UNIVERSIDAD ESTATAL

PENÍNSULA DE SANTA ELENA

CARRERA DE ENFERMERIA
MATERIA: MICROBIOLOGÍA
FORMATO DE PRÁCTICA DE MICROBIOLOGÍA

PRÁCTICA # 3
DOCENTE: Q.F. Patricia Suárez G.
NOMBRE DE Diagnóstico microbiológico de las Infecciones del Tracto Urinario
PRÁCTICA (ITU). Urocultivo

OBJETIVO DE LA Aplicar los métodos convencionales para el diagnóstico microbiológico de

PRÁCTICA infecciones del tracto urinario (ITU).

MATERIALES Y Etapa pre-analítica

MÉTODOS
Recomendaciones previas a la toma de muestra

Mujeres: se debe higienizar la zona genital con agua y jabón, de adelante

hacia atrás, secarse con toalla limpia, se deben colocar un tapón vaginal
(torunda de gasa o algodón) y se recomienda orinar separando los labios
mayores.

Hombres: se debe retraer el prepucio e higienizar el glande y surco

balanoprepucial con agua y jabón (no usar antisépticos). Se elimina el
primer chorro de orina y luego se recolecta en un envase estéril la fracción
siguiente.

Etapa analítica

Procesamiento de la muestra: antes de iniciar el estudio de la muestra, el

microbió- logo debe conocer algunos datos concernientes a la misma.

Muestra: tipo de recolección: chorro medio, punción suprapúbica, sonda

(punción, sonda nueva). Conservación.

Siembra: responsable es el auxiliar de bacteriología . La muestra debe ser

sembrada dentro de 2 horas de haber sido tomada, si se mantiene a To
ambiente; si la muestra se ha mantenido refrigerada puede ser sembrada
hasta dentro de 4 harás.

Orinas de 2a micción y por catéter permanente: primero se debe agitar bien

la muestra con movimientos suaves para homogeneizarla, se introduce asa
inmediatamente por debajo de la superficie líquida y se toma una gota con
asa de 1 μL, llevarla en forma vertical y sembrar en placa de agar
cromógeno para orina, haciendo una línea central y luego pasando en forma
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horizontal el asa desde el inicio de la línea hasta el final de ella, sin cortar los
trazos (como zigzag). Para interpretar e informar un urocultivo se compara
con el sedimento, de manera que no haya discordancia en ambos
resultados

Incubación en estufa de cultivo a 35° a 37oC a atmósfera normal por 18 a 24

hrs. Las placas de urocultivos incubadas son examinada por el bacteriólogo
la presencia o ausencia de crecimiento, y decidir estudio. En los cultivos
positivos se determina recuento de colonias, identificación de
microorganismo y estudio de susceptibilidad según criterios: Interpretación
e informe de resultados de urocultivo.

Las placas que tienen escaso desarrollo o que son de muestras obtenidas
por métodos invasivos se reincuban. Recuento de colonias: no colonias x
1.000 (siembra con asa de 1 μL) ó no colonias x 100 (siembra con asa de 10
μL) Interpretación del cultivo: el responsable es el Tecnólogo médico Para la
interpretación del resultado, se debe relacionar el recuento de colonias con
la clínica del paciente, con el sedimento urinario o tinción de Gram, con el
método de recolección de la muestra y con antecedentes clínicos del
paciente. Informe: Cultivo negativo a las 24 horas.

Etapa post-analítica

Informe de resultados

Datos personales del paciente: nombre y apellidos, cédula de identidad.

nombre del médico tratante
 Fecha de recepción de la muestra y emisión
del reporte.
 Tipo de muestra: orina (especificar método de recolección)

Examen realizado: Urocultivo o cultivo y antibiograma
 resultados del

examen directo: fresco o frotis
 Agente microbiano aislado (género y
especie) y recuento de colonias: recuento de colonias:

generalmente un recuento de 10.000 o menos colonias por ml de orina

indica contaminación y un recuento de 100.000 o más, indica infección.

Cuando se obtienen valores intermedios, el examen debe ser repetido, ya

que existen factores como, por ejemplo, la obstrucción uretral, diuresis,
infecciones crónicas e infecciones por cocos grampositivos, que pueden
explicar recuentos bajos en infeccio- nes urinarias verdaderas.

Cultivo positivo: se informa recuento de colonias aproximado hasta 100.000

unidades formadoras de colonia por mL (UFC/mL).

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DESARROLLO DE LA UROCULTIVO
PRÁCTICA
Primer período Materiales

• Muestra de orina
 • Asa calibrada
 • Coloración de Gram

• Láminas portaobjetos y cubreobjetos.
 • Agar sangre y agar CLED,

MacConkey o EBM.

Sembrar la muestra de orina en AS y CLED o MK o EMB, utilizando el asa

calibrada e incubar en las condiciones ya señaladas 


Segundo período Materiales

• Pruebas bioquímicas
 • Reactivo de oxidasa
 • Reactivo para la prueba

de catalasa • Papel de filtro
 • Palillos de madera

Procedimiento

• Agar Mueller Hinton
 • Patrón de MacFarland 0,5 • Hisopos estériles
 •

Discos de antibióticos
 • Pinza sin dientes

observar las placas sembradas en el período anterior, describa las

características observadas en cada medio y realice el contaje de
colonias. 


Con base en la morfología y tinción observada en el examen

directo de la muestra de orina coloreada con Gram y el estudio de
las características de las colonias y su efecto sobre el medio del
agente etiológico, seleccione y siembre las pruebas fisiológicas que
le permitirán identificar el microorganismo, así como los
antibióticos para la prueba de sensibilidad de acuerdo al agente
presuntamente identificado y los datos clínicos y epidemiológicos.



Tercer período Materiales


 • Reactivo de oxidasa


 Procedimiento 


Realizar la prueba de la oxidasa si es el caso, realizar la lectura de las

pruebas fisiológicas montadas en el período anterior e 
 identifique el
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agente aislado, realizar la lectura de la prueba de susceptibilidad
antimicrobiana. 


Elaborar el informe definitivo de los resultados. 


Cultivos negativos: negativo a las 48 horas de incubación o no se

observó desarrollo bacteriano hasta las 48 horas de incubación.

Cultivos positivos: Desarrollo de número de UFC/ml de orina de nombre

del microorganismo.

CONCLUSIONES De esta práctica se puede decir que es el mejor de los métodos para
realizar, además de tener un amplio espectro clínico. La muestra de orina
para urocultivo es la más frecuentemente recibida y procesada en los
laboratorios de microbiología.

RECOMENDACIONES Toma de muestra del paciente

• Preferentemente se debe obtener la primera orina de la mañana (ya
que se trata de una muestra más concentrada). De no ser posible, el
paciente debe abstenerse de orinar durante las 3 horas previas al
examen.

• No forzar la ingestión de líquidos, ya que con ello se diluye la orina,

alterando el recuento.
 Lavado de manos.
 Lavado del meato genitourinario.
 Abrir los labios vaginales.
 Preferentemente se debe obtener la primera orina de la mañana
(ya que se trata de una muestra más concentrada). Se obtiene en el
segundo chorro.
Volumen recomendado a recolectar: 25 a 50 ml.
Volumen mínimo: 3 ml.
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