Las escalas fósiles iluminan la evolución temprana

de lepidópteros y colores estructurales

Resumen

Las escamas de lepidópteros exhiben ultraestructuras muy complejas, muchas de las cuales
producen colores estructurales que son la base de diversas estrategias de comunicación. Sin
embargo, se sabe poco sobre la evolución temprana de las escamas de lepidópteros y sus
estructuras fotónicas. Presentamos arquitecturas de escala de Lepidoptera jurásico del
Reino Unido, Alemania, Kazajstán y China, y de Tarachoptera (un grupo madre de
anfiesmenoptera) del ámbar birmano del medio del Cretácico. Los lepidópteros del Jurásico
exhiben una vestidura de escala bicapa tipo 1: una capa superior de grandes escamas de
cubierta fundida y una capa inferior de pequeñas escamas de tierra fusionadas. Esta
disposición de escala, más ornamentación de espina de pescado preservada en la superficie
de la escala de la cubierta, es casi idéntica a la de algunos Micropterigidae
existentes. Críticamente, las ultraestructuras de escala fósil tienen periodicidades que miden
de 140 a 2000 nm y, por lo tanto, son capaces de dispersar la luz visible, proporcionando la
evidencia más temprana de colores estructurales en el registro de fósiles de insectos. El
modelado óptico confirma que los mecanismos de dispersión relacionados con la difracción
dominan las propiedades fotónicas de las escamas de cobertura fósil, que habrían mostrado
matices metálicos de banda ancha como en numerosos Micropterigidae existentes. Las
escalas de tarachopteran fósiles exhiben un conjunto único de características, que incluyen
el tamaño pequeño, la forma espatulada alargada, la ornamentación surcada y la disposición
irregular, lo que proporciona una nueva visión de la evolución temprana de las escamas de
lepidópteros. Conjunto, nuestros resultados proporcionan la evidencia más temprana para la
coloración estructural en lepidópteros fósiles y respaldan la hipótesis de que las escamas
fusionadas de las alas y la cubierta de bicapa tipo 1 son características básicas del
grupo. Las escamas del ala probablemente tenían orígenes profundos en los linajes
anfiesmenopteros anteriores a la aparición de los lepidópteros.

INTRODUCCIÓN
Los colores estructurales han evolucionado en una gran cantidad de animales y plantas y
son el resultado de la dispersión selectiva de la longitud de onda de la luz incidente por
estructuras con periodicidades que miden de decenas a cientos de nanómetros
( 1 - 3 ). Tales colores son típicamente más vibrantes y visualmente deslumbrantes que los
producidos a través de la pigmentación ( 4 ) y con frecuencia son multifuncionales,
desempeñando papeles importantes en la señalización sexual intraespecífica, el
aposematismo y la cripsis ( 5 - 7 ). Los lepidópteros exhiben en sus escalas algunos de los
colores estructurales más diversos producidos por los insectos, y esta diversidad
indudablemente ha contribuido al éxito evolutivo del orden ( 4 , 8 - 11).) En los
lepidópteros modernos ( 12 ) se encuentran cuatro tipos de recubrimiento a escala de ala ,
entre los que se encuentra el recubrimiento de escala bicapa tipo 1 (en el que una capa de
grandes escamas fusionadas recubre una capa de escamas de suelo fusionadas más
pequeñas). lepidópteros ( 12 ). El color de las alas de lepidópteros se suele atribuir a las
escamas de cobertura [pero véanse los estudios de Vukusic et al . ( 13 ) y Stavenga et
al . ( 14 )]; las escamas de suelo en muchos lepidópteros modernos contienen pigmento que
absorbe el exceso de luz transmitido por las escamas de la cubierta, mejorando así la pureza
espectral del color estructural ( 14 , 15)) A diferencia de otros tipos de vestimentas a escala,
es decir, aquellas que tienen escalas huecas, las estructuras fotónicas en la disposición de
bicapa tipo 1 están restringidas a la superficie abwing (hacia arriba) de las escamas de
cobertura.

A pesar del interés sostenido en la estructura, desarrollo y propiedades fotomiméticas y

fotónicas de las escalas de lepidópteros en estudios neonatológicos ( 13 - 22 ), y en
investigaciones recientes sobre colores estructurales en escarabajos fósiles ( 23 , 24 ) y
plumas ( 25 , 26 ), el La historia evolutiva profunda de escalas y colores estructurales en
lepidópteros es poco conocida. Se han reportado escamas de alas fósiles de fósiles de
compresión Mesozoico y Cenozoico y ámbar, pero la ultraestructura de la mayoría de estas
escalas fósiles no ha sido caracterizada ( 27- 32) Las únicas nanoestructuras fotónicas
reportadas en las escamas de insectos fósiles son de lepidópteros fósiles de la pizarra
bituminosa del Eoceno Messel, Alemania ( 9 ), y un único gorgojo del Pleistoceno de Gold
Run, Canadá ( 33 ). El registro fósil tiene el potencial de preservar las estructuras fotónicas
en escalas; ahora se sabe que el registro de las escamas de lepidópteros se extiende al
último Triásico ( 34 ), confirmando la factibilidad de reconstruir la evolución de las
estructuras fotónicas en este grupo. Las preguntas específicas sobre la evolución de los
lepidópteros son las siguientes: ¿se encontraron estructuras fotónicas en los primeros
lepidópteros y forman parte del plano de las escalas de lepidópteros?

