EXTRACCION DE COLORANTE (Bixina) A PARTIR DE SEMILLAS DE

ACHIOTE (Bixa orellana L.)

INTRODUCCION

Los colorantes naturales se dividen en “tintes” y “pigmentos”. Los tintes se definen como
compuestos que interaccionan químicamente con el sustrato coloreado (p. e. textiles) por otro
lado, los pigmentos, muy usados en la industria farmacéutica, no forman enlaces químicos
con el sustrato, y para que pueda adherirse a la superficie del sustrato se tiene que mesclar
con un adhesivo.

El cultivo de achiote ha adquirido importancia, principalmente, por la presencia de colorante

en la semilla. Este colorante natural, como otros, está desplazando a los colorantes sintéticos
por los efectos que éstos ocasionarían al utilizarse en la dieta humana.
Además, la Organización Mundial de la Salud, considera al colorante obtenido del achiote
como uno de los pocos permitidos, por no ser tóxico y no alterar el sabor de los alimentos
(Hernández, 1988). Estos aspectos han incrementado su exportación.

Este colorante se usa en la industria alimentaria para la coloración de mantequillas,

margarinas, quesos, yogurts, aceites, néctares, productos de panadería y confitería (SGS,
1991).
El annato puede obtenerse mediante extracción acuosa, alcalina o con otros solventes como
aceites, propilen-glicol, alcohol etílico y tricloro-etano. El método más utilizado es el de
extracción alcalina. Sin embargo, los principales mercados de exportación (Estados Unidos,
Europa y Japón) desean que se eliminen los métodos de extracción que utilizan productos
químicos (Liceras, 1988).

El uso de enzimas (pectinasas, celulasas, hemicelulasas) que degradan la pared celular,

facilitaría la extracción acuosa del colorante (Godfrey, 1983). Estas enzimas que actúan
sobre componentes insolubles tales como celulosa, hemicelulasas y pectina permitirían
obtener un colorante (annato) de mayor pureza y calidad. Asimismo, permitiría dejar de lado
las sustancias químicas utilizadas actualmente en los métodos de extracción industriales.
El presente trabajo tuvo como objetivo obtener esta extracción acuosa, alcalina-acida en la
extracción de colorante a partir de semillas de achiote (Bixa orellana L.).

OBJETIVOS:

 Determinar el fundamento de extracción de colorantes naturales.

 Extraer el colorante crudo de achiote (bixina)

 Realizar la extracción dela Bixina mediante el método alcalino con mejores

condiciones para la obtención de un buen rendimiento.

MARCO TEORICO.
 ASPECTOS GENERALES DEL ACHIOTE

Nombre común: Achiote

Otros Nombres Comunes: Colombia y Perú: Achote, achiote, onoto, bijo, bija, urucu.,
pumacoa. Inglés: Annato-tree. Alemán: Orleans Baum.

Nombre científico común: Bixa orellana

Taxonomía
Familia: Bixaceae.
Género: Bixa.
Especie: orellana

Fruto: Es una cápsula dehiscente de forma hemisférica, ovoide, elipsoidal o cónica carnosa,
de 3 a 5 cm. de largo recubierto por espinas rígidas o flexibles de tamaño variable que puede
llegar a 6 mm, ocasionalmente ausentes; presenta 2 valvas recubiertas internamente por una
membrana placentaria a la cual están adheridas las semillas, aproximadamente 50 de color
rojo vivo hasta amarillo dependiendo del cultivar.

Semillas: Pueden ser de forma cónica o triangular, de 3 a 4 mm de base y 3 a 4 mm de altura,

las cuales están cubiertas por una membrana fina y blanquecina, debajo de esta se encuentra
una capa roja y carnosa en donde se encuentran los pigmentos colorantes o tinte. Conforme
madura el fruto aparecen en la superficie de las semillas en papilas rojas que llegan a cubrirlas
por completo. El pigmento que se encuentra en las semillas constituye alrededor del 4-5%
del peso total de las mismas.
ZONAS DE PRODUCCION: El Perú ofrece condiciones ecológicas óptimas para su
cultivo en la costa, valles interandinos y en la selva. En la costa: en huertos familiares desde
Tumbes hasta Moquegua. En la Ceja de Selva: Tingo María, Satipo, Apurimac, Cusco y
Cajamarca, también en huertos pequeños incluso en Selva Baja.

