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y Naturales
Laboratorio V
Guía de Trabajos Prácticos
003623 Profesor:
Dr. Alberto Postigo
UNIVERSIDAD DE BELGRANO
FACULTAD DE CIENCIAS EXACTAS Y NATURALES
CARRERAS LICENCIATURA EN CIENCIAS QUIMICAS
LICENCIATURA EN TECNOLOGI DE ALIMENTOS
LABORATORIO V
1
INDICE
Guía de Trabajos Prácticos
2
OBJETIVOS GENERALES
TEMARIO
Unidada 1: Repaso de Resonancia Magnética Nuclear, espectrometria de masas y
espectroscopia infrarroja.
Unidad 2:Análisis Elemental de Compuestos Orgánicos
Unidad 3 Leche. Densidad y extracto seco de leche fluida. Acidez. Contenido
graso. P y detección de adulteraciones . Leche en polvo. Humedad y cenizas.
Técnicas para la utilización de la mufla.
Unidad 4: Grupos Funcionales Halogenuros Orgánicos y Alquenos
Unidad 5: Grupos Funcionales Alcohol, Amina, Carbonilo
Unidad 6: Analisis de Harinas. Humedad por secado a peso constante. Acidez y
pH. Cenizas, incineración con mechero y calcinación en mufla. Contenido de
grasas por extracción continua. Extractor de Soxhlet.
Unidad 7: Grupos Funcionales Acido, Ester, Amida
Unidad 8: Análisis de Jugos y Jarabes. Acidez por titulación potenciométrica.
Determinación del punto final por métodos gráficos. Contenido de sacarosa en
jarabes por densidad. Grados Brix.
Unidad 9: Solventes no Miscibles con Agua. Separación de mezclas
Unidad 10 Carnes. Determinación de proteínas por el método de Kjeldhal.
3
Bibliografía
Guía de Trabajos Prácticos de Bromatología 2004, Universidad de Belgrano. Dr.
Alberto Postigo
Scalzo, R.L.; Iannoccari, T.; Summa, C.; Morelli, R.; Rapisarda, P. Food
Chemistry 85, (2004), 41-47
4
Laboratorio No 1
APLICACIÓN DE LA ESPECTROSCOPIA
INFRARROJA, DE RESONANCIA MAGNETICA
NUCLEAR, y ESPECTROMETRIA DE MASAS
Objetivo general
Estudiar los fundamentos y aplicaciones de las técnicas de Espectroscopia de
Infrarrojo (IR) y de Resonancia Magnética Nuclear (RMN).
Objetivos específicos
Realizar ejercitación concerniente a los fundamentos y aplicaciones de las
técnicas espectroscópicas IR y RMN. Ejercitar estos conceptos con problemas sencillos.
Utilizar la información que proporcionan los espectros en relación a la estructura de
sustancias químicas. Análisis de espectros de IR y de RMN de 1H.
Conceptos
Espectro electromagnético.
Interacción materia-energía
Modos vibracionales
Fenómeno de resonancia
Corrimiento químico: apantallamiento, desapantallamiento
Acoplamiento: multiplicidad
Integración
Interpretación de espectros de IR y RMN de 1H de moléculas simples
Introducción
La estructura de los compuestos de origen natural o de síntesis, fueron, hasta la
mitad del siglo pasado, determinadas por reacciones químicas de degradación, de
reconocimiento de presencia de grupos funcionales. Desde la segunda mitad del siglo
XX, estas técnicas fueron suplementadas con métodos instrumentales que en su mayoría
son técnicas no destructivas y requieren muy poca cantidad de muestra. Las más
destacadas son la espectroscopia de ultravioleta-visible (UV-vis), espectroscopia de
infrarrojo (IR), espectroscopia de resonancia magnética nuclear (RMN), y
espectrometría de masas (EM). A pesar de ser todas distintas, todas ellas están basadas
5
en la absorción de energía por una molécula y examinan cómo ésta responde a esa
absorción de energía.
Principios generales
Cuando la radiación electromagnética (comunmente del intervalo de frecuencias
5000-200 cm-1) interactua con la materia origina transiciones vibracionales y
rotacionales. Estas transiciones proporcionan espectros de absorción que aportan
elementos importantes para el conocimiento detallado de la naturaleza de las moléculas y
constituyen una herramienta muy útil en el análisis cualitativo y cuantitativo de especies.
mi mz
6
(2) Ev = ( v + ½ ) h/2π
πω v = 0, 1 , 2 , .....
donde mA y mB son las masas del átomo A y del átomo B respectivamente que forman el
enlace. Si la masa de uno de los átomos es mucho mayor que la masa del otro, por
ejemplo ma >> mB, el átomo A permanecerá “quieto” y el que se “mueve” es el átomo B.
Dicho de otra manera, m ≈ mB por lo que el nivel de energía estará determinado por la
masa del átomo mas liviano.
