Documente Academic
Documente Profesional
Documente Cultură
INFORME LABORATORIO 1
UNIVERSIDAD DE LA SALLE
CIENCIAS BASICAS
MICRO-LAB No 1
1.TITULO:
ALUMNOS:
GRUPO: 15
FACULTAD: Ingeniería Ambiental y Sanitaria
PRE-LAB
librys .com./problemasdequimica/ingenieria.html
(http://esg-www.mit.edu:8001/esgbio/chem/review.html)
Course/pHtutorial/index.html
enlacequim.bioweb.wku.edu/BD/courses/MB220/chemiscalbonding.html
Fiederich Konrad Beilstein (Ale mania), Investigation y Ciencia, Ozono, Ambio, Journal Environmental
Engineering.
www.edu.aytolacoruna.es/aula/quimica
www.jjorg.chem.unc.edu/personal/monroe
www.educaplus.org/sp2002/index sp.php
www.geocities.com/erkflores/Tabla.htm
www.ciencianet.com
www.chemicalcalculator.com
www.orbit.org/perlib/
www.edu.aytolacoruna.es/aula/quimica
Desde el siglo pasado las separaciones analíticas se llevaban a cabo por métodos clásicos como son la
precipitación, destilación y extracción. Los crecientes esfuerzos por conocer más sobre la composición
y función de las proteínas han obligado a los científicos a buscar técnicas, cada vez, más precisas.
Para elegir una técnica de separación, además de tener en cuenta los criterios económicos y de
accesibilidad, hay que atender a dos tipos de consideraciones: unas tienen que ver con las
propiedades físicas y estructurales de las moléculas que se pretende separar, o de las características
de la matriz en que se encuentran; otras se derivan de los objetivos del análisis (sensibilidad,
El método de selección incluye los pasos necesarios para la obtención, preparación y posible
datos obtenidos.
Las técnicas analíticas más empleadas en la actualidad pueden englobarse en dos grandes grupos:
cada compuesto analizado, una información compleja, relacionada con sus características
estructurales específicas, por otro lado las técnicas de separación se utilizan para resolver los
componentes de una mezcla y la señal obtenida puede utilizarse con fines analíticos cuantitativos o
cualitativos.
Es precisamente en las técnicas de separación en las que basaremos la revisión bibliografíca del
ella. Las muestras se pueden separar de acuerdo a su carga como por ejemplo su hidrofobicidad y su
pureza. Esto es tan importante que en ocasiones dependiendo de la carga hace más fácil el trabajo. En
estos casos la cromatografía es tan útil que el ser humano mediante estudios puede determinar en
alguna muestra de análisis forense, que sustancias o elementos estaban contenidos, y hacer uso de
Introducción:
2- OBJETIVOS –: para c/u de los problemas planteados teórico - prácticos dar el correcto método de
de una solución
d) Deducir, a través del R.f., la relación que existe entre la polaridad de las sustancias que se analizan
MATERIAL EQUIPOS:
REACTIVOS:
4.5 Destaque en pocas palabras una norma de seguridad para tener en cuenta en este LAB.
MATERIAL
REACTIVOS
CROMATOGRAFICAS DE COLUMNA
Soporte universal
-BEAKER 600 ml
-Papel de filtro
-reglilla
-capilares
-Cámaras de cromatografía
CROMATOGRAFICAS DE COLUMNA
-etanol 98%
Patrones de fenoles
-acido galico
- naftol
Mezcla de todos
- yodo solidó
-bencina de petróleo
- Acetato de etilo
DE
· CROMATOGRAFICAS DE COLUMNA
· matriz de la columna. Sustancia que está empapada de solvente y que se empaqueta en la columna.
en algunos tipos de cromatografía como la de filtración en gel y poco importante en otras como la
cromatografía de afinidad.
· volumen de la columna. Volumen total de gel que se empaqueta en una columna cromatografía.
· volumen muerto de la columna. Cantidad de solvente que tiene que atravesar la columna para
asegurar que se ha reemplazado completamente. Coincide con el volumen de solvente que sale de la
columna desde que se aplica la muestra hasta que empieza a salir la primera proteína. En general, y
dependiendo del tipo de cromatografía puede ser de 1 a varias veces el volumen de la columna.
