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PRÁCTICA No.

MANEJO DE ANIMALES
I. TEMA

Manejo de Animales

II. OBJETIVO GENERAL

- Enseñar al alumno de un modo general algunas formas de marcar y manejar algunos


animales de laboratorio de uso más frecuente.
- Manejar, inmovilizar y presentar sin riesgo para el animal ni para el estudiante, las diferentes
especies que se emplean en las prácticas de farmacología.
- Conocer y aplicar las normas éticas para el manejo adecuado de los animales de
laboratorio.
- Identificar y aplicar las distintas vías de administración de fármacos en animales de
laboratorio.
- Identificar y aplicar los distintos métodos de marcado de animales, para su correcta y
completa identificación.
- Conocer los métodos más adecuados para sacrificar, sin sufrimiento, a los animales que se
emplean en las prácticas de laboratorio.

NORMAS ETICAS EN EL MANEJO DE ANIMALES

Debemos hacer hincapié en las obligaciones que se tienen con los animales de experimentación
dentro del laboratorio, mismas que han sido postuladas por las sociedades protectoras de animales
como normas éticas para su manejo adecuado.

- Tratarlos humanamente.
- Reducir al mínimo el dolor y la incomodidad.
- Evitar el sufrimiento innecesario.
- Manipularlos adecuadamente, firme pero con suavidad, para evitar desencadenar
reacciones agresivas hacia el experimentador.
- Evitar su uso innecesario.

El matar o sacrificar humanamente a un animal, significa que no se debe sufrir dolor, o el menor
posible, lo que se consigue evitando brusquedades, así como utilizando el método de sacrificio más
adecuado, el que pudiera ser con una sobredosis de anestésico o barbitúrico.
Si el anestésico es inhalatorio se debe evitar colocar directamente el algodón en la nariz del animal.
Otro método de sacrificio es la descerebración; en ratas y conejos se hace por golpe contundente en
la nuca, en los ratones, tomando la cabeza del animal con una mano, la cola con la otra y
firmemente, y en el sapo con un estilete adecuado.
III. INTRODUCCIÓN

La docencia, investigación biológica, biomédica y el desarrollo, producción y control de


medicamentos, alimentos y otros insumos importantes para la salud requieren la utilización de
animales de laboratorio. El diseño de los experimentos que utilizan animales de laboratorio exige la
definición detallada de las características genéticas y ambientales ya que sólo así se obtendrán
resultados reproducibles. Las acciones de los fármacos y su correcta evaluación requieren de
animales de diferente especie por lo que es necesario el aprender su manejo para evitar lastimarlos
y que no sean un peligro cuando se trabaja con ellos. Además es importante el marcarlos para poder
hacer su diferenciación en cualquier momento, en especial cuando se hacen experimentos crónicos
en los que se prolonga su observación por tiempo más o menos largo. Las revistas científicas
internacionales exigen que los investigadores firmen un documento donde se garantice que las
experiencias han sido efectuadas respetando las normas internacionales existentes, por ejemplo la
declaración universal de los derechos de los animales(UNESCO,1996) y la guía para el cuidado y
uso de animales de laboratorio (NRC,1996): La firma de este documento significa aseverar que los
trabajos han sido previamente autorizados por comités de ética institucionales y que todo el personal
que interviene en el trabajo en relación con los animales de laboratorio ha aprobado previamente un
curso de capacitación en el tema.
Las responsabilidades del investigador para el cuidado de los animales incluyen:

 El diseño y realización de los procedimientos con base en su relevancia para la salud


humana y animal, el avance del conocimiento y el bienestar de la sociedad.
 El uso de las especies, calidad y número apropiados de animales.
 El evitar o reducir al mínimo la incomodidad, estrés y dolor.
 El uso apropiado de sedación, analgesia y anestesia.
 El establecimiento de metas y objetivos en el experimento.
 Brindar un manejo apropiado a los animales, dirigido y realizado por personas calificadas.
 La conducción de experimentos en animales vivos sólo por, o bajo la, estricta supervisión de
personas calificadas y con experiencia.

