Instituto Tecnológico de Morelia

"José María Morelos y Pavón"

Investigación
Espectrómetros de masa

Pimentel Dorado Omar 13121129

Instrumentación Biomédica I

25/noviembre/2017 Morelia, Michoacán.

Contenido

Introducción. ............................................................................................................ 1
Antecedentes. ......................................................................................................... 2
Principios de la espectrometría de masas. .............................................................. 3
Espectrómetro de masas......................................................................................... 5
Sistema de entrada de muestras. ........................................................................ 7
Fuente de Iones. .................................................................................................. 9
Fuentes de fase gaseosa ............................................................................... 11
Fuentes de desorción. .................................................................................... 13
Acelerador. ........................................................................................................ 16
Analizadores. ..................................................................................................... 16
Detector. ............................................................................................................ 22
Análisis de un espectrograma de masas. .............................................................. 24
Aplicaciones de la espectrometría de masas. ....................................................... 25
Conclusiones. ........................................................................................................ 27
Bibliografía. ........................................................................................................... 28

B
Introducción.
En el presente trabajo de investigación se presentan cuáles son las características
y la constitución de un equipo llamado espectrómetro de masas y se mostrará una
introducción a la técnica en la cual se emplea este equipo llamada espectrometría
de masas.

La espectrometría de masas, es una técnica consolidada de análisis cualitativo, que

ha tenido un gran avance en el ámbito biológico y se está imponiendo en los
laboratorios analíticos biosanitarios de investigación o de diagnóstico con una
amplia utilización para
la determinación de estructuras orgánicas, por si sola o en combinación con otras

técnicas de espectrofotometría.

Las cualidades de esta técnica son: su alta especificidad analítica, el amplio

intervalo de aplicabilidad con buena facilidad al trabajar con moléculas grandes o
pequeñas, posibilidad de obtener información cualitativa y cuantitativa en una única

prueba, así como su flexibilidad que permite diseñar procedimientos analíticos en

relativamente poco tiempo, permite la automatización y miniaturización del equipo.

Una diferencia esencial que presenta la espectrometría de masas con las

espectroscopías clásicas, es que en estos últimos métodos, los procesos que se

originan son puramente físicos, no destructivos, de forma que la muestra utilizada

para la obtención del espectro no se modifica químicamente y se puede volver a
recuperar; por contra, en la espectrometría de masas, durante la obtención del

espectro tienen lugar procesos químicos, con lo que la muestra utilizada se destruye

y no puede recuperarse; este hecho no es un inconveniente grave, ya que la

cantidad de muestra necesaria para la obtención de un espectro de masas, es

pequeñísima, del orden del μg.[1]

La espectrometría de masas cae dentro de las técnicas invasivas de detección por
plasmas[2], a continuación, se muestra un cuadro con esta clasificación:

Fig. 1 Técnicas de diagnóstico de plasmas.

Antecedentes.
En el año 1912 cuando el científico J. J. Thomson (Premio Nobel en 1906) animado

por su afán de descubrir los secretos más profundos de la química, se las ingenió
para crear el primer espectrómetro de masa y obtener de él los primeros espectros
de compuestos como O2, N2, CO y COCl2.

Pero el mérito no fue solo de él, ya que la espectrometría de masas comenzó a ver

la luz en el año 1886 cuando Goldstein descubrió los iones positivos , siguió

cogiendo forma con W. Wien que consiguió analizarlos por deflexión magnética en

1898 y que dio un paso definitivo cuando W . Kaufmam consiguió analizar los rayos

catódicos usando campos eléctricos y magnéticos paralelos en 1901 . Todos estos

avances permitieron a la privilegiada mente de J. J. Thomson idear el primer

espectrómetro de masas.

A partir de ese día se comenzó a usar en los laboratorios de química para separar
iones atómicos y moleculares en función del cociente masa/carga con la unidad
Thomson (Th) como unidad fundamental. Y aunque su avance era firme, su uso

para analizar macromoléculas no fue posible hasta la década de los 80 , cuando el

2
profesor J. B. Fenn utilizó el método de ionización por electropulverización

("electrospray") de una solución acuosa de proteínas. De esta forma consiguió

producir pequeñas gotas de una muestra que se reducen de tamaño al evaporarse
el agua que las transporta, mientras los iones de proteínas permanecen en forma

de suspensión libre. La relación masa/carga de los iones así obtenidos permite su

análisis en cualquier espectrómetro de masas.

