UNIVERSIDAD NACIONAL DEL SANTA

FACULTAD DE CIENCIAS

ESCUELA ACADEMICO PROFESIONAL DE BIOTECNOLOGÍA

PROYECTO DE TESIS

Determinación de la concentración de Chlorella vulgaris que tiene mayor efecto

degradativo sobre la concentración de Cu y Pb en la Laguna Chinchaycocha, Nuevo

Chimbote – 2018.

INVESTIGADORES:

Guillén Morales, Ruth Marleny

Olivera Fernandez, Hyrum Spencer

ASESOR:

NUEVO CHIMBOTE – PERÚ

2017

Página | 1
 ÍNDICE
PROYECTO DE TESIS .......................................................................................................... 1
ÍNDICE ...................................................................................................................................... 2
I. GENERALIDADES ........................................................................................................ 3
1.1. Título: ............................................................................................................................ 3
1.2. Investigador (es) .......................................................................................................... 3
1.3. Tipo de investigación.................................................................................................... 3
1.4. Lugar donde se ejecuta el proyecto ............................................................................ 4
1.5. Institución que ejecuta el proyecto ............................................................................. 4
1. 6. Duración ....................................................................................................................... 4
1.7. Cronograma de Trabajo .............................................................................................. 5
1.8. Recursos ........................................................................................................................ 6
1.9. Presupuesto analítico en base al clasificador de gastos vigente ............................... 7
1.10. Financiamiento ......................................................................................................... 10
II. PLAN DE INVESTIGACION ................................................................................. 10
2.1. Problemática ............................................................................................................... 10
2.2. Importancia de la investigación ................................................................................ 15
2.3. Objetivos de la investigación ..................................................................................... 15
2.4. Marco Referencial ...................................................................................................... 16
2.5. Formulación de Hipótesis .......................................................................................... 22
2.6. Propuesta experimental ............................................................................................. 22
2.7 Metodología ................................................................................................................. 22
2.8 Referencias bibliográficas .......................................................................................... 22
2.9 Anexos .......................................................................................................................... 25

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 PROYECTO DE INVESTIGACIÓN

I. GENERALIDADES

1.1. Título:

Determinación de la concentración de Chlorella vulgaris que tiene mayor efecto

degradativo sobre la concentración de Cu y Pb en la Laguna Chinchaycocha, Nuevo

Chimbote – 2018.

1.2. Investigador (es)

1.2.1. Autores:

Guillén Morales, Ruth Marleny

Olivera Fernandez, Hyrum Spencer

1.2.2. Asesor:

1.3. Tipo de investigación

1.3.1. Por su propósito

Aplicada

1.3.2. Por su naturaleza o profundidad

Investigación explorativa

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1.4. Lugar donde se ejecuta el proyecto

Región : Ancash

Provincia : Del Santa

Distrito : Nuevo Chimbote

1.5. Institución que ejecuta el proyecto

 Laboratorio de Microbiología de la Facultad de Ciencias de la Universidad

Nacional del Santa

 Laboratorio de Investigación Biotecnológica de la Facultad de Ciencias de la

Universidad Nacional del Santa.

1. 6. Duración

9 meses

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 1.7. Cronograma de Trabajo

SEMANAS
ACTIVIDAD
1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 13 14 15 16 17 18 19 20 21 22 23 24 25 26 27 28 29 30 31 32 33 34 35 36
Revisión del PTI X X X X X X X X
Presentación del
X
proyecto
Aprobación del
X
PTI
Obtención de
X X
Chlorella vulgaris
Obtención de agua
proveniente de la
laguna X X X
chinchaycocha y
demás materiales
Diseño de
X X X
biorreactor
Medición de las
concentraciones
de Chlorella
X X X X X X X X X X X X X X X
Vulgaris en el
agua con metales
pesados
Análisis de
X X X X
resultados
Elaboración del X X X X
informe Final
Presentación del X
informe Final

Página | 5
1.8. Recursos

1.8.1. Disponibles

1.8.1.1 Recursos Humanos

 Investigadores

 Asesor

 Personal de apoyo

1.8.1.2 Bienes

 Guardapolvo

 01 Balanza analítica

 Alcohol 70%

 01 Microscopio

 02 Biorreactores de 1L

 01 Espectrofotómetro

 Mechero

 Material de vidrio (pipetas, matraz, placas Petri, vasos de

precipitación, fiolas, entre otros)

