UNIVERSIDAD NACIONAL MAYOR DE SAN MARCOS

(Universidad del Perú, Decana de América)

FACULTAD DE QUIMICA E INGENIERIA QUIMICA

ESCUELA ACADEMICA PROFESIONAL DE ING. AGROINDUSTRIAL
LABORATORIO DE QUÌMICA INSTRUMENTAL

ESPECTROFOTOMETRÌA ULTRAVIOLETA
DETERMINACIÒN DE NITRATOS EN AGUA

PROFESOR(A): CALIXTO COTOS, ROSARIO

ALUMNO: LLATAS ORTIZ, GERALDINE MERCEDES CÓDIGO: 15070062

FECHA DE REALIZACIÓN DE LA PRÁCTICA: 26 MAY 2018

FECHA DE ENTREGA DE INFORME: 07 JUN 2018

LIMA- PERÚ
2018-I
 INTRODUCCIÒN

Los nitratos están presentes naturalmente en suelos, agua, vegetales y tejidos animales.
Los niveles en suelos cultivados y en agua se ven incrementados por la utilización de
fertilizantes nitrogenados comerciales. Normalmente se encuentran distribuidos en la
litosfera en forma de sales sódicas y potásicas. La concentración de los nitratos en las
aguas superficiales tiene diferentes orígenes, liberándose cuando la materia orgánica
se descompone por las bacterias del suelo, y por la disolución de rocas y de efluentes
industriales (Canter, 1997). Por otro lado la principal fuente de los nitratos es la
agricultura donde se utilizan como componentes de abonos y fertilizantes nitrogenados
(Pulido- Bosch et al., 2000).
Los nitritos son formados biológicamente por la acción de bacterias nitrificantes, en un
estadio intermedio en formación de nitratos. La concentración del mismo en agua y
vegetales es baja. Sin embargo, la conversión microbiológica de nitrato a nitrito puede
ocurrir durante el almacenamiento. La presencia de estas en agua es indicadora de
contaminación de carácter fecal reciente (Metcalf & Eddy, 1998) y en aguas superficiales
bien oxigenadas no suele superar los 0.1 mg/l (Stumm & Morgan, 1981). Los nitritos en
concentraciones elevadas reaccionan dentro del organismo con aminas y amidas
secundarias y terciarias formando nitrosaminas de alto poder cancerígeno y tóxico. En
general, la concentración de nitritos en el agua superficial es muy baja, pero puede
aparecer ocasionalmente en concentraciones inesperadamente altas debido a la
contaminación industrial y de aguas residuales domésticas (Prat et al., 1999).
Los nitratos ingeridos tienen relativamente baja toxicidad por sí mismo, son rápidamente
absorbidos en el estómago y se excretan con la orina. Las intoxicaciones por nitrato no
son comunes; el nitrato no es normalmente peligroso para la salud; su gravedad
depende del nivel de reducción a NO2.
La IDA para los nitratos es de 0 – 3,7 mg/kg de peso corporal, expresada en iones nitrato
y de 0 – 0,06 mg/ kg de peso corporal para los nitritos, expresada en términos de iones
nitrato. Esta IDA se aplica a todas las fuentes de ingesta, FAO/OMS. La OMS ha
recomendado una concentración máxima de 45 mg/L, las limitaciones que impone la
EPA relativas a las aguas potables, en las que el contenido en nitratos no puede superar
45 mg/L como NO-3, dadas sus consecuencias en niños.
 PRINCIPIOS TEÒRICOS

El nitrato es un compuesto inorgánico compuesto por un átomo de nitrógeno (N) y tres

átomos de oxígeno (O); el símbolo químico del nitrato es NO3. El nitrato no es
normalmente peligroso para la salud a menos que sea reducido a nitrito (NO2)

Descripción:
Nombre químico: Nitrato
Nombre regulatorio: Nitrato
Fórmula molecular: NO3-
Peso molecular: 62 g/mol
Fig 1. Estructura molecular nitrato