Biólogos y químicos pueden ahora rápidamente identificar las proteínas y obtener

su imagen Tridimensional.[3]

Principios de la espectrometría de masas.

La espectrometría de masas es una herramienta muy versátil y útil para identificar
los elementos presentes en una muestra y determinar las concentraciones de cada
una de los compuestos que la componen.

La espectrometría de masas está basada en la obtención de iones a partir de

moléculas orgánicas en fase gaseosa; una vez obtenidos estos iones, se separan

de acuerdo con su masa y su carga, y finalmente se detectan por medio de un

dispositivo adecuado.

Los procesos que tienen lugar en un espectrómetro de masas , son de naturaleza

química; en consecuencia, la presencia y abundancia en el espectro de

determinados tipos de iones, identificables a partir de su masa, será función de la

estructura química de cada compuesto; la información ofrecida por un espectro de

masas es, de alguna forma, comparable a la obtenida mediante una gran cantidad

de reacciones de las utilizadas para la determinación de estructuras por vía química,

por lo que la espectrometría de masas puede ofrecer una enorme cantidad de
información sobre un compuesto determinado.

3
Un espectro de masas es una información bidimensional que representa un
parámetro relacionado con la abundancia de los diferentes tipos de iones en función
de la relación masa/carga de cada uno de ellos.[1]

La técnica de espectrometría ofrece numerosas ventajas frente a las técnicas

espectrofotométricas ya que:

• Los límites de detección que son, para muchos elementos, tres órdenes de

magnitud más sensibles frente a los métodos ópticos.

• Espectros notablemente más sencillos, generalmente únicos y con

frecuencia fácilmente interpretables.

• Capacidad para medir relaciones isotópicas atómicas.

En cambio, también tienen una serie de desventajas que no podemos obviar como :

• El coste del instrumento es de dos a tres veces el de los instrumentos ópticos

atómicos.

• La deriva del instrumento puede ser del orden del 5 o 10%/hora.

• Contiene unas determinadas interferencias.

Con la espectrometría de masas somos capaces de proporcionar información

acerca de:

• La composición elemental de las muestras: de esta se encarga la

espectrometría de masas atómico.

• De la composición de las moléculas inorgánicas, orgánicas y biológicas.

• De la composición cualitativa y cuantitativa de mezclas complejas.

• De la estructura y composición de superficies sólidas.

• De las relaciones isotópicas de átomos en las muestras.

El instrumento usado en estos estudios se denomina espectrómetro de masas.[3][4]

El proceso de la espectrometría de masas comprende básicamente cuatro etapas:

4
 1. Introducción de la muestra.

2. Ionización de la muestra, en la que se transforman los átomos o moléculas

en especies iónicas en fase gaseosa, con la consiguiente pérdida de

electrones o protones.
3. Separación y el análisis de los iones moleculares y de los fragmentos
cargados producidos según su relación m/z.

4. Finalmente, se obtiene el espectro de masas, en el que se presenta la

abundancia relativa de los iones y fragmentos separados respecto a la
relación masa/carga.[5]

Espectrómetro de masas.
El espectrómetro de masas, como ya se mencionó anteriormente, es el equipo

utilizado para la realización e la espectroscopia de masas, es seguida se detallan

cuales son las funciones que cumple este equipo y las partes que lo componen .

Principalmente el espectrómetro de masas debe ser capaz de desempeñar cuatro

funciones:

• El espectrómetro de masas debe ser capaz de vaporizar substancias de

volatilidades muy diferentes.

• Una vez volatilizada la muestra, el espectrómetro debe ser capaz de originar

iones a partir de las moléculas neutras en fase gaseosa.

• Una vez generados los iones, el espectrómetro debe ser capaz de separarlos

en función de su relación masa/carga.

• Una vez separados los iones, el espectrómetro debe ser capaz de detectar

los iones formados y registrar la información adecuadamente.

5
 Fig. 2 Diagrama a bloques de los componentes de un espectrómetro de masas[2].

Básicamente un espectrómetro de masas costa esencialmente de las siguientes

partes[3][1]:

• Sistema de entrada de muestras.

• Fuente de iones.

• Acelerador.

• Analizadores.

• Detector.

El esquema de un espectrómetro de masas clásico, de separación magnética, es el

siguiente:

6
 Fig. 3 Espectrómetro de masas clásico de separación magnética[1].

Sistema de entrada de muestras.

En el sistema de entrada de muestras, un micromol o menos de muestra se

convierte al estado gaseoso por calentamiento a unos 400ºC y se introduce
lentamente en la cámara de ionización.