MANEJO DE LOS ANIMALES

RANAS
La rana debe de tomarse con una franela húmeda para evitarle pérdida de agua (respiración
cutánea) y facilitar su manipulación.

SAPO
Tome al animal firmemente con toda la mano, dejando expuesta la cabeza, ya que en este caso el
animal deberá ser descerebrado y/o desmedulado, lo que se consigue doblando hacia abajo la
cabeza, se introduce el estilete en el sitio localizado por detrás de las membranas timpánicas y a
nivel de la línea media de ña cabeza, haciendo un movimiento pendular se destruye el cerebro en el
caso de descerebración, lo que se manifiesta con la pérdida del reflejo ocular; para la desmedulacion
se cambia la dirección del estilete y se dirige hacia abajo siguiendo la dirección del canal medular, la
desmedulacion se manifiesta con un estiramiento brusco de las extremidades inferiores seguida de
una relajación permanente.
RATONES
Se toman del extremo de la cola con los dedos pulgar e índice de la mano derecha. Con el pulgar y
el índice de la mano izquierda se tomará un pliegue de la piel en la parte dorsal del cuello del ratón
en sentido longitudinal del mismo con lo que se le inmoviliza. Así sujeto al animal se levantará de la
mesa girando al mismo tiempo la mano para poder usarla, (inyectar etc.) otro sitio de inyección
subcutánea es precisamente debajo de la piel del cuello se puede aprovechar el pliegue que se toma
entre pulgar e índice y apoyando la mano con el animal ligeramente sobre la mesa. Los dedos
medio, anular y meñique sirven para abrazar abdomen y tren posterior del animal. La mano derecha
queda libre para hacer la inyección clavando la aguja en la piel que queda sobre el pulgar e índice y
en sentido cefálico caudal.

RATAS
Tome al animal por la cola, teniendo cuidado que no escale su propia cola y lo muerda; para
presentarlo, se toma al animal por el dorso con el dedo pulgar y el índice, rodeando la cabeza sin
oprimir el cuello. En el caso del ratón, tómelo restirando la piel que se encuentra por encima de la
nuca, de tal forma que las extremidades anteriores del animal queden inmovilizadas, sin oprimir
demasiado.

Evítese el manejar a la rata con violencia, pues rápidamente aprende a defenderse y se torna difícil y
peligrosa se debe de tomar suavemente pero con seguridad con la mano derecha por el dorso y
colocarla en la mesa sin soltarla, o bien, por la cola, procurando que solamente las extremidades
anteriores se apoyen sobre la mesa. Con toda la mano izquierda sujete la piel del cuello en una
amplia zona, y manteniéndola inmóvil con la derecha se puede estirar la cola o las patas posteriores
(sin lastimarla) y se presenta otra persona, la que hará la inyección o manipulación necesaria.

Si va a inyectar en la cola se envuelve en una franela que inmovilizará al animal y lo deja en


posibilidad de poder inyectar.

CONEJO
Tómelos por el dorso sujetando con toda la mano la piel; nunca lo tome por las orejas y vasos
sanguíneos.

GATO
El gato se puede inmovilizar tomándole un amplio pliegue de la piel del cuello con toda la mano
izquierda en la mano derecha se sujetarán las patas posteriores restirando al animal se le colocará
sobre el abdomen, del operador (bien restirado se impiden los zarpazos y el pliegue de la piel del
cuello puede manejarse para inmovilizar la cabeza).

Así puede hacerse inyección intraperitoneal (con las precauciones debidas) por otro operador. Si se
necesita pasar sonda gástrica se le colocará un bocado y sujetándole el hocico firmemente se
introducirá la sonda como se ha indicado antes.