 Agua destilada

 Cajas Petri

 sistema de aire acondicionado

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 1.8.2. No Disponibles

1.8.2.1 Bienes

 Lámparas fluorescentes de luz blanca fria, Sylvania Daylight

F48T12/D 39w

 Hematocitometro - Microscopio Compuesto Nikon ND2

 Centrifugadora Hettich Zentrifugen ROTOFIX 32 da

 NaHCO3

 Muestras de agua de Chinchaycocha

 Agar BBM

 Sistema de aireación de hipoclorito de sodio

 Hipoclorito de Sodio

 Chlorella Vulgaris

1.8.2.2 Servicios

 Impresiones

 Fotocopias

 Tipeos

1.9. Presupuesto analítico en base al clasificador de gastos vigente

Página | 7
2.3 Bienes y Servicios

2.3.1 Compra de Bienes

2.3.1 2 Vestuarios y Textiles

2.3.1 2. 1 Vestuario, Zapateria y Accesorios, Talabarteria y Materiales

Textiles
2.3.1 2. 1 1 Vestuario, Accesorios y Prendas Diversas

Descripción Cantidad Monto

Guardapolvo 2 unid. 70.00

2.3.1 5 Materiales y Útiles

2.3.1 5. 4 Electricidad, Iluminacion y Electronica

2.3.1 5. 4 1 Electricidad, Iluminacion y Electronica

Descripción Cantidad Monto

Lámparas fluorescentes
de luz blanca fria, 2 38.52
Sylvania Daylight
F48T12/D 39w
2.3.1 8 Suministros Médicos

2.3. 1 8. 1 Productos Farmacéuticos

2.3.1 8. 1 99 Otros Productos Similares

Descripción Cantidad Monto

Alcohol 70% 2lt 14.00

1unid 215.00
Agar BBM
2.3. 1 8. 2 Material, Insumos, Instrumental y Accesorios Médicos,
Quirúrgicos, Odontológicos y De Laboratorio
2.3. 1 8. 2 1 Material, Insumos, Instrumental Y Accesorios Médicos,
Quirúrgicos, Odontológicos Y De Laboratorio
Cantidad Monto
Descripción
Balanza analítica 1unid 9033

Microscopio 1unid 1457

Biorreactor 1unid 1943

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Espectrofotómetro 1unid 5362

Mechero 2unid 156

3unid 291
Pipeta
3unid 104
Matraz
Vasos de precipitación 3unid 54

3unid 90
Fiolas
12unid 29,63
Tubo de Ensayo
Agua destilada 5lt 10,34

Placa Petri 3unid 35,01

Sistema de aire
1unid 2,479
acondicionado

Hematocitometro -
1unid 774
Microscopio Compuesto
Nikon ND2
Centrifugadora Hettich
Zentrifugen ROTOFIX 1unid 1,350
32 da

Sistema de aireación de 1unid 809

hipoclorito de sodio

2.3. 1 10 Suministros para uso Agropecuario, Forestal y Veterinario

2.3. 1 10. 1 Suministros para uso Agropecuario, Forestal y Veterinario

2.3. 1 10. 1 2 Material Biológico

Descripción Cantidad Monto

10ml 288,16
Chlorella Vulgaris
Muestra de agua del 2lt
Lago Chinchaycocha
2.3. 1 99 Compra De Otros Bienes

2.3. 1 99. 1 Compra De Otros Bienes

2.3. 1 99. 1 2 Productos Químicos

Cantidad Monto
Descripción
NaHCO3 3kg 82,60

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 Hipoclorito de Sodio 2lt 34,58

2.3.1 99. 1 3 Libros, Diarios, Revistas y Otros Bienes Impresos no

Vinculados a Enseñanza
Cantidad Monto
Descripción
Impresión del proyecto
de tesis

1.10. Financiamiento

Financiamiento Aporte (S/.) Participación (%)

Autofinanciamiento

Total

II. PLAN DE INVESTIGACION

2.1. Problemática

2.1.1. Realidad Problemática

La contaminación es la presencia o incorporación al ambiente de sustancias o

elementos tóxicos que son perjudiciales para el hombre o los ecosistemas (seres

vivos). Existen diferentes tipos de contaminación. Los tipos de contaminación

más importantes son los que afectan a los recursos naturales básicos: el aire, los

suelos y el agua. Algunas de las alteraciones medioambientales más graves

relacionadas con los fenómenos de contaminación son los escapes radiactivos, el

smog, el efecto invernadero, la lluvia ácida, la destrucción de la capa de ozono,

la eutrofización de las aguas o las mareas negras. Existen diferentes tipos de

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contaminación que dependen de determinados factores y que afectan

distintamente a cada ambiente (Bermúdez, 2010).

La contaminación del aire (o atmosférica) es la producida por los humos de los

vehículos e industrias, aerosoles, polvo, ruidos, malos olores, radiación atómica,

etc. Entre los contaminantes gaseosos más comunes encontramos el dióxido de

carbono, el monóxido de carbono, los hidrocarburos, los óxidos de nitrógeno, los

óxidos de azufre y el ozono. Para la organización Ecologistas en Acción, las

principales causas de la contaminación del aire están relacionadas con la quema

de combustibles fósiles (carbón, petróleo y gas) (Roberto, 2012).