La finalidad del sistema de entrada es permitir la introducción de una muestra

representativa en la fuente de iones con la mínima perdida de vacío.[3]

Como norma general, se puede decir que la condición necesaria para que se pueda

obtener el espectro de un compuesto, es que su presión de vapor sea igual o

superior a 10-6 mm de mercurio, a una temperatura tal que la muestra no pirolice;

para poder realizar el espectro, no es necesario vaporizar toda la muestra, sino

únicamente la cantidad necesaria para alcanzar la presión indicada
anteriormente.[1]

7
De acuerdo con la naturaleza de la muestra a estudiar, se utilizan principalmente

tres métodos para la introducción de muestras:

1. Introducción indirecta.

2. Introducción directa.

3. Introducción a partir de un cromatógrafo.

• Introducción indirecta. es el sistema más clásico y el más simple, en el cual

la muestra se volatiliza externamente y se introduce en la región de ionización
que está a baja presión. El sistema de entrada es normalmente un balón de
vidrio o de metal esmaltado interiormente que se mantiene a temperatura
elevada. Este método de introducción es aplicable para el análisis de gases,

líquidos de punto de ebullición inferior a 200 ◦C, o sólidos sublimables. El

balón utilizado para la introducción indirecta debe tener una capacidad de un
litro aproximadamente. Una vez vaporizado el producto en el balón, a una

presión de 10-2 mm de Hg, mediante un dispositivo adecuado, escape

molecular, se permite salir el vapor a escala molecular ("molecular leak")

hacia la fuente de iones, que se mantiene a un elevado vacío (10-6 a 10-7

mm de Hg.); el vapor fluye hacia la fuente de iones con gran rapidez debido

a la diferencia de presión; el escape molecular permite tener un flujo

constante de moléculas hacia la fuente de iones.[1], [3]

• Introducción directa. En este procedimiento, se introduce la muestra

directamente en la fuente de iones por medio de una varilla metálica , que

lleva en la punta un capilar conteniendo la muestra . La muestra se calienta

en el capilar, bien directamente a través de la varilla, o bien indirectamente

por medio de una resistencia eléctrica externa. La varilla se introduce en la

fuente de iones por medio de un sistema de válvulas para evitar alterar el

8
 vacío que se mantiene en el interior del aparato.[1] A continuación se muestra

el esquema correspondiente para este sistema de introducción de muestras:

Fig. 4 Esquema sistema de introducción de muestras.[1]

• Introducción a partir de un cromatógrafo de gases. Este sistema de

introducción de muestra se ha popularizado para el análisis por
espectrometría de masas de mezclas de compuestos, ya que la introducción
se realiza directamente en fase gaseosa y el cromatógrafo realiza la
separación de los diversos componentes de la mezcla.[1]

Fuente de Iones.

Las fuentes de iones de los espectrómetros de masas, tienen todas unas

características comunes, pese a la variabilidad de tipos existente y es que todas

transforman los componentes de una muestra en iones.

9
En muchos casos el sistema de entrada y la fuente de iones están combinados en
un único componente. En todos los casos, se obtiene un haz de iones positivos o
negativos (normalmente positivos) que posteriormente se acelera hacia el interior
del analizador de masas o sistema separador a través del acelerador.

El aspecto de los espectros de masas para distintas especies moleculares , depende

en gran medida del método utilizado para la formación de los iones. Estos métodos

los podemos dividir en dos categorías:

• Fuentes de fase gaseosa.

En estas primero se volatiliza la muestra y luego se ioniza.

Están generalmente restringidas a compuestos térmicamente estables que tengan

puntos de ebullición menores de unos 500ºC. En la mayoría de los casos, estos
requerimientos limitan la utilización de las fuentes de fase gaseosa a compuestos
con pesos moleculares menores de unos 103 Daltons.

Son aplicables a muestras no volátiles y térmicamente inestables. Normalmente los

espectrómetros de masas están equipados con accesorios que permiten
intercambiar ambos tipos de fuentes.

Son aplicables a compuestos que tienen pesos moleculares superiores de 1000

Daltons.

• Fuentes de desorción.

En estas las muestras en estado sólido o líquido, se transforman directamente en

iones gaseosos.

Son aplicables a muestras no volátiles y térmicamente inestables. Normalmente los

espectrómetros de masas están equipados con accesorios que permiten
intercambiar ambos tipos de fuentes.