Siempre que se dirija una sonda al estómago deberá tenerse en cuenta que la sonda efectivamente
sea introducida al esófago “no a la tráquea” Cuando está en la tráquea se percibe ruido de aire o
se ve como se expulsa si se coloca en la superficie del agua, o bien, como mueve una mechita de
algodón sostenida con una pinza frente a la boca de la sonda.
PERRO
Debe manejarse con bozal, si no lo tiene con una cuerda fuerte se hace un lazo con dos extremos
los suficientemente largos. Dependiendo de la agresividad del animal se tomarán las precauciones
necesarias para sostenerlo entre las piernas, la cabeza del perro hacia delante del operador.
El lazo que estará listo se le colocará en el hocico con las puntas hacia abajo y rápidamente se
jalarán cada una con una mano haciendo que el animal baje la cabeza y la pegue a su pecho, los
extremos del lazo se cruzaran primero sobre el cuello y después por debajo del mismo para
finalmente anudarlos sobre el dorso del cuello del animal.

IV. METODOLOGÍA

MATERIAL BIOLÓGICO, EQUIPO Y REACTIVOS

 Ratas (6 por equipo)


 1 Trapo limpio o franela
 Guantes de látex

V. CUESTIONARIO
1. ¿Por qué es importante saber manejar los animales de laboratorio?
2. ¿Cuáles son los cuidados ambientales a considerar en animales de experimentación?
3. ¿Cómo se define un animal no tradicional de experimentación (ANTE)?
4. ¿Investigue como se debe realizar la disposición final de los animales de experimentación?
5. ¿Explique la diferencia entre droga y medicamento?
6. ¿Defina que es principio activo, ponga ejemplos?
7. ¿Diga ud, como debe ser el trato correcto de animales como el cobayo?

VI. BIBLIOGRAFÍA

http://www.javeriana.edu.co/Facultades/Ciencias/neurobioquimica/grupo/rbioterio.PDF
Leader, R. W., and D. Stark. 1987. The importance of animals in biomedical research. Perspect. Biol.
Med. 30(4):470-485
NRC (National Research Council). In press. Occupational Health and Safety in the Care and Use of
Research Animals. A report of the Institute of Laboratory Animal Resources Committee on
Occupational Safety and Health in Research Animal Facilities. Washington, D.C.: National Academy
Press.
PRÁCTICA No. 2

MÉTODOS PARA MARCAR ANIMALES DE EXPERIMENTACIÓN

I. TEMA

Métodos para marcar animales de experimentación.

II. OBJETIVO
Identificar y aplicar los distintos métodos de marcado de animales, para su correcta y completa
identificación.

III. INTRODUCCIÓN

El marcar a los animales facilita su identificación y distribución para los diferentes ensayos en el
laboratorio.

RANAS
A las ranas se les coloca un cintillo de tela adhesiva en una de sus extremidades en tal forma que se
pueda anotar el peso corporal o el número que le corresponde para su identificación posterior.

RATONES
Para experimentos agudos se utiliza el método de manchado en el cual se le aplica un colorante por
medio de un hisopo en las diferentes regiones haciendo todas las combinaciones posibles. Por
ejemplo: CA cabeza; CO cola; MI pata delantera izquierda; PD pata trasera derecha. Así quedaría
CACO con manchas en la cabeza y en la cola.

Para experimentos subagudos ó crónicos se emplea el mismo procedimiento que se usa en las ratas
de perforaciones en las orejas.

RATAS
Se utiliza una pinza sacabocado y se hacen perforaciones de tal forma que en la oreja izquierda del
animal queden las unidades y en la derecha las decenas como lo indica el esquema.
Con esta forma sencilla se eliminan los números ocho y nueve tanto igual sucede con el ochenta y el
noventa.

AVES
Se les coloca anillos metálicos en las patas que tienen grabado un número o con anillos plásticos de
colores diferentes.

CONEJOS Y CUYOS
Cuando todo un grupo de animales son de color, tamaño y características semejantes se les colocan
grapas en las orejas que los identifican.
METODOS DE MARCAJE

Los métodos de marcaje generalmente utilizados son:

Físicos: Directo: Corte de pelo, perforaciones, y muescas en orejas, mutilación, tatuaje eléctrico.
Indirecto: Libretas, tarjetas, aretes, collares, pulseras, chips.
Químicos: Tatuaje, colorantes, fotografías.
Biológicos: Especie, marcas naturales, sexo, color edad.