La contaminación del agua (o hídrica). Según la Organización Mundial de la

Salud (OMS), el agua está contaminada cuando su composición se haya alterado

de modo que no reúna las condiciones necesarias para ser utilizada

beneficiosamente en el consumo del hombre y de los animales. La contaminación

del agua afecta a ríos, acuíferos y mares, que se convierten poco a poco en

verdaderos basureros (Roberto, 2012).

La contaminación del suelo es la producida por el vertido de sustancias químicas

y basuras. La actividad minera también contamina los suelos a través de las aguas

de relave, que contienen elementos químicos como mercurio, cadmio, cobre,

arsénico, plomo, etc (Roberto, 2012).

En el caso de los ecosistemas acuáticos, los productos contaminantes no son

depositados solo en el agua sino que incluso los que se vierten en el suelo, son

arrastrados por las precipitaciones hasta los cauces hídricos y son llevados hasta

el mar. Los residuos sólidos no degradables como el plástico se acumulan en

cantidades enormes en la superficie de las aguas y los más pesados como los

neumáticos, en el fondo, alterando las cadenas alimentarias de los ecosistemas

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acuáticos y también causan la muerte de los animales que los comen por error

(Miranda G. O., 2013).

Los metales pesados son componentes naturales de la corteza de tierra. No

pueden ser degradados o ser destruidos. En un grado pequeño se incorporan a

nuestros cuerpos vía el alimento, el agua potable y el aire. Los metales pesados

son peligrosos porque tienden a bioacumularse. La bioacumulación significa un

aumento en la concentración de un producto químico en un organismo biológico

en un cierto plazo, comparada a la concentración del producto químico en el

ambiente (Orosco & Soria, 2008).

El cobre es un nutriente esencial y, al mismo tiempo, un contaminante del agua

de consumo. Tiene muchos usos comerciales: se utiliza para fabricar tuberías,

válvulas y accesorios de fontanería, así como en aleaciones y revestimientos. La

concentración de cobre en el agua tratada suele aumentar durante su distribución,

sobre todo en sistemas con pH ácido o en aguas con concentración alta de

carbonato, con pH alcalino (IPCS, 1998).

El plomo es un metal tóxico presente de forma natural en la corteza terrestre. Su

uso generalizado ha dado lugar en muchas partes del mundo a una importante

contaminación del medio ambiente, un nivel considerable de exposición humana

y graves problemas de salud pública (Organización Mundial de la Salud, 2017).

La biorremediación es una tecnología que utiliza el potencial metabólico de los

microorganismos (fundamentalmente bacterias, pero también algas, hongos y

levaduras) para transformar contaminantes en compuestos más simples, poco o

nada contaminantes, con el fin de realizar una transformación parcial o total de

los residuos o agentes contaminantes y una alteración del estado de metales en el

medio terrestre o acuático (Orosco & Soria, 2008).

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La biorremediación se puede utilizar para limpiar terrenos o aguas contaminadas,

incluyendo el tratamiento de ríos, lagos y lagunas que contienen sustancias

perjudiciales para los elementos bióticos propios del ecosistema. En el Perú más

de cien ríos, lagos y lagunas están contaminados con aguas servidas o metales,

siendo el lago Chinchaycocha uno de ellos. El lago Chinchaycocha es conocido

también como laguna Junín, debido a su ubicación. Posee una temperatura de

18°C y un PH de 7.5. Estudios han indicado que posee concentraciones de cobre,

plomo, entre otros metales, lo cual significa un riesgo no solo para las especies

que viven en ella sino también para el departamento en el que está situado, ya que

se trata de uno de los lagos más importante de Junín (Castillo & Zafra, 2008).

Básicamente, los procesos de biorremediación pueden ser de tres tipos: la

degradación enzimática, la remediación microbiana, y la fitorremediación.

La degradación enzimática consiste en el empleo de enzimas en el sitio

contaminado con el fin de degradar las sustancias nocivas. Dichas enzimas son

previamente producidas en bacterias transformadas genéticamente. Esta

aplicación de la biotecnología lleva décadas en el mercado y hoy las compañías

biotecnológicas ofrecen las enzimas y los microorganismos genéticamente

modificados para tal fin (ArgenBio, 2007).

La remediación microbiana se refiere al uso de microorganismos directamente en

el foco de la contaminación. Estos microorganismos pueden ya existir en ese sitio

o pueden provenir de otros ecosistemas, en cuyo caso deben ser inoculados en el

sitio contaminado (proceso de inoculación). Cuando no es necesaria la

inoculación de microorganismos, suelen administrarse más nutrientes, como

fósforo y nitrógeno con el fin de acelerar el proceso (ArgenBio, 2007).

