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UNIVERSIDAD NACIONAL DE CAÑETE

VICEPRESIDENCIA ACADÉMICA
CARRERA PROFESIONAL DE AGRONOMIA

PRÁCTICA N° 2: PLASMÓLISIS INCIPIENTE


I.- INTRODUCCIÓN
1.1.- Ósmosis, Turgencia y Plasmólisis.
La ósmosis es el paso del agua a través de una membrana semipermeable desde una zona en la
que el agua tiene una concentración más alta (al tener menos solutos) a un área donde tiene
una concentración más baja (al tener más solutos).

La Turgencia es el fenómeno por el cual las células al absorber agua, se hinchan, ejerciendo
presión contra las membranas celulares, las cuales se ponen tensas. Este fenómeno tiene lugar
de forma natural cuando la planta se marchita, puede provocarse colocando la célula en un
medio de concentración salina menor al citoplasma. Este fenómeno está relacionado con la
ósmosis. La presión externa suele alcanzar en promedio 6 a 7 atmósferas, con tanta presión
interna las células se dilatan cuanto lo permite la elasticidad de las membranas, y por ende la
resistencia de las células vecinas, es por eso que los órganos, como por ejemplo el pecíolo, el
tallo, las hojas y frutos maduros se encuentren en ese estado de firmeza.

La plasmólisis es el proceso de contracción o retracción del protoplasma de la célula de la planta


debido a la pérdida de agua en esa célula. Este proceso es uno de los resultados de la ósmosis.
Se produce cuando la concentración del medio exterior contiene mayor número de moléculas
disueltas y menos agua por unidad de volumen en comparación con el líquido celular. Entonces
la membrana semipermeable deja fluir libremente moléculas de agua aumentando el flujo hacia
el exterior, por lo que la concentración de la vacuola debe igualar la concentración del medio
externo reduciéndose a causa de la pérdida de agua. La membrana celular se reduce y se separa
de la pared celular. Finalmente se separa la pared de la membrana celular porque la célula se
plasmoliza. Si durante este proceso la planta no consigue agua para llenar la vacuola para que
la célula recupere su turgencia, lo más probable es que la planta muera.

1. 2.- ¿En qué consiste la plasmólisis?


1.2. 1.- Anatomía de la célula
Para comprender la plasmólisis, es necesario remitirse previamente a la anatomía de la célula
de una planta. Cada célula está constituida por una membrana plasmática, un citoplasma en su
interior, y protegiendo esta estructura, una pared celular compuesta básicamente por celulosa.
Todas las partes principales de la célula funcionan juntas para mantener la planta activa. La
vacuola se encuentra en el citoplasma que contiene el agua en la célula de la planta. La
membrana celular o plasmática separa el interior de la célula de la pared, permitiendo el paso
de moléculas de agua, iones o algunas partículas a través de la membrana y evitando el paso de
otros. Las moléculas de agua viajan dentro y fuera de la célula a través de las membranas
celulares. Este flujo es una consecuencia necesaria que permite a las células obtener agua.
Cuando las células no reciben suficiente agua, se produce la plasmólisis, la membrana plasmática
y el citoplasma se contraen y se separan de la pared celular, haciendo que la planta completa se
contraiga.
1.2.2.- Fases de la plasmólisis

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El marchitamiento de las plantas observado en condiciones de escasez de agua es una indicación


de la plasmólisis de las células. Existen tres etapas en la plasmólisis: plasmólisis incipiente,
plasmólisis evidente y plasmólisis final.