10
Son aplicables a compuestos que tienen pesos moleculares superiores de 100000
Daltons.[3]

Las fuentes de iones también poder ser clasificadas como fuentes duras y fuentes
blandas.
• Fuentes duras.

Las fuentes duras comunican suficiente energía a las moléculas para que estén en
un estado de energía altamente excitado . La relajación posterior, implica la rotura

de las uniones produciendo iones fragmentados. Su espectro da lugar a muchos

picos y nos da información acerca de la naturaleza de los grupos funcionales e
información estructural de los analitos.

• Fuentes blandas.

Las fuentes blandas dan lugar a poca fragmentación y el resultado es un espectro

con muy pocos picos dándonos información útil ya que nos permite la determinación
exacta del peso molecular de la molécula o moléculas.[1], [3]

Fuentes de fase gaseosa

• Ionización por impacto de electrones (EI).

En este método, las moléculas de muestra son ionizadas por medio de un haz de
electrones de elevada energía.

En este método de ionización se somete a la muestra a una temperatura

suficientemente elevada (normalmente mediante un filamento caliente de wolframio
o de renio) como para producir un vapor molecular, el cual posteriormente se ioniza
bombardeando las moléculas originadas con un haz de electrones de elevada
energía. Pese a sus desventajas, esta técnica es la que se ha usado para
determinar la mayoría de los espectros que componen las colecciones de
espectros.[3]

Para enfocar los electrones dentro de una trayectoria determinada, se utiliza un

campo magnético dispuesto paralelamente a la dirección en la que se mueven los

11
electrones, de forma que estos describen una trayectoria helicoidal hasta llegar a
un ánodo donde son recogidos.[1]

Fig. 5 Fuente de iones de impacto de electrones.[1]

El sistema de ionización por impacto de electrones, presenta un problema, y es que,

dependiendo de la naturaleza de la molécula a estudiar, algunos iones serán más
estables que otros, existiendo algunos casos en los que el ion molecular no se
descompone casi, mientras que en otros la importancia de los procesos secundarios
será tan grande que apenas quedará un ion molecular. Dado que, en algunos casos,
el pico molecular presenta gran importancia, habrá que buscar métodos alternativos

12
que permitan obviar este inconveniente. El pico molecular presenta especial
importancia cuando se trabaja en combinación con la cromatografía de gases, ya
que en este caso el pico molecular por si solo permite en muchas ocasiones lograr
la identificación del compuesto sin necesidad de más información.

• Ionización química (CI).

En la ionización química los átomos gaseosos de la muestra (tanto de un sistema

de entrada indirecto como en el directo) se ionizan al colisionar con los iones
producidos al bombardear con electrones un exceso de gas reactivo (normalmente
metano). Normalmente se utilizan iones negativos, aunque la ionización química de
iones negativos se utiliza ocasionalmente en aquellos compuestos analizados,
llamados analitos, que contienen átomos muy electronegativos.[3]

• Ionización por campo (FI).

En las fuentes de ionización por campo, los iones se forman bajo la influencia de un
campo eléctrico elevado (108 V/cm). Estos campos se producen al aplicar elevados

potenciales (10 a 20 kV) a emisores especialmente construidos . Que están

formados por numerosas puntas finas cuyos diámetros son menores a 1 μm . A

menudo estos emisores adquieren la forma de un fino hilo de wolframio en el cual
se han formado dendritas o filamentos microscópicos de carbono por pirólisis de
benzonitrilo en un campo eléctrico elevado. El resultado de este tratamiento es la
aparición de centenares de micro agujas de carbón que emergen desde la superficie
del hilo. En este caso el compuesto analizado, adquiere poca energía vibracional y

rotacional por lo que tiene poca fragmentación.[3]

Fuentes de desorción.

• De desorción de campo.
Esta fuente de ionización usa un emisor con múltiples puntas, similar al usado en
las fuentes de ionización por campo. En este caso el electrodo se coloca sobre una
sonda que puede retirarse y recubrirse con una disolución de la muestra, después

13
de reinsertarla la ionización se produce tras proporcionar un potencial elevado a
este electrodo. En ocasiones es necesario calentarlo haciéndole pasar una
corriente, pero puede ocurrir una degradación térmica antes de completarse la
degradación.[3]

• Desorción/ionización por láser asistida por una matriz (MALDI).

Esta técnica de reciente descubrimiento nos permite calcular pesos moleculares

exactos de extractos de biopolímeros polares en un intervalo de masas moleculares
de varios cientos de miles de Daltons.

