri
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2.2. Método
2.2.1.1. Recolección
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2.2.1.2. Preparación de la muestra19
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a. Selección
O
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La planta recolectada fue transportada al Laboratorio de Farmacognosia de la
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b. Lavado
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c. Secado
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Se separó las hojas de los tallos de la planta, se colocó sobre papel kraft y se
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El aceite esencial fue extraído a partir de las hojas frescas por el método de
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condensada y se obtuvo dos fases, una de aceite esencial y otra del agua
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descomposición por la luz), bajo refrigeración a una temperatura de 4 oC20,21.
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2.2.1.4. Preparación de las diferentes concentraciones del aceite esencial de las hojas
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de Lippia alba BI
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Se tomó del aceite esencial puro (100%), volúmenes de 0.20 mL. 0.25 mL, 0.30
IA
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mL, 0.35 mL, 0.40 mL y 0.45 mL, se colocaron en frascos color ámbar
RM
completando con polisorbato 80, para obtener las concentraciones de 20%, 25%,
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de las hojas de Lippia alba se trabajó por triplicado, mediante el método de agar
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en placa, de los tres primeros tubos de la lectura del CMI, en los cuales no se
Cada cepa bacteriana se sembró en tubos con agar Müller-Hinton inclinado, los
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b. Estandarización del inóculo
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Se tomó una pequeña cantidad de colonias de cada cepa, para luego ser
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suspendidas en solución salina fisiológica estéril hasta alcanzar la turbidez
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equivalente al tubo N° 1 del Nefelómetro de Mac Farland (3 x 108 UFC/mL).
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modificado27
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sensibles es inhibido en zonas alrededor del área que contiene una concentración
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aceite esencial preparadas anteriormente, luego en cada tubo de ensayo se
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colocó 6 uL de la suspensión de la bacteria y se incubó a 37°C por 24 horas.
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Se empleó como control positivo al ciprofloxacino, 30 uL a una concentración
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de 2mg/mL y para el control negativo 30 uL de polisorbato 80. Se trabajó por
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triplicado.
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destruir o matar el 99.9% de bacterias del inoculo original, tras 18-24 horas de
incubación.
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Mueller-Hinton.
Se trabajó por triplicado con cada cepa e incubo a 37°C por 24 horas.
de bacterias.
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2.3. Análisis de datos23
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Los datos fueron presentados en tablas haciendo uso del Excel 2016.
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FA
DE
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III. RESULTADOS
Tabla 1. Concentración mínima inhibitoria (CMI) del aceite esencial de Lippia alba frente a Escherichia coli y Staphylococcus aureus
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Cepas Concentración mínima inhibitoria
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Bacterianas (μL/mL)
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̅± . .
𝐗
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Escherichia coli 2.5 ± 0.00
AC
RM
Staphylococcus aureus 3 ± 0.00
FA
̅
DE
X = promedio
CA
D. E. = desviación estándar
TE
Fuente: Investigadores
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Tabla 2. Concentración mínima bactericida (CMB) del aceite esencial de Lippia alba frente a Escherichia coli y Staphylococcus aureus
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Bacterianas (μL/mL)
M
UI
̅± . .
𝐗
Q
2.5 ± 0.00
O
Escherichia coli
BI
3 ± 0.00
Y
Staphylococcus aureus
IA
AC
̅ = promedio
X
RM
D. E. = desviación estándar
FA
DE
Fuente: Investigadores CA
TE
O
B LI
BI
24
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IV. DISCUSIÓN
Al comienzo del estudio se realizó el método de difusión de Kirby Bauer modificado para
verificar que el aceite esencial de las hojas de Lippia alba tiene efecto sobre los
ensayos para determinar las concentraciones de aceite esencial para realizar el estudio,
encontrando que el aceite esencial opacaba el caldo BHI, siendo necesario tomar como
A
IC
referencia para la determinación del CMI el sedimento bacteriano.
M
UI
En la tabla N° 01 se observa los valores de la CMI del aceite esencial de las hojas de Lippia
Q
alba, siendo para Escherichia coli y Staphylococcus aureus, 2.5 μL/mL y 3 μL/mL
O
BI
respectivamente. Dentro de esta familia, el aceite esencial de Lippia origanoides presento
Y
IA
una CMI para Staphylococcus aureus de 1,25 μL/mL durante los 10 meses de estudio y para
AC
Escherichia coli variaron entre 0.15 μL/mL a 0.31 μL/mL, estos resultados indican que los
RM
componentes del aceite esencial varían dependiendo de la estación y asimismo varían sus
FA
propiedades 27.
