Practica #3

Titulo: REACCIONES DE IDENTIFICACIÓN DE CARBOHIDRATOS

1. Fundamento.
El nombre de Carbohidratos se utiliza para designar a un numeroso grupo de compuestos
que son polihidroxialdehídos, polihidroxicetonas o sustancias que conducen a ellos por
hidrólisis en medio ácido. La reactividad de los Carbohidratos es, principalmente, la
reactividad debida a los grupos funcionales carbonilo e hidroxilo.
2. Objetivos.

Reconocer y analizar las reacciones químicas que se producen en las pruebas de

Molisch y Benedict en los carbohidratos.

3. Marco teórico. Investigue sobre:

• Carbohidratos. Funciones biológicas y clasificación

Funciones de los carbohidratos

Forma de almacenamiento de la energía (almidón y glucógeno).
Las glucoproteínas y los glucolípidos son componentes de las membranas
celulares y receptores.
Base estructural de muchos organismos: la celulosa de las plantas, el
exoesqueleto delos insectos, la pared celular de los microorganismos y los
mucopolisacáridos como matriz extracelular de organismos superiores.
(Vasudevan , Sreekumari, & Kannan, 2011, pág. 60)

Clasificación de los carbohidratos

Los carbohidratos se clasifican en:
a) Los monosacáridos son los azúcares que no se pueden hidrolizar hacia
carbohidratos más simples. Pueden clasificarse como triosas, tetrosa,
pentosas, hexosas o heptosas, dependiendo del número de átomos de
carbono, y como aldosas o cetosas, dependiendo de si tienen un grupo
aldehído o cetona
b) Los disacáridos son productos de condensación de dos unidades de
monosacáridos; los ejemplos son lactosa, maltosa, sacarosa y trehalosa.
c) Los oligosacáridos son productos de condensación de 3 a 10
monosacáridos. Casi ninguno es digerido por las enzimas del ser humano.
d) Los polisacáridos son productos de condensación de más de 10 unidades
de monosacáridos; los ejemplos son los almidones y las dextrinas, que
pueden ser polímeros lineales o ramificados. Los polisacáridos a veces de
clasifican como hexosanos o pentosanos, dependiendo de la identidad de
monosacáridos que los constituyen.
 Además de almidones y dextrinas, los alimentos contienen una amplia
variedad de otros polisacáridos que se conocen en conjunto como
polisacáridos no almidón; las enzimas de ser humano no las digieren, y son
el principal componente de la fibra en la dieta. Los ejemplos son la celulosa
de paredes de células vegetales, e inulina, el carbohidrato de
almacenamiento en algunos vegetales. (Murray , y otros, 2013, pág. 132)

•Características estructurales de los principales monosacáridos, disacáridos

y polisacáridos de interés biológico.

Monosacáridos
Los monosacáridos son los glúcidos más sencillos. No pueden ser hidrolizados
en unidades más pequeñas. Son los que con más propiedad pueden ser llamados
azúcares, por sus características: cristalizables, sólidos a temperatura ambiente,
muy solubles blancos y dulces.
Son los monómeros del resto de los glúcidos, lo cual quiere decir que todos los
demás se forman por polimerización (unión) de estos.
Podemos nombrarlos de forma genérica atendiendo al número de carbonos que
presentan, y poniendo la terminación “–osa”. Así una triosa tendrá tres átomos de
carbono y una tetrosa cuatro, con cinco, seis o siete átomos de carbono están
respectivamente las pentosas, las hexosas y las heptosas. Las octosas, ocho
átomos de carbono, son muy raras. (García, 2010)
Los azucares que tienen un grupo aldehído son llamados aldosas y los azucares
con un grupo cetona son llamados cetosas.

Disacáridos

Los disacáridos están formados por la unión de dos monosacáridos, generalmente

hexosas y son los oligosacáridos de mayor importancia biológica y están formados
por la unión de dos hexosas. Su fórmula general es C12H22O12
El enlace que se establece entre las dos unidades de monosacáridos recibe el
nombre de enlace glucosídico (más correctamente O-glucosídico), y consiste en
la unión de dos grupos –OH (hidroxilo) con pér-dida de una molécula de agua.
Este enlace se forma entre un carbono (llamado anomérico) del primer
monosacárido y cualquier otro del segundo. Esta, como todas las reacciones que
se dan en las células no es espontánea sino está catalizada por enzimas. La
reacción es reversible, pero en la naturaleza requiere también la presencia de
enzimas hidrolíticas espe-cíficas para cada disacárido (maltasa, sacarasa, etc.).
(García, 2010)

Polisacáridos
Los polisacáridos están formados por la unión de centenares de monosacáridos,
unidos por enlaces “O-glucosídicos”. Existen algunos formados por unidades de
 pentosa, llamados pentosanas, pero los que tienen importancia biológica son los
polímeros de unidades de hexosas, llamados también hexosanas, y muy
especialmente los polisacáridos formados de glucosa.
Los polisacáridos son sustancias de gran tamaño y peso molecular. Son
totalmente insolubles en agua, en la que pueden formar dispersiones coloidales.
No tienen sabor dulce. Pueden ser cristalizados, mantienen el aspecto de sólidos
de color blanco y carecen de poder reduc-tor. Se pueden clasificar en dos grandes
grupos (García, 2010):
 Heteropolisácaridos. Están compuesto de dos o más monosacáridos
diferentes. Ej. Ácido hialorónico, la condroitina sulfato entre otros.
 Homopolisácaridos. Están compuestos de un solo tipo de monosacáridos.
Ej. El almidón, glucógeno, celulosa.
Los polisacáridos se pueden encontrar como cadenas lineales o ramificadas,
que a su vez pueden estar integradas por un solo tipo de monosacárido
(homopolisácaridos), como por ejemplo el almidón y la celulosa, o también por varios
tipos de monosacáridos (heteropolisácaridos), como es el caso de la mayoría de las
gomas.

