Escuela Superior Politécnica del Litoral

FCNM
Laboratorio de Química Analítica

Ingeniería Química

Practica #: 10

Título: Determinación de fosfatos en agua por espectrofotometría.

Paralelo: 103

Profesor: Luis Antonio Vaca Salazar

Elaborado por: Sánchez Basurto Carlos Xavier

Título de la práctica: Determinación de fosfatos en agua por
espectrofotometría.

Objetivo General:
Determinar la cantidad de fosforo presente en una muestra de fosfatos
por medio de una curva de calibración y su respectiva ecuación lineal.

Objetivos específicos:

 Emplear las técnicas apropiadas para preparar las disoluciones

requeridas en la práctica.
 Reconocer los cambios físicos que pueden presentar las
soluciones al agregar el agente reductor.

Marco Teórico:
Para la determinación del fósforo en una muestra, se requiere realizar
primero un proceso de digestión el cual debe ser eficaz para oxidar la
materia orgánica presente en la muestra, liberando así el fósforo como
orto fosfato, se presentan los siguientes métodos de digestión:

 Digestión con ácido perclórico.

 Digestión con ácido sulfúrico-ácido nítrico.

Luego de realizar la digestión se determina el fósforo mediante métodos

colorimétricos, estos métodos se basan en que el analito forma un
compuesto con características de color definido y en magnitud
directamente proporcional al mismo. Existen varios métodos
colorímetros:

 Método colorimétrico del ácido molibdato de fosforo.

 Método de cloruro estañoso

 Método de ácido ascórbico

El método de cloruro estañoso se basa en la reacción del fósforo
contenido en la muestra como ortofosfato con el ácido molíbdico para
formar el ácido molibdofosfórico. El ácido molibdofosfórico es reducido
por el cloruro de estaño a azul de molibdeno, compuesto de
composición desconocida que contiene una mezcla de Mo (VI) y Mo (V),
que absorbe a 690 nm. La intensidad del color azul formado depende
de la concentración de fosfatos adicionados. El método es aplicable
cuando el contenido de fósforo en las muestras se encuentra entre las
concentraciones de 0.01 mg P/L a 6.0 mg P/L. Todo el fósforo contenido
en la muestra debe estar como ión ortofosfato (𝑃𝑂4 )3− , ya que el
método espectrofotométrico es esencialmente específico para este ión.

La interferencia positiva es causada por la sílica y arseniato solo si la

muestra es calentada, la interferencia negativa es causada por el
arseniato, fluoruro, torio, bismuto, sulfuro, tiosulfato, tiocianato o
excesos de molibdato. El hierro en su forma ferrosa produce un color
azul, pero no afecta a los resultados, si su concentración es menor a
100 mg/L. Este método es más sensible que el método colorimétrico del
ácido vanadomolibdofosfórico y posibilita la determinación de hasta 4
µg P/L utilizando un recorrido de luz más largo.

Absorción de la luz ley de Lambert-Beer.

La ley de Beer relaciona la concentración de la solución con la absorción de luz,

la ley establece que la intensidad de un rayo de luz monocromática decrece
exponencialmente con el aumento de la concentración del medio absorbente.
La relación entre la absorción de la luz y el camino recorrido por ésta viene
dada por la ley de Lambert. Es conveniente considerar ambas leyes
conjuntamente, el procedimiento experimental para el análisis cuantitativo
utilizando la ley de Lambert-beer implica la preparación de una recta que
permita relacionar el valor de la absorbancia del analito que queremos
determinar teniendo un valor conocido de concentración. Se requiere la
presencia de un blanco al momento 3 de realizar este procedimiento. El blanco
contiene todas las fuentes de absorbancia distintas del analito. La elección del
blanco depende de qué especie interfiere en la longitud de onda analítica.
Cuando una molécula absorbe un fotón pasa a un estado excitado de mayor
energía. Y al revés, cuando una molécula emite un fotón, disminuye su energía
en un valor igual a la energía del fotón.

Materiales:

 Vidrio reloj.
 Pipeta Pasteur.
 Pisceta.
 Probeta de 25 mL ± 0.02 mL.
 Varilla de agitación
 Pipeta de 1.0 mL ± 0.02 mL.
 Pipeta de 10 mL ± 0.2 mL.
 Matraz aforado de 100 mL.
 Vaso de precipitación de 50mL.
 Vaso de precipitación de 100mL.
 Espátula.
 Tubos d ensayos.
 Gradilla.

Reactivos:

 (𝑁𝐻4 )6 𝑀𝑜7 𝑂24 . 𝐻2 𝑂

 𝑆𝑛𝐶𝑙2 . 𝐻2 𝑂
 𝐾𝐻2 𝑃𝑂4 (s).
 HCl ©.
 𝐻2 𝑂 (𝑑).
 Muestra problema.