1.2.2.1.- Plasmólisis incipiente


En la fase incipiente de la plasmólisis, se detecta el primer signo de encogimiento del contenido
celular de la pared. En una célula turgente, con la cantidad adecuada de agua, la membrana
plasmática aprieta la pared celular y está en total contacto con ella. Cuando esta célula se
mantiene en una solución hipertónica, el agua comienza a moverse fuera de la célula.
Inicialmente no habrá efecto en la pared celular. Pero a medida que el agua continúa
perdiéndose, la célula se contrae en volumen. Aún así, la membrana plasmática mantiene su
contacto con la pared celular debido a su capacidad elástica. A medida que la salida del agua
continúa, la membrana plasmática alcanza su límite de elasticidad y se desgarra de la pared
celular en los extremos, manteniendo el contacto en otras regiones. Esta es la primera etapa de
la plasmólisis.
1.2.2.2.- Plasmólisis evidente
En esta segunda fase, la célula, en condiciones hipertónicas, continúa perdiendo agua en el
medio externo y se reduce aún más en volumen. La membrana plasmática se desgarra
completamente de la pared celular y se contrae.
1.2.2.3.- Plasmólisis final
A medida que la exosmosis continúa, la contracción de la célula y el citoplasma alcanzan el límite
mínimo y no es posible una contracción adicional en volumen.
El citoplasma queda completamente desprendido de la pared celular, alcanzando forma esférica
y permaneciendo en el centro de la célula.
1. 3.- Tipos de plasmólisis
Basándose en la forma final del citoplasma, la plasmólisis final se divide en dos tipos: plasmólisis
cóncava y plasmólisis convexa.
1.3.1.- Plasmólisis cóncava
Durante la plasmólisis cóncava, el protoplasma y la membrana plasmática se contraen y separan
de la pared celular debido a la pérdida de agua. El protoplasma se transforma en protoplasto
una vez que ha comenzado a separarse de la pared celular.
Este proceso se puede invertir si la célula se coloca en una solución hipotónica, lo que hará que
el agua retorne nuevamente a la célula.
1.3.2.- Plasmólisis convexa
La plasmólisis convexa, en cambio, es más grave. Cuando una célula sufre una plasmólisis
compleja, la membrana plasmática y el protoplasto pierden tanta agua que se separan
completamente de la pared celular.
La pared celular se derrumba en un proceso llamado citorrisis. La plasmólisis convexa no se
puede revertir y provoca la destrucción de la célula. Esencialmente, esto es lo que sucede
cuando una planta se marchita y muere por falta de agua.
1.4.- Plasmólisis y deplasmólisis
En laboratorio, se puede experimentar la ósmosis colocando una célula viva en una solución
salina, que provocará que la savia celular se mueva. La concentración de agua dentro de la célula
será mayor que fuera de la misma.
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Por lo tanto, el agua viaja a través de la membrana celular hacia el medio vecino. Finalmente, el
protoplasma se separa de la célula y asume una forma esférica, produciéndose la plasmólisis.
Cuando se coloca una célula plasmolizada en una solución hipotónica (una solución en la que la
concentración de soluto es menor que la savia celular), el agua viaja a la célula debido a la mayor
concentración de agua fuera de ésta.
Entonces la célula se hincha y recupera nuevamente su turgencia. Este proceso que consiste en
recuperar la turgencia normal de una célula plasmolizada se conoce como deplasmólisis.
II.- OBJETIVOS
 Demostrar la relación existente entre plasmólisis y concentración osmótica.
 Observar la reversibilidad de la plasmólisis.

III.- MATERIALES
3.1.- Material que brinda laboratorio.
 Disoluciones de sacarosa.
 Portaobjetos.  Cubreobjetos.
 Tubos de ensayo.
 Gradillas.
 Microscopio.  Pizetas.
3.2.- Material que debe llevar el alumno.
 Guardapolvo.
 Hojas o flores con antocianina (De color rojo, azul o púrpura).
 Hojas de Geranio.
 Plumón indeleble para vidrio.
 Papel de filtro.

IV.- PROCEDIMIENTOS
 Preparar disoluciones de sacarosa con las siguientes molalidades: 0.10, 0.15, 0.20, 0.25,
0.30, 0.35, 0.40, 0.45 y 0.50.
 Transferir unas gotas de la disolución más débil a un portaobjetos, colocar un trozo de
tejido de epidermis que tenga pigmento antocianínico en el jugo celular y cubrir con una
laminilla.
 Hacer preparaciones similares con las demás disoluciones.
 Identificar bien cada portaobjetos.
 Tener cuidado que el tejido esté siempre en buen contacto con la disolución.
 Después de 5-10 minutos observar al microscopio y anotar con cual molalidad hay por
lo menos un 50% de células plasmolizadas.
 Sustituir la disolución que causó plasmólisis en casi todas las células, por agua del grifo,
enjuagando bien el tejido para remover la disolución de sacarosa. Secar con papel de
filtro el exceso de agua y prepararlo para observación microscópica.
 Observar el tiempo necesario para que ocurra la deplasmólisis. Expresar los resultados
en MPa, Pa, atm, bares.