'Run Throught'. Es, en columnas de intercambio iónico o de afinidad, el volumen de solvente más
A-PROCEDIMIENTO
1.- Separación por cromatografía en columna de una mezcla de(colorantes) violeta cristal y naranja de
metilo
Se sujeta la columna, en posición vertical, a un soporte utilizando dos pinzas: una cerca de la llave y
otra en la parte superior y se introduce un pequeño copo de algodón en su extremo inferior. Se coloca
En un vaso de precipitados se prepara una suspensión con 5g de gel de sílice (adsorbente) y 50mL de
procurando que no se formen burbujas y evitando que se seque la gel de sílice. El etanol que se va
para así recuperar la gel de sílice de columna que hubiera podido quedar y se transvasa todo de nuevo
a la columna. Se deja que el eluyente baje hasta una altura sobre el adsorbente de 1-2 mm, se cierra
la llave de la columna se quita el embudo y con una pipeta se añade cuidadosamente 1 mL de luna
solución preparada de violeta cristal y naranja de metilo. Se abre la llave de la columna para que esta
disolución quede inmersa en la gel de sílice y se vuelve a cerrar cuando la disolución de colorantes
alcanza una altura de 1 mm sobre el adsorbente. Se añaden con una pipeta 5mL de etanol con mucho
llave y se continúa añadiendo etanol para desarrollar la columna hasta que se recoja el primer
colorante. Después se utiliza una mezcla de disolventes: etanol/trietilamina en proporción 9:1 como
El naranja de metilo es un colorante azoico (los azo-derivados contienen el agrupamiento –N=N-, son
compuestos intensamente coloreados y muchos se emplean como colorantes) que se utiliza como
indicador ácido-base y es amarillo en medio básico y rojo en medio ácido. El violeta cristal es un
colorante derivado del trifenilmetano. Ambos compuestos son muy polares y sus estructuras son:
· ANTECEDENTES
CROMATOGRAFÍA
Fundamento teórico: El termino de cromatografía viene de las palabras griegas Kromato (color) y
Graphos (escritura), fue usado primero en 1906 por Michael Tsewtt, botánico ruso, para describir la
Luego fue reintroducido en el análisis orgánico en 1931 por Khon y Ledever. Y el CCD se originó en
1938 por dos rusos Tzmalois y Shacraiber.
integrantes de una mezcla en movimiento a través de procesos de absorción, partición, exclusión por
A principios del siglo XX un botánico ruso desarrolló una técnica de coloración para separar los
compuestos químicos, que es lo que hoy día se denomina Cromatografía. Este es actualmente uno de
los métodos más difundidos para separar e identificar los compuestos químicos. Las sustancias de
origen biológico tales como los pigmentos, los aminoácidos, los azúcares, las sustancias químicas
aromáticas, las grasas y otras sustancias relacionadas con los seres vivos (ejemplo son las Sustancias
Contaminantes y los Insecticidas) pueden aislarse utilizando la Cromatografía. Aunque hoy día esta
técnica se utiliza para muchos fines, el principal intento de su descubridor, Michelle Tswett, era el de
separar los pigmentos contenidos en las hojas de las plantas de la materia que los rodea.
Para ello preparó una mezcla de pigmentos de las hojas disueltas en un disolvente (disolvente es un
líquido, ejemplo: agua o alcohol, en el que puede disolverse otras sustancias químicas; después de la
evaporación de éste las sustancias químicas no varían respecto a como eran antes de ser disueltas).
Vertió, a continuación esta solución en la parte superior de un estrecho tubo de vidrio lleno de azúcar
en polvo. Cuando el disolvente se desplaza a través del azúcar, los pigmentos que transportaba
tendían a adherirse con distintas velocidades sobre la superficie de los cristales del azúcar (éste es un
ejemplo del proceso conocido con el nombre de adsorción) y en la columna aparecían unas bandas de
colores, cada uno correspondiendo a uno de los pigmentos de la mezcla. Una vez sacada la columna,
podía dividirse en secciones por medio de una espátula y lavando, se extraería cada pigmento de un
Cromatografía, de la palabra griega chroma, que significa color. Existen varios tipos de Cromatografía:
Si se mezclan varias tintas de escribir y se absorbe una gota de la mezcla con un papel secante, se ve
la formación de franjas o círculos concéntricos, cada uno de los cuales corresponde a uno de los
absorbida por un polvo fino (alumina, almidón, magnesia, sílice en forma de gel, etc.) o por un papel
sin escolar. En ciertos casos la observación directa permite distinguir los constituyentes de la mezcla.
Por lo general, es necesario embeber la materia porosa con un eluyente que acentúa la separación o la
revela si era invisible.