A nivel mundial se cultiva en Kenia, India, Ecuador, Brasil, República Dominicana,

Colombia, Bolivia, Bélice, Costa de Marfil, Costa Rica, Guatemala, Guyana, Haití, Jamaica,
México, Sri Lanka, Surinam, Angola, Nigeria, Tanzania, Filipinas, Hawai.

FUNDAMETO SOBRE LA EXTRACCION DEL COLORANTE

Los colorantes son sustancias de color intenso que puede usarse para producir un alto grado
de coloración cuando se dispersan en otros materiales o se hacen reaccionar con los mismos
mediante un proceso que, cuando menos temporalmente, destruye la estructura cristalina de
la sustancia. Este último punto es la característica que distingue a los colorantes de los
pigmentos, que casi siempre se aplican en forma de agregados a cristales insolubles.

La mayoría de los colorantes naturales son de origen vegetal; pueden ser compuestos puros
o productos de extracción. Estos últimos son obtenidos de materia primas alimentarias y
pueden ser asociadas en otras moléculas. Entre los más importantes encontramos a los
carotenoides, que son un grupo de compuestos solubles en lípidos, ampliamente distribuidos
en el reino vegetal. Tienen dos funciones, principales en las plantas durante la fotosíntesis y
como materia colorante en flores y frutos, aparecen como flores amarillas, mientras que en
los frutos son también de color rojo o naranja.

La bixina es el principal pigmento de achiote, es un carotenoide natural soluble en aceite

que se forma naturalmente en la superficie de la semilla de Bixa orellana L.
Este pigmento natural se puede obtener mediante separación por métodos de cromatografía.
Su punto de ebullición es de 198 °C. Es soluble en acetona, cloroformo y soluciones acuosas
alcalinas, es soluble en agua, ligeramente soluble en alcohol etílico propilenglicol, etc.
La bixina es muy estable entre 60-80 °C e inestable por encima de 80 °C el colorante crudo
es de color rojo anaranjado y posee un color amargo. Existen preparaciones de Bixina, los
extractos solubles en agua, la norbixina es muy soluble en agua, la elaboración de soluciones
(0.5 – 4% de norbixina) por hidrolisis alcalina es una práctica comercial usual y es frecuente
mente llamado annato de simple poder.

El método de extracción del pigmento denominado solución de Hidróxido de Sodio, se

realiza a través de una reacción química, donde un átomo de hidrogeno del grupo carboxilo
del compuesto de bixina es remplazado por un átomo de sodio de Hidróxido de Sodio
formándose una sal llamada bixinato de sodio, luego se acidifica la solución de bixina de
sodio con ácido clorhídrico al 1.5N para poder lograr precipitar un colorante constituido por
bixina.

La norbixina es un pigmento carotenoide soluble en agua (Hidrosoluble) formado de Bixina

mediante hidrolisis alcalina

COLORANTES (Bixina y Norbixina).

Hay dos productos principales de achiote, la Bixina y la Norbixina, el pigmento se encuentra
en la superficie de la porción carnosa (arilo Rojo- Naranja) que envuelve a la semilla de
achiote. Son compuestos algo diferente químicamente entre ellos, siendo la Bixina soluble
en las grasa e insoluble en el agua, y Norbixina en la inversa, el aceite extraído de semilla es
la principal fuente de los pigmentos Bixina y Norbixina, clasificados como carotenoides.
Como el resto de los carotenoides, los extractos de achiote son susceptibles a la degradación
oxidativa. La pérdida del color también ocurre por la exposición prolongada a la luz,
temperatura elevada y la presencia de dióxido de sulfuro (Preston y Richard, 1980); desde
que se conoce la Bixina en la naturaleza, su estereoquímica a sido objeto de investigación.

La Bixina es insoluble en agua ligeramente soluble en etanol y fácilmente soluble en éter y

en los aceites. Su espectrometría máxima en Cloroformo es de 502 Nm, y de la Norbixina
en solución diluida de KOH es de 482 Nm (Norma oficial Mexicana NOM – 119-ssa1 1994)

Bixina

Formula química y estructura: cis- Bixina C24H30O4

Norbixina

Formula química y estructura: cis- Norbixina C24H28O4

MATERIALES Y METODOS.

 50 g. de semilla de achiote
 Balanza analítica
 Estufa
 Centrifuga
 Cocina
 Olla
 NaOH al 1% (100mL)
 HCl 1.5 N (20mL)
 Agua destilada

Descripción de diagrama de flujo para la extracción de la Bixina.