La fitorremediación es el uso de plantas para limpiar ambientes contaminados.

Aunque se encuentra en desarrollo, constituye una estrategia muy interesante,

Página | 13
debido a la capacidad que tienen algunas especies vegetales de absorber,

acumular y/o tolerar altas concentraciones de contaminantes como metales

pesados, compuestos orgánicos y radioactivos, etc. Las ventajas que ofrece la

fitorremediación frente a los procesos descritos anteriormente son el bajo costo y

la rapidez con que pueden llevarse a cabo ciertos procesos degradativos

(ArgenBio, 2007).

La fitorremediación, también incluye el uso de las microalgas. Las microalgas Commented [RM1]: La fitorremediación, también incluye ….

constituyen un grupo heterogéneo de vegetales inferiores con amplia diversidad

de tamaño, pigmentación, mecanismo reproductivo, composición química y

hábitat (Capa Robles, 2010).

Chlorella, es un alga verde unicelular perteneciente al reino Protista. Tiene forma

esférica, su diámetro es de 2 a 10 µm, no posee flagelo y se encuentra presente

en la mayoría de los cuerpos de agua dulce. La Chlorella conocida popularmente

como Clorela contiene los pigmentos verdes fotosintetizadores clorofila a y b en

su cloroplasto. Mediante la fotosíntesis se multiplica rápidamente, requiriendo

sólo luz solar, dióxido de carbono, agua y pequeñas cantidades de minerales. Para

su cultivo se utiliza además la urea, la cal, el fósforo y las mieles finales del

proceso azucarero (Naturalways, s.f.).

Un cultivo de Chlorella Vulgaris se desarrolla en un medio con condiciones

controladas de temperatura (20°C ± 2°C) y luz continua (19.5 µE m2 s-1)

suministradas por lámparas fluorescentes Daylight 40W, con nitrato como

principal fuente de nitrógeno y pH 7.0; luz continua (Daylight F40T 12/D 40 W

PHILIPS a 110.35 µE m-2s-1) sin suministro directo de CO2 (Gómez Luna,

Álvarez, & Rivero, 2011).

La facultad de Chlorella Vulgaris de absorber los metales pesados gracias a su

metabolismo permitiría insertar dicha alga en aguas con presencia de metales

Página | 14
 pesados para su descontaminación; teniendo como factor importante el PH, la

temperatura, y los nutrientes que existen. La laguna Chinchaycocha es referencial

para el cultivo de esta microalga, para su limpieza y a la vez, para un nuevo

impulso para las investigaciones futuras. Asimismo por su forma rápida de

cultivo a gran escala, se podrá hacer de forma continua.

2.1.2 Planteamiento del Problema

¿Qué concentración de Chlorella vulgaris tiene mayor efecto degradativo sobre

la concentración de Cu y Pb en la Laguna Chinchaycocha, Nuevo Chimbote –

2018?

2.2. Importancia de la investigación

Restaurar el ecosistema perdido, equilibrando el nicho ecológico de cada especie

acuática, dando así, un lugar de como el que fue antes. Investigando a más

profundidad las Microalgas en ambientes con metales pesados. Manteniendo la

cultura y el Patrimonio de la Nación.

2.3. Objetivos de la investigación

2.3.1. Objetivos Generales

 Determinar que concentración de Chlorella vulgaris tiene mayor efecto

degradativo sobre la concentración de Cu y Pb

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 2.3.2. Objetivos Específicos

 Obtener la muestra de la laguna.

 Medir la concentración iniciales de Cu y Pb de las muestras de las Laguna.

 Seleccionar el conjunto de concentraciones de Chlorella vulgaris acon las cuales

voy a trabajar.

 Diseñar los sistemas de bioreactores para la biorremediación.

 Medir las concentraciones finales de Cu y Pb.

 Comparar dichos resultados.

2.4. Marco Referencial

2.4.1. Antecedentes

 ANTECEDENTES NACIONALES:

Según Castillo, 2008, en su investigación INFLUENCIA ANTROPOGÉNICA

MINERA SOBRE LA ESPECIE ENDÉMICA Batrachophrynus macrostomus

Peters, 1873 EN PELIGRO DE EXTINCIÓN DEL LAGO

CHINCHAYCOCHA (PASCO, JUNÍN), cuyo objetivo fue determinar las

influencias y amenazas que alteran el ecosistema y las especies del lago

Chinchaycocha, con el método de investigación experimental, concluye que

existe influencia antropogénica minera en el lago Chinchaycocha incluyendo

concentraciones de cobre, plomo, zinc los cuales superan los estándares de

calidad ambiental afectando a las especies que habitan en el ecosistema,

incluyendo a la especie Batrachophrynus macrostomus Peters.A partir de esta

Página | 16
 evaluación, logramos conocer una perspectiva de la realidad de la laguna

Chinchaycocha y los metales pesados que existen en ella. Las ppm que analizó

el tesista influirán en nuestra investigación como comparación de lo que ocurre

ahora en la actualidad. Por ello debido a las consecuencias negativas que tiene

sobre algunos animales de la zona como la Batrachophrynus macrostomus

Peters, podemos emplear Chlorella Vulgaris para conservar el hábitat y las

especies.

