Documente Academic
Documente Profesional
Documente Cultură
~ l l 1 1 l
t.:::::r~ A ---;--- B ~ C----¡;- O--;¡--
producto
intermedian
producto
intermediario
_J_ _l _l _l X_l
1 U u V v W w x
producto
finalZ
producto 1 u v w x producto
U-v-w- X- final Z
lntermediaño -
t . . .______._
1nh1b1c16n por producto final
16.1 Regulación de la síntesis enzimática 551
16.1.1 Inducción
Inducción de la {3-galactosidasa. El ejemplo más profundamente estu-
diado de inducción enzimática es la utilización de la lactosa por
Escherichia coli (Fig. 16.1 ). La lactosa es un disacárido que hay que
hidrolizar antes de que entre en las vías de degradación de las hexosas:
~-galactos1dasa
lactosa + H20 o-glucosa + o-galactosa
Las células silvestres que crecen sobre glucosa contienen una actividad de
la {3-galacrosidasa prácticamente no determinable. No obstante, si crecen
552 16. La regulación del metabolismo
A~s~c ~ o~E~1
a b e d e
t"' A t B te
~
"'u
~ ~"'
E
.Ñ
.,e
• b e d • E
.Ñ
.,e
abe de E
.Ñ
.,e:
• b o d•
'O
"' ..
'O
~
j ~
<
i<
Tiempo Tiempo Tiempo
E - -· F - G - H - 1
íTrintó.l
~ nunenna
f - ki formil: 1- kinu:nina l__ antranilatol 1catecol I
16.1.2 Represión
R epresión por producto final . Consideremos el ejemplo de la síntesis de
la arginina para ver cómo transcurre la represión deter~nada por un yro-
ducto final sobre una vía biosintélica en la concentración de los enzimas
para esta síntesis (Fig. 16.3). La síntesis de la arginina parte_~el gluta_ma-
to (Fig. 7 .18) y conduce en último término a través de la orn1tma, la c1tru-
lina y el argininosuccinato a arginina.
represión por el producto final
Ornitina +
Carbamoil· OCTasa citrulina _i__ ___.!___ Arginina
fosfato
2-acebl·
lactato
+ + <5
+ + + <5
+ 182
+ + 170
+ + 70
element°'
gen regulado< <M comrol genes estructurales
,------/\-----, ,---/'-.
p
:::::::: 1'·
1 ~ ---º"
•~ - -· t
~ RNAm
·~7 / 1 _!...y l j
transacet1/asa
l
B) Sin IUllrá> lnduc*>r
: : :::::: 1
p
:
1
~
R ~~ O
-
., z y a t
P R tPO z at
1 __,__---41___-+---+---- --t----ii---·mt:::
'. :::::: :+- ONA
e
•
.---
--
Inductor
AMPc
~
•
•
-
A
.....
~
Represor
CAP •
Represor
1nactrvo
RNA·
pollmeraSIJ
Fig. 16.7 Modelo de regulación del operón lactosa, sometido tanto a induc·
ción como a represión por catabolito. Para la transcripción del operón se requ1e
re la unión del CAP al promotor. El CAP se une solamente en presencia de AMPc.
La glucosa inhibe la unión del AMPc y con ello la transcripción del operón Jac.
16.1 Regulación de la síntesis enzimática 561
ONA
::: 1 p 1 A ~ t
¡ ¡ ¡ ¡ ¡ ¡
ANAm
¡
) enzimas prote1na
P A t o 1
M ::: ONA
1 •
producio hnal
• correpresor represor
o 2 3 4
Concentración de sustrato (en mmol/I)
tración de enzima (E) y del sustrato (S) o del producto (P) sino que tam-
bién depende de la afinidad del enzima hacia el sustrato (Km) y de su velo-
cidad máxima (Vmáx). La Km es la llamada constante de MICHAELIS-
MENTEN; indica la concentración de sustrato para la que la actividad enzi-
mática tiene una velocidad semimáxima (Vm;.12). El enlima tiene una
velocidad máxima cuando el sustrato se encuentra en exceso y, por tanto,
el enzima está saturato de sustrato. Km y Vmax son parámetros de la cinéti-
ca enzimática.