Las tarjetas principalmente para colocarlas en jaulas o cajas. Como marcas naturales se consideran
las características fenotípicas que sean fácilmente detectables.

CUADRO 1. MÉTODOS DE IDENTIFICACIÓN PERMITIDOS - NOM-062-ZOO

Resumen de MÉTODOS DE IDENTIFICACIÓN

ESPECIE DE ANIMAL METODO DE ZONA DE APLICACION


IDENTIFICACION

Rata y ratón colorante Pelaje y cola

Rata, ratón y conejo Perforación y muescas Oreja(s)

Rata y ratón tatuaje Cola

Conejo tatuaje Parte distal interna de la


oreja

IV. METODOLOGIA

Utilizar diferentes marcajes utilizando colorantes y marcadores, diseñando un código de marcado.

V. CUESTIONARIO

1. ¿Qué es un método temporal de marcado?


2. ¿Qué es un método permanente de marcado?
3. Investigue códigos de marcado de animales

VI. BIBLIOGRAFÍA
Guidelines for the use of animals in school science behavior projects, American Psychologist, Volume
36, Issue 6, June 1981, Page 686.
Ethical regulation and animal science: why animal behaviour is not so special, Animal Behaviour,
Volume 74, Issue 1, July 2007, Pages 15-22.
PRÁCTICA No. 3

VÍAS DE ADMINISTRACIÓN
I. TEMA
Vías de administración.

II. OBJETIVO
- Identificar y aplicar las distintas vías de administración de fármacos en animales de
laboratorio.

III. INTRODUCCIÓN
La administración de un medicamento obliga a tener en cuenta los factores que modifican su
actividad, dichos factores pueden ser: su dosificación, la frecuencia de administración, la distribución
del fármaco en el organismo, sus antagonismos tanto químicos como farmacológico, su efecto de
potenciación, su tolerancia específica, la edad del individuo y la vía de administración. Este último
factor es quizá el más importante de todos, ya que si no se elige una vía de administración correcta,
la actividad del fármaco puede atenderse o a veces nulificarse, en algunas ocasiones puede producir
efectos exagerados que resulten lesivos.
Las vías de administración de fármacos son las rutas de entrada del medicamento al organismo, la
cual influye en la latencia, intensidad y duración del efecto, por esta razón es de suma importancia
conocer sus ventajas y desventajas además de cuál de las vías de administración de fármacos se
utiliza en una situación particular.

Las diferentes vías de administración de los fármacos dependen de su composición química y en


algunas ocasiones de objetivo terapéutico que se persigue, estas se pueden clasificar en:
Enterales y parenterales

VIAS DE ADMINISTRACIÓN
Vía de Patrón de absorción Utilidad especial Limitaciones y
administración precauciones
Intravenosa Evita la absorción, Útil en urgencias, Aumenta el riesgo de
efectos inmediatos permite ajustar la efectos adversos, las
potenciales, adecuada dosis, útil para soluciones se deben
para administrar administrar moléculas inyectar lentamente.
grandes volúmenes. de alto peso molecular.
Subcutánea Inmediata o sostenida. Útil para suspensiones No es adecuada para
poco solubles y para volúmenes grandes,
infiltrar implantes de posible dolor o necrosis
liberación lenta. cuando son irritantes.
Intramuscular Inmediata, en solución Adecuada para Prohibida durante el
lenta y sostenida con volúmenes moderados. tratamiento con
preparados de anticoagulantes.
depósito.
Oral Variable, depende de Más cómoda y Es importante el
muchos factores. económica, por lo seguimiento del paciente,
general más segura. biodisponibilidad variable.

Administración por vía oral (p.o.)

Inmovilizar al animal (rata, ratón) en forma correcta con una mano y con la
otra mano introducir la cánula en la trompa en forma lenta y suave a lo largo
de la rama mandibular derecha, aquí el animal comienza a tragar y la cánula
se inserta dentro del esófago.