La Cromatografía tiene una importancia considerable, pues permite analizar cómodamente cantidades
Cromatografía en fase gaseosa sirve para el control continuo de la composición de los productos o
Tipos de Cromatografía:
El método de Tswett, se utiliza todavía para separar compuestos químicos y para analizarlos, pero se
han desarrollado otras formas de Cromatografía: las principales son la Cromatografía en Papel y en
Durante este proceso la mezcla química a analizar se disuelve en un disolvente y después se coloca
una gota de la misma sobre una tira de papel filtro o una placa de silica gel. l en el interior de una
cámara cerrada, que contiene disolvente en el fondo. El extremo inferior de la placa de silica gell se
sumerge en el eluyente y cuando este se desplaza hacia arriba (por efecto de la acción capilar) las
menudo las sustancias químicas separadas sobre son incoloras, así que, una vez retirado y secado la
placa, ver con lámpara U-V- se le trata (por aspersión) o por sustancias que se sublimen (gas) ej:
yodo solidó con sustancias específicas llamados reveladores que hacen visibles los compuestos
químicos.
Este segundo proceso se llama revelado, porque es similar al revelado de una fotografía. Gracias a la
Cromatografía en papel o capa fina es posible identificar varias sustancias químicas, como por ejemplo
los azúcares, los aminoácidos, las grasas e incluso las sustancias reactivas.
B-5-Procedimiento:
Cromatografía de capa fina método de separación e identificación de fenoles
Prepare dos placas cromatograficas aplique en ellas una gota de muestra patrón de una mezcla que
contiene acido galico, resorcinol y naftol disueltos en diclorometano y aun lado una gota de muestra
problema que contiene uno de los fenoles efectué la cromatografía sobre capa delgada utilizando
como eluentes
2. Acetato de etilo
Deje subir el eluente hasta aproximadamente 1 cm. del final de la placa señale con un lápiz y
Introduzca la placa de silica gel en la cámara de cromatografía ensayo procurando que la mancha
quede encima del solvente a este proceso se denomina desarrollo del cromato- grama.
4. 9 cm.
Se giran 90º
Desarrollo
POS-LAB
6 CÁLCULOS Y RESULTADOS:
disolvente (Mezcla acetato de etilo-éter de petróleo 2:8 y 4: 6) y se esperó a que el disolvente subiera
para poner en los reveladores primero en la lámpara UV, pero no dando resultados se puso en yodo
sólido para revelarlos. Al recoger la primera placa del yodo nos dimos cuenta que estaba corrida la
mancha y que tenia manchas de dedos, por lo cual se hizo difícil distinguir la posición de la ultima
macha, Para la segunda placa se tuvo mas cuidado y por lo tanto las machas y sus posiciones eran
mas consistentes
SUSTANCIA
DISTANCIA RECORRIDA
R.F.
3,7cm
7,4cm
0,5
NAFTOL (C10H8)
6cm
7,4cm
0,81
RESORCINOL (C6H6O2)
4.4cm
7,4cm
0,59
MEZCLA
5,9cm
7,4cm
0,79
MEZCLA
4,3cm
7,4cm
0,58
SUSTANCIA
DISTANCIA RECORRIDA
R.F.
0.7cm
7.2cm
0.09
NAFTOL (C10H8)
5.3cm
7.2cm
0.73
RESORCINOL (C6H6O2)
1.2cm
7.2cm
0.16
MEZCLA
5.2cm
7.2cm
0.72
MEZCLA
1.3cm
7.2cm
0.18
6.2 cálculos
RF (C6H2) = 3.7cm/7.4cm
=0.5
RF (C10H8) = 6cm/7.4cm
= 0.81
RF (C6H6O2) =4.4cm/7.4cm
=0.59
RF mezcla =5.9cm/7.4cm
=0.79
=4.3cm/7.4cm
=0.58
RF (C6H2) = 0.7cm/7.2cm
=0.09
RF (C10H8) = 5.3cm/7.2cm
= 0.73
RF (C6H6O2) =1.2cm/7.2cm
=0.16
RF mezcla =5.2cm/7.2cm
=0.72
=1.3cm/7.2cm
=0.18
6.3 grafico
NAFTOL (C10H8)
RESORCINOL (C6H6O2)
MEZCLA
NAFTOL (C10H8)
RESORCINOL (C6H6O2)
MEZCLA
6.4 Observaciones
-En el éter de petróleo 2:8 de menor concentración, hay un desplazamiento menor en las sustancias.