Selección.- se eliminaron las semillas negras húmedas y fermentadas y con rasgos de

enfermedad

Extracción 1: Se realiza la primera extracción del pigmento utilizando 40mL y 1mL de

NaOH al 1% para solubilizar fácilmente el principio colorante del achiote, agitar
constantemente a temperatura ambiente durante 10 min. Hasta agotar la semilla.

Extracción 2: A los sólidos insolubles (semillas desgastadas) se le realiza la segunda

extracción del pigmento utilizando 30mL de agua y 20mL de NaOH para solubilizar la
otra parte de colorante del achiote. Agitando constantemente a temperatura ambiente
durante 10min hasta agotar la semilla.

Extracción 3 A los sólidos insolubles (semillas desgastadas) se le realiza la tercera

extracción del pigmento utilizando 30mL y 20mL de NaOH para ultima extracciones
colorante, agitando constante mente a temperatura ambiente durante 15 min.

Separación: luego se procede a separar la solución del extracto llamado solución de

Bixinato de Sodio de las semillas agotadas y se lavó con 50mL de agua destilada (4
veces), con la finalidad de arrastrar los restos de colorante adheridos a la semilla.
Filtrado: Se filtró al vacío, se lavó con agua destilada y se clarifico para eliminar los
restos de sales que contuvo la Bixina por el NaOH.

Centrifugación. Se procedió a centrifugar después de haber agregado el HCl y reducido

el PH hasta 2.9 la cual es su punto isoeléctrico, con la finalidad de poder precipitar la
Bixina durante la centrifugación a 4000Rpm durante 15min.

Secado: Se secó el sólido precipitado a temperatura de 70°C por 30 min.

Molido: luego de todas estas operaciones se procede a moler la Bixina con la finalidad
de obtener una granulometría más fina y de fácil solubilizarían como colorante.

DIAGRAMA DE FLUJO PARA LA EXTRACCION DE LA BIXINA

(Método de solución alcalina)

SEMILLAS DE
ACHIOTE
 SELECCION

NaOH 1% 20mL
EXTRACCION 1 EXTRACTO 1

EXTRACCION 2 EXTRACTO 2
NaOH 1% 20mL

NaOH 1% 20mL EXTRACCION 3 EXTRACTO 3

HCl 1.5N 9mL PRECIPITACION

ÁCIDA

SEPARACION

LAVADO

CENTRIFUGACION

SECADO Y MOLIENDA

NORBIXINA

RESULTADOS:

PESO
 COLOR Rojo - Anaranjado
PH INICIAL 8.7
PH FINAL 2.9
GASTO 9mL
RENDIMIENTO 4.4%

Resultados de las muestras colocadas a la estufa a 70°C x 30 min

Placa Peso Placa + Muestra Peso Placa Peso Muestra Rendimiento
Placa N°1
Placa N° 2
Placa N° 3
Placa N° 4

DISCUSIONES.

 Se pudo determinar que es un carotenoide acido, y que su punto isoeléctrico es de

2.9 pH, que permite su extracción (A cubero, 2002) el cual también puede ser
afectado por los excesos de calor y luz.

 En el presente trabajo se realizó la extracción del colorante de achiote (Bixina y

Norbixina) mediante el método de Solución Alcalina, Sin embargo, los principales
mercados de exportación (Estados Unidos, Europa y Japón) desean que se eliminen
los métodos de extracción que utilizan productos químicos (Liceras, 1988). Se están
optando por el uso de enzimas (pectinasas, celulasas, hemicelulasas) que degradan
la pared celular, facilitaría la extracción acuosa del colorante (Godfrey, 1983). Estas
enzimas que actúan sobre componentes insolubles tales como celulosa,
hemicelulasas y pectina permitirían obtener un colorante (annato) de mayor pureza
y calidad. Asimismo, permitiría dejar de lado las sustancias químicas utilizadas
actualmente en los métodos de extracción industriales.

 Según otras investigaciones lic. Olga Murillo. El procedimiento de extracción

normalmente utilizada por los productores rurales consta de las siguientes etapas:

Extracción: las semillas se cocinan en agua caliente por un periodo hasta de 24

horas
Filtración: los tejidos vegetales se separan de la solución acuosa coloreada mediante
filtración mecánica. Los residuos se lavan con abundante agua, para separar la mayor
cantidad posible de colorante de las semillas.

