PRACTICA No.
3 COFACTORES E INHIBIDORES
Abonce Abonce E, Carranza Rodríguez Y, Guzmán Herrera B ,Moreno Garcia M,Rodriguez Rangel E
1. INTRODUCCIÓN
Además del componente proteínico, muchas
enzimas requieren la presencia de ciertos
componentes accesorios reciben diversos nombres:
cofactores y coenzimas. El termino cofactor no
tiene una definición precisa, son pequeños iones
orgánicos. (Virginia Melo, 2007) Estos auxiliares,
llamados cofactores pueden unirse de forma
estrecha en la enzima; los cofactores funcionan de
diversa maneras pero, en todos los casos en los que
se emplean, tiene una función crucial en la catálisis.
Si el inhibidor es una molécula orgánica se le llama
más específicamente coenzima. Ciertos productos
químicos inhiben de forma selectiva la acción de
enzimas específicas, si el inhibidor se une a la
enzima mediante enlaces covalentes, la inhibición a
menudo es irreversible, son embargo, si se une a la
enzima mediante enlaces débiles la inhibición es
reversible.Atendiendo a su mecanismo
distinguimos entre tres tipos de inhibición:
competitiva, no competitiva y acompetitiva.
(Neil A. Campbell)
2. METODOLOGÍA
. A.PREPARACION DEL SISTEMA
DESHIDROGENASA LACTICA-NAD.
Preparación de la coenzima.
De la pierna de pollo, obtener 10 g del musculo:
cortarlo en fragmentos pequenos y colocarlos en un
vaso con agua destilada, en una proporcion de 8 mL
de agua por gramo de musculo. Poner el vaso a
baño maria, a ebullicion durante 5 minutos.
Pasar la preparacion a un mortero con arena y
moler perfectamente hasta que las fibras hayan
desaparecido. Pasar esta preparacion a tubos de
centrifuga y centrifugar a 3000 rpm durante 15
minutos. Despues pasar el sobrenadante de todos y
cada uno de los tubos a un matraz etiquetado como
COENZIMA.
Preparación de la enzima.
Pesar 10 g del mùsculo de la pierna del pollo y
agregar 10 mL de NaCl al 0.9%por g de músculo.
Colocar lo anterior en un mortero, el cual debera
estar en un baño de hielo. Con ayuda de arena, esta
preparacion se molera hasta obtener una muestra
casi sin fibras. Despues dejar reposar 30 minutos en
el mortero sobre el baño de hielo.
Pasar la preparacion a tubos de centrifuga y
centrifugar a 3000 rpm durante 15 minutos. Pasar el
sobrenadante de todos los tubos a un matraz
marcado como DESHIDROGENADA LACTICA.
B. PREPARACION DE LAS
DESHIDROGENASAS SUCCINA Y
CITOCROMOS.
Cortar el Corazon de pollo en fragmentos
pequeños: pesarlos y colocarlos en un vaso y
agregar 8 mL de Na2HPO3 0.06 M por g de
Corazon.
Moler la mezcla anterior en un mortero que
contenga arena y moler el Corazon. El mortero
debe permanecer en baño de hielo mientras se
efectua. Al terminar pasar la mezcla a un vaso ; y
dejar reposar por 30 minutos en un baño de hielo,
con aguitación ocasional.
Pasado este tiempo, pasar la preparación a tubos de
centrifuga y centrifugara a 3000 rpm durante 15
minutos. Pasar el sobrenadante de todos los tubos a
un matraz etiquetado como DESHIDROGENASA
SUCCINICA.
3. RESULTADOS Y DISCUSIÓN
En los 5 tubos a los 10 min se dividieron aprox.
5mm. A los 20 min no ocurrió ningún cambio a los
30 min los tubos A1 y A2 se observaron partículas
en suspensión, el tubo A3 quedo mas claro y el A4
mas obscuro. A los 40 y 50 min, no se observo
ningún cambio. Y a la hora se separaron.
En los 4 tubos B a los 10 min se comenzó a dividir
la solución y en el tubo B4 se observo un segundo
anillo donde su coloración era azul clarito, a los 20
min no se pudo observar mucho cambio mas que un
ligero cambio de tono del color, a los 30 min el
tubo B3 presento una capa azul clarita menos
gruesa que los demás con partículas suspendidas, a
los 40 y 50 min se observo un cambio en la
tonalidad y la hora se observo que el tubo B1 fue el
mas obscuro y B3 el mas claro.
En los tubos C a los 10 min no se observo ningún
cambio, a los 20 min se pudieron observar
pequeñas burbujas y a los 30 min el tubo C2 fue el
mas claro de todos y el tubo C5 se dividió en dos
fases una mas clara.
Nosotros suponemos que el hecho de que no se
haya percibido muchos cambios en los tubos fue
por que al momento de hacer las observaciones de
los tubos no se realizaron en la plancha de
calentamiento, pero se mantuvo la temperatura de
37ªC , posiblemente hicimos alguna otra cosa
errónea. Que no haya permitido la total reacción de
los tubos.
4. CONCLUSIONES
Podemos concluir que es esencial para que la
las reacciones se lleven a cabo que la
temperatura se a la óptima ya que si no es así
las reacciones no se concluyen por este motivo
nuestra practica no tubo los resultados
esperados, además los inhibidores formaron
parte fundamental para nuestros resultados y
podemos decir que también fue una de las
causas por las cuales las reacciones no se
concluyeron.
5. REFERENCIAS
Müller-Esterl, W. (s.f.). Bioquímica.Fundamentos
para medicina y cienciasde la vida.
Reverte.
Neil A. Campbell, J. B. (s.f.). Biologia. Buenos
Aires Bogota: Panamericana.
Virginia Melo, O. C. (2007). bioquímica de los
procesos metabólicos. Barcelona: Reverte
.

TUBO COLORACIÓN
10 20 30 40 50 60
min min min min min min
A1 X O O O O X
A2 X O O O O X
A3 X O X O O X
A4 X O X O O X
A5 X O O O O X
B1 X O O X X X
B2 X O O X O O
B3 X X X X X X
B4 X X O X O O
C1 O O O
C2 O O X
C3 O O O
C4 O O O
C5 O O X

Reporte de práctica 2