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Materia:
Microbiología
SATCA: 3-4-10
SEMESTRE: Sexto
Revisión Autorización
Página | 1
Fecha de Edición:
Instituto Tecnológico Superior de Edición
Unidad:
Coatzacoalcos. No. 2
FEBRERO / 2017
Materia:
Microbiología
ÍNDICE DE PRÁCTICAS
No. 7 ESTERILIZACIÓN I 20
No. 8 ESTERILIZACIÓN II 22
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Fecha de Edición:
Instituto Tecnológico Superior de Edición
Unidad:
Coatzacoalcos. No. 2
FEBRERO / 2017
Materia:
Microbiología
PRESENTACIÓN
El presente manual tiene como finalidad que los estudiantes adquieran las
herramientas necesarias para la manipulación y control de los microorganismos en
procesos bioquímicos para el aprovechamiento racional de los recursos naturales.
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Fecha de Edición:
Instituto Tecnológico Superior de Edición
Unidad:
Coatzacoalcos. No. 2
FEBRERO / 2017
Materia:
Microbiología
COMPETENCIAS A DESARROLLAR.
Competencias específicas Competencias genéricas
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Instituto Tecnológico Superior de Edición
Unidad:
Coatzacoalcos. No. 2
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Materia:
Microbiología
Práctica No. 1
2. Introducción.
4. Procedimiento.
Lectura del reglamento del laboratorio
Análisis del reglamento del laboratorio.
Hacer comentarios finales
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Unidad:
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Materia:
Microbiología
5. Cuestionario.
1. ¿Qué utensilios de limpieza debe traer el alumno?
2. ¿Cuáles son las normas de vestimenta en el laboratorio?
3. ¿Cuál es la sanción en caso de incumplir con la vestimenta indicada?
4. En cuanto al material y equipo ¿cuáles son las principales
recomendaciones?
5. En cuanto a la seguridad, ¿cuáles son las principales
recomendaciones?
6. Referencias bibliográficas.
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Unidad:
Coatzacoalcos. No. 2
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Materia:
Microbiología
Práctica No. 2
2. Introducción.
Materia:
Microbiología
4. Procedimiento.
Parte A: Observación de bacterias:
1. Vierte el yogurt natural en el vaso de precipitado. Agrega 50 ml. de agua
destilada, mezcla suavemente y obtén una solución homogénea.
2. Vierte dos gotas de la solución de yogurt en un extremo del porta objeto,
coloca el filo angosto de otro portaobjetos sobre las gotas formando un ángulo
con el primer portaobjetos, desliza suavemente para dejar una película muy
delgada y homogénea
3. Seca el frotis al aire libre y luego fija al calor de la flama, cuida que no se
queme.
4. Después cubre con alcohol el frotis para eliminar el exceso de grasa,
5. Coloca una gota de azul de metileno, espera 30 segundos escurre, enjuaga y
deja secar al aire perfectamente.
6. Coloca, sin que se formen burbujas, una gota de aceite de inmersión sobre el
frotis
7. Observa al microscopio en objetivo de inmersión (100X)
5. Cuestionario.
¿Cuál es la importancia biológica de los organismos observados?
¿Cuál es la importancia económica de los organismos observados?
6. Referencias bibliográficas.
Audesirk, T. (1997) Biología: La vida en la tierra. Pearson educación. México.
Curtis. H., Biología, México, Panamericana.
Pelksar. (2000). Microbiología. México. Edit. Paidós.
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Unidad:
Coatzacoalcos. No. 2
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Materia:
Microbiología
Práctica No. 3
2. Introducción.
4. Procedimiento.
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Unidad:
Coatzacoalcos. No. 2
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Materia:
Microbiología
Nota: una buena extensión no debe tener una cantidad excesiva de bacterias, procure seguir
estas indicaciones con mucho cuidado, ya que de ello depende el éxito de su tinción y
observación.
Materia:
Microbiología
5. Cuestionario.
1. ¿Cuál es la constitución básica de las esporas (formas de resistencia
bacteriana)?
2. ¿En qué consisten los procesos de tinción?
3. ¿Cómo se llama la técnica de tinción de esporas?
4. ¿Qué es la cápsula?
5. ¿Cómo se comprueba la rigidez de la cápsula bacteriana?