DE
CA
En la determinación del CMB, tiene de destruir o matar el 99.9% de bacterias del inoculo
TE
original, 0.1% es la cantidad máxima de UFC que debían crecer en placa, siendo en nuestro
IO
trabajo 600 UFC. En las placas cultivadas a partir del CMI de Escherichia coli no hubo
BL
BI
placas cultivadas a partir del CMI de Staphylococcus aureus si hubo crecimiento bacteriano,
siendo en todas las placas menor a 600 UFC (menor al 0.1% del inoculo original),
aceite esencial de las hojas de Lippia alba, siendo para Escherichia coli y Staphylococcus
25
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Dentro de esta familia, el aceite esencial de Lippia origanoides presento una CMB para
Escherichia coli de 1.25 μL/mL y para Staphylococcus aureus fue de 2.5 μL/mL27.
La composición de los aceites esenciales varía de acuerdo a las diferentes partes de la planta
A
de las cuales se extrae, y puesto que sus componentes volátiles son los que presentan el
IC
M
efecto antimicrobiano, se ha demostrado que los principales componentes derivan de un
UI
Q
grupo de terpenoides, sesquiterpenos y diterpenos, los cuales a su vez contienen diferentes
O
BI
grupos de hidrocarburos, ácidos, alcoholes, aldehídos, esteres, éteres y cetonas.
Y
El aceite esencial de Lippia alba está caracterizado por un alto contenido de monoterpenos
IA
AC
oxigenados.
FA
fosforilación oxidativa ha sido demostrado, siendo los compuestos fenólicos y los alcoholes
CA
no fenólicos los que exhiben los efectos inhibidores más fuertes, seguidos de aldehídos y
TE
IO
cetonas, estando así relacionada con el alto contenido de oxígeno que contienen los
BL
conduce a rupturas o fugas citoplasmáticas, lisis celular, interacciones con proteínas ATPasa
26
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Por otro lado, se ha observado en estudios que las bacterias Gram-negativas tienen mayor
relacionado con la membrana externa compuesta por lipopolisacáridos que poseen este tipo
de bacterias29.
Otros estudios suponen que el efecto antimicrobiano de los monoterpenos está influenciado
Los resultados obtenidos en esta tesis con otros estudios similares, puede diferir que muchos
A
factores varían entre los ensayos. Esto incluye diferencias en el crecimiento microbiano,
IC
M
exposición de los microorganismos al aceite esencial, la solubilidad del aceite, el uso y
UI
Q
cantidad de emulsificante. Asimismo, la composición del aceite esencial de Lippia alba
O
BI
puede variar, teniendo en cuenta factores como el clima y las condiciones ambientales.
Y
En las diferentes regiones, las mismas especies de plantas pueden exhibir diferente
IA
AC
composición de aceite esencial, esto es justificado por el hecho de que los aceites esenciales
RM
ambientales (temperatura, precipitación, humedad, duración de luz del día, niveles de luz),
CA
27
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V. CONCLUSIONES
La Concentración Mínima Inhibitoria (CMI) del aceite esencial de las hojas de Lippia
alba, por el método de macrodilución en caldo BHI frente a Escherichia coli fue 2.5
μL/mL.
La Concentración Mínima Inhibitoria (CMI) del aceite esencial de las hojas de Lippia
A
fue 3 μL/mL.
IC
M
La Concentración Mínima Bactericida (CMB) del aceite esencial de las hojas de
UI
Q
Lippia alba, por el método de difusión de agar en placa frente a Escherichia coli fue
O
2.5 μL/mL. BI
Y
La Concentración Mínima Bactericida (CMB) del aceite esencial de las hojas de
IA
AC
28
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2. Prats G. Microbiología Clínica. Ed. Medica Panamericana. 1° ed. España. 2005. Pág.
17
A
IC
4. Montoya H. Microbiología básica para el área de la salud y afines. Ed. Universidad
M
UI
de Antioquia. 2° ed. Medellín. 2008. Pag. 22-41
Q
O
5. Tortora G, Funke B, Case C. Introducción a la Microbiología. Ed. Medica
BI
Panamericana. 9° ed. Argentina. 2007. Pág. 12, 332, 583-595
Y
IA
Disponible en:
BI
http://repositorio.unapiquitos.edu.pe/bitstream/handle/UNAP/3864/Sergio_Tesis_T
itulo_2016.pdf?sequence=1
29
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http://hemeroteca.unad.edu.co/index.php/nova/article/view/1963/2184
10. Zarate M. Efecto in vitro antibacteriano del extracto acuoso de Caesalpinia spinosa
http://journal.upao.edu.pe/PuebloContinente/article/view/284/252
A
IC
hojas de Aloysia triphylla P. “cedrón” frente a Escherichia coli ATTC 25922 y
M
UI
Staphylococcus aureus 25923. [Internet]. [acceso en agosto del 2017]. Perú; 2013.