En esta técnica se mezcla una disolución acuosa/alcohólica de la muestra con un

exceso de una sustancia matriz que absorbe la radiación. La disolución resultante
se evapora en la superficie de una sonda metálica que se utiliza para la introducción
de la muestra. La mezcla sólida se expone a la acción de un haz de láser pulsante,
provocando la sublimación del analito a iones que son introducidos en un
espectrómetro de tiempo de vuelo para el análisis de masas.[3]

• Ionización por electronebulización (ESI/MS).

Esta técnica se ha convertido en una de las más importantes para el análisis de
biomoléculas de pesos superiores a 100.000 Daltons.

Se realiza en condiciones atmosféricas de presión y temperatura. La disolución de

la muestra se bombardea a través de una aguja capilar de acero inoxidable a un
flujo de algunos microlitros por minuto. Las agujas se mantienen a un potencial de

varios kV con respecto al electrodo cilíndrico que rodea a dicha aguja . La niebla de
finas gotitas cargadas resultantes pasa a través de un capilar de desolvatación
donde se produce la evaporación del disolvente y de las moléculas del analito y
donde estas adquieren la carga. Debido a que las gotitas se vuelven más pequeñas
por la evaporación del disolvente, su densidad aumenta produciéndose la desorción
de los iones en la atmósfera gaseosa.[3]

14
 • De bombardeo por átomos rápidos (FAB).

Con este tipo de fuentes, las muestras en un estado condensado, a menudo en una
matriz de una disolución de glicerol, se ionizan por bombardeo con átomos de xenón
o argón de elevada energía. Tanto los iones positivos como negativos del analito

son expulsados de la superficie de la muestra por un proceso de desorción .

El haz de átomos rápido se obtiene al pasar iones acelerados de argón o xenón de

una fuente o cañón de iones a través de una cámara que contiene átomos de argón
o xenón a una presión de unos 10-5 torr. Estos experimentan una reacción de
intercambio de electrones en resonancia con los átomos obteniéndose un haz de
átomos de alta energía.[3]

• Desorción por plasma (PD).

El deterioro del 252Cf produce dos fragmentos de fisión que viajan en direcciones
opuestas. Un fragmento golpea la muestra anulando entre 1-10 iones analíticos. El
otro fragmento golpea un detector y desencadena la puesta en marcha de la
adquisición de datos. Este método es especialmente interesante para moléculas

largas de origen biológico.[3]

• Espectrometría de masas de iones secundarios (SIMS).

Un haz de luz ionizado primitivo como 3He+,16O+, o 40Ar+ es acelerado y enfocado

hacia la superficie de la muestra y chisporrotea entrando dentro de la fase gas.

Aproximadamente el 1% del material chisporroteado entra en forma ionizada, el cual

ya puede ser analizado. SIMS tiene la ventaja que puede ser continuamente
chisporroteado desde la superficie y determinar las concentraciones analíticas en
función de la distancia desde la superficie original.[3]

• Ionización por termonebulización (TS).

15
La ionización por termonebulización se usa para elementos reflectantes. Una
muestra es depositada encima de una cinta metálica, que puede ser de Pt o Re y
una corriente eléctrica calienta el metal a altas temperaturas. La cinta es revestida

de grafito que reduce la desfragmentación.

Acelerador.

En el sistema acelerador las partículas ionizadas producidas por el impacto de los

electrones son obligados a atravesar una primera ranura aceleradora por una
pequeña diferencia de potencial. Entre esta primera y una segunda ranura existe
una diferencia de potencial muy elevada que imprime a las partículas su velocidad
final. Una tercera ranura actúa como colimador del haz de partículas.[3]

Analizadores.

Para la separación de iones con diferente relación m/e se dispone de varios

dispositivos. Lo ideal es que el analizador fuera capaz de distinguir entre diferencias

muy pequeñas de masa. Además, los analizadores deberían de permitir el paso del

número suficiente para producir corrientes iónicas fáciles de medir.

A la salida de la fuente de iones, se tiene una mezcla de diversos iones que deben
ser separados para detectarlos de forma individual; para la separación de estos
iones, existen también varios procedimientos posibles.[1], [3]

• Analizador de sector magnético.

Los analizadores de sector magnético utilizan un imán permanente o un electroimán

para hacer que el haz procedente de la fuente de iones se desplace con una
trayectoria circular de 180, 90 o 60º. Estos analizadores también son llamados de

enfoque simple.