En los estándares europeos para el agua potable, segunda edición, publicada por la
OMS después de la convención de Génova en 1970, encontramos lo siguiente:
Constituyentes del agua que, si presentes en cantidades excesivas, pueden dar lugar a
problemas:
Tabla N°1 Efectos de cantidades excesivas de nitratos

Nivel aproximado por

Naturaleza del problema
Sustancia encima del cual pueden
que puede aparecer
aparecer problemas

Nitrato (como NO3)
- Recomendado: menos de
Peligro de
50 mg/l.
metahemoglobinemia
- Aceptable: de 50 a 100
infantil si el agua es
mg/l.
consumida por niños
- No recomendado:
pequeños.
más de 100 mg/l.

Fig 2. Reducción de nitratos a nitritos

 PARTE EXPERIMENTAL

Materiales
 02 celdas de cuarzo
 01 Luna de reloj
 01 vaso precipitado de 50 mL
 01 pipeta volumétrica de 1, 2, 3, 5,10, 15, 20 y 25 mL.
 01 pipeta graduada de 5 mL.
 01 fiola de 1L
 01 fiola de 500 mL
 01 fiola de 100 mL
 01 fiola con tapa de 50 mL
 01 propipeta

Equipos
 Espectrofotómetro UV- Vis, UV-1700
Shimadzu.
 Balanza analítica

Reactivos

 Agua exenta de nitrato

 KNO3 p.a.
 Cloroformo, CHCl3 (reactivo controlado) para mantener la solución patrón
de KNO3 por 6 meses.
 HCl QP (reactivo controlado)

Metodología
A) Preparación de soluciones
1. Solución patrón de nitrato (100 ppm NO-3 – N). Colocar en una placa Petri
aproximadamente 0,3 g de KNO3 y secar en una estufa a 105°C durante
24 horas. Retirar y enfriar en el desecador. Pesar 0,1805 g de KNO 3
disolver en agua, agregar 2 mL de CHCl3 y diluir en fiola de 250 mL,
enrazar y homogenizar la solución por inmersión; 1,00 mL = 100 ug NO-3
– N. Esta solución es estable durante 6 meses.
2. Solución patrón intermedia de nitrato (5 ppm NO-3 – N). Diluir 5 mL de
solución patrón primario de nitrato con agua destilada, llevar a fiola de 100
mL, enrazar y homogenizar la solución.
3. Soluciones para la curva de calibración. Preparar soluciones de 0.1, 0.2,
0.3, 0.4, 0.5 ppm de NO-3 – N, diluyendo las alícuotas a partir de la
 solución intermedia de 5 ppm NO-3 – N en fiolas de 50 mL, antes de
enrazar añadir 1 mL de HCl 1N y completar a 50 mL con agua destilada,
homogenizar la solución.
4. Solución de HCl 1N. Diluir 8.3 mL de HCl conc. en agua destilada y
enrazar en fiola de 100 mL, homogenizar la solución.
5. Blanco. En una fiola de 50 mL colocar aproximadamente 45 mL de agua
redestilada, añadir 1 mL de HCl 1N y luego completar el volumen hasta el
enrasa, homogenizar la solución.

B) Preparación de la muestra

En fiolas de 50 Ml, añadir 1, 2, 5 o 10 mL, según sea el contenido de nitrato

de la muestra transparente, filtrar si fuera necesario y antes de enrazar añadir
1 mL de HCl 1N, mezclar bien y completar a 50 mL con agua destilada,
homogenizar la solución.

C) Cálculos

Graficar la curva de calibración con los datos de absorbancia vs

concentración NO-3 – N (nitrato expresado como N) del patrón. Con las
absorbancias de las muestras y la curva de calibración calcular el contenido
de nitrato (NO-3) en la muestra en ppm.

