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La reacción del luminol precisa de un medio alcalino, el cual sirve para disolver
y cargar negativamente la molécula. Para emitir luz, el luminol debe ser activado
con un agente oxidante. Normalmente se utiliza una disolución de peróxido de
hidrógeno e iones hidróxido en agua. En presencia de un catalizador (como
cationes de hierro o un peryodato), el peróxido de hidrógeno se descompone
para formar oxígeno y agua en una reacción de dismutación.
No fue necesario recurrir a proporciones perfectas para crear una solución que
detecte la sangre. A partir de luminol, agua, H2O2, y una base cualquiera con
pH mayor a 9 (NaHCO3, Na2CO3,y NH3) se obtuvieron iguales resultados con
la reacción de la sangre. Tan solo se debe precaver en que esta solución solo
dura unas horas o días, según la temperatura en que se conserve. Finalmente
fue comprobado que la sangre puede diferenciarse de otras sustancias que
causan la oxidación del luminol en escenarios comunes de la ciencia forense.