Enzimas sencillos. La mayoría de los enzimas se cru·acteriLan por tener
una curva de saturación hiperbólica. La velocidad de reacción depende
únicamente de la concentración del sustrato y del producto, y aumenta
hiperbólicamente a medida que se incrementa la concentración de sustra-
to, obedeciendo por tanto a la relación de MICHAELIS-MENTEN. A este con-
junto de enzimas caracterizados por curvas de saturación hiperbólicas se
les denomina también enzimas sencillos o "hiperbólicos" (véase Fig. l 6.9A,
curva negra).
Resulta plausible que un enzima transforme más rápidamente al sustrato
cuando su concentración vaya aumentando que cuando disminuye. La sen-
sibilidad con la que un enzima reacciona frente a las modificaciones en la
concentración de i.ustrato depende de la pendiente de la curva de satura-
566 16. La regulación del metabolismo
t-
forma T
~ rn
Modelo de simetría
---,J
formaR
+S
------. tf3 - +S § j S - +S ~S
s - +S ~S
s s
• n•
11 lnh1b1dor
lil Sustrato
o e
lf
•
Ac11vador
• u
Estado T Estado A
Flg. 16.11 Representación del tipo de equilibrlo entre el estado de baja acti-
vidad catalítica y el estado de alta actividad de un enzima alostérico compues-
to por cuatro subunldades según el modelo de simetría. Aclaraciones en el texto.
(según K1RSCHN• R, K. Ergebn. M1krobiol 44 (1968) 123).
'tt> { 12 PP
" JI
erwma aden1'ante
sistema desademlanle
12 AMP
/
f! '® 12 H,O
gtutamona '
2-0xoglutara10
píruvato 1--~
l --
Tal como indican estos ejemplos, la influencia mutua de dos vías biosin-
téticas puede evitarse por formación de enzimas isofuncionales, siendo
uno por lo general regulado de una forma estricta, mientras que el otro es
regulado por otra vía.
Vías biosintéticas ramificadas. Si e l primer paso de una vía biosintética
es común a dos o más productos finales se plantean unos problemas espe-
ciales. En una sucesión de reacciones hipotética que conduzca A hasta E,
G y H la transformación inicial A ~ B quedaría inhibida cuando uno
solo de los productos finales (p. ej. H) se acumulase. Sin embargo así tam-
bién se disminuiría la síntesis de G y E. Estas complicaciones en la regu-
lación de las vías biosintélicas ramificadas parecen haberlas resucito los
distintos organismos por mecanismos diversos. Hasta ahora se han encon-
trado varios tipos de regulación de la función enzimática en las vías meta-
bólicas divergentes o paralelas: l. El primer paso está catalizado por
varios enzimas isofuncionalcs, cada uno de los cuales está regulado por un
producto final distinto. 2. El primer paso está catalizado únicamente por
un enzima y a) para su inhibición hacen falta todos los productos finales
en exceso (inhibición concertada) o b) cada producto final participa de
forma paritaria en la inhibición (inhibición acumulativa) de modo que la
inhibición total puede superar a la suma de las inhibiciones parciales (inhi-
bición cooperativa).
aspartato
aspartato-4-loslato
aspartato
semialdehído
poperidín·
o-succ1nil·
homoserina
'
dicarboxilato cistationina
2-oxobutirato
'
diam1nop1mela10 homoc1sleína
'
lisina isoleucina
N
T
E
s
Este enzima es inhibido por el AMP. El AMP actúa aquí como indicador
del grado de saturación de la célula con compuestos ricos en energía. Un
exceso en AMP indica que no hay suficientes suministros de ATP para
saturar las reacciones que consumen energía. Parece plausible que bajo
estas condiciones la gluconeogénesis debe frenarse en favor de la degra-
dación de la glucosa para una mayor ganancia energética.
