ENSAYO DE LABORATORIO

Control de Phytophthora con un extracto natural de origen vegetal

Introducción:

El tomate es un cultivo originario de Sudamérica y comercializado ampliamente en todo el

mundo; en la Argentina su producción anual es superior a 1.300.000 toneladas. Su cultivo
es altamente susceptible al ataque de varios hongos patógenos, por lo que se dedica mucha
investigación al estudio de las estrategias de control. Las infecciones fúngicas durante el
almacenamiento y el transporte de las frutas y hortalizas son la primera causa de
podredumbres poscosecha, que ocasionan pérdidas económicas significativas en la fase de
comercialización. Si bien el control de estos patógenos se ha venido realizando mediante el
uso de fungicidas sintéticos, su impacto potencialmente negativo sobre el ambiente, como
sobre la salud humana y animal registra un precedente que motiva el desarrollo de
alternativas más sustentables. Las plantas proveen de una fuente abundante de
compuestos biológicamente activos que pueden ser utilizados como agentes protectores
de los cultivos; producen una amplia variedad de compuestos, metabolitos secundarios,
como parte de su desarrollo, como en respuesta al estrés o al ataque de un patógeno, que
tienen efecto protector. Por lo tanto se plantea realizar una evaluación in vitro, en
condiciones de laboratorio, con un aislamiento de Phytophthora, obtenido de la zona de
producción hortícola NE de la provincia de Buenos Aires para tener una aproximación sobre
su potencial aplicación.

Procedimiento:

Para evaluar el poder fungicida de un extracto natural de origen vegetal para el control de
Phytophthora capsici in vitro se realizará un diseño en bloques completamente
aleatorizados (DBCA), bajo cámara de flujo laminar. Se probarán 3 dosis del extracto: 20, 30
y 50 ml/ l medio de cultivo agar jugo V8 (AV8) y se utilizará un testigo que consistirá en una
caja de Petri con AV8 y el aislamiento inoculado (T). El ensayo se realizará Con tres
repeticiones. El extracto se adicionará y se mezclará por agitación en un EM con medio de

1
cultivo a base de jugo V8 (AV8), el que será previamente fundido y preparado a tal efecto
para cada tratamiento. En cada caja de Petri se adicionarán 20 ml del medio. Una vez
solidificado el medio se inoculará un disco de 5 mm de diámetro del aislamiento de
Phytophthora en el centro de la caja y se incubará a 22°C por 14 días en oscuridad en el
bioterio de Ecología, perteneciente al Depto. de Cs. Básicas. El efecto inhibitorio será
evaluado de forma diaria en una hora prefijada mediante la medición de dos diámetros
perpendiculares de cada colonia. La inhibición del crecimiento será calculada basada en la
diferencia en porcentaje del diámetro promedio en comparación con el tratamiento
control: % Inhibición = (testigo–Tratamiento/Control) x 100.

En la siguiente tabla se deberán registrar las mediciones obtenidas:

Rep. 1 Rep. 2 Rep. 3 total

Boque Tratamiento
d1 d2 đrep1 d1 d2 đrep2 d1 d2 đ đ total
1 1
1 2
1 3
1 4
2
2
2
2
.
.
.
.
.
14 1
14 2
14 3
14 4

2
a) ¿Cuál es la variable respuesta? Indique las unidades y el tipo de variable.
b) ¿Cuál es el factor en estudio?
c) ¿Cuáles son los tratamientos?
d) Defina la unidad experimental
e) ¿Cuál es el modelo que se adecua?
f) Realice el análisis de varianza
g) Se pretende conocer si hay diferencias significativas entre las dosis utilizadas y
además hacer una recomendación sobre la dosis a utilizar para ensayos posteriores
con este extracto.
h)