RESULTADOS

A) Preparación del patrón de nitrato NO-3 – N

Se determina el volumen necesario para la preparación de 250 mL de patrón
NO-3 – N a partir de 0.1805 g de KNO3.
B) Preparación del patrón intermedio de nitrato (5 ppm NO-3 – N)
Se determina el volumen necesario para la preparación de 100 mL de patrón
intermedio a partir de una solución de patrón 100 ppm.
100 ppm * V = 5 ppm * 100 mL
V= 5 mL

C) Preparación de los estándares (STD)

A partir de una solución stock a 5 ppm, se procede a preparar 5 estándares
a diferentes concentraciones (0.1, 0.2, 0.3, 0.4 y 0.5 ppm). Añadir 1 mL de
HCl 1N a cada uno y enrazar con agua destilada.
Ejemplo: 5 ppm * V = 0.1 ppm * 50 mL
V= 1 mL
 Tabla Nº2 Volúmenes para la preparación de los estándares

Vol. Stock
[ ] ppm
(mL)
0.1 1
0.2 2
0.3 3
0.4 4
0.5 5

D) Preparación de las muestras (M1 y M2)

Para la práctica se tendrá como muestra problema aguas de mesa como San
Mateo, Bells y Vida. Se preparan tres muestras con diferentes volúmenes del
agua de mesa, luego añadir 1mL de HCl 1 N y enrasar hasta los 50 mL con
agua destilada.
Tabla N°3 Volúmenes del agua de mesa para cada muestra

M1 49 mL
M2 5 mL
M3 1 mL

E) Obtención del espectro de absorción de una solución estándar de

cafeína
 Fig 3. Curva espectral del nitrato

La figura 3 nos muestra la curva espectral para el nitrato, para su realización

se debe fijar los valores de lectura de las longitudes de onda. Por referencia
teórica se conoce que la longitud de onda máxima suele encontrarse en los
220 nm por lo que los rangos de la lectura se realizan desde los 300 – 190
nm.
Tabla N°4 Valores del pico más alto de la curva espectral

λ max 196
Abs 0.408

F) Gráfica de la curva de calibración

Una vez obtenida la longitud de onda máxima realizar la cuantificación por el
modo PHOTOMETRIC del espectrofotómetro. Realizaremos la lectura de los
estándares y con los valores de absorbancias junto a los valores conocidos
de concentración preparar la curva de calibración.

Fig 4. Curva de calibración del nitrato

Tabla N°5 Valores de absorbancia de los estándares

[ ] ppm Abs

BK 0 0.004

STD1 0.1 0.085

STD2 0.2 0.160

STD3 0.3 0.179

 STD4 0.4 0.294

STD5 0.5 0.270

Al ajustar los valores estadísticos de la curva se comprueba que el valor del

coeficiente de correlación es cercano a 1, indicando que la curva de
calibración se encuentra relativamente bien elaborada (se busca valores
más cercanos).
Tabla N°6 Valor del coeficiente de correlación

R2 0.94736

G) Concentraciones de las muestras

Una vez realizada la curva de calibración, se procede a la lectura de las
muestras para obtener la concentración de las mismas. Tener en cuenta que
los valores de las concentraciones arrojadas por las muestras deben
corresponder al intervalo de concentraciones leídas para la curva de
calibración caso contrario debemos realizar una dilución o la preparación de
otra curva de calibración.

Fig 3. Valores de concentración en ppm de las muestras

Tabla N°7 Valores de concentración de las muestras

[ ](ppm) Abs

M1 0.313 0.197

M2 0.845 0.488

M3 0.319 0.200
Debido a las concentraciones obtenidas en la muestra M2 (Agua Bells) no será
considerada dentro de los cálculos puesto que sale de los valores establecidos por la
curva de calibración.
Por tratarse de nitratos emplearemos un factor de corrección que nos indicará las
concentraciones exactas de nitratos determinados en las muestras de agua:
Ppm nitratos = [ ] calculada por la curva de calibración * factor corrección
Factor de corrección = PF NO-3/ PF N
Factor corrección = 4.43

