Universidade Federal do Pará

Instituto de Ciências Biológicas

Faculdade de Biotecnologia e Engenharia de Bioprocessos

ROTEIRO PRÁTICO DE BIOLOGIA CELULAR E MOLECULAR Nº 4

Nome: Matrícula:
Prof. Data _____/_____/________

Tema: Extração de DNA de Cebola

O principal papel do DNA é armazenar as informações necessárias para a construção

de RNA e das proteínas. O DNA se encontra no núcleo das células de um organismo, no interior dos
cromossomos. Os segmentos de DNA que contêm a informação genética são denominados genes, o
resto da sequência tem importância estrutural ou está envolvido na regulação do uso da informação
genética.

Materiais:
Álcool absoluto gelado
Cebola, Morango ou Fígado em pedaços
Solução de lise: 4 colheres de sopa de detergente incolor (ou Dodecil Sulfato de Sódio), 1 colher de
chá de sal (cloreto de sódio), 74 mL de água
Papel de filtro
Gelo em cubos
2 béqueres pequenos (50 mL) e 1 Becker de 500 ou 1000 mL
Funil
Tubos Falcon ou tubos de ensaio de vidro (preferível)
Bastão de vidro
Estilete ou faca de cozinha
Palitos de Sorvete ou de dente.
Banho-maria (~60 oC)

Procedimentos:
Em um Becker esmague o material em pedaços bem pequenos
Coloque no béquer pequeno 4 colheres de chá do material esmagado
Adicione 2 colheres de sopa de solução de lise
Bata tudo ao liquidificador ou misture bem (com morango e fígado não é preciso usar o
liquidificador)
Complete com a solução de lise até 25 mL no béquer
Coe a solução, com o auxílio do funil e do papel de filtro (opcional)
Coloque o filtrado/peneirado em tubo Falcon ou Tubo de Vidro (este último é melhor para
visualização)
Tampe o tubo e o coloque em no banho-maria ~60 oC por 15 minutos
Em seguida, coloque o tubo no béquer com gelo e água, durante 5 minutos.
Decorrido este tempo, adicione um volume igual de álcool gelado ao tubo (misture vagarosamente).
E aguardar cerca de 3 minutos para o DNA começar a precipitar na interfase.
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Faculdade de Biotecnologia e Engenharia de Bioprocessos

Observe o aparecimento de duas fases. A solução aquosa contendo o DNA ficará na fase que está
embaixo.
Questões:
a. Explique sucintamente o porquê de todos os procedimentos e materiais utilizados no
experimento.
b. Por que você não pode ver a dupla-hélice do DNA ao microscópio?
c. O esquema abaixo representa as etapas da extração do DNA da cebola que
você realizou no laboratório. Use uma legenda explicativa para cada uma das figuras