Aquí, informamos arquitecturas de escala preservadas tanto en diversos lepidópteros

jurásicos de Europa y Asia como en Tarachoptera del Cretácico medio del ámbar birmano
[hace 99 millones de años (Ma)] y los comparamos con los de lepidópteros primitivos
existentes. Usamos microscopía óptica, microscopía electrónica de barrido (SEM),
microscopía electrónica de transmisión (TEM) y microscopía de escaneo láser confocal
(CLSM) para revelar la morfología y ultraestructura gruesa de las escalas. Utilizando los
parámetros ultraestructurales identificados en muestras jurásicas, demostramos el uso de
modelos ópticos para describir las propiedades ópticas teóricas de la disposición de escala
bicapa de tipo 1, proporcionando así la evidencia más temprana de colores estructurales en
el registro de fósiles de insectos.

RESULTADOS

Escamas del ala de lepidópteros jurásicos

Caracterizamos la disposición, forma y fina ultraestructura de las escamas de seis fósiles
del Reino Unido, Alemania, Kazajstán y China (que representan una porción sustancial de
lepidópteros jurásicos conocidos) utilizando microscopía óptica y SEM ( figura 1 ). Antes
del reciente descubrimiento de escamas de lepidópteros fosilizados en los últimos
sedimentos del Triásico del norte de Alemania ( 34 ), Archaeolepis mane (Archaeolepidae)
del Jurásico Inferior de Dorset en Inglaterra era el lepidóptero conocido más antiguo
( 35 ). Este lepidóptero exhibe una cobertura de escala densa en la proyección anterior de
5.5 mm ( figura 1 , A a C, y figura S1, A a E). Se producen dos tipos de escamas: escamas
de cobertura de 100 a 110 μm de largo y escamas de suelo de 76 a 82 μm de largo (Tabla
1 ). La superficie de cada escala de cubierta presenta de 20 a 25 crestas paralelas
longitudinales de 1,8 a 2,0 μm de separación ( figura 1C ). SEM y microscopía óptica (bajo
iluminación ultravioleta, figura S1C) muestran que las escamas de las alas son alargadas-
espatuladas con un margen apical redondeado ( Fig. 1C ); esta geometría es idéntica a la de
ciertos Micropterigidae existentes (una familia de polillas primitivas, Fig. 1K ) y no ocurre
en otros lepidópteros existentes. Del mismo modo, cuatro especímenes (posiblemente
Eolepidopterigidae), uno del Jurásico superior de Kazajstán (PIN2239 / 607) ( 36 ) y tres
del Jurásico inferior de Alemania (LGA968, LG1500 y LGA2150) ( 37 , 38), muestran
escamas de espatuladas densas en las alas anteriores (figuras S2 y S3, E a H). El espécimen
PIN2239 / 607 tiene escamas de cobertura y de tierra de 100 a 110 μm y de 48 a 53 μm de
longitud, respectivamente ( Tabla 1 ); las escamas de la cubierta presentan de 23 a 28
crestas longitudinales paralelas que se extienden ligeramente más allá del margen apical de
la escala ( figura 1F ). La microestructura entre las crestas paralelas de estas escalas no se
conserva claramente en estos fósiles de compresión. Además, investigamos 16 lepidópteros
bien conservados del Jurásico medio de Daohugou, China. Aunque los insectos fósiles de
Daohugou son famosos por su excelente conservación macroscópica ( 39 , 40), los
lepidópteros Daohugou (Mesokristenseniidae) conservan apenas vestigios de las escamas
de las alas (figuras S1, F y G).

Fig. 1Alas y escamas de Lepidoptera jurásico y Micropterigidae existentes.