Q
O
Disponible en:
BI
http://200.37.105.196:8080/bitstream/handle/unjbg/285/170_2013_Aliaga_Mamani
Y
IA
_PA_FACI_Microbiologia_2013_Resumen.pdf?sequence=2
AC
http://doi.org/10.1155/2017/7801924
marianum. [Internet]. [acceso en agosto del 2017]. Colombia; 2010. Disponible en:
http://www.scielo.org.co/pdf/rudca/v13n2/v13n2a14.pdf
30
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departamento del Quindío. [Internet]. [acceso en agosto del 2017]. Colombia; 2009.
Disponible en:
http://blade1.uniquindio.edu.co/uniquindio/revistainvestigaciones/adjuntos/pdf/841
c_n1918.pdf
A
IC
Staphylococcus aureus. [Internet]. [acceso en agosto del 2017]. México; 2013.
M
UI
Disponible en: http://www.scielo.org.mx/scielo.php?pid=S1870-
Q
O
01952013000400009&script=sci_arttext&tlng=pt
BI
17. Pezo N, Gonzales A. Caracterización Agronómica de Pampa Orégano Lippia alba
Y
IA
(Mill). Folia Amazónica [Internet]. 1998 [acceso en agosto del 2017]; 9(1-2).
AC
Disponible en:
RM
FA
http://revistas.iiap.org.pe/index.php/foliaamazonica/article/view/175/154
DE
Aplicaciones del Aceite Esencial de Lippia alba. Rev. Bras. Pl. Med., Campinas
TE
[Internet]. 2016 [acceso en agosto del 2017]; 18 (1): 191-200. Disponible en:
IO
http://www.scielo.br/scielo.php?pid=S1516-
BL
BI
05722016000100191&script=sci_abstract&tlng=pt
19. Kuklinski C. Farmacognosia. Ed. Omega S.A. 1° ed. España. 2003. Pág. 14-17.
31
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http://www.bdigital.unal.edu.co/1173/1/angelaandreagonzalezvilla.2004.pdf
A
24. Picazo J. Métodos básicos para el estudio de la sensibilidad a los antimicrobianos.
IC
M
2000 [acceso en agosto del 2017]. Disponible en:
UI
http://www.seimc.org/contenidos/documentoscientificos/procedimientosmicrobiolo
Q
O
gia/seimc-procedimientomicrobiologia11.pdf
BI
Y
25. Saldarriaga A. Determinación de la Concentración Mínima Inhibitoria y
IA
http://www.mdpi.com/1420-3049/20/2/1860
28. Rodriguez C, Saavedra H. Determinación del efecto in vitro del extracto de las hojas
32
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Universidad Nacional de Trujillo; 2011. [acceso en agosto del 2017]. Disponible en:
http://dspace.unitru.edu.pe/bitstream/handle/UNITRU/4644/Rodriguez%20Crespo
%20Carmen%20Lisseth.pdf?sequence=1&isAllowed=y
A
Schmidt D, Otomar Caron B, Copatti C. (2017). Antimicrobial and synergistic
IC
activity of essential oils of Aloysia triphylla and Lippia alba against Aeromonas spp.
M
UI
Microbial Pathogenesis. 113.. 10.1016/j.micpath.2017.10.013.
Q
O
BI
Y
IA
AC
RM
FA
DE
CA
TE
IO
BL
BI
33
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A
IC
M
UI
Q
O
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Y
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AC
RM
FA
DE
CA
TE
IO
BL
BI
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Familia: Verbenaceae
Nombre Científico: Lippia alba (Mill.) N.E. Br. ex Britton & P. Wilson
Hábito: Suarbusto aromático de ca. 1.00 m de alto, flores rosadas.
Procedencia: Jardín Botánico “Rosa Elena de los Ríos Martínez”
Prov.: Trujillo Dpto.: La Libertad
Hábitat: Suelo salitroso-arenoso.
Altitud: 34 m.s.n.m.
CÓDIGO: 59148
A
IC
M
UI
Q
O
BI
Y
IA
AC
RM
FA
DE
CA
TE
IO
BL
BI
35
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A
alba. Lippia alba.
IC
M
UI
Q
O
BI
Y
IA
alba. decantación.
36
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A
IC
M
UI
Figura 1. Esterilización del Figura 2. Lavado del
Q
material contaminado en material.
O
autoclave.
BI
Y
IA
AC
RM
FA
DE
CA
y secado.