Equipos:

 Balanza analítica con cuatro decimales de precisión marca

ADAMS.
 Espectrofotómetro UV visible

Procedimiento:

Preparación de Molibdato de amonio; Disolver 25 g de molibdato de

amonio, (𝑁𝐻4 )6 𝑀𝑜7 𝑂24 . 𝐻2 𝑂, en 175 ml agua destilada. Con mucha
precaución, agregar 280 mL de 𝐻2 𝑆𝑂4 concentrado a 400 mL de agua
destilada. Enfriar y añadir la solución de molibdato. Diluir a 1 litro.

Cloruro estañoso: Disolver 2.5 g de 𝑆𝑛𝐶𝑙2 . 𝐻2 𝑂 en 100 ml de glicerina

en baño maría.

 Mida 25 ml de cada una de las soluciones estándar y colóquelas

en diferentes tubos de ensayo rotulados previamente.
 Agregar 1 ml de la solución de molibdato de amonio a cada tubo.
 Adicionar 3 gotas de la mezcla de cloruro estañoso en glicerol a
cada tubo y agitar hasta su homogeneización total.
 Dejar reaccionar las soluciones, hasta coloración azul, en la
oscuridad durante 12 minutos exactos.
 Realizar las lecturas de absorbancia de los estándares y de la
muestra problema en el espectrofotómetro a 690 nm.
 Realizar la curva de calibración empleando la herramienta
estadística de regresión lineal.
 En base a la curva de calibración, determine la concentración de
la muestra problema en ppm de 𝑃 − 𝑃𝑂4 − .

Reacciones involucradas:

𝑯𝟑 𝑷𝑶𝟒(𝒂𝒄) + 𝟏𝟐(𝑵𝑯𝟒 )𝟔 𝑴𝒐𝟕 𝑶𝟐𝟒(𝒂𝒄) + 𝟐𝟏𝑯+ (𝒂𝒄)

→ (𝑵𝑯𝟒 )𝟑 𝑷𝑶𝟒 . 𝟏𝟐𝑴𝒐𝑶𝟑(𝒂𝒄) + 𝟐𝟏𝑵𝑯𝟒(𝒂𝒄) + + 𝟏𝟐𝑯𝟐 𝑶𝒍

(𝑵𝑯𝟒 )𝟑 𝑷𝑶𝟒 . 𝟏𝟐𝑴𝒐𝑶𝟑(𝒂𝒄) + 𝑺𝒏𝟐+ (𝒂𝒄) → 𝒂𝒛𝒖𝒍 𝒅𝒆 𝒎𝒐𝒍𝒊𝒃𝒅𝒆𝒏𝒐 + 𝑺𝒏𝟒+ (𝒂𝒄)

Resultados:
Tabla 1: Datos de la práctica.

Concentracion (ppm) Absorbancia

0.1 0.124
0.3 0.326
0.5 0.511
0.8 0.752
1.0 0.913
 Muestra problema 1.964

Cálculos:

 Solución estándar de fosfatos:

50𝑚𝑔𝑃 136.06𝑚𝑔𝐾𝐻2 𝑃𝑂4 1𝑔𝐾𝐻2 𝑃𝑂4

0.1𝐿𝑠𝑜𝑙 × × ×
1𝐿 30.97𝑚𝑔𝑃 1000𝑚𝑔𝐾𝐻2 𝑃𝑂4

= 0.02197𝑔𝐾𝐻2 𝑃𝑂4

 Solución de 10 ppm de fosfatos:

𝑉1 𝐶1 = 𝑉2 𝐶2

(100𝑚𝐿)(50𝑝𝑝𝑚) = (10𝑝𝑝𝑚)(𝑉)

𝑉2 = 20.5𝑚𝐿

 Soluciones para curva de calibración:

1. 100mL Concentración de 0.1 ppm:

𝑉1 𝐶1 = 𝑉2 𝐶2

(100𝑚𝐿)(0.1𝑝𝑝𝑚) = (10𝑝𝑝𝑚)(𝑉)

𝑉2 = 1.0𝑚𝐿

2. 100mL Concentración de 0.3 ppm:

𝑉1 𝐶1 = 𝑉2 𝐶2
 (100𝑚𝐿)(0.3𝑝𝑝𝑚) = (10𝑝𝑝𝑚)(𝑉)

𝑉2 = 3.0𝑚𝐿

3. 100mL Concentración de 0.5 ppm:

𝑉1 𝐶1 = 𝑉2 𝐶2

(100𝑚𝐿)(0.5𝑝𝑝𝑚) = (10𝑝𝑝𝑚)(𝑉)

𝑉2 = 5.0𝑚𝐿

4. 100mL Concentración de 0.8 ppm:

𝑉1 𝐶1 = 𝑉2 𝐶2

(100𝑚𝐿)(0.8𝑝𝑝𝑚) = (10𝑝𝑝𝑚)(𝑉)

𝑉2 = 8.0𝑚𝐿

5. 100mL Concentración de 1.0 ppm:

𝑉1 𝐶1 = 𝑉2 𝐶2

(100𝑚𝐿)(1.0𝑝𝑝𝑚) = (10𝑝𝑝𝑚)(𝑉)

𝑉2 = 10.0𝑚𝐿
Figure 1: Grafica de Absorbancia vs Concentración.