( A a C ) A. crin del Jurásico Inferior de Dorset en Inglaterra, NHMUK In. 59397. (B y C)
Imágenes SEM de escamas de alas. ( D a F ) Espécimen de lepidópteros del Jurásico
superior de Karatau en Kazajstán, PIN2239 / 607. (E) Ampliación de la parte anterior en
(D), imagen SEM. (F) Escala de la cubierta que superpone la escala de tierra, imagen
SEM. ( G a I ) Espécimen de lepidópteros del Jurásico inferior de Grimmen en Alemania,
LGA1500. (H) Ampliación de la parte anterior en (G), imagen SEM. (I) Ampliación de la
escala anterior en (H), imagen SEM; tenga en cuenta que es un fósil de impresión y
representa una huella de la estructura original. ( J a L) Lanzamiento de polilla
micropterigida existente ( M. aruncella ). (K) Ampliación de la parte anterior en (J),
imagen SEM. (L) Ampliación de la escala anterior en (K), imagen SEM. ( M ) Esquema
interpretativo de ultraestructura de espina de pescado; las regiones entre las crestas
paralelas (rojo) muestran un llamativo patrón en espiga formado por crestas paralelas
oblicuas y longitudinales (verde) superpuestas a cruces paralelas estrechamente espaciadas
(amarillo). Cr, cruceta; Cs, escala de cobertura; Gs, escala de tierra; Hb, cresta en
espiga; Pr, cresta paralela. Barras de escala, 1 mm (A, D y G), 0.5 mm (J), 50 μm (E), 20
μm (B, C, F, H y K) y 1 μm (I y L). Crédito de la foto: BW, Nanjing Institute of Geology
and Paleontology, Chinese Academy of Sciences. Usado con permiso.

Tabla 1 Mediciones de escamas mesozoicas anteriores.

FL, longitud anterior; CSL, cubre la longitud de la escala; CSW, cubre el ancho de la
escala; GSL, longitud de la escala de tierra; GSW, ancho de la escala de tierra.

Ver esta tabla:

Muestra Taxonomía FL CSL CSW GSL (μm) GSW (μm) Edad y localidad
(mm) (μm) (μm)

Kinitocelis Tarachoptera 4.5 30- 15- Ninguna Ninguna Ámbar birmano de

brevicostata 50 20 mediados del
Cretácico

A. mane Archaeolepidae 5.5 100- 36- 76-82 26-33 Principios del

110 42 Jurásico; Reino
Unido

LGA968 ? Eolepidopterigidae 4.7 200- 70- 140-160 60-70 Principios del

230 80 Jurásico; Alemania

LGA2150 ? Eolepidopterigidae 4.7 200- 70- 140-160 60-70 Principios del

230 80 Jurásico; Alemania

LGA1500 ? Eolepidopterigidae 4.9 200- 65- Desconocido Desconocido Principios del

230 80 Jurásico; Alemania

Mesokristensenia Mesokristenseniidae 6.1 95- 35- Desconocido Desconocido Jurásico

sinica 110 43 medio; China

PIN2239 / 607 ? Eolepidopterigidae 5.2 100- 48- 66-72 35-43 Jurásico

110 53 tardío; Kazakhstan

Tabla 1 Mediciones de escamas mesozoicas anteriores.

FL, longitud anterior; CSL, cubre la longitud de la escala; CSW, cubre el ancho de la
escala; GSL, longitud de la escala de tierra; GSW, ancho de la escala de tierra.

El espécimen LG1500 (posiblemente Eolepidopterigidae, Jurásico inferior de Alemania),

conservado como un molde externo (impresión), revela la preservación de características
ultraestructurales tridimensionales en la superficie de las escamas. Estas escamas de
cobertura fósil tienen aproximadamente 200 a 230 μm de largo y 65 a 80 μm de ancho
( Tabla 1 ); su superficie exhibe de 30 a 38 crestas longitudinales paralelas espaciadas de
1.8 a 2.0 μm de separación. Entre las crestas paralelas se encuentran las características
ultraestructurales con periodicidades submicrométricas, es decir, un llamativo patrón de
espina de pescado formado por crestas paralelas oblicuas-longitudinales superpuestas a
cruces transversales estrechamente espaciadas (0,14 μm de separación) ( Fig. 1I).e
higos S3, C y D y S4). Las crucetas se conectan con, y son perpendiculares a, las crestas
longitudinales paralelas. Las crestas de espina de pescado tienen de 1.7 a 1.8 μm de largo y
0.25 a 0.30 μm de separación. El patrón de espina de pescado está presente solo en las tres
familias más antiguas de Lepidoptera (Micropterigidae, Agathiphagidae y
Heterobathmiidae) ( 12 , 41 , 42 ). Las escamas de cobertura de los lepidópteros jurásicos
estudiados aquí son, sin embargo, claramente diferentes de las de Agathiphagidae: estas
últimas tienen una muesca apical profunda, y sus crestas paralelas están más espaciadas
(distancias inferiores a 2 μm) ( 43).) Las escalas en los fósiles del Jurásico son muy
similares en morfología a las de los Heterobathmiidae existentes, pero carecen de las placas
de interverbio presentes en el último ( 12 ). Además, la disposición y la ultraestructura de
estas escalas fósiles difieren de las de los ejemplos conocidos en los Trichoptera existentes
(caddisflies, que están estrechamente relacionados con Lepidoptera) ( 44 , 45 ). Sin
embargo, las escalas se parecen mucho a las de ciertos Micropterigidae existentes,
notablemente Micropterix aruncella y Micropterix calthella ( 46 ), que exhiben tonalidades
metálicas de banda ancha.