Tabla N°8 Valores de concentración de las muestras - corregida

[ ](ppm)

M1 1.387

M2 3.743

M3 1.413

Para M1
1.387 mg nitrato - 1000 mL solución
X1 - 50 mL solución
X1 = 0.06935 mg nitrato

El volumen empleado de agua San Mateo para preparar la muestra fue de 49

mL, suponiendo entonces que 1 gr = 1 mL de San Mateo tendremos:

0.06935 mg nitrato – 49 mL San Mateo

X2 – 600 mL
X2 = 0.8492 mg nitrato

Contenido nitrato 0.1415 mg / 100 mL San Mateo

Contenido nitrato por botella 0.8492 mg / 600 mL San Mateo

Para M3
1.413 mg nitrato - 1000 mL solución
X1 - 50 mL solución
X1 = 0.07065 mg nitrato

El volumen empleado de agua Vida para preparar la muestra fue de 1 mL,

suponiendo entonces que 1 gr = 1 mL de Vida tendremos:

0.07065 mg nitrato – 1 mL Vida

X2 – 625 mL
X2 = 44.1563 mg nitrato

Contenido nitrato 7.3594 mg / 100 mL Agua Vida

Contenido nitrato por botella 44.1563 mg / 625 mL Agua Vida

Tabla N°9 Valores nitratos de las muestras

[ ] mg/L Observaciones
M1 – San Mateo 1.415 Cumple
M3 - Vida 73.594 No cumple
 CONCLUSIONES

 El contenido de nitratos determinada en una botella de San Mateo se

expresa en 1.415 mg/L. Se puede comparar con el máximo recomendado
por la OMS de 45 mg/L, así esta marca cumple con los requisitos de una
agua de mesa para el público en general sin representar riesgos.
 Por otro lado para el agua Vida la situación es distinta ya que los valores
de concentración ascienden a 73.594 mg/L este contenido resulta por
encima de lo establecido por la OMS y EPA; significando un peligro
potencial para el mercado.
 No se analizan los valores para el agua Bells, puesto que la concentración
reconocida por el espectrofotómetro sale fuera de los rangos establecidos
por la curva de calibración. Se recomienda realizar la dilución de esta
muestra, es decir emplear un menor valor de muestra para obtener
concentraciones dentro de los rangos.
 Realizando comparaciones con el INTI (Instituto Nacional de Tecnología
Industrial) – Buenos Aires; para su programa pruebas de desempeño de
productos/ Agua de mesa (2011) podemos observar que la mayoría de
sus agua de mesa cumplen con el límite establecido de 45 mg/L siendo
solo una marca la que los incumple. La situación en nuestro país resulta
parecida puesto que existen marcas sin sobrepasan los valores
establecidos.
 Sí se considera que el adulto promedio pesa alrededor de 70 kg, según el
IDA consumir 1 litro de agua San Mateo representa el 0.5 % de la ingesta
máxima de nitratos. Por otro lado 1 litro de agua Vida representa el 28.4
% de la ingesta máxima de nitratos.
 BIBLIOGRAFÌA

1. Canter, L.W. (1997) Nitrates in groundwater. University of Oklahoma,

Norman, Oklakoma. Lewis Publishers, Boca Raton.

2. Metcalf & Eddy, Inc (1998) Ingeniería de aguas residuales tratamiento,

vertido y reutilización. 3a Edition. McGraw- Hill- Madrid, pp 1485.

3. Pulido- Bosch, A., Bensi, S., Molina, L., Vallejos, A., Calaforma, J.M.,
Pulido- Leboeuf, P. (2000) Nitrates as indicators of aquifer
interconnection. Application to the campo de Dalias (SE – Spain).
Environmental Geology 39(7), 791-799.

4. Stumm, W. and Morgan, J.J. (1981) Aquatic Chemistry: An Introduction

Emphasizing Chemical Equilibria in Natural Waters. 2nd Edition, John
Wiley & Sons Ltd., New York.