IO
BL
BI
37
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A
Figura 1. Cepas proporcionadas por el Figura 2. Calentando el agar Mueller-
IC
laboratorio de referencia regional en Hinton para el sembrado de las cepas
M
salud pública, del distrito de Trujillo, bacterianas.
UI
provincia de Trujillo, región la Libertad.
Q
O
BI
Y
IA
AC
RM
FA
DE
sembrado.
TE
IO
BL
BI
38
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A
Figura 1. Después de calentar el agar, Figura 2. Se colocó 0.1 mL de la
IC
se vertió en las placas. suspensión bacteriana por extensión y
M
se hizo los pocillos.
UI
Q
ciprofloxacino
O
BI
Y
IA
AC
RM
FA
Polisorbato 80
DE
blanco y el control.
TE
39
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A
observando que no se diluyó para un nuevo ensayo.
el blanco y control.
IC
uniformemente la muestra.
M
UI
Q
O
BI
Y
IA
AC
RM
con E. coli.
CA
TE
IO
BL
BI
40
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A
IC
M
UI
Q
O
BI
Y
Figura 10. Ensayo por triplicado con E. Figura 11. Ensayo por triplicado con E. coli
IA
Figura 12. Ensayo por triplicado con S. Figura 13. Ensayo por triplicado con S.
BI
41
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A
IC
Figura 1. Ensayo por triplicado con E. coli con
M
las concentraciones preparadas al 20, 25, 30, Figura 2. Se observa sedimento bacteriano a la
UI
35, 40 y 45 %, más el blanco y control, después concentración preparada de 20% (2 μL/mL en
Q
de 24 horas de incubación. el caldo) de E. coli, fue la más alta
O
concentración donde presento crecimiento
BI
bacteriano.
Y
IA
AC
RM
FA
DE
polisorbato 80 en E. coli.
después de 48 horas de incubación.
IO
BL
BI
42
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A
horas de incubación.
IC
M
observando sedimento solo hasta la
UI
concentración de 20 %.
Q
O
BI
Y
IA
43
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A
Figura 1. Calentando el agar Mueller- Figura 2. Preparando el material para
IC
Hinton para el sembrado de las cepas el sembrado.
M
bacterianas.
UI
Q
O
BI
Y
IA
AC
RM
FA
44
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A
30% (3 μL/mL en el caldo) en E. coli. 35% (3.5 μL/mL en el caldo) en E. coli.
IC
M
UI
Q
O
BI
Y
IA
AC
RM
FA
45
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ANEXO N° 9: Cálculos
x uL de aceite esencial--------------30uL
A
6 uL de aceite esencial (cantidad agregada al caldo BHI)
IC
M
6uL-------------3mL de caldo BHI
UI
Q
x uL-------------- 1mL de caldo BHI
O
BI
2 uL/mL de aceite esencial en el tubo de ensayo
Y
30uL de aceite esencial al 25% en 3mL de caldo BHI
IA
AC
46
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3 x 108 UFC-------------1000uL
x = 18 x 105 UFC
A
IC
M
UI
18 x 105 UFC-----------------3mL de caldo
Q
O
BI
x---------------1mL de caldo (cantidad agregada a la placa)
Y
x = 6 x 105 UFC
IA
AC
6 x 105 UFC-----------100%
RM
x----------------0.1%
FA
acción antibacteriana “in vitro” del aceite esencial de Lippia alba frente a Escherichia
IO
coli
BL
BI
∑ 𝑋 − 𝑋̅ 2
𝑆=√
𝑛−
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A
3.5 - - -
IC
4 - - -
M
4.5 - - -
UI
Leyenda: (+) con crecimiento; (-) sin crecimiento
Q
R1: resultado del primer ensayo
O
R2: resultado del segundo ensayo BI
Y
R3: resultado del tercer ensayo
IA
AC
Fuente: Investigadores
RM
2 + + +
2.5 + + +
IO
3 - - - 3 μL/mL
BL
3.5 - - -
BI
4 - - -
4.5 - - -
Leyenda: (+) con crecimiento; (-) sin crecimiento
R1: resultado del primer ensayo
R2: resultado del segundo ensayo
R3: resultado del tercer ensayo
Fuente: Investigadores
48
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A
IC
CUADRO N° 4: Concentración mínima bactericida (CMB) por acción antibacteriana
M
“in vitro” del aceite esencial de Lippia alba frente a Staphylococcus aureus
UI
Q
O
Concentración de UFC de Staphylococcus Concentración
aceite esencial aureus BI mínima bactericida
Y
(μL/mL) 𝑋̅ (CMB)
IA
3 21 3 μL/mL
AC
3.5 17
4 12
RM
Fuente: Investigadores
FA
DE
CA
TE
IO
BL
BI
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