Modelado óptico
Para reconstruir el color aproximado de las escamas de cobertura fósil de lepidópteros
jurásicos, realizamos modelado óptico. Nuestro modelo comprendía una geometría
bidimensional simplificada de la ultraestructura de escamas de cubierta fusionada, con
periodicidades de cresta cruzada y cresta de espina medidas directamente a partir de
imágenes SEM de la muestra LG1500 ( figura 1I y figura S3, C y D). Las simulaciones
demuestran que la respuesta óptica global incluye una fuerte dispersión coherente ( figura
2A ). En incidencia normal, la difracción de orden cero (produciendo efectos similares a la
interferencia de película delgada) a partir de la geometría de escala modelada muestra una
coloración de banda ancha, con una intensidad de aproximadamente 7 a 8% para longitudes
de onda superiores a 500 nm ( Fig. 2B)., lineas solidas). Esta respuesta es sensible al estado
de polarización de la luz incidente: la figura 2B muestra las cajas transversales eléctricas
(TE) y magnéticas transversales (TM), para las cuales el campo eléctrico está polarizado
linealmente de forma paralela o perpendicular a las crestas longitudinales, respectivamente.

Fig. 2Modelado óptico que muestra la respuesta fotónica de una estructura de escala
de cubierta fusionada simplificada.

( A ) Esquema tridimensional de la "celda unitaria" que representa la estructura

bidimensional "en forma de U" para la que se realizaron simulaciones, que muestra las
crestas paralelas que se extienden longitudinalmente a lo largo de la superficie de la escala
abwing. Al extender la celda unitaria se obtiene la estructura periódica que se muestra en la
parte superior izquierda. ( B ) Espectros de reflectancia (para excitación en incidencia
normal) que ilustran la difracción de orden cero (líneas finas de interferencia de película
delgada) y la difracción de primer orden (líneas discontinuas) para polarización TE (líneas
azules) y TM (líneas rojas) estados. Juntos, los espectros TE y TM producen la respuesta no
polarizada (líneas negras). ( C) La respuesta no polarizada de orden cero como una función
del ángulo de incidencia creciente, con la región encerrada por el rectángulo rojo que se
muestra en ( D ). ( E ) Carta de colores de la Comisión Internacional de Iluminación con el
espectro no polarizado de orden cero en (B) representado por el punto negro que ilustra el
color de banda ancha producido por la estructura en (A).

Hay tres picos distintos en la respuesta de TE con máximos a aproximadamente 460, 525 y
690 nm (el último es significativamente más amplio y se pesa hacia el borde de la banda de
longitud de onda larga) ( figura 2B , línea azul continua). La intensidad de estos picos
aumenta con el aumento de la longitud de onda, aunque el pico de longitud de onda corta
(460 nm) es considerablemente menos intenso, lo que ilustra la reflectancia relativamente
débil de las longitudes de onda azules. El pico ancho a 690 nm exhibe una pequeña, pero
aguda, inmersión a aproximadamente 640 nm que corresponde al inicio de la difracción
impuesta por la periodicidad de las crestas longitudinales paralelas. Los descensos menores
adicionales en la respuesta de tipo película delgada en longitudes de onda más cortas
también corresponden a los picos en la difracción de primer orden ( figura 2B , línea
discontinua azul).

Aunque la respuesta de TM es similar en intensidad a la modelada para el caso de TE, la

primera muestra menos picos espectrales distintos. Específicamente, el caso TM muestra un
aumento constante en la reflectancia de orden cero por encima de 500 nm, con un máximo
de aproximadamente 650 nm (una pequeña caída atribuida a la difracción de las crestas
paralelas de 650 a 670 nm) y una meseta para longitudes de onda que se extienden más allá
700 nm en el infrarrojo cercano ( Fig. 2B , línea roja continua). Juntas, las contribuciones
parecidas a la interferencia de película fina TE y TM producen un color estructural de
banda ancha con una incidencia normal.

Los efectos de difracción de orden superior, como resultado de la periodicidad impuesta por
las crestas longitudinales paralelas, son menos intensos. Esto se muestra aquí para el
término de difracción de primer orden solamente ( figura 2B , líneas discontinuas); sin
embargo, se producen muchos efectos de difracción de orden superior de baja
intensidad. Los modos difractados de orden superior se separan de la normal de la
superficie y así aumentan el rango angular sobre el que se dispersa la luz, lo que afecta la
direccionalidad del color. En consecuencia, la dispersión difractiva por las crestas paralelas
mantiene la apariencia de color de banda ancha de la báscula con respecto al ángulo de
visión: hay un desplazamiento azul mínimo en las características espectrales con un ángulo
de incidencia creciente ( Fig. 2 , C y D).

