UNIVERSIDAD ESTATAL

PENÍNSULA DE SANTA ELENA

CARRERA DE ENFERMERIA
MATERIA: MICROBIOLOGÍA
FORMATO DE PRÁCTICA DE MICROBIOLOGÍA

PRÁCTICA # 3
DESARROLLO DE LA Materiales
PRÁCTICA
- Kit de reactivos para ELISA 


- Pipetas automáticas de 1000 uL 


- Puntas azules para pipetas de 200-1000uL 


- Puntas amarillas para pipetas de 200-1000uL 


Permitir que los reactivos alcancen la temperatura ambiente.

Organizar y etiqueta con el número necesario de tiras. 


- Añadir 100 uL control positivo, control negativo y suero de

paciente por duplicado en los pocillos. 


• - Añadir 50 ul de conjugado en los pozos. Cubrir con cinta

adhesiva. Mezcle suavemente. Incubar durante 90 minutos a 37°C. 


• - Lavar llenando cada pozo con 350 uL de solución de lavado.

Repetir el procedimiento 5 veces 


• - Añadir 100 ul de cromógeno (sustrato) a los pozos A1 a H1.

Mezcle suavemente. Cubrir con cinta adhesiva e incubar 30 minutos
protegidos de la luz. 


• - Añada 50 ul de solución de parada a los pozos A1 a H1. Si el

cambio de color no parece uniforme, golpee suavemente la placa para
que se mezcle bien. 


CONCLUSIONES
Para realizar una prueba de ELISA se deben tener en cuenta los ensayos para esto
los más apropiados son los ensayos de sándwich, ya que puede disminuirse un
paso de reacción añadiendo simultáneamente muestras y conjugado. Aunque
también se utilizan los ensayos para obtener IgM, que es el antígeno que se
produce primero durante la infección. Esta prueba se lo realiza de dos maneras
distintas. Hay que tener en cuenta que los resultados de esta prueba siempre van
a tener alta especificidad.

RECOMENDACIONES
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 Se recomienda siempre contar con los quipos de bioseguridad, para evitar
infecciones nosocomiales.
 Es necesario el lavado adecuado de las pipetas para eliminar los posible
microorganismos presentes

REPORTE GRAFICO

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DIANA PILAY JOSÉ