Según Chávez, 2014, en su investigación FITOREMEDIACION CON

ESPECIES NATIVAS EN SUELOS CONTAMINADOS POR PLOMO, cuyo

objetivo fue emplear especies nativas en suelos con plomo y comparar qué

especie tiene mayor efecto degradativo sobre el plomo, con el método de

investigación experimental, concluye que la Nicotiana tiene un mejor potencial

de fitorremediación por su desarrollo de biomasa aérea, la elevada

concentración de biomasa (276.7 ppm en zona radicular, y 96.5ppm en zona

aérea), extracción del metal (0.3 mg de Pb), capacidad de natural de translocar

el metal hacia las partes aéreas e inmovilización del metal en la raíz (Factor de

Translocación: 0.39) y a su mejor adaptación a otras condiciones climáticas.

Gracias a la Nicotiana, como especie de mayor efecto degrativo, podemos

analizar que el uso de plantas y otros organismos fotosintéticos para la

recuperación de ecosistemas resulta eficiente por su metabolismo,

compararando con la investigación que realizamos, en nuestra microalga

analizaremos las rutas metabólicas que contribuyen a la absorción de metales

pesados en la laguna Chinchaycocha.

 ANTECEDENTES INTERNACIONALES:

Según Chacón, Andrade, Cárdenas, Araujo y Morales, 2004, en su investigación

USO DE Chlorella sp. Y Scenedesmus sp. EN LA REMOCIÓN DE

Página | 17
NITRÓGENO, FÓSFORO Y DQO DE AGUAS RESIDUALES URBANAS

DE MARACAIBO, VENEZUELA, cuyo objetivo fue evaluar el uso de

Chlorella sp. Y Scenedesmus sp., para la remoción de fosfatos, nitratos y DQO

de las aguas de Maracaibo, con el método de investigación experimental,

concluyen que la remoción del nitrógeno y el fosfato, entre 44,0% y 48,7%; y

la DQO entre 54,8% y 55,8%, favorecen el uso potencial de Chlorella sp. y

Scenedesmus sp. para el tratamiento de aguas residuales urbanas. Estas

microalgas pueden ser utilizadas para el tratamiento de estos efluentes. A partir

de esta tesis podemos analizar que la microalga Chlorella Vulgaris tiene un

efecto de reducción de fosfatos, nitratos y otros compuestos debido a su

metabolismo especial. Así mismo como objeto de comparación para nuestro

proyecto podemos emplear dicha microalga para la extracción de Plomo y

Cobre.

Según Vacca, Angulo, Puentes, Torres y Plaza en su investigación Uso de la

microalga Chlorella sp. viva en suspensión en la decoloración del agua residual

de una empresa textil Barranquilla, Colombia, cuyo objetivo fue emplear el uso

de Chlorella sp. Para reducir los niveles de toxicidad y contaminación de aguas

residuales con colorantes disueltos provenientes de la industria textil, con

método de investigación experimental, concluye que el uso de Chlorella sp. en

aguas con la presencia de colorantes disueltos remueve el 97,2% del colorante

presente y disminuye en un 94,6% la DQO, entre otros parámetros de

caracterización antes y después del tratamiento, mostrando la mejor

biorremoción en este estudio. Estos resultados permiten sugerir que el

tratamiento biológico con la microalga Chlorella sp. del agua residual es un

método eficiente. La investigación sobre la reducción de colorantes en aguas

residuales por la Chlorella Vulgaris, sirve como base teórica dándonos una idea

de su metabolismo y sistema de degradación en la industria textil. Además de

Página | 18
 reducir colorantes, tiene la capacidad de reducir elementos químicos como los

metales pesados siendo tóxicos en el agua, lo cual resulta ser una parte del

fundamento de nuestra investigación.

2.4.2. Bases Teóricas

La Teoría Ambientalista

Es un movimiento social que se centra en la conservación y recuperación de los

recursos naturales, es una campaña a favor del ambiente. También se conoce

como conservacionismo, o Política Verde (Soto, 2016).

Representa movimientos en defensa del ambiente con mayor o menor relación

con otras problemáticas sociales, económicas y políticas (Soto, 2016).