Vía subcutánea (s.c.)

Realizar la administración en sitios donde abunde tejido conectivo, ya


sea en el dorso o en los flancos del animal.
Se inserta la aguja en la piel paralela a la columna vertebral con un
ángulo de 30° a 45°, en caso de utilizar ratón, no administrar un
volumen mayor de 2 ml.

Vía intraperitoneal (i.p)


Sujetar al animal con una mano y con la otra mano inmovilizar la
pata izquierda, inclinar el animal con la cabeza hacia abajo para
producir un desplazamiento de las vísceras con el fin de no
lesionarlas.

Insertar la aguja en la piel en el cuadrante izquierdo inferior del


abdomen e introducir en la cavidad peritoneal, levantando la
aguja en contra de la pared abdominal para evitar la punción en
el interior del intestino.

Vía intramuscular (i.m.)

Inyectar al animal en la región antero-lateral del muslo, el ángulo


de inyección con respecto a la piel debe ser de 90°. No realizar
esta vía de administración en el ratón debido a que la masa
muscular es menor y se puede provocar un daño en las
estructuras vitales del tejido.
Vía intravenosa (i.v.)
Inmovilizar al animal con ayuda de una franela. Aplicar calor o etanol en la cola del roedor para
dilatar las venas, éstas se observaran cuando la cola es levantada y girada lentamente en cualquier
dirección, posteriormente introducir la aguja en un ángulo no mayor de 45°.

MAXIMO VOLUMEN PERMITIDO DE SOLUCIONES DE FARMACO QUE PUEDEN SER


ADMINISTRADOS

MARCADO DE ANIMALES
Durante las prácticas de farmacología, frecuentemente es necesario identificar individualmente a los
animales de un grupo, o a los depositados en determinada jaula, o a los grupos pertenecientes a los
distintos experimentos, por lo que existen diversas formas de identificar individualmente a los
animales; presentaremos aquí una de las técnicas más utilizadas de marcado de animales:

CARACTERISTICAS DE LOS ANIMALES DE LABORATORIO:


Algunas características importantes se encuentran en la siguiente tabla el conocimiento de estas
características será de gran utilidad para seleccionar el animal de laboratorio más adecuado para un
experimento en particular.

IV. METODOLOGÍA

MATERIAL BIOLÓGICO, EQUIPO Y REACTIVOS


 04 Ratas marcadas y pesadas
 Cánula intragástrica
 Una jeringa de 5 ml
 Una jeringa de 1 ml
 Jeringas de insulina
 Una aguja hipodérmica del Nº. 20
 Una aguja hipodérmica de Nº. 27
 Tijeras rectas
 Vaso de precipitados de 600 ml largo
 Guantes descartables
 Sonda de alimentación orogastrica
 Dextrosa 5%
 Suero fisiológico 0.9%
MAXIMO VOLUMEN PERMITIDO DE SOLUCIONES DE FARMACO QUE PUEDEN SER
ADMINISTRADOS

ANIMAL I.V. I.M. I.P. ORAL

RATON 0.5 0.05 1.0 1.0

RATA 1.0 0.1 2.0 -5.0 5.0

COBAYO 1.0 0.25 2.0 – 5.0 10.0

CONEJO 5.0 – 10.0 0.5 10.0 – 20.0 20.0

PERRO 10.0 – 20.0 5.0 20.0 – 50.0 100.0

CARACTERISTICAS DE LOS ANIMALES DE LABORATORIO

Algunas de las características más importantes que deben conocerse de los animales de
experimentación se encuentran en la siguiente tabla; el conocimiento de estas características será
de gran utilidad para seleccionar el animal de laboratorio más adecuado para un experimento en
particular.