16
 Fig. 6 Diagrama de analizador de sector magnético.

Fig. 7 Diagrama esquemático de un analizador de masas de sector magnético utilizado en espectrometría de

masas.

• Analizador de doble enfoque.

Este término se usa en los espectrómetros en los cuales las aberraciones

direccionales y las aberraciones de energía de una población de iones se minimizan
simultáneamente. El doble enfoque se consigue utilizando combinaciones de

campos magnéticos y electrostáticos cuidadosamente seleccionados.[3]

17
 • Analizador de masas cuadrupolar.

Este tipo de analizador no utiliza campos magnéticos para la dispersión, por lo que
se encuentra libre de los problemas derivados de la histéresis magnética y, en
consecuencia, es perfectamente utilizable para realizar barridos con gran rapidez.

El analizador cuadrupolar está formado por cuatro barras metálicas de sección

circular o hiperbólica, exactamente rectas y paralelas y dispuestas con gran
precisión sobre una circunferencia, de tal forma que el haz de iones procedente de
la fuente incida sobre el centro del dispositivo. [1]

Sobre estas barras, por pares alternos, se aplica un potencial constante V, y un

potencial alterno de radiofrecuencia superpuesto. Ninguno de estos dos campos
eléctricos tiene efecto sobre el movimiento longitudinal de los iones, pero la
combinación de los dos campos origina un movimiento lateral complejo .

Fig. 8 Esquema de un analizador de masas cuadrupolar.[1]

Son normalmente menos caros y más robustos que los de sector magnético,
además también ofrecen la ventaja de emplear tiempos de barrido pequeños
(<100ms), lo cual es particularmente útil para realizar barridos de picos
cromatográficos en tiempo real.[3]

18
 Fig. 9 Geometría de un analizador cuadrupolar. [1]

Otra de las ventajas que presenta el analizador cuadrupolar, es que la escala de

masas es lineal con respecto a los potenciales utilizados, de forma que en los
espectros obtenidos por este procedimiento pueden realizarse interpolaciones de
masa con facilidad.

Son, con diferencia los más utilizados hoy en día.[1]

• Analizador por trampa de iones.

Este tipo de analizador es una modificación del analizador cuadrupolar, y está

basado en la utilización de una zona de confinamiento electromagnética generada
por medio de dos señales de radiofrecuencia.

El analizador de trampa de iones (figura 9) está formado por tres electrodos de

superficie hiperbólica; de ellos, el electrodo central es anular, mientras que los
electrodos superior e inferior forman el cierre de los extremos del anillo . Los tres
electrodos forman una cavidad en la que se producen la ionización, la fragmentación
y el análisis de masas.[1]
19
Es un dispositivo en el que los cationes o aniones gaseosos pueden formarse y
quedar confinados durante largos periodos de tiempo por la acción de campos
eléctricos y/o magnéticos. Los espectrómetros de trampa de iones son más

robustos, compactos y más económicos que los anteriores.[3]

Fig. 10 Esquema de un analizador de trampa de iones.[1]

• Analizador de tiempo de vuelo.

El analizador de masas de tiempo de vuelo está basado en un concepto muy

sencillo, por lo que los primeros analizadores fueron desarrollados ya en 1948; no
obstante, el escaso conocimiento de todos los factores que influían en la resolución
junto con algunos defectos en los diseños iniciales, hicieron que estos analizadores
fuesen relegados por los analizadores de tipo cuadrupolar.[1]

En este tipo de analizador se producen los iones positivos periódicamente por

bombardeo de la muestra con impulsos de electrones, de iones secundarios o de
fotones generados por láser. Los iones producidos de esta forma son acelerados
en un tubo analizador libre de campo mediante un campo eléctrico pulsante de 103
a 104 V. La separación de los iones en función de la masa se produce durante su

recorrido hacia el detector, situado al final del tubo.

20
Estos analizadores de masas presentan ventajas como la robustez, simplicidad, fácil
acceso a las fuentes de iones y el virtualmente ilimitado intervalo de masas, pero
tienen no obstante una sensibilidad y una resolución limitadas.[3]

Fig. 11 Esquema de analizador de tiempo de vuelo.[1]

• Analizador por transformada de Fourier.

Los espectrómetros de masas de transformada de Fourier proporcionan mejores

relaciones señal/ruido, velocidades mayores y sensibilidad y resolución más
elevadas.

La parte fundamental de un instrumento de transformada de Fourier es una trampa

de iones en la cual los iones circulan en órbitas bien definidas durante largos
periodos. Tales cavidades se construyen aprovechando el fenómeno de resonancia

iónica ciclotrónica.