Un ambientalista es alguien que cree que el medio ambiente, por ser la fuente

de recursos de la humanidad, debería tener su explotación de forma más

planeada a fin de no agotar el planeta para las generaciones futuras.Los

ambientalistas parten de la Teoría de Evolución de Charles Darwin, que afirma

que los seres humanos son animales como cualquier otros, frutos de la evolución

de las especies (Soto, 2016).

Lentamente se está tomando conciencia de la ecología y la conservación de las

especies, pero faltan muchísimos logros aún para crear leyes de protección;

grupos ambientalistas como Amigos de la Tierra, Greenpeace entre otros son

profundos activistas de la ecología y su defensa (Soto, 2016).

Actualmente han surgido grupos opositores extremistas a los cuales se les llama

Anti ambientalistas Liberales Postmodernistas que niegan las declaraciones

ambientalistas emitidas por grupos ecologistas (Soto, 2016).

Página | 19
2.4.3. Definición de Términos Básicos

2.4.3.1. Fitorremediación:

El término fitorremediación hace referencia a una serie de tecnologías que se

basan en el uso de plantas para limpiar o restaurar ambientes contaminados,

como aguas, suelos, e incluso aire. Es un término relativamente nuevo, acuñado

en 1991. Se una tecnología sustentable que se basa en el uso de plantas para

reducir in situ la concentración o peligrosidad de contaminantes orgánicos e

inorgánicos de suelos, sedimentos, agua, y aire, a partir de procesos bioquímicos

realizados por las plantas y microorganismos asociados a su sistema de raíz que

conducen a la reducción, mineralización, degradación, volatilización y

estabilización de los diversos tipos de contaminantes (Núñez López, Meas

Vong, Ortega Borges, & J. Olguín, 2004).

2.4.3.2. Biorremediación:

La biorremediación es una tecnología que utiliza el potencial metabólico de los

microorganismos (fundamentalmente bacterias, pero también algas, hongos y

levaduras) para transformar contaminantes en compuestos más simples, poco o

nada contaminantes, con el fin de realizar una transformación parcial o total de

los residuos o agentes contaminantes y una alteración del estado de metales en

el medio terrestre o acuático (Orosco & Soria, 2008).

La biorremediación se puede utilizar para limpiar terrenos o aguas

contaminadas, incluyendo el tratamiento de ríos, lagos y lagunas que contienen

sustancias perjudiciales para los elementos bióticos propios del ecosistema

(Castillo & Zafra, 2008).

2.4.3.3. Microalga

Las microalgas son organismos unicelulares eucariotas fotosintéticos capaces

de transformar la energía luminosa en energía química con una eficiencia cuatro

Página | 20
veces superior a la de las plantas. Su importancia radica en su papel como

productores primarios de la cadena trófica, que las constituyen en las primeras

formadoras de materia orgánica. Por su tamaño reducido y variado (5–50 µm

en promedio) son de fácil captura y digestión por multitud de organismos que

se alimentan en forma directa del fitoplancton (Abalde, 2004).

2.4.3.4. Chlorella Vulgaris

Chlorella, es un alga verde unicelular perteneciente al reino Protista. Tiene

forma esférica, su diámetro es de 2 a 10 µm, no posee flagelo y se encuentra

presente en la mayoría de los cuerpos de agua dulce. La Chlorella conocida

popularmente como Clorela contiene los pigmentos verdes fotosintetizadores

clorofila a y b en su cloroplasto. Mediante la fotosíntesis se multiplica

rápidamente, requiriendo sólo luz solar, dióxido de carbono, agua y pequeñas

cantidades de minerales. Para su cultivo se utiliza además la urea, la cal, el

fósforo y las mieles finales del proceso azucarero (Naturalways, s.f.).

2.4.3.5. Metales Pesados

Los metales pesados son componentes naturales de la corteza de tierra. No

pueden ser degradados o ser destruidos. En un grado pequeño se incorporan a

nuestros cuerpos vía el alimento, el agua potable y el aire. Los metales pesados

son peligrosos porque tienden a bioacumularse. La bioacumulación significa un

aumento en la concentración de un producto químico en un organismo biológico

en un cierto plazo, comparada a la concentración del producto químico en el

ambiente (Orosco & Soria, 2008).

Página | 21
 2.4.3.6. Aguas Residuales

Son aquellas aguas cuyas características originales han sido modificadas por

actividades humanas y que por su calidad requieren un tratamiento previo, antes

de ser reusadas, vertidas a un cuerpo natural de agua o descargadas al sistema

de alcantarillado (Redacción OEFA, 2014).