CARACTERISTICAS RATON RATA CONEJO PERRO


(Mus (Rattusrattus) (Orictolagusconiculus) (Canisfamiliaris)
musculus)
Pubertad 35 días 40 – 60 días 4 meses 7 – 9 meses

Tiempo de crianza Todo el año Todo el año Mayo - setiembre Todo el año

Periodo de preñez 20 días 23 días 30 días 63 días

Crías por camada 4 – 12 6-8 5–6 1 - 18

Tiempo de vida 2 – 3 años 2- 3 años 8 años 18-20 años

Desarrollo a adulto 6 meses 5 meses 6 meses 15 meses

Tiempo de lactancia 21 dias 21 dias 40 dias 8 semanas

Camadas/año 4 7 4 2

Temp. Corporal 37.9 – 39.2 ºC 37.7 – 38.8 ºC 38.5 – 39.5º C 37.5 – 39.0 º C

Frec. Respiratoria 136 – 100 – 150/min. 50 – 60 min. 15 – 28/min.


216/min.
Presión sanguínea 147/106 130/95 110/80 148/100

Volumen sanguíneo 7.5% 7.5% 5% 7.2 – 9.5%

DESARROLLO EXPERIMENTAL

Vías de Administración

Vía oral
Los fármacos se van a absorber en el estomago y/o, sobre todo, en el intestino delgado. Es la vía
más fisiológica, aunque tiene el inconveniente de que no todos los fármacos se absorben por esta
vía.

Primeramente inmovilizar a la rata, luego se introduce la sonda orogastrica por la boca, administrar
una dosis de 0,3 ml/kg de dextrosa. La administración de fármaco, por error en las vías respiratorias
puede provocar la muerte del animal.

Observaciones:
Vía intraperitoneal

Es la vía parenteral más utilizada en experimentación porque es fácil de realizar, porque la superficie
de absorción es muy amplia y por tanto el tiempo de latencia es muy corto.

La punción se realiza en la mitad inferior del abdomen fuera de la línea alba con una aguja biselada.
El ángulo de punción debe ser de 45. se debe aspirar para descartar que la punta se encuentre en
un asa intestinal o en un vaso.

Usando una jeringa de tuberculina de bisel corto, introducida en la parte inferior del abdomen una
dosis de 0.1 ml/kg.

Observaciones:
Vía Intravenosa

Se utiliza para la administración de fármacos que requieran rapidez de acción o para infusión
continua.

El ratón se inmoviliza en un cilindro de vidrio. La cola se coloca encima de la ranura del corcho- se
dilata la vena caudal con un algodón empapado en alcohol o por presión. Se introduce la aguja con
el bisel hacia arriba con la mano derecha hasta estar en el vaso. Seguidamente se coloca la jeringa
horizontalmente sobre la piel y se introduce en el vaso. Si el movimiento es correcto el embolo
comenzar a llenarse de sangre tras una ligera aspiración. La administración debe realizarse
lentamente para evitar el shock de velocidad.

Los alumnos se colocaran par parejas y cada pareja cogera una rata (o cobayo). Cuando todos
hayan aprendido a inmovilizar el animal correctamente se realizara la administración del fármaco,
por las vías indicadas.

Observaciones:
Vía Subcutánea

Inyectar en la zona dorsal, levantando la piel utilizando una jeringa de tuberculina, en dosis de 0,2
mg/kg.

Observaciones:

V. CUESTINARIO
1. ¿Cuál es la vía más común para administrar medicamentos? ¿Por qué?
2. Menciona tres vías de administración de aplicación parenteral
3. ¿Cómo afecta el efecto del primer paso la biodisponibilidad de un fármaco?
4. Menciona en que vía de administración se evita el proceso de absorción del fármaco.
¿Por qué?
5. ¿Qué cuidados se debe tener en la aplicación por vía intraperitoneal?

VI. BIBLIOGRAFIA:
1. Goodman G. A, Rall T.W., Nies A.S, Taylor P. Las bases farmacológicas de la terapéutica, 11ª.
Edición, Interamericana pp 3-29,2006.
2. Quezada A. Introducción al manejo de animales de laboratorio: roedores y pequeñas
especies. Mérida: Universidad Autónoma de Yucatán; 1997.

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