La resolución es espectrometría de masas de transformada de Fourier está limitada

por la precisión en la medida de la frecuencia más que por las rendijas o las medidas
de campo.[3]

21
 Fig. 12 Diagrama de un analizador de masa de transformada de Fourier.[3]

Detector.

Las corrientes de iones que salen del analizador, son de una intensidad
pequeñísima (10-8 a 10-14 A); estas bajas intensidades de la corriente iónica
originan problemas a la hora de realizar la detección, que debe ser muy rápida y
muy precisa.[1]

Los iones procedentes del sistema acelerador llegan al detector el cual

generalmente está constituido por un cátodo emisor que al recibir el impacto
producido por las partículas cargadas emite electrones. Estos electrones son
acelerados hacia un dinodo el cual emite varios electrones más al recibir el impacto
de cada electrón. Este proceso se repite varias veces hasta obtenerse una cascada
de electrones que llega al colector lográndose una corriente fuertemente

22
amplificada, por un procedimiento muy similar al que se utiliza en los tubos
fotomultiplicadores. La corriente obtenida puede amplificarse de nuevo por

procedimientos electrónicos y se lleva a un sistema registrador.[3]

Existen principalmente tres tipos de detectores:

• Caja de Faraday.

• Multiplicador de electrones.

• Placa fotográfica.

• Caja de Faraday.

Consiste en una caja dentro de la cual se tiene una placa, ligeramente inclinada
para evitar la reflexión de iones; al chocar con la placa, los iones toman de ésta
electrones para neutralizar su carga, y midiendo la corriente electrónica necesaria
para neutralizar a todos los iones, se puede tener una idea bastante exacta del
número de iones que han alcanzado la placa. Este tipo de detector es muy utilizado
para determinaciones cuantitativas, en particular para determinaciones de
abundancia isotópica; presenta la dificultad de que como las corrientes originadas
son muy débiles, son necesarios aparatos de medida muy sofisticados para poder
determinarlas con exactitud.

• Multiplicador de electrones.

El multiplicador de electrones es esencialmente igual a los tubos fotomultiplicadores

utilizados para la detección de radiación. Este tipo de detector, utiliza la energía
cinética de los iones que inciden sobre una placa que tiene su superficie recubierta
por óxidos de tierras raras; al chocar los iones contra la placa, ésta emite una
corriente de electrones que son acelerados hacia una segunda placa, de la que
vuelven a arrancar electrones que son acelerados hacia una tercera placa y asi
sucesivamente.

23
En principio, pueden utilizarse tantas placas como se quiera, aunque generalmente
se utilizan entre 10 y 16. Por medio de este detector, se consiguen amplificaciones

de la corriente iónica con factores de multiplicación de 106 o mayores . Este tipo de

detector, presenta el inconveniente de que las corrientes inicial y final no presentan
una proporcionalidad suficientemente buena como para poder ser utilizados en
determinaciones cuantitativas muy exactas.

Una variante de este tipo de detectores es la placa de microcanales, formada por

un material emisor de electrones aplicado sobre las paredes de microtubos a lo largo
de los cuales se establece una diferencia de potencial que acelera los electrones.

• Detección fotográfica.

La detección fotográfica se utiliza en muy pocos equipos y únicamente cuando es

necesaria una altísima sensibilidad o una extraordinaria resolución; las placas sobre
las que ha incidido el haz de electrones, se procesan por medio de técnicas
normales de fotografía y su lectura se realiza por medio de un densitómetro.

Análisis de un espectrograma de masas.

Como consecuencia del bombardeo electrónico en la cámara de ionización, las
moléculas se rompen en una serie de fragmentos, siempre que una misma molécula
se rompa en las mismas condiciones nos dará el mismo tipo y número de
fragmentos y constituyen la fragmentación patrón.

Gracias a esto se pueden determinar que es la muestra por comparación y por otra
parte, la intensidad relativa de los distintos picos, permite deducir la proporción en
que cada componente se encuentra en la muestra.

El pico del espectrograma que aparece con valor más elevado de m/e corresponde
a la molécula ionizada sin fragmentar y recibe el nombre de masa patrón . Esta masa
patrón nos permite determinar con rapidez y precisión la masa molecular, siempre

24
que se opere con una tensión de ionización no excesivamente elevada, la cual
produciría la fragmentación total de la molécula.