2.5. Formulación de Hipótesis

La concentración de Chlorella vulgaris que tiene mayor efecto degradativo sobre la

concentración de Cu y Pb en la Laguna Chinchaycocha es XYZ mg/L

2.6. Propuesta experimental

Diseño con preprueba-posprueba y grupo de control.

2.7 Metodología

2.8 Referencias bibliográficas

(s.f.). Obtenido de Naturalways: http://www.naturalways.com/chlorella.htm

(Agosto de 2017). Obtenido de Organización Mundial de la Salud:

http://www.who.int/mediacentre/factsheets/fs379/es/

Allara, M. (2002). PENICILINA G EN LECHE PASTEURIZADA PRODUCIDA EN EL ESTADO

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ArgenBio. (2007). Obtenido de ArgenBio:

http://www.argenbio.org/index.php?action=novedades&note=202

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Arias, E. L., & Piñeros, P. A. (Junio de 2008). Aislamiento e identificacion de hongos
filamentosos de muestras de suelo de los parámos de Guasca y Cruz Verde.
Trabajo de Grado. Pontificie Universidad Javeriana, Facultad de Ciencias . Bogotá
D.C., Bogotá, Colombia.

Ariza, B., & Gonzalez, L. (1997). Producción de Proteína Unicelular a partir de levadura
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Universidad Javeriana. Bogotá, Colombia.

Ascencio, R. (2012). Fersinsa: Penicilina, de Ramos para todo el mundo. Pmfarma, 21-
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Cañizares-Villanueva, R. O. (2000). Biosorción de metales pesados mediante el uso de

biomasa. Revista Latinoamericana de Microbiología, 131. Obtenido de
http://www.medigraphic.com/pdfs/lamicro/mi-2000/mi003f.pdf

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2.9 Anexos

2.9.1 Matriz de Consistencia

Título: Determinación de la concentración de Chlorella vulgaris que tiene mayor efecto

degradativo sobre la concentración de Cu y Pb en la Laguna Chinchaycocha, Nuevo Chimbote
– 2018.

Página | 25
Problema: ¿Qué Hipótesis: OBJETIVOS : Tipo de
concentración de investigación
Chlorella vulgaris Implícita Objetivo General:
tiene mayor efecto - Determinar que Según su fin:
degradativo sobre la VARIABLE concentración de Aplicada
concentración de Cu Chlorella vulgaris
y Pb en la Laguna Variable única: La tiene mayor efecto Según el alcance o
Chinchaycocha, concentración de degradativo sobre la nivel de
Nuevo Chimbote – Chlorella vulgaris concentración de Cu profundidad del
2018? con mayor efecto y Pb conocimiento:
degradativo sobre la Explorativas
concentración de Cu Objetivo Específico:
y Pb - Obtener la muestra Diseño
de la laguna. Experimental puro
- Medir la
concentración
iniciales de Cu y Pb
de las muestras de las Unidad de Análisis
Laguna.
- Seleccionar el El agua proveniente
conjunto de de la Laguna de
concentraciones de Chinchaycocha
Chlorella vulgaris
acon las cuales voy a
trabajar. Población
- Diseñar los sistemas
de bioreactores para Toda el agua de la
la biorremediación. Laguna de
- Medir las Chinchaycocha
concentraciones
finales de Cu y Pb. Muestra
- Comparar dichos Los 10 litros de agua
resultados. de la Laguna de
Chinchaycocha

