Informe de Laboratorio Nº 4 1

BIOQUÍMICA 1 – Semestre 2009-I

INTRODUCCIÓN

Em este presente trabajo desarrollamos el tema de Reconocimiento de

proteínas y para esto hemos realizado un trabajo de investigación mediante el
cual estamos exponiendo las diferentes formas de reconocer la presencia de
las proteínas en una sustancia ( clara de huevo), las reacciones a utilizar, etc.

Este informe en completo también contiene la experiencia en el laboratorio,

imágenes de ella y algunos resultados que se pedía en la realización de
informe y que se requería saber en cada experimentación.

I. MARCO TEÓRICO

PROTEINAS:

Son biomoleculas de gran tamaño y peso molecular formadas por C, H, O, y N.

Son macromoléculas o polímeros de aminoácidos.

AMINOACIDOS

Son moléculas orgánicas que presentan grupo amino (- NH2) y un grupo

nacido carboxi8lico (- COOH).
En disolución los aminoácidos forman iones dobles denominados (Zwitteriones)
debido a sus grupos acido y base; además, un aminoácido, dependiendo del
PH de la solución, puede comportarse como acido o como base por esta razón
se les denomina anfótera.

AMINOACIDOS

NO ESENCIALES ESENCIALES
Acido aspartico Histidina
Acido glutamico treonina
Prolina triptófano
Serina leucina
tirosina isoleucina
asparagina valina
glutamina fenilalanina
cisteína Lisina
Glicina metionina
alanina arginina
 Informe de Laboratorio Nº 4 2
BIOQUÍMICA 1 – Semestre 2009-I

ESTRUCTURA DE LAS PROTEINAS:

Estructura primaria: es la secuencia de aminoácidos de la proteína (en forma

lineal).

Estructura secundaria: La estructura secundaria es la disposición de la

secuencia de aminoácidos en el espacio. La a (alfa)-hélice Esta estructura se
forma al enrollarse helicoidalmente sobre sí misma la estructura primaria.

La conformación beta En esta disposición los aminoácidos no forman una

hélice sino una cadena en forma de zigzag.

Estructura terciaria: informa sobre la disposición de la estructura secundaria

de un polipéptido al plegarse sobre sí misma originando una conformación
globular. Aparecen varios tipos de enlaces:(el puente disulfuro, los puentes de
hidrógeno, los puentes eléctricos, las interacciones hidrófobas)

Estructura cuaternaria: Esta estructura informa de la unión, mediante enlaces

débiles (no covalentes) de varias cadenas polipeptídicas con estructura terciaria, para
formar un complejo proteico. Cada una de estas cadenas polipeptídicas recibe el
nombre de protómero.
 Informe de Laboratorio Nº 4 3
BIOQUÍMICA 1 – Semestre 2009-I

Reacciones de reconocimiento

 Reacción de Biuret

El reactivo de Biuret está formado por una disolución de sulfato de cobre en

medio alcalino, este reconoce el enlace peptídico de las proteínas mediante la
formación de un complejo de coordinación entre los iones Cu 2+ y los pares de
electrones no compartidos del nitrógeno que forma parte de los enlaces
peptídicos, lo que produce una coloración rojo-violeta.

 Reacción de Millon

Reconoce residuos fenólicos, es decir aquellas proteínas que contengan

tirosina. Las proteínas se precipitan por acción de los ácidos inorgánicos
fuertes del reactivo, dando un precipitado blanco que se vuelve gradualmente
rojo al calentar.

 Reacción xantoproteica

Reconoce grupos aromáticos, es decir aquellas proteínas que contengan

tirosina o fenilalanina, con las cuales el ácido nítrico forma compuestos nitrados
amarillos.

II. MATERIALES Y MÉTODOS

MATERIALES Y REACTIVOS:

Para la práctica y experimentación sobre reconocimiento de proteínas se

utilizaron los siguientes elementos.

REACTIVOS
 Acido nítrico concentrado
 Hidróxido de sodio al 40 %
 Hidróxido de sodio al 20%
 Sulfato cúprico al 1%
 Acetato de plomo al 5%

MATERIALES
 Informe de Laboratorio Nº 4 4
BIOQUÍMICA 1 – Semestre 2009-I

 Tubo de ensayo
 Gradilla
 Varillas de vidrio
 Mechero
 Vaso precipitado
 Vagueta
 Pipeta

MUESTRA
 Clara de huevo

METODOLOGIA:

Existen varios métodos diferentes para el reconocimiento de proteínas uno de

estos es la coagulación de proteínas debido al gran amaño de sus moléculas,
también esta la reacción xantoproteica que es debida a la formación de un
compuesto aromático nitrado de color amarillo, otra es la reacción de biuret y
finalmente la reacción de los aminoácidos azufrados.

IV. DESCRIPCION DE LA PRÁCTICA

REACCIÓN XANTOPROTEICA:

 Poner en el tubo de ensayo de 2 a 3 cc. de solución problema

(clara de huevo).

 Añadir 1 cc. de HNO3 concentrado.

 Informe de Laboratorio Nº 4 5
BIOQUÍMICA 1 – Semestre 2009-I

 Calentar al baño maría a 100 0C.

 Enfriar en agua fría.

 Añadir gota a gota una disolución de sosa al 40%.

40%

REACCIÓN DE BIURET:

 Tomar un tubo de ensayo y poner unos 3 cc. de albúmina de huevo.

 Añadir 2cc. de solución de hidróxido sódico al 20%.

 Informe de Laboratorio Nº 4 6
BIOQUÍMICA 1 – Semestre 2009-I

 A continuación 4 ó 5 gotas de solución de sulfato cúprico diluida al 1%.

Debe aparecer una coloración violeta-rosácea característica.

Sulfato cúprico 1%

4 a 5 gotas

REACCIÓN DE LOS AMINOÁCIDOS AZUFRADOS:

 Informe de Laboratorio Nº 4 7
BIOQUÍMICA 1 – Semestre 2009-I

 Poner en el tubo de ensayo de 2 a 3 cc. de albúmina de huevo (clara de

huevo).

 Añadir 2 cc. de solución de hidróxido sódico al 20%.

 Añadir 10 gotas de solución de acetato de plomo al 5%.

 Calentar el tubo hasta ebullición.

 Informe de Laboratorio Nº 4 8
BIOQUÍMICA 1 – Semestre 2009-I

 Si se forma un precipitado de color negruzco nos indica que se ha

formado sulfuro de plomo, utilizándose el azufre de los aminoácidos, lo
que nos sirve para identificar proteínas que tienen en su composición
aminoácidos con azufre.

Resultados final de las diferentes reacciones para

identificar proteínas
 Informe de Laboratorio Nº 4 9
BIOQUÍMICA 1 – Semestre 2009-I

V. CONCLUSIONES

Las proteínas constituyen una de las moléculas más importantes en el

organismo ya que cumplen muchas funciones

Las proteínas están constituidas por aminoácidos por los cuales los
métodos se basan en el reconocimiento de los aminoácidos

Al realizar las diferentes pruebas con la albúmina se pudo comprobar

experimentalmente efectivamente que se trata de una proteína

Las proteínas son sensibles con las sales metálicas pesadas

(mercurio ,cobre ,plomo) formando precipitados

En las reacciones donde se obtuvo precipitación se debió a un cambio

en el estado físico de la proteína , mientras que en la coagulación se ha
producido un cambio en el estado físico y en la estructura química por
eso es irreversible

VI. BIBLIOGRAFÍA

http://www.monografias.com
Ediciones Pamer
http://es.wikipedia.org/wiki/Proteínas
http://www.prote
inas.org.es