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V.- CUESTIONARIO.
1. ¿Se observó algún cambio en la intensidad de la coloración del jugo celular de las células
plasmolizadas?
En el experimento se observó un cambio en la coloración y esto explica por qué al romperse la
membrana, a consecuencia de las altas concentraciones de NaCl, salen pigmentos de la célula y
ay un rompimiento de en laces por alta concentración de cationes.

2. ¿Qué ocupó el espacio entre la PC y el protoplasma en las células plasmolizadas?


En la célula plasmo izada el espacio entre la membrana celular y la pared es ocupado por la
solución plasmolizante. Algunas veces la plasmólisis es tan intensa que los plasmodesmos se
dañan y el protoplasma se contrae al centro de la célula. El mantenimiento de este estado de
plasmólisis puede llegar a alterar a tal punto los procesos metabólicos de la célula que ocasiona
su muerte.

Resultados:
En este experimento comenzamos agregando una gota de la disolución de sacarosa a las flores
de color rojo en el portaobjeto, cubriéndolo con la laminilla y haciendo preparaciones
semejantes con las de más muestras.
Esperamos unos entre 5 a 10 minutos para observar que la disolución de sacarosa del efecto
esperado (plasmólisis)
En las células de las flores rojas, en concentraciones bajas a sacarosa se observa de manera
normal (turgencia).
En otras muestras se observa que las células han sufrido una plasmólisis muy leve (plasmólisis
incipiente).También se ve una plasmólisis muy marcada, además notamos que el citoplasma de
las células está separado por una pared celular.

Discusión:
En los vegetales la semipermeabilidad de la membrana plasmática y la permeabilidad de la
pared celular originan, entre otros el fenómeno de la plasmólisis. Se produce ya que las
condiciones del medio extracelular son hipertónicas, debido a esto, el agua que hay dentro de
la vacuola sale al medio hipertónico, y la célula se deshidrata ya que pierde el agua que la
llenaba. Finalmente se puede observar como la membrana celular se separa de la pared.

Conclusiones:
 Se logró observar como ocurre los procesos de la plasmólisis incipiente y turgencias en
células vegetales conforme a la teroria.
 La plasmólisis se produce en las condiciones del medio extracelular son hipertónicas.

Bibliógrafa
Osmosis y presion osmótica. UM. (Sin año) Recuérado el 14 de noviembre de 2015 de:
http://www.um.es/molecula/sales06.htm.
Celulas animales y vegetales en medio hipotónicos. Sin autor. Recuperdo el 14 de noviembre
de 2014 de: http://www.maph49.galeon.com/memb1/plants.html.

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Anexos

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PRÁCTICA N°3: PERMEABILIDAD RELATIVA DE LA MEMBRANA CITOPLASMÁTICA A LOS


IONES Y MOLÉCULAS
I.- INTRODUCCIÓN.
La pared celular confiere fuerza mecánica a la célula vegetal e impide la entrada de agentes
patógenos. Sin embargo es permeable a la mayor parte de compuestos, desde proteínas
relativamente grandes hasta agua y iones inorgánicos. La primera barrera de permeabilidad
entre la célula vegetal y su medio ambiente es la membrana plasmática.
La captación de solutos, como los iones minerales, es esencial para la supervivencia y el
crecimiento de la célula vegetal. Asimismo, determinados solutos deben ser eliminados hacia el
exterior celular o almacenados en la vacuola.
Las membranas biológicas son totalmente permeables a pequeñas moléculas no cargadas, como
agua y O2. Estas moléculas poseen una elevada solubilidad en lípidos y pueden pasar a través
de la bicapa lipídica. Por el contrario, moléculas mayores no cargadas como la sacarosa, o
moléculas cargadas, como los iones inorgánicos o los ácidos orgánicos, no pueden atravesar la
bicapa de lipídica y su paso a través de las membranas se produce de las membranas se produce
por medio de canales o de transportadores, de los que cada membrana posee su propio y único
conjunto.