6. Referencias bibliográficas.
Audesirk, T. (1997) Biología: La vida en la tierra. Pearson educación. México.
Curtis. H., Biología, México, Panamericana.
Pelksar. (2000). Microbiología. México. Edit. Paidós.
La biología de los microorganismos
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Materia:
Microbiología
Práctica No. 4
2. Introducción.
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Microbiología
4. Procedimiento.
Parte A. Coloración negativa (Método de la tinta china):
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Microbiología
5. Cuestionario.
6. Referencias bibliográficas.
Audesirk, T. (1997) Biología: La vida en la tierra. Pearson educación. México.
Curtis. H., Biología, México, Panamericana.
Pelksar. (2000). Microbiología. México. Edit. Paidós.
La biología de los microorganismos
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Materia:
Microbiología
Práctica No. 5
Nombre de la práctica: MOHOS Y LEVADURAS
2. Introducción.
4. Procedimiento.
Parte A: Comparación macroscópica:
Observa macroscópicamente la muestra de pulque, tortilla, pan y queso. Y
completa la siguiente tabla:
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Materia:
Microbiología
5. Cuestionario.
6. Referencias bibliográficas.
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Materia:
Microbiología
Práctica No. 6
2. Introducción.
3.
Los organismos como las levaduras son de gran importancia biológica y
económica, por lo que resultan de gran relevancia estudiar sus principales
procesos vitales, tales como la respiración y reproducción típica que presentan.
Las levaduras degradan glucosa y producen alcohol etílico como producto de su
respiración anaerobia (fermentación). Cuando las levaduras efectúan este
proceso, este proceso en presencia del azul de metileno, éste atrapa los iones
liberados, por lo que cambia su coloración. La reproducción es típicamente por
gemación en la cual la célula madre aumenta de tamaño, el núcleo se divide y
finalmente la célula se separa, ocasionalmente la célula madre e hija quedan
unidas temporalmente
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Unidad:
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Materia:
Microbiología
5. Procedimiento.
Parte A: Respiración:
Acomoda los tubos de ensaye en la gradilla y etiquetalos con el número 1 y 2
Tubo #1
1. Coloca la solución de azúcar en el tubo 1 y sujétalo con las pinzas. Caliéntalo a
flama directa por 15 segundos
2. Vacía el contenido de una cápsula de levadura de cerveza en la solución de
azúcar. Agita suavemente hasta formar una solución homogénea
3. Toma con el gotero una pequeña cantidad de azul de metileno y añade una
gota del colorante en el tubo agita suavemente y repite la operación hasta
obtener un solución de color azul claro
4. Deposita 50 ml de agua tibia en el vaso de precipitado. Coloca el tubo de
ensayo dentro del vaso y déjalo reposar 15 minutos. Observa lo que sucede
cada 5 minutos.
Tubo #2
1. Vierte el contenido de la segunda cápsula en el tubo 2. Toma con la pipeta.
Toma con la pipeta 5 ml de solución de azúcar al 5% y viértela en el interior del
tubo
2. Sujeta el tubo con las pinzas y caliéntalo a flama directa por 5 minutos y
retíralo
3. Toma con el gotero un poco del colorante y agrégalo gota a gota hasta que la
coloración se torne azul claro
4. Coloca el tubo en la gradilla y déjalo reposar 15 minutos. Observa lo que
sucede cada 5 minutos.
5. Compara la coloración de ambos tubos después de transcurrido el tiempo
Parte B: Reproducción:
1. Deposita la levadura de pan en un vaso de precipitado con 50 ml de agua,
agita hasta obtener una mezcla homogénea
2. Coloca una gota de la solución de levadura en el portaobjetos y cúbrela
3. Observa al microscopio en seco débil (10X) y seco fuerte(40X)
4. Agrega una cucharada de azúcar a la solución de la levadura y caliéntala por
10 segundos, retírala del fuego y espera 4 minutos
5. Agita la solución y toma una gota de la solución de levadura en el portaobjetos
y cúbrela
6. Observa al microscopio en seco débil (10X) y seco fuerte(40X)
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Fecha de Edición:
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Unidad:
Coatzacoalcos. No. 2
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Materia:
Microbiología
6. Cuestionario.
7. Referencias bibliográficas.
Audesirk, T. (1997) Biología: La vida en la tierra. Pearson educación. México.