4. Materiales y Reactivos.

• Ácido Sulfúrico concentrado

• Reactivo de Molisch
• Reactivo de Benedict
• Soluciones al 2% de los siguientes azúcares:
• Sacarosa
• Lactosa
• Maltosa
• Xilosa,
• Glucosa,
• Fructosa
• Marcadores permanentes o lápiz graso.
• Tubos de ensayo 100x16 y 150x16
• Baño María
• Pipetas
• Gradillas

5. Procedimiento.
A. Reacción de Molisch:
1. Numerar 5 tubos de ensayo y colocar 1 ml de las soluciones de azúcar en el siguiente
orden:
 Xilosa
  Glucosa
 Fructosa
 Lactosa
 Sacarosa
2. Adicionar a cada tubo 2 a 3 gotas del reactivo de Molisch y agitar.
3. Añadir paulatinamente por las paredes de cada tubo, 1 ml de ácido sulfúrico concentrado
4. Inclinar ligeramente los tubos de ensayo durante la adición para permitir la formación de
dos capas.
5. Observar y anotar los resultados

B. Prueba de Benedict:
a). Identificación:
1. Numerar 4 tubos de ensayo y proceder de la siguiente manera:
 Tubo 1: Colocar 1 ml de la solución de Glucosa.
 Tubo 2: Colocar 1 ml de la solución de Lactosa.
 Tubo 3: Colocar 1 ml de la solución de Sacarosa.
 Tubo 4: Colocar 1 ml de la solución de Maltosa.
2. Agregar a cada tubo 2 ml del reactivo de Benedict y mezclar.
3. Llevar los tubos a baño de agua hirviente por 5 minutos.
4. Retirar los tubos del baño y enfriar.
5. Observar y anotar los resultados.

6. Observaciones.

Reactivo de Molisch

Tubo Soluciones Resultados

1 Xilosa Si reaccionó

2 Glucosa Si reaccionó

3 Fructosa Si reaccionó

4 Lactosa Si reaccionó
 Observamos en cada solución la formación de un anillo con una coloración violeta en
la interfase, lo que nos quiere decir que la prueba es positiva para carbohidrato. A
pesar de que la fructosa, la glucosa y la xilosa son monosacáridos y de que la lactosa
es disacárido. Todas estas soluciones reaccionan por la deshidratación de la molécula
que genera el ácido sulfúrico o el rompimiento de los enlaces glucosídico para una
posterior deshidratación de la molécula y la reacción con el alfa-naftol con complejos
furfurales para dar complejos coloreados.

Formación del anillo purpura en la solución.

Reactivo de Benedict
Tubo Soluciones Resultados

1 Glucosa Si reaccionó

2 Lactosa Si reaccionó

4 Maltosa Si reaccionó
 Las soluciones que dieron positivo a la prueba de Benedict son la glucosa, lactosa y
maltosa. Este resultado fue positivo debido a sé que presenta una coloración
anaranjada o ladrilla lo cual es la comprobación de que se trata de un azúcar reductor.

Reactivo de Seliwanoff
Tubo Soluciones Resultados

1 Glucosa no reaccionó

2 Fructuosa Si reaccionó

Las solucion de fructuosa reaccionaron a la prueba de seliwanoff debido a que la

fructosa es una cetosa razón por la cual obtenemos un resultado positivo.
 La glucosa da negativa a esta prueba ya que la molécula, si bien está constituida
por glucosa y fructosa, en la unión alfa (1-2) se anulan las propiedades reductoras
de la glucosa y la fructosa, por lo que no da positiva.

7. Conclusiones.-

Gracias a estas pruebas se pudo reconocer tres formas diferentes para identificar
la presencia de carbohidratos en una muestra con diferentes reactivos.

En la prueba de Molisch los azúcares por acción del ácido sulfúrico sufren una
deshidratación de la molécula cambiando la estructura de ésta.

En la prueba de Benedict se pueden identificar que un azúcar es reductor cuando

se produce el precipitado de óxido cuproso de color anaranjado o ladrillo, como se
demuestra en los resultados de la glucosa maltosa y lactosa, que dieron positivo a
la prueba de Benedict. Esta prueba es la más utilizada en muestras para poder
identificar glucosa en la sangre.
Y por último en la prueba de Seliwanoff se usa para distinguir entre aldosas y
cetosas. Esta prueba está basada en el hecho de que, al calentarlas, las cetosas
son deshidratadas más rápido que las aldosas como vemos en las fotos.

Referencias bibliográficas
García, J. (17 de Enero de 2010). La Guía. Obtenido de
https://biologia.laguia2000.com/bioquimica/monosacridos

Murray , R., Bender, D., Botham, K., Kennelly, P., Rodwell, V., & Weil, P. (2013). Bioquímica Ilustrada .
México : Mc Graw Hill.

Vasudevan , D., Sreekumari, S., & Kannan, V. (2011). Texto de BIOQUÍMICA. JAYPEE HIGHLIGHTS
MEDICAL PUBLISHERS INC.