También realizamos simulaciones ópticas para investigar cómo las propiedades fotónicas
(el grosor de la escala, la altura de la cresta y el paso de cresta) de estas escamas de
cobertura fusionadas con el Jurásico responden a alteraciones en varios parámetros
estructurales (figuras S5, A a C). Se optimiza una respuesta fotónica fuerte con un grosor
de escala de 100 a 150 nm junto con una altura de cresta paralela que excede de 0,5 μm. Al
aumentar el tono de las crestas paralelas, se produce un desplazamiento hacia el rojo de las
características espectrales. Este cambio es más claro para el pico de alta longitud de onda
larga (máximo a 690 nm para parámetros por defecto).

En resumen, nuestras simulaciones ópticas de escamas de lepidópteros jurásicos

demuestran que la presencia de crestas longitudinales paralelas es suficiente para que estas
escamas produzcan dispersión óptica coherente, que, con los parámetros estructurales
apropiados, puede manifestarse como banda ancha, tonos metálicos comparables a los
observados en Micropterigidae existentes ( Fig. 2E ).

Escamas del ala de Tarachoptera

Tarachoptera es un grupo de tallo recién erigido de Amphiesmenoptera (que también
incluye Lepidoptera y Trichoptera) que potencialmente proporciona información
importante sobre el origen y plano de las escamas de las alas en Lepidoptera ( 47 ). Usando
microscopía óptica, TEM y CLSM, examinamos las escamas de las alas de dos
especímenes de tarachopteran recién descubiertos del ámbar birmano del Cretácico
medio. La característica más notable de estos fósiles recién descubiertos es la disposición
densa de escamas pequeñas, de 30 a 50 μm de largo, tanto en el ala anterior como en el
posterior ( Figura 3 ). En Lepidoptera, la longitud mínima de la escala individual
informada hasta la fecha es de 40 μm en una polilla nepticulítica, y la longitud mínima de la
escala es de 60 μm para una polilla micropterigida arcaica ( 48) Por lo tanto, a pesar de que
los taracópteros tienen alas y cuerpos más grandes que los micropérgidos existentes, las
escalas de tarachopteran fósiles son más pequeñas que las de los lepidópteros
existentes. Esto refuta la sugerencia de que un límite de tamaño de escala inferior era un
factor importante que impedía la miniaturización de los lepidópteros ( 49 ).

Fig. 3Tarachoptera del ámbar birmano del Cretácico medio.

( A a D ) K. brevicostata , femenino, NIGP164785. (B y C) Escalas de

lanzamiento; observe los tubérculos y setas en la membrana del ala. (D) reconstrucción a
escala. ( E a H ) K. brevicostata , macho, NIGP164786. (E) Imágenes CLSM de escamas
anteriores separadas de la punta anterior. (F) Bosquejo interpretativo de la sección
transversal de la escala. (G) Imagen CLSM de la sección transversal de las escamas
anteriores. (H) Imagen de TEM de la sección transversal de una escala anterior. Barras de
escala, 0.5 mm (A), 0.1 mm (B), 50 μm (C), 40 μm (E), 20 μm (G) y 2 μm (H). Crédito de
la foto: BW, Nanjing Institute of Geology and Paleontology, Chinese Academy of
Sciences. Usado con permiso.

Las escalas de tarachopteran fósiles consisten en un pedicelo basal enchufado a un alvéolo

y un cuerpo principal alargado y espatulado con un margen apical agudo ( Fig. 3 , D y
E). Son claramente diferentes de otras escamas primitivas de lepidópteros, que tienen
márgenes apicales redondeados o festoneados ( 8 ). La superficie de cada escala de
tarachopteran exhibe de 8 a 10 crestas longitudinales paralelas de 2 a 3 μm de separación
que se fusionan apicalmente en el margen distal; esto nuevamente contrasta con las
escamas primitivas de lepidópteros existentes, donde las crestas forman proyecciones cortas
más allá del margen de la escala ( 12 , 50 ). La escala del ala no muestra ventanas o
perforaciones entre las crestas paralelas ( Fig. 3, C y E). Además, los resultados de CLSM y
TEM muestran que la sección transversal del cuerpo principal de las escamas consiste en
una placa sólida y homogénea ( Fig. 3 , F a H). Todas las escamas del ala del tarachopteran
fósil están ligeramente arqueadas, por lo que el lado cóncavo está orientado hacia la
membrana del ala, que está densamente cubierta por tubérculos ( Fig. 3C ). Las setas se
dispersan aleatoriamente entre las escamas de ambas alas ( figura 3B ), que es una
condición primitiva retenida en la mayoría de los lepidópteros basales ( 12 ).