Dentro de una célula vegetal existen varios compartimentos, siendo los mejores estudiados el
citoplasma, la vacuola, los cloroplastos, las mitocondrias y los peroxisomas. Cada uno de estos
compartimentos tiene una composición única y hay un intercambio continuo de solutos a través
de sus respectivas membranas.
A excepción de la vacuola, la composición del compartimento se mantiene dentro de límites
bastantes estrechos, fenómeno conocido como homeostasis. Para conseguir esto deben
regularse los flujos de solutos.
II.- OBJETIVOS
 Demostrar que ciertos iones y moléculas son permeables a las membranas
citoplasmáticas.
III.- MATERIALES
3.1.- 3.1.- Material que brinda laboratorio.
 NaOH 0,02 N
 NH4OH 0,02 N
 HCl 0,02 N  CH3COOH 0,02 N
 Safranina.
 Na2CO3 0,5%
 08 tubos de ensayo.
 01 matraz.
 01 vaso de precipitación (100 ml).
 01 embudo
3.2.- Material que debe llevar el alumno. 
01 papel de filtro.
 03 pipetas de plástico.
 Plumón indeleble para marcar vidrio.  01 Mechero con alcohol o velas.

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 1 sobre de levadura de pan. IV.- PROCEDIMIENTOS


 Preparar una suspensión de levadura (2-3 g) en 50 mL de Na2CO3 al 0,5%.
 En 06 tubos de ensayo numerados del 1 al 6, colocar 2,5 mL de la suspensión anterior.
 Añadir a cada tubo de ensayo igual cantidad de safranina (2,5 mL).
 Separar al tubo número 1 como testigo.
 Al tubo 2 añadir 1 mL de NaOH 0,02 N.
 Al tubo 3 añadir 1 mL de hidróxido de amonio.
 Al tubo 4 añadir 1 mL de CH3COOH 0,02 N.
 Al tubo 5 añadir 1 mL de HCl 0,02 N.
 Al tubo 6 someterlo a baño maría o ebullición por 5 minutos.
 Filtrar el contenido del tubo 6.
 Anotar lo observado.

V.- CUESTIONARIO
1.- ¿Qué es la permeabilidad en la membrana citoplasmática?
La permeabilidad de las membranas es la facilidad de las moléculas para atravesarla.
Esto depende principalmente de la carga eléctrica y, en menor medida, de la masa
molar de la molécula. Moléculas pequeñas o con carga eléctrica neutra pasan la
membrana más fácilmente que elementos cargados eléctricamente y moléculas
grandes. Además, la membrana es selectiva, lo que significa que permite la entrada de
unas moléculas y restringe la de otras.
2.- ¿Por qué existe la selectividad en la membrana citoplasmática?
La permeabilidad selectiva es una propiedad de la membrana plasmática y de
otras membranas semipermeables que permiten el paso de solo ciertas partículas a
través de ellas.
De esta forma, pueden entrar a la célula aquellas partículas que necesite la misma y se
evita que ingresen las que no le sean útiles. De la misma forma, la célula puede eliminar
las partículas que ha generado como desecho. Así se regula la entrada y salida de
sustancias a través de la membrana y se logra el correcto funcionamiento de la célula.
3.- ¿En qué consiste el mosaico fluido, dibuje?
En la membrana plasmática, los lípidos se disponen formando una bicapa de
fosfolípidos, situados con sus cabezas hidrofílicas hacia el medio externo o hacia el
citosol, y sus colas hidrofóbicas dispuestas en empalizada. Las proteínas se intercalan
en esa bicapa de lípidos dependiendo de las interacciones con las regiones de la zona
lipídica. Existen tres tipos de proteínas según su disposición en la bicapa:

 Proteínas integrales o intrínseca: Embebidas en la bicapa lipídica, atraviesan la


membrana una o varias veces, asomando por una o las dos caras (proteínas
transmembrana); o bien mediante enlaces covalentes con un lípido o a un glúcido de
la membrana. El aislamiento de ella requiere la ruptura de la bicapa.
 Glucoproteínas: Se encuentran atravesando toda la capa de la membrana celular,
su nombre es debido a que contiene glúcidos.
 Proteínas periféricas o extrínsecas: Se encuentran a un lado u otro de la bicapa
lipídica, pueden estar unidas débilmente por enlaces no covalentes. Fácilmente

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separables de la bicapa mediante soluciones salinas, sin provocar su ruptura.


Aparecen en la membrana interna y carecen de pico.
Este modelo fue desarrollado para demostrar la asimetría entre ambas capas, lo que
explicaría por qué no entran los mismos nutrientes que los que salen. A-E- 3

VI.- GRAFIQUE LO OBSERVADO EN EL LABORATORIO.

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