Absorbancia(A) vs Concentracion (ppm)

1
0.9 y = 0.8689x + 0.056
R² = 0.9975
0.8
0.7
0.6
0.5
0.4
0.3
0.2
0.1
0
0 0.2 0.4 0.6 0.8 1 1.2

Ecuación de la recta:

𝑨 = 𝟎. 𝟖𝟔𝟖𝟗𝑪 + 𝟎. 𝟎𝟓𝟔

𝟏. 𝟗𝟔𝟒 − 𝟎. 𝟎𝟓𝟔
𝑪= = 𝟐. 𝟏𝟗𝟔 𝒑𝒑𝒎 𝑷 − 𝑷𝑶𝟒 −
𝟎. 𝟖𝟔𝟗

Análisis de Resultados:

De la gráfica experimental obtenida, se puede apreciar que la

absorbancia de una solución aumenta linealmente conforme aumenta
su concentración, es decir que la relación es directamente proporcional.
Así mismo podemos apreciar en la tabla #1 que la Transmitancia
disminuye conforme aumenta la absorbancia.

Por medio de la ecuación de la recta se pudo obtener la concentración

de fosforo presente en una muestra de fosfatos, este valor fue de 2.196
ppm. Una de las posibles causas por la cual se obtuvo este valor, al
tratarse de concentraciones demasiado bajas, un exceso o déficit de
volumen podría provocar que su concentración final varíe con respecto
al teórico.

Otra posible causa de error experimental fue el tiempo de espera para

cada muestra cuando se procedió a homogenizar hasta que presente
una coloración azul, el tiempo tenía que ser de 12 minutos por cada
muestra para que se desarrolle la máxima intensidad del color, pero por
varias confusiones que se presentaron durante la realización de esta
etapa de la práctica el tiempo de espera para cada muestra fue
diferente, variando desde los 12 hasta los 14 minutos.

Observaciones:

 Al colocar el cloruro estañoso a las muestras de fosfatos, estas

cambiaron su coloración a azul debido a que el cloruro estañoso
cumple el papel de agente reductor reduciendo ácido molíbdico a
azul de molibdeno.
 Se utilizó el agua destilada como blanco para las lecturas
espectrofotométricas, ya que esta se encuentra libre de iones
fosfatos por lo que no produciría errores en las lecturas
experimentales de la absorbancia.

Recomendaciones:
 Luego de colocar el cloruro estañoso se debe agitar rápidamente
para lograr una buena homogenización y así permitir que la
muestra pueda absorber bien la luz.
 Si al momento de realizar la lectura de la absorbancia a la muestra
problema, esta se encuentra fuera del rango se deberá diluir la
muestra para así tener una lectura más precisa.
 Calibrar el espectrofotómetro con agua destilada, y observar que
marque un valor de absorbancia 0.
 Limpiar con papel tisú las celdas antes de colocarlas en el
espectrofotómetro, tratando de que no queden las huellas de los
dedos sobre la celda. Y luego de colocar los reactivos no tardarse
en homogenizar, para así llevar a la oscuridad el tubo de ensayo.
Conclusiones:

 La determinación de fósforo presente en una muestra de agua

resulta una técnica muy importante y necesaria en al área
industrial. Dependiendo de la concentración en la que se
encuentre se puede determinar una funcionalidad ya sea en el
área agrícola interviniendo en los procesos metabólicos de las
plantas o inclusive determinar si es apta o no para el consumo
humano.

 La absorbancia depende directamente de la concentración de la

disolución, a mayor absorbancia mayor concentración, esto se
verifica en los resultados obtenidos y en la gráfica realizada la cual
presenta debido a esto un comportamiento creciente.

 Se realizó la curva de calibración con concentraciones de analito

conocidas vs. absorbancia, la misma que nos sirvió como patrón
para calcular la concentración de fosfatos en las muestras
problema.

Bibliografía:

1. Gary D Christian. Química Analítica. Sexta edición. 2009.

McGraw-Hill education. México. Capítulo10. PP 190, 191, 192.

2. Skoog Douglas. Química Analítica. 1995. McGraw-Hill education.

Sexta edición. México. Capítulo 9. PP 248,250.

3. Daniel C. Harris. Análisis químico cuantitativo, McGraw-Hill

education. Tercera edición. 2005. México. Capítulo 13, PP
354,355.