C iclo de los ácid os tricarboxfücos. En las levaduras el ATP disminuye
intensamente la afinidad de la citrato-sintasa por el acetil-CoA. En E. coli
y otras bacterias una concentración alta en NADH2 constituye la señal de
que la cadena respiratoria está saturada y de que debe disminuirse el flujo
a lo largo del ciclo de los ácidos tricarboxílicos. La 2-oxolutarato-deshi-
drogenasa, la citra10-sintasa y Ja pinll'ato-deshidrogenasa están someti-
das a inhibición por el NADH2 (Fig. 16.14).
Síntesis de grasas de r eser va. Por lo general se acumulan sustancias de
reserva cuando las fuentes de carbono y de energía están en exceso, pero
también cuando hay una deficiencia en compuestos nitrogenados o sulfu-
rados y el crecimiento no es posible. La señal para la síntesis de grasas
(ácidos grasos) y polisacáridos parte predominantemente de productos
intermediarios. En las levaduras Ja reacción limüante en la velocidad de la
síntesis de los ¿\cides grasos es la carboxilación del acetil-CoA por la ace-
ti/-CoA-carboxi!asa.
lo~ compuestos con el CoA del ácido palmítico y otros ácidos grasos.
Cuando se acumulan derivados del CoA tiene lugar una inhibición por
producto final.
Síntesis d e polisacáridos de reser va . La síntesis de glucógeno y almidón
se realiza a partir de la glucosa-1-fosfato. Ésta se activa por el nuclcósido-
trifosfato (NuTP) y es transferido a una cadena de glucosas:
E.C. = . __
2_A_T_P_+_A_D_P__ ATP + 0,5 ADP
112
ATP + ADP + AMP ATP + ADP + AMP
El factor 0.5 'e ha incluido arbitrariamente para que el parámetro oscile entre O y
1. Por tanto, el e>tado de carga energética indica cuánto' "enlaces rico\ en energía"
están presente' referido~ al número total de unidade> de adenosina. El parámetro
vale 1 cuando todos los adcnilatos están en forma de ATP y vale O cuando sólo \C
presenta el AMP. En células en crecimiento exponencial el valor de E.C. es gene-
ralmente 0.8.
Esta r esiste ncia frente a l a ntimcta bolito puede deberse a varias muta-
ciones en las caraeterÍ'>llcas fisiológicas de las células: 1. Mutación a
·'insensibilidad alo'>térica": e'.'.ta mutación tiene como consecuencia que
la acti\idad del primer en11ma C'>pecíflco (alostérico) no disminuye ni por
el metabolito ni por el an11me1abolito. y el producto final de la cadem1
biosintélica se sinte1i1a de forma incontrolada. 2. Mutación a una "desre
presión constituli,a". e'>ta mutación tiene como consecuenci~ que los
enzimas implicados en la \Íntes1-. del producto final se formen mcon1ro-
ladamen1e. 3. Mu1ac10ne'.'. en lo'> centro\ catalíticos de los eOLima'> que
activan y transforman a lo-. mc1abolitos: si se incrementa la capacidad de
elección puede perder'>e la capacidad de un enzima de fijar al antimeta
bolito en lugar del mctabohto: el antimetabolito pierde entonces su
acción bacteriostática . .t. Una mutación en un defecto en el tramporte
determina que el antimetabol110 no penetre en el interior de la célula y por
tanto no actúe en el metahohsmo. 5. Una mutación que determine la
degradación constitutiva del antimetabolito;, el antimetabolito es .<legra
dado por la célula y se convierte en inocuo. Unicamcn~e los dos pnme;~ls
tipos de mutantes son interesantes desde el punto de vista de la sclecc10.n
de mutantes con regulaci6n defectuosa. La síntesis desreprimida. de en.11·
mas anabólicos y la pérdida de la inhibición alostérica detenninan trc
16.3 Mutantes defectivos en la regulación 579