DISCUSIÓN

Estructuras fotónicas y colores estructurales del lepidóptero jurásico

Nuestros datos confirman el potencial de los fósiles de compresión e impresión para
preservar los detalles ultraestructurales de las escamas de lepidópteros. Las escamas
anteriores de los lepidópteros del Jurásico muestran notables similitudes morfológicas con
las de Micropterigidae existente; ambos tienen una disposición de bicapa de tipo 1, una
forma de espatula alargada y crestas de espiga. Además, estos resultados confirman que los
lepidópteros jurásicos tenían nanoestructuras fotónicas en sus escalas y exhibían así colores
estructurales.

Nuestras simulaciones ópticas revelan que el comportamiento fotónico de la arquitectura de

escala de cobertura fusionada en los micropterígidos existentes y en los fósiles del Jurásico
está impulsado por la interacción de las periodicidades espaciales de las crestas paralelas
longitudinales (paso medio, 1,9 μm), cruces transversales (paso medio, 140 nm), y crestas
en espiga (paso medio, 280 nm). La periodicidad estructural en el plano de la superficie de
la escala da lugar a la dispersión difractiva, mientras que la periodicidad perpendicular a la
superficie de la escala conduce a la interferencia de la película delgada. Este último tiende a
dominar donde múltiples componentes lamelares interfieren constructivamente. En los
fósiles del Jurásico estudiados aquí, las escamas de cobertura comprenden una única placa
laminar fusionada con elementos ultraestructurales adicionales que sobresalen de la
superficie abwing. Como resultado, La dispersión difractiva contribuye significativamente
a las propiedades fotónicas de las escalas. La coloración de los parches de oro brillante en
las alas de la polilla existenteThysanoplusia orichalcea (Noctuidae: Argyrogrammatini) se
atribuye de manera similar a los efectos de difracción ( 51 ). El paso transversal de 140 nm
medido aquí para el espécimen LGA1500 corresponde directamente al medido para T.
orichalcea ( 51 ). Las crestas en espiga son una característica estructural distintiva de las
escamas de cobertura de los fósiles de lepidópteros descritos aquí y, también, escamas de
color dorado en ciertos Micropterigidae existentes. Dado que las crestas de espina de
pescado están ausentes en escamas de color dorado en otros lepidópteros, lo más probable
es que no sean un factor determinante de la banda ancha, los tonos metálicos que muestran
las especies en este grupo. Por ejemplo, ambos lepidópteros superiores, como el
mencionado T. orichalcea, y los glosatanes primitivos que tienen la disposición de escala
bicapa de tipo 1 [por ejemplo, Eriocrania semipurpurella ( 50 )] logran colores
estructurales de banda ancha similares a los del oro a pesar de carecer de crestas en
espiga. Nuestro modelo ilustra que las ultraestructuras periódicas en las escalas de
lepidópteros del Jurásico podrían, sin embargo, producir colores metálicos de banda ancha
similares a los existentes en Micropterigidae ( 52 , 53 ), por ejemplo, M. aruncella y M.
calthella (figura S6). Antes de este estudio, se informó el primer registro de color
estructural en insectos en polillas fósiles de la pizarra bituminosa del Eoceno Messel,
Alemania ( 9).) Por lo tanto, nuestro descubrimiento extiende el rango geológico conocido
de los colores estructurales de insectos en al menos 130 Ma.

Plano de distribución y evolución temprana de Lepidoptera

Se cree que los lepidópteros y los tricópteros divergieron de un ancestro similar a la
necrotauliida en el último Triásico ( 54 , 55 ). Esto indica que Tarachoptera con una capa de
recubrimiento de una sola capa evolucionó antes del Jurásico ( Fig. 4 ). Las escamas de
tarachopteran fósiles exhiben un conjunto único de características, que incluyen su tamaño
pequeño, forma espatulada alargada, ornamentación surcada y disposición irregular; estas
características pueden indicar condiciones antes desconocidas, más arcaicas (relativas a las
escamas de las alas de las polillas primitivas existentes) ( Figura 4A ).
Fig. 4Historia evolutiva y paleodistribución de Amphiesmenoptera.

( A ) Filogenia simplificada de Amphiesmenoptera ( 47 , 55 , 56 ). ( B ) Distribución

paleogeográfica de lepidópteros del Jurásico en un mapa geográfico del Jurásico Medio
(aproximadamente 170 Ma antes) ( 60) Las ramas que representan lepidópteros son
rojas. Las barras verticales grises representan posibles apomorfías de vestidura de las alas:
1, revestimiento de una sola capa; 2, escala fusionada con microestructura simple; 3, crestas
que terminan en un margen de escala apical; 4, escala fusionada con crestas en espiga; 5,
tipo 1 cubierta de bicapa; 6, crestas que se extienden más allá del margen de la escala
apical; 7, acuerdo de escala agrupado; 8, escamas huecas presentes; 9, placas de
contenedores presentes; 10, cresta de espina de pescado ausente. Las escamas de
lepidópteros jurásicos en sedimentos clásticos están indicadas con barras verticales
amarillas: 1, Jurásico temprano de Inglaterra (hace 195 Ma); 2, Early Jurassic of Grimmen,
Alemania (181.5 Ma ago); 3, Jurásico medio de Daohugou, China (hace 165 Ma); 4,
Jurásico tardío de Karatau, Kazajstán (160 Ma ago).