-En el éter de petróleo de 4:6 de mayor concentración, el desplazamiento de las sustancias es mayor.
-Se observa que en la separación de la mezcla, se divide en dos componentes como son el naftol y el
resorcinol, tanto en éter de petróleo de 2:8 y 4:6.
- Al observar que el éter de petróleo, no mostró ningún efecto, se necesito la ayuda del sodio sólido
para relevarlos.
El estudiante debe seguir pasos como los siguientes para realizar la discusión de resultados del
laboratorio.
largo de una matriz porosa. Se basa en alguna propiedad que es diferente en las proteínas que se
quiere separar; peso molecular, carga eléctrica, afinidad de una de ellas por alguna de otra. Se
columna de cristal en la que se ha situado una matriz sólida porosa que está inmersa en el solvente. A
continuación se bombea una gran cantidad de solvente a través de la columna. Las diferentes
proteínas se van retrasando de manera distinta según sus interacciones con la matriz, por lo que
pueden ser recogidas separadas a medida que son eluidas por el fondo de la columna. Según la matriz
capacidad de unirse a grupos químicos particulares. La pureza de las fracciones obtenidas se duele
Método en el cual los componentes de una mezcla son separados en una columna absorvente dentro
de un sistema fluyente.
cual los métodos son divididos en dos fases, una estacionaría y otra movil.
Fuentes:
-http://www.ub.es/biocel/wbc/tecnicas/cromatografia.htm
-http://www.textoscientificos.com/quimica/cromatografía
Éter de petróleo
Para usos de laboratorio, análisis, investigación y química fina. Extremadamente inflamable. Nocivo:
riesgo de efectos graves para la salud en caso de exposición prolongada por inhalación. Toxico para
los organismos acuáticos, puede provocar a largo plazo efectos negativos en el medio ambiente
acuático. Posible riesgo de perjudicar la fertilidad. Si se ingiere puede causar daño pulmonar.
Fuente: http://www.panreac.com/new/esp/fds/ESP/X142699.htm
-El valor de los R.F. tomados en la práctica, al no someterlos en contacto con nada y realizando
correctamente el proceso, puede ser tan exacto, que se puede determinar que tipo de sustancia están
en las mezclas.
-La cromatografía es importante para determinar los componentes que hay en una mezcla orgánica.
- Siempre que vayamos a hacer una cromatografía de capa fina lo importante es colocar las muestras
en los lugares adecuados la cantidad adecuada para que una muestra no se nos vaya a juntar con la
otra ya que no dejaría ver muy bien las muestras y se formarían son manchas
-Generalmente ocurren por el contacto de las manos en las placas de cílica gel lo cual hace que las
-La cantidad de sustancia que se pone con un capilar alargado, a veces era muy exagerado, por lo
-También que a veces no se esperaba a que el solvente no llegara hasta el final, o faltando un
centímetro.
integrantes de una mezcla en movimiento a través de procesos de absorción, partición, exclusión por
sustancia compleja.
La cromatografía separa sustancias por intercambio iónico y la electroferesis separa moléculas ya sean
Las distintas técnicas cromatográficas se pueden dividir según cómo esté dispuesta la fase
estacionaria:
Cromatografía plana. La fase estacionaria se sitúa sobre una placa plana o sobre un papel. Las
Cromatografía en columna. La fase estacionaria se sitúa dentro de una columna. Según el fluido
químicas.
9.5 que es un Rf
Relación existente entre la distancia que recorre la sustancia en la placa de cílica gel y la distancia a la
11-BIBLOGRAFÍA.
http://www.panreac.com/new/esp/fds/ESP/X142699.htm
http://www.ub.es/biocel/wbc/tecnicas/cromatografia.htm
-http://www.textoscientificos.com/quimica/cromatografía
2007)
Methods in Enzymology, Vol. XIV: Lipids (J.M.Lowenstein, ed.) Academic Press, London.
de agosto de 2007).
Completa la Bibliografía con las fuentes consultadas para escribir la nueva introducción, la discusión
de resultados y cuestionario.
No hay comentarios:
Publicar un comentario
Entrada más recienteEntrada antiguaPágina principal
trabajos quimica
A R C H I V O D E L B L O G
▼ 2007 (8)
o ▼ septiembre (8)
INFORME LABORATORIO 3
INFORME LABORATORIO 2
INFORME LABORATORIO 2
INFORME LABORATORIO 1
INFORME LABORATORIO 4
D A T O S P E R S O N A L E S
JoRGe RoJAS