Concentración: se lleva a cabo con la finalidad de reducir el contenido de

humedad y concentrar el del colorante.
  Considerando los procedimientos realizados en este trabajo, podemos apreciar, que
nuestro procedimiento es más complejo que el método empírico encontrado, es por
ello que la obtención de Norbixina de manera empírica no es tan recomendable,
porque los rendimientos de extracción son bajos, ya que se utiliza el agua como
disolvente en el cual la Norbixina es poco soluble, esta a su vez se degrada por efectos
de las altas temperaturas aplicadas durante la extracción, lo que no sucede con
nuestro método al mantener controlada la temperatura. La calidad del colorante se
encuentra estandarizada.

 Observamos que luego de haberle secado tiene un alto poder colorante del mismo
modo una buena estabilidad, propiedades de alta resonancia que se deben al grupo
carbonilo y sus dobles enlaces conjugados (Guy Linden y Denis Lorient).

 Características fisicoquímicas de la semilla de achiote.

La composición tanto química como nutricional de la semilla de achiote es muy

variada, como puede observarse en la siguiente tabla

Tabla 1 Composición química, nutricional de la semilla y del colorante de achiote

Composición química (%) Composición (mg/100g) composición
Humedad 8.0 – 13.0 Calcio 7 Proteínas 12.3 – 13.2
Proteína 13 -14.24 Fosforo 10 Pectina 0.23
Celulosa 13.8 Hierro 1.4 Carbohidratos 39.91 – 47.9
Fibra Cruda 18.48 Vitamina A 45 mg Cenizas 5.44 – 6.92
Almidones 11.45 Riboflavina 0.2 Taninos 0.33 – 0.91
Carbohidratos 39.91 Ácido 12.5 Pentosanos 11.35 – 14.97
totales Ascórbico
Energía (kcal) 54 Tiamina 0.39 Carotenoides 1.21 – 2.30
Ceniza 4.50 – 7.97 Niacina 1.46 Beta-Caroteno 6.8–11.30 mg
Fuente Jaramillo.M C. A. y Muñoz. M. O. A. (1992) Medellin. Universidad. Facultad
Nacional de Minas.

 Mediante este cuadro se puede ver todo el valor nutricional que pose esta semilla
del cual no solo se puede extraer colorantes si no que también se puede aprovechar
en la extracción de otro de sus componentes, ejemplo en su concentración de
proteínas, etc.

CONCLUSIONES.

 Se pudo lograr la extracción del colorante de achiote denominada Bixina

mediante el método de solución alcalina.
  De las semillas de achiote (Bixa Orellana) se obtuvo un compuesto químico
llamado Nor-Bixina la cual es materia prima de colorantes ampliamente
utilizados en la industria alimenticia.

 Se pudo lograr extraer cantidades de 0.8g, 0.3g, 0.5g, y 0.6g de Bixina en

cuatro muestras respectivamente obteniendo un rendimiento total de 4.4
respecto a la materia prima inicial de 50g.

 El color rojo del achiote o annatto se debe a varios compuestos carotenoides,

principalmente apocártenos, que se encuentran en la semilla. La Bixina es el
más cotizado e importante de éstos. La Bixina es una sustancia cristalina de
color rojo oscuro, soluble en alcohol, aceites y grasas e insoluble en agua.
También se encuentran pequeñas cantidades de iso-bixina y norbixina; esta
última, de color amarillo y soluble en agua e insoluble en grasas, también es
un colorante con valor comercial.

 Es posible aumentar la pureza del annato obtenido por extracción alcalina,

realizando una hidrólisis previa del extracto.

BIBLIOGRAFIA

 Cubero, A; Monferrer, A y Villalta, J. 2002 “aditivos alimentarios” .Tecnología de

Alimentos. España, Editorial Mundi Prensa. Madrid.

 Lic. Olga Marta Murillo G. Tecnología de Alimentos Dirección de Mercadeo.

Agroindustria Área de Desarrollo de Producto. Disponible en la web:
http://www.mercanet.cnp.go.cr/Desarrollo_Agroid/documentospdf/Achiote_FTP.pdf

 Guy Linden y Denis Lorient, BIOQUIMICA AGROINDUSTRIAL, Acriba S:A

ZARAGOZA

 Hernández, G. Tirado, G. Juan, M. y otros (2002) Obtención del colorante de la

semilla de achiote (Bixa Orellana) utilizando microorganismos celulóticos.
Universidad Autónoma Agraria Antonio Narro. Universidad Autónoma de
Coahuila

ANEXOS

PROCEDIMIENTO

PESADO DE LA MATERIA PRIMA BATIDO CON AGUA CON NaOH X 10MIN

MEDIANTE EL BATIDO SE LOGRÓ EL DESPRENDIMIENTO DEL COLORANTE (BIXINA)