A excepción de los miembros de Agathiphagidae (que tienen escamas de cubierta hueca y

escamas de tierra fusionadas) ( 43 , 54 , 56 ), la mayoría de los lepidópteros basales tienen
escamas fusionadas que carecen de perforaciones y / o ventanas ( 50 ). En lepidópteros más
derivados, las escamas son huecas y tienen ventanas y / o perforaciones en la superficie
abwing ( 12 ). Aunque la mayoría de los lepidópteros basales tienen escamas fusiformes
fusionadas ( 12 ), los estudios de biología del desarrollo sugieren que la escala primitiva de
lepidópteros debería ser hueca porque se origina en una cerda cilíndrica hueca
( 15 , 57).) Nuestros datos, sin embargo, muestran que las escamas de tarachopteran se
fusionaron y que los lepidópteros tempranos tenían una cobertura de la escala bicapa de
tipo 1. Estas observaciones respaldan la hipótesis de que las escamas de alas fusionadas y la
disposición de escala bicapa de tipo 1 son características fundamentales de Lepidoptera
( 8 ).

En resumen, nuestro estudio confirma que los primeros lepidópteros tenían en su cubierta
escalas de estructuras fotónicas que probablemente producían colores metálicos de banda
ancha a través de una combinación de mecanismos de difracción y de interferencia de
película delgada. Nuestros datos también demuestran que la vestidura a escala bicapa tipo 1
y las crucetas en espiga (características del plano de Lepidoptera) encontradas en
lepidópteros existentes basales ya habían evolucionado a mediados del Jurásico ( Fig.
4).) Estos hallazgos tienen implicaciones más amplias: la amplia presencia de escamas de
las alas en lepidópteros jurásicos y en tarachopterans sugiere fuertemente que las escamas
de las alas (incluidos algunos morfotipos posiblemente desconocidos) estaban muy
extendidas en el tallo Amphiesmenoptera antes de su apogeo en los lepidópteros. Dada la
presencia de coloración estructural en estos lepidópteros fósiles basales, el advenimiento de
los principales clados de lepidópteros en el Cretácico [pero véase el estudio de van Eldijk et
al . ( 34 )] plantea la posibilidad de que esta radiación taxonómica pueda haber estado
acompañada por una mayor diversidad en la forma de la escala, la microestructura y los
efectos ópticos ( Fig. 4).) Los estudios futuros caracterizarán la respuesta óptica de las
nanoestructuras de escala en otros especímenes fósiles y proporcionarán evidencia de la
presencia de pigmentos de escala en lepidópteros fósiles para informar a los modelos de la
evolución de los colores estructurales en lepidópteros.

MATERIALES Y MÉTODOS

Materiales y depósito
Los especímenes de ámbar birmano (NIGP164785 y NIGP164786) y Daohugou
(NIGP150462) se depositan en el Instituto de Geología y Paleontología de Nanjing, la
Academia de Ciencias de China; el espécimen del Reino Unido (NHMUK In. 59397) se
encuentra en el Museo de Historia Natural de Londres, y la imagen del archivo (figura S1C)
fue tomada por P. York en el Museo de Historia Natural; tres especímenes de Alemania
(LGA968, LGA1500 y LGA2115) están en el Museum für Naturkunde, Universidad de
Humboldt; y el espécimen de Kazajstán (PIN2239 / 607) se encuentra en el Instituto
Paleontológico de la Academia Rusa de Ciencias.

Microscopia óptica
Para reducir la distorsión óptica causada por el contraste del índice de refracción entre el
ámbar y el aire, colocamos las muestras de ámbar entre dos cubreobjetos y llenamos el
espacio con glicerol. Las fotografías fueron tomadas usando un sistema de microscopio
Zeiss Stereo Discovery V16 en el Laboratorio Estatal de Paleobiología y Estratigrafía,
Instituto de Geología y Paleontología de Nanjing, Academia China de Ciencias. En la
mayoría de los casos, el incidente y la luz transmitida se usaron simultáneamente. Todas las
imágenes son compuestos fotomicrográficos apilados digitalmente de aproximadamente 50
planos focales individuales obtenidos utilizando el software gratuito CombineZP para una
mejor ilustración de las estructuras tridimensionales.

Microscopio de barrido láser confocal

Se tomaron fotomicrografías con fondo verde usando un CLSM Zeiss LSM710 con
objetivos × 63 y × 40 y un láser a 488 nm en el Laboratorio Estatal de Paleobiología y
Estratigrafía, Instituto de Geología y Paleontología de Nanjing, Academia China de
Ciencias. Para obtener imágenes de mayor resolución, las dos muestras de ámbar
(NIGP164785 y NIGP164786) se pulieron hasta un grosor de 1,1 mm. Afortunadamente, se
expuso una sección transversal de las alas delanteras con escamas en el espécimen
NIGP164786, que permite el examen de una sección transversal del cuerpo principal de las
escamas.

