INTRODUCCION AL LABORATORIO DE BIOLOGÍA VEGETAL.

Jhonier Quelal, Néstor

Universidad del Cauca- Ingeniería ambiental
RESÚMEN.
La primera práctica se realizó el manejo de sustancias colorantes para verificar, observar y
analizar las diferentes estructuras de las plantas; se utilizaron rojo neutro 91%, eosina,
hematoxilina, fluoroglusina + HCl, sudan lll y tionina estos colorantes son capaces de
identificar a ciertas sustancias presentes en las estructuras para hacer más fácil su
observación al microscopio. Los órganos utilizados fueron raíces, hojas y tallos, a los cuales
se procedió a realizarles cortes tanto transversales como longitudinales y son quienes
fueron teñidos para observar sus características.

TABLA 2. Reconocimiento de
DATOS Y RESULTADOS. estructuras en raíz.
P-POSITIVO. .
N-NEGATIVO
Reactivo/colo Estructura Color Observació
TABLA 1. RECONOCIMIENTO DE rante n
ESTRUCTURAS EN TALLO. Rojo neutro 91 Núcleo y Rojo P
% granulacione
Reactivo/co Estruct Col Identific s
lorante ura or ación Eosina Citoplasma Rosado P
P/N
Rojo neutro Núcleo y Rojo N Hematoxilina Núcleo Violeta N
91 % granulac
iones Fluoroglusina Lignina Rojo N
Eosina Citoplas Ros N + HCl pálido
ma ado
Hematoxilin Núcleo Viol N Sudan 3 Paredes Rojo P
a eta cutinizadas
Fluoroglusin Lignina Rojo P
a + HCl palid Tionina Lignina, Azul y N
o pectina y rosado
Sudan 3 Paredes Rojo P celulosa
cutiniza
das
Tionina Lignina, Azul
pectina y
y rosa
celulosa do
 TABLA 3. Reconocimiento de
estructuras en hojas.
Reactivo/c Estruct Col Observ
olorante ura or ación
Rojo neutro Núcleo y Rojo P raiz con eosina
91 % granulac
iones
Eosina Citoplas Ros N
ma ado
Hematoxilin Núcleo Viol N
a eta
Fluoroglusin Lignina Rojo N
a + HCl pálid
o
Sudan 3 Paredes Rojo P
cutiniza
das
Tionina Lignina, Azul N
pectina y
Raiz con hematoxilina
y rosa
celulosa do

ANÁLISIS DE RESULTADOS.

los colorantes son reactivos que se usan

para identificar diversas moléculas o
estructuras, es decir son sustancias
químicas que al aplicarse sobre la
muestra reaccionan tiñendo de un color
especifico algo deseado, en las pruebas
de tinción realizadas a los cortes
Tallo con sudan III
realizados a la raíz, tallo y hojas se puedo
observar en los diferentes cortes las
estructuras como el núcleo, el citoplasma, Pruebas para hojas con corte
la lignina, paredes cutinizadas pectina/ transversal
celulosa cabe resaltar que no en todos los Rojo neutro positivo
casos se encontró efectivo identificar Eosina negativa
todas las estructuras esto puede variar Hematoxilina negativo
dependiendo del tipo de corte y de la parte Fluoroglucina +HCl negativo
propuesta para el análisis; por ejemplo en Sudan lll positivo
un corte de tallo de una planta Tionina negativo
monocotiledónea (liliopside) al aplicar Hoja con corte transversal no se observa
coloración con rojo neutro y poner a color y haces vasculares.
observación se logró identificar núcleo y
granulaciones mientras que un corte Pruebas para tallo para corte
transversal de una hoja no se observaron transversal
estas estructuras y no se observó color Rojo neutro (negativo)
alguno por lo tanto se considera que dio Eosina (negativo)
identificación negativa para estas Hematoxilina negativa
estructuras. Sudan lll positivo
Fluoroglucina +HCl positivo
Pruebas para raíz con corte transversal Tionina no se realizo
Rojo neutro: raíz liliopside se observan los
haces vasculares bien definidos en la PREGUNTAS COMPLEMENTARIAS.
vista de 10x se observa la definición de 1. Cuál es la función de cada
células. colorante utilizado y relacionar con
Eosina (positivo) se observa citoplasma la estructura celular identificada.
color rosado  Rojo neutro
Hematoxilina: (negativo) El rojo neutro (toluylene red) colorea de
Sudan lll (positivo) se observa paredes rojo a la substancia de Nissl. Con
cutinizadas y estructura de la cutina frecuencia se utiliza como
Fluoroglucina + HCl (negativo) contracoloración en otras técnicas de
Tionina (negativo) tinción.
Tallo monocotiledóneo con rojo neutro, se
observa núcleo y granulaciones.
 Eosina
La eosina se utiliza más frecuentemente y eosina), una de las más comunes
como contra coloración de la utilizadas en histología.
hematoxilina, impartiendo un color que va
del rosado al rojo al
 Fluoroglicina:
material citoplasmático, membrana
es un método de reconocimiento para la
celular, y algunas estructuras
lignina, por tanto, se utiliza en aquellos
extracelulares. Además, imparte un fuerte
tejidos que la presentan el xilema y el
color rojo a los eritrocitos. La eosina
esclerénquima.
puede ser utilizada también en algunas
Se conoce esta coloración como tés de
variantes de la coloración de Gram, y en
lignina y se realiza de manera
muchos otros protocolos de tinción. De
extemporánea.
hecho, existen dos compuestos muy
estrechamente relacionados (aunque no
Sudan lll es un colorante que tiene
iguales) conocidos como eosina. El más
afinidad por los compuestos lipídicos, por
frecuentemente utilizado es la eosina Y
lo cual se utiliza fundamentalmente para
(también conocida como eosina
colorear la cutina y la suberina.
amarillenta) ya que posee una tonalidad
 Tionina:
amarillenta muy suave. El otro compuesto
conocido como eosina es la eosina B, también conocido como tionina
también conocida como eosina azulada o acetato o violeta de Lauth es un
rojo imperial, la cual posee una suave colorante azul, derivado
tonalidad azul. Los dos colorantes son de guayacol . Como colorante metacrom
intercambiables, y en la utilización de uno ática con fuerte poder colorante se utiliza
u otro es más una cuestión de preferencia a menudo como contraste en
y tradición. preparaciones biológicas.

 Hematoxilina CONCLUSIONES.

La hematoxilina es un colorante nuclear. Es importante que para el reconocimiento

Utilizado con un mordiente, la de las estructuras de las células vegetales
hematoxilina tiñe los núcleos celulares de se puedan realizar cortes a mano alzada
color azul violeta a negro. Con gran longitudinal y transversal para poder
frecuencia se utiliza en combinación con realizar muestras y colocarlas a
eosina en la coloración H&E (hematoxilina observación.
Los cortes que se realicen siempre deben
estar hidratados por eso se deben colocar
en agua para que se vivos los tejidos y no
los afecte los cortes.
Es importante conocer las propiedades de
cada colorante para poder identificar las
estructuras de las células vegetales.

Al hacer los montajes en los portaobjetos

antes de hacer la observación se debe
lavar un poco con agua destilada para
minimizar concentración del colorante y
poder observar mejor las estructuras.

BIBLIOGRAFIA.

RAMIREZ B morfología vegetal

/universidad del cauca.

JONES, S. 1989. Sistemática Vegetal.

2da. ed. 536p.

Http/biología.com/histología/células-
observación-.

Anexos de imágenes de pruebas para las

tinciones mencionadas.