El pico mayor del espectrograma de masa se llama pico base . Normalmente la

altura de este pico se toma como valor cien. Las intensidades de los demás picos

se expresan en porcentajes de la intensidad del pico base.[3]

Fig. 13 Aspecto clásico de un espectrograma de masas, en el que se señalan su pico base y su ion molecular
más importante. La tabla situada a la derecha nos indica la concentración y la relación m/z de cada uno de los
elementos presentes en el compuesto analizado.[3]

Aplicaciones de la espectrometría de masas.

Las aplicaciones de la espectrometría de masas son muy numerosas y abarcan
muchos campos que es muy complicado citarlas todas, a continuación, se enlistaran
algunas de las mas usadas y mas relevantes para el área de la biomédica:

• Determinación del peso molecular de péptidos, proteínas y oligonucleicos .

• Elucidación de la estructura de moléculas orgánicas y biológicas.

• Determinación de secuencias de aminoácidos en muestras de polipéptidos y
proteínas.

• Identificación de drogas de abuso y sus metabolitos en sangre, orina y saliva.

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 • Control de gases en enfermos respiratorios durante los procesos quirúrgicos .
• Pruebas para confirmar la presencia de drogas en la sangre en atletas
olímpicos.

• Datación de ejemplares en arqueología.

• Determinación de residuos de pesticidas en alimentos.

Dentro del campo de la biomédica se toman como mas relevantes las pruebas que
se hacen para determinar compuestos presentes en la sangre por lo que a
continuación se detalla un poco más la forma en la que se aplica la espectrometría
en estos estudios:

Análisis de sangre: debido a la rapidez del método, se puede emplear incluso

como control durante un proceso quirúrgico. Así se puede determinar a gran
velocidad las concentraciones hemáticas de monóxido y dióxido de carbono,
oxígeno, nitrógeno, gases anestésicos (como el óxido de nitrógeno (NO)).

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Conclusiones.
Con la investigación realizada se pudo observar que a pasar de que la técnica de la
espectrometría de masas tiene mas de un siglo de que se empezó a desarrollar
sigue siendo una técnica de las mas confiables y con mayor aplicación en la
detección de elementos y compuestos presentes en una muestra . Los principales
avances y modificaciones que se han tenido durante este tiempo en la
espectrometría han sido generalmente en los equipos con los que se realiza el
proceso, teniendo en la actualidad una gran variedad de equipos que se adaptan a
las necesidades de cada una de las aplicaciones de esta técnica.

Se tiene que los espectrómetros de masas están vigentes y se encuentran en

constante desarrollo en la actualidad debido a que son instrumentos que tiene gran
versatilidad y practicidad además de que son de los pocos que permiten análisis
cuantitativos y cualitativos de forma simultánea.

Se observa que su uso esta restringido principalmente a laboratorios

especializados, esto debido a su elevado costo provocado por la complejidad de los
componentes que integran es dispositivo, además por los ambientes en los que este
requiere para ser operado.

Se concluye que para el desarrollo del instrumental del espectrómetro de masas se

requiere de un trabajo conjunto de varias disciplinas, principalmente la electrónica,
mecánica, física y química, ya que su funcionamiento implica tener reacciones
químicas, fenómenos físicos y entendimiento sobre fenómenos electromagnéticos .

Dentro del área de la biomédica sus principales usos se enfocan en los análisis de
componentes y contaminantes de la sangre y otros fluidos corporales, así como el
análisis de componentes estructurales de moléculas y compuestos biológicos y
orgánicos.

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Bibliografía.
[1] Museo Nacional de Ciencias Naturales, “ESPECTROMETRIA DE MASAS.” .

[2] I. Nancy Janeth Cortez Cervantes and E. Marcelo de Posada Piñán, “&quot;

DISEÑO Y DESARROLLO DE UN ESPECTROMETRO DE MASAS.

ELECTRÓNICA Y CONTROL &quot; T E S I S P r e s e n t a.”

[3] A. Payá, “Fundamentos y Funciones de la Espectrometría de Masa,” Univ.

Val. España, 2006.

[4] N. J. Cortez Cervantes, “DISEÑO Y DESARROLLO DE UN

ESPECTROMETRO DE MASAS. ELECTRÓNICA Y CONTROL”,”

INSTITUTO POLITÉCNICO NACIONAL, 2009.

[5] M. Carmen, M. Gómez, and M. B. González, “Espectrometría de masas y

análisis de biomarcadores,” Monogr. la Real …, pp. 113–168, 2010.

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