Microscopía electrónica de barrido

Se obtuvieron micrografías electrónicas de barrido de la muestra de Kazajstán PIN2239 /
607 ( figuras 1 , E y F, y figura S2) analizando la muestra no recubierta con un
microscopio electrónico de barrido de presión variable LEO1530VP a una tensión de
aceleración de 15 kV en la llave de estado Laboratorio de Paleobiología y Estratigrafía,
Instituto de Geología y Paleontología de Nanjing, Academia de Ciencias de China. Las
imágenes SEM de las escamas de las alas de Micropterigidae existentes ( Fig. 1 , K y L) se
obtuvieron utilizando muestras de tejido deshidratado recubierto de oro. Imágenes SEM del
espécimen NHMUK In. 59397 ( Fig. 1, B y C, y la fig. S1, D y E) se obtuvieron utilizando
un microscopio electrónico de barrido de presión variable LEO 1455VP a una tensión de
aceleración de 20 kV en el Natural History Museum, Londres. Las imágenes SEM de la
muestra de Grimmen LGA1500 ( figura 1 , H e I, y las figuras S3, B a D y S4) se
obtuvieron utilizando un microscopio electrónico de barrido Zeiss EVO LS10 a una tensión
de aceleración de 10 kV después del recubrimiento de oro en Greifswald Universidad.

Microscopio de transmisión por electrones

La escala de sección transversal se aisló suavemente de una pieza rota de la muestra
NIGP164786 usando un bisturí y luego se incrustó en resina Epon-812. Las muestras
incrustadas se polimerizaron a 35 ° C durante 24 horas, luego a 40 ° C durante 48 horas, y
finalmente a 60 ° C durante 48 horas. La sección ultrafina se preparó utilizando un
ultramicrotomo PowerTome XL y se montó en una rejilla de cobre recubierta con
carbono. La sección fue fotografiada usando un microscopio electrónico de transmisión
JEM-1400Plus (a 80 keV) en el Laboratorio Estatal Clave de Lake Science and
Environment, Instituto de Geografía y Limnología de Nanjing, Academia China de
Ciencias.

Modelado óptico
El modelado óptico se realizó con COMSOL Multiphysics 5.2a ( www.comsol.com ), un
paquete de software de método de elemento finito comercial. Se construyó una estructura
periódica en forma de U bidimensional simple representativa de la muestra fósil LGA1500
( figura 1 , G a I) al repetir la geometría de celda unitaria ( figura 2A ). El tono de las
crestas longitudinales paralelas se determinó directamente a partir de las imágenes SEM de
la estructura ( Fig. 1I).y fig. S3, C y D). El paso de la cruceta es suficientemente pequeño
en relación con las longitudes de onda visibles, de manera que la luz incidente interactúa
con la superficie abbada de la escala (en las áreas de intercalación) como si fuera
homogénea. Como resultado, se produce la difracción de orden cero, que contribuye a la
reflectancia especular en lugar de dispersar la luz incidente a ángulos más altos. Además, la
dispersión difractiva de orden superior atribuible al paso de la cruceta es despreciable,
justificando así nuestra aproximación de la respuesta fotónica a través de una geometría
bidimensional simple. Los detalles de otros parámetros estructurales en el modelo utilizaron
datos de estudios previos: se utilizó un índice de refracción complejo, n * = 1.56 + 0.06 i ,
para la cutícula quitinosa de la muestra ( 13 ,58 , 59 ); se usó un grosor predeterminado de
100 nm para la cutícula de escala ( 8 , 51 ); y la altura de cresta paralela por defecto se
estableció en 500 nm ( 8 , 51 ). Considerando la morfología de escala fusionada, se asumió
que el índice de refracción se mantuvo constante en toda la escala. Las simulaciones
presentadas aquí corresponden a la dispersión óptica de una onda plana no polarizada a
incidencia normal a menos que se indique lo contrario. Las polarizaciones de onda
incidente se definieron como campo eléctrico TE (TM) paralelo polarizado linealmente
(perpendicular) a las crestas longitudinales, y la superficie normal para el plano de
incidencia para condiciones de excitación fuera de lo normal se definió como paralela a las
crestas longitudinales.
 Información del artículo
vol. 4 no 4
DOI:
https://doi.org/10.1126/sciadv.1700988
Publicado por:
Asociación Americana para el Avance de la Ciencia
ISSN en línea:
2375-2548
Historia:
 Recibido para su publicación el 30 de marzo de 2017
 Aceptado para su publicación el 23 de febrero de 2018
Derechos de autor y uso:
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