UNIVERSIDAD RICARDO PALMA

FACULTAD DE MEDICINA HUMANA

LABORATORIO DE BIOQUÍMICA Y NUTRICIÓN
Informe de Laboratorio Nº 5: Digestión enzimática del
almidón

Alumno : Enciso Samamé, Álvaro Mauricio

Código : 201011004

Profesora : Dra. Nancy Jo Vargas

Grupo : 1-3

Período : 2012-I
 Parte experimental:
En cada tubo de ensayo se colocaron las medidas correspondientes de sustancias como
muestra el cuadro:

TUBO Nº 1 2 3 4
ALMIDON 1%; ml 2.0 2.0 2.0 2.0
BUFFER FOSFATO pH 6.8:ml 1.0 1.0 1.0 -
HCL O,3N : ml - - - 3.4
CLNa 0,9%: ml 3.0 2.4 - -
Agua dest.:ml - - 2.4 -
Baño María 37º x 5´
Amilasa Salival: ml - 0.6 0.6 0.6

A. DETERMINACIÓN DEL SUSTRATO:

TUBOS Nº 5 6 7 8
DIGERIDO DEL TUBO 1: ml 0.5 - - -
DIGERIDO DEL TUBO 2: ml - 0.5 - -
DIGERIDO DEL TUBO 3: ml - - 0.5 -
DIGERIDO DEL TUBO 4: ml - - - 0.5
HCL 0.05N : ml 5 5 5 5
Sol. deLugol: ml 0.5 0.5 0.5 0.5
Dejar en reposo por 15 minutos. Leer al fotocolorímetro con filtro
rojo (660nm)
5 6 7 8 BLANCO
Lectura inicial 0.015 0.016 0.261 0.829 1.757
Calculando la actividad enzimática con la fórmula:

Actividad enzimática = Lectura del blanco – Lectura inicial

1) Tubo 5 :
Ae= 1.757-0.015
Ae=1.742
2) Tubo 6:
Ae=1.757-0.016
Ae=1.741
3) Tubo 7:
Ae= 1.757-0.261
Ae=1.496
4) Tubo 8:
Ae=1.757-0.829
Ae=0.928
B. DETERMINACIÓN DEL PRODUCTO:
TUBOS 9 10 11 12 13

DIGERIDO DEL TUBO 1: ml 0.5 - - - -

DIGERIDO DEL TUBO 2: ml - 0.5 - - -

DIGERIDO DEL TUBO 3: ml - - 0.5 - -

DIGERIDO DEL TUBO 4: ml - - - 0.5

SOLUCION DE GLUCOSA 1%: ml - - - - 0.5

SOLUCION BENEDICT : ml 2 2 2 2 2

Mezclar, Incubar en Baño María a 100°C x 5’ y enfriar en agua helada. Los

resultados de la interpretación se encuentran en la parte de Cuestionario.
 Cuestionario e interpretación de resultados:

1. Determinación del sustrato:

 Tubo Nº1:
El color que se puede apreciar en el tubo es
azulado. Esto nos indica que no hubo
hidrólisis, debido a que no hay presencia de
la enzima amilasa. El color lo toma en base
al lugol. Existe el sustrato (almidón), el pH
adecuado (6.8), y el activador (HCl).

 Tubo Nº2:
El líquido queda incoloro, debido a que se
dieron las condiciones óptimas, para que
ocurra la reacción, por lo tanto la hidrólisis
es total. En este caso sí se añadió la
amilasa.

 Tubo Nº3:
Queda un color rosado pálido, esto
demuestra que hubo hidrólisis, pero
parcial, ya que no hubo NaCl.Es necesaria
una cantidad de sales, por lo tanto, no
actuó de manera optima.

 Tubo Nº4:

Queda un color azul, con lo cual se

demuestra que no hubo reacción, debido al
medio ácido en el que se encontraba por la
presencia deHCl. La coloración azul, se da
por el contacto del almidón con el lugol.
3. Determinación del producto:

 Tubo Nº9:
Nos da un color celeste, demostrando que no hubo
reacción con la solución de Benedict, ya que este solo
reacciona con azúcares reductores, y tomamos
muestra del tubo número uno en el cual no hubo
hidrólisis; en dicha muestra solo hubo almidón, el cual
no es un azúcar reductor.

 Tubo Nº10:
El color obtenido en este procedimiento, es celeste
verdoso con precipitado rojo ladrillo, con lo cual
demostramos hidrólisis, debido a que el producto no
fueron en su totalidad azúcares reductores.Aún se
aprecia el color base de la solución (azul), pero
disminuido.

 Tubo Nº11:
El color obtenido es verdoso con precipitado rojo
ladrillo, perose obtiene menor cantidad de
precipitado, lo cual indica que sí hubo hidrólisis, pero
parcial.

 Tubo Nº12:
El color obtenido es celeste, demostrando que con el
sustrato trabajado en la reaccion de Benedict, no hubo
hidrólisis previa, manteniendo el color del reactivo de
Benedict.

 Tubo Nº13:
En este procedimiento, debido a que trabajamos con
glucosa (azúcar reductor), se obtiene una solución roja,
con precipitado rojo ladrillo, en mayor cantidad. El
precipitado que se da es CuO2, formado al
 reaccionarlos azúcares reductores con el reactivo de
Benedict.
3. Grafique Actividad enzimática vs. Tubo de ensayo
(En papel milimetrado adjunto)

4. Explique cuáles son las condiciones óptimas para una hidrólisis

enzimática del almidón soluble:
Fundamentalmente se necesita:

 Presencia de un pH óptimo (6.8)

 Las concentraciones de sustratos y enzimas adecuadas.
 Temperatura óptima, alrededor de 37.5° C.
 Un buffer para estabilizar el pH.
 Concentración adecuada e iones (NaCl)

5. Interpretar la reacción de Benedict:

Consiste en la reacción de un azúcar reductor (p. ej. lactosa, glucosa, maltosa) en
soluciones alcalinas; en este experimento usamos la glucosa, con el reactivo de
Benedict, compuesto por:
 Sulfato cúprico
 Citrato de sodio
 Carbonato anhídrido de sodio
 NaOH
Formando un precipitado rojo ladrillo. Pueden reducir el Cu+2, que tiene color azul, a
Cu+, el cual, precipita de la solución alcalina como Cu2O.

Cu+2  Cu+