Criterio de
inclusión:
Muestro ecológico
con fundamento
estadístico

Técnicas e
Instrumentos

Página | 26
 2.9.2 Matriz de Operacionalización

Variable Definición Definición Dimensiones Indicador Ítem

Conceptual Operacional

Página | 27
Variable -La utilización de -Chlorella Realizada Chlorella ¿La Chlorella
Única: microorganismos vulgaris es una por una Vulgaris: vulgaris se
La como Chlorophyta de micro alga: - Reproducción a rejuvenece en
concentración Biosorbentes de forma esférica, Chlorella una proporción nuevas células
de Chlorella metales pesados, unicelular, Vulgaris asombrosa, se en un tiempo de
vulgaris con ofrece una eucariota y hacia la rejuvenece en 17 a 20 horas?
mayor efecto alternativa presenta degradación nuevas células en
degradativo potencial a los clorofila a y b. Se de Cobre y un tiempo de 17 a ¿La Chlorella
sobre la métodos ya puede encontrar Plomo 20 horas. Su vulgaris
concentración existentes para la en medios reproducción contiene cerca
de Cu y Pb destoxificación y marinos y de acelerada está de 45% de
recuperación de agua dulce, dada con el factor proteína, 20%
metales tóxicos o debido a que su de crecimiento de de grasas, 20%
valiosos pared celular se chlorella especial de
presentes en encuentra presente en el carbohidratos,
aguas residuales compuesta por núcleo de cada 5% de fibras,
industriales. una mezcla célula de la 10% de
Muchas compleja de clorela. minerales y
levaduras, azúcares, - Contiene cerca vitaminas?
hongos, algas, glucosamina, de 45%
bacterias y cierta proteínas y ácido de proteína, 20% ¿La Chlorella
flora acuática úrico. Esta de grasas, 20% vulgaris es
tienen la microalga es de carbohidratos, capaz de
capacidad de capaz de 5% de fibras, coexistir en
concentrar incorporar 10% lugares con
metales a partir grandes de minerales y concentraciones
de soluciones cantidades de vitaminas. altas de
acuosas diluidas metales - Pared celular pesticidas,
y de acumularlas (Cr+2,+3,+6, casi irrompible la toxinas y
dentro de la Fe+2,+3, cuál es capaz de metales
estructura Cu+1,+2, Zn+2, coexistir en pesados?
microbiana. Pb+2,+4 y lugares con
Actualmente los Hg+1,+2) por concentraciones ¿Los metales
procesos medio de altas de pesados se
biotecnológicos absorción y pesticidas, transforman a
más eficientes acumulación toxinas y metales través de
utilizan la (Graham y pesados. procesos
biosorción y la Wilcox, 2000). biogeoquímicos
bioprecipitación, - Las microalgas Metales y se distribuyen
pero otros son muy Pesados: entre varias
procesos tales sensitivas a la - Una vez que han especies con
como la unión a toxicidad de los entrado en los distintas
macromoléculas metales y ecosistemas características
específicas algunas especies acuáticos, se físico-químicas?
pueden tener un son utilizadas transforman a
potencial en el como sensores través de ¿La toxicidad
futuro biológicos para procesos bioquímica del
(Cañizares- detectar efectos biogeoquímicos y cobre deriva de
Villanueva, tóxicos se distribuyen sus efectos en la
2000). potenciales de entre varias estructura y
- Chlorella es un metales pesados. especies con función de
súper alimento Los efectos distintas variadas
superior 10 para tóxicos en características biomoléculas?
complementar microalgas físico-químicas,
durante un pueden ser por ejemplo

Página | 28
régimen de causados por material ¿El plomo es
desintoxicación diversos particulado absorbido por
anual o bianual. mecanismos: a) (>0,45 µm), inhalación,
El uso de las dosis bloqueo de coloidal (1 nm- ingestión y a
apropiadas, grupos 0,45 µm) y través de la piel?
durante un funcionales de especies disueltas
período moléculas (=1 nm)
programado de biológicamente (Martorell J.J.,
tiempo ha importantes 2010).
demostrado para como enzimas en - El carácter
facilitar la orina y el sistema de esencial del
la excreción de transporte de Cobre deriva de
mercurio fecal, nutrientes su incorporación
así como una esenciales y de a un gran número
serie de otros iones, b) de proteínas con
metales pesados y desplazo o fines catalíticos y
sustancias sustitución de estructurales. Su
químicas iones metálicos toxicidad
(comidasanaweb, esenciales de bioquímica,
2016). biomoléculas y cuando supera el
unidades control
funcionales homeostático,
celulares. Lo deriva de sus
anterior puede efectos en la
resultar en estructura y
modificación e función de
inactivación de variadas
enzimas o biomoléculas
disrupción de la (Sancha & Lira ).
integridad de la - El plomo es un
membrana metal pesado que
celular (Kaplan, se ha utilizado
2005). durante
- Por su elevada muchos años
toxicidad, el debido a su
impacto causado resistencia a la
en salud por corrosión,
exposición ductibilidad,
prolongada o por maleabilidad y
bio-acumulación facilidad para
de metales formar
pesados resulta aleaciones. El
alarmante. plomo es
Dependiendo del absorbido por
tipo de metal o inhalación,
metaloide, se ingestión y a
producen través de la piel
afecciones que (Bayona, 2009;
van desde daños NavaRuíz
en órganos & Méndez-
vitales hasta Armenta 2011).
desarrollos
cancerígenos
(Combariza,
2009; Nava-Ruíz

Página | 29
&
MéndezArmenta
2011).

Página | 30
 2.9.3 Esquema

Uso de la biorremediación en aguas contaminadas con metales pesados

Muestra de agua
con contaminantes Metales pesados Cobre y plomo Concentración inicial

Extraemos 3 muestras Concentración final

X1 X2 X3
()1 de Chlorella Vulgaris ()2 de Chlorella Vulgaris ()3 de Chlorella Vulgaris

¿Qué concentración de Chlorella vulgaris tiene mayor efecto degradativo sobre la

Concentración de Cu y Pb en la Laguna Chinchaycocha, Nuevo Chimbote – 2018?

Página | 31