Curtis. H., Biología, México, Panamericana.
Pelksar. (2000). Microbiología. México. Edit. Paidós.
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Unidad:
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Materia:
Microbiología
Práctica No. 7
Nombre de la práctica: ESTERILIZACIÓN I
2. Introducción.
4. Procedimiento.
1. Lavar perfectamente el material
2. Prepara 500 ml del agar de acuerdo con las instrucciones del envase
3. Prepara 1L de caldo nutritivo (suspender en el agua y dejar remojar 15
minutos), hervir a Baño María hasta completar la disolución
4. Realizar un tapón con el algodón y la gasa para cubrir la boca del matraz y
tubos de ensayo, amarra con hilo
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Fecha de Edición:
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Materia:
Microbiología
5. Cuestionario.
6. Referencias bibliográficas.
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Materia:
Microbiología
Práctica No. 8
2. Introducción.
La esterilización con calor seco, o aire caliente, se recomienda cuando no se
desea o quiere que el vapor a presión tenga contacto directo y completo con el
material a esterilizar, como artículos de vidrio de laboratorio, cajas de petri,
pipetas, aceites, polvos y sustancias similares. Las células vegetativas mueren a
temperaturas comprendidas entre los 50°C y 70°C (calor húmedo), para matar
esporas son necesarias temperaturas mucho más altas, superiores a los 100°C
(calor seco) que deshidrata a las células y también destruye a los
microorganismos por oxidación de sus constituyentes intracelulares.
4. Procedimiento.
Materia:
Microbiología
4. Envolver con papel de estraza y realizar un tapón con el algodón y la gasa para
cubrir la boca de los tubos de ensayo, amarra con hilo
5. Realiza un cucurucho de papel aluminio y colócalos sobre los tapones a
manera de protección
6. Coloca en el horno a 160°C durante 2 horas.
5. Cuestionario.
6. Bibliografía.
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Materia:
Microbiología
Práctica No. 9
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Materia:
Microbiología
4. Procedimiento.
1. Pesa la cantidad exacta del medio sobre un papel de aluminio (la cantidad esta
indicada en cada frasco y se determina por una regla de tres dependiendo la
cantidad a elaborar)
2. Se marca el matraz con la cinta adhesiva indicando el tipo de medio
3. En el matraz se mide la cantidad correcta de agua con una probeta, se agrega
el polvo hidratándolo y se utiliza un agitador de madera para disolverlo y
agitarlo
4. Se toma el matraz con unas pinzas y se coloca directamente sobre el mechero
y se calienta hasta su ebullición y retíralo
5. Se deja enfriar un poco y se le coloca un tapón de gasa y algodón amarrado
con un hilo y se le coloca el cucurucho de papel aluminio
6. El matraz se introduce en el autoclave hasta aproximadamente 15 lb. de
presión y 120 °C
7. Se baja la temperatura por 15 minutos y se apaga
8. Se destapa la autoclave hasta que tenga 0 lb. de presión y se saca el matraz
9. Sin destapar por un lado del tapón introduce el termómetro esterilizado y deja
enfriar hasta 45°C
10. Usa tus guantes y cubre bocas
11. Vacía el medio en las cajas petri frente al mechero encendido y flamea la boca
del matraz cada vez que vacíes en el liquido en la caja
12. Deja enfriar el medio en las cajas de petri hasta que cuaje
13. Una vez cuajados los medios se invierten las cajas de petri y se refrigeran en
esa posición
14. Si el medio es agar sangre antes de que cuaje el medio pero ya frío se vacía
la sangre (5 ml)
5. Cuestionario.
6. Bibliografía.
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Materia:
Microbiología
Práctica No. 10
2. Introducción.
Página | 26
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Materia:
Microbiología
4. Procedimiento.
5. Cuestionario.
6. Bibliografía.
Materia:
Microbiología
Práctica No. 11
2. Introducción.
4. Procedimiento.
Página | 28
Fecha de Edición:
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Materia:
Microbiología
el medio
Filiforme Seca
Enraizado húmeda
Tinción de Gram:
5. Cuestionario.
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Fecha de Edición:
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Unidad:
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Materia:
Microbiología
6. Bibliografía.
Página | 30