(3) π(k/m)1/2
Eo = h/4π
7
La frecuencia (cm-1) correspondiente al fotón que originará la transición entre dos
niveles vibracionales, se obtiene de la ecuación 4:
H-F HF 9,7
H-Cl HCl 4,8
H-Br HBr 4,1
H-I HI 3,2
H-O H2O 7,8
H-S H2S 4,3
H-C CH3X 4,7 – 5,0
H-C C2H4 5,1
H-C C2H2 5,9
Cl-C CH3Cl 3,4
C-C ....... 4,5 – 5,6
C=C ....... 9,5 – 9,9
C=C ....... 15,6 – 17,0
N-N ....... 3,5 – 5,5
N=N ....... 13,0 – 13,5
N=N ....... 22,9
C-O ....... 5,0 –5,8
C=O ....... 11,8 –13,4
8
Se denomina transición fundamental, si el cambio en el número cuántico
vibracional es ∆v = 1 (Ejemplo: vo v1) y sobretonos si ∆v es 2 ( 1er. sobretono), si ∆v
es 3 ( 2do. sobretono), etc. Si υ , es la frecuencia de la transición fundamental, la del 1er.
sobretono será 2 υ, la del 2do. sobretono 3 υ (considerando al oscilador como
armónico, Fig. 2a).
Como regla de selección, sólo están permitidas (son altamente probables), las
transiciones fundamentales, y están prohibidas (baja probabilidad) las transiciones
correspondientes a los sobretonos.
a) Elasticidad del enlace (k) y masa relativa (m) relacionadas por la ecuación 5.
b) Efectos eléctricos (campo externo), en este caso afecta a la magnitud de la absorción.
y otros como:
c) Naturaleza y tamaño de átomos vecinos
d) Enlace hidrógeno
e) Cambios de fase
f) Efectos estéricos
b) Efectos eléctricos:
Para ejemplificar, se analizará lo que ocurre en la vibración de una molécula polar
diatómica como la molécula de HCl (µ ≠ 0 ; µ = d. q ). Cuando la molécula vibra, el
enlace se enlonga y se comprime modificándose la distancia entre los núcleos, por lo
tanto se modificará el momento dipolar durante la vibración entre valores de µ
alternantes, esto hace que el campo eléctrico creado por δ de cargas en la molécula
(campo eléctrico interno) oscile a una cierta frecuencia. Si la frecuencia de la radiación
electromagnética (campo eléctrico externo) que incide sobre la molécula es igual a la del
campo eléctrico alternante producido por la vibración de la molécula, se absorberá
radiación y el modo de vibración se excita. Caso contrario, no se absorberá radiación
infrarroja si en el modo de vibración, permanece inalterado el momento dipolar. (Ej. En
la vibración de moléculas diatómicas homonucleares, como Cl2 , N2, etc., µ = 0 en
cualquier etapa de la vibración).
Cuanto mayor es el cambio en el momento dipolar durante la vibración, mayor
será la absorción de la radiación electromagnética. Esto último está relacionado con la
9
intensidad de las bandas de absorción, clasificándolas en muy fuertes, fuertes, medias y
débiles.
10
antisimétrica -1
simétrica 1596 cm
-1 -1
3652 cm 3756 cm
Fig. 3
b) Molécula triatómica lineal, CO2.
3 x 3 – 5 = 4 modos de vibración
De éstos, 2 modos son de tensión (1 simétrico y 1 antisimétrico) y los otros 2 modos
de deformación en diferentes planos, equivalentes en energía. El modo de tensión
simétrico, no conduce a una variación del momento dipolar durante la vibración, por lo
tanto no se observará absorción en el espectro IR a dicha frecuencia, no es activo en IR;
sí será activo en IR el modo de tensión antisimétrico. Por lo tanto, en el espectro IR en el
intervalo 4000-600 cm-1, se observarán únicamente 2 bandas, una correspondiente a la
excitación del modo de tensión antisimétrico y la otra, correspondiente a la excitación de
los 2 modos de deformación de igual energía con frecuencias como las indicadas en la
simétrica antisimétrica
1340 cm-1 2350 cm-1
-1 -1
666 cm 666 cm
Fig. 4. Fig. 4
11
Fig. 5: Espectro IR del CO2.
Se dan a continuación, otros ejemplos de modos de tensión y deformación del
grupo metileno y del grupo metilo.
Modos de vibración del grupo metileno Modos de vibración del grupo
metilo
antisimétrica simétrica
~2926 cm-1 ~2853 cm-1
"TENSION": C-H
simétrica antisimétrica
-1 -1
υ = 2960 cm υ = 2870 cm
-1 -1
~1465 cm 1350-1150 cm
DEFORMACIONES : "tijereteo"
-1 -1
υ = 1465 cm υ = 1375 cm
(deformación (deformación
asimétrica) ambas simétrica)
-1 -1
1350-1150 cm ~720 cm
Fig. 6
12
La banda correspondiente al modo de deformación “tijereteo” del metileno es la
más intensa, al igual que la de rotación, por lo tanto estas dos bandas de absorción (de
frecuencias 1465 y 720 cm-1 respectivamente) se observan en los espectros de los alcanos
y compuestos relacionados que poseen varios grupos metilenos. (compare estas
frecuencias, en los espectros de n-butano, i-butano y cloruro de t-butilo).
Con relación a los diferentes modos de vibración de deformación del grupo metilo, la
banda más intensa es la de frecuencia 1375 cm-1 y es la mas sensible a la sustitución de
átomos de H por elementos mas electronegativos (compare la absorción de las bandas a
este valor de frecuencia en los espectros de n-butano y bromuro de n-butilo).
13
II) Resonancia Magnética Nuclear
ν movimiento = ν fotón
Isótopo Z N A I
neutrón 0 1 1 1/2
1
H (protón) 1 0 1 1/2
2
H (tritio) 1 1 2 1/2
13
C 6 7 13 1/2
35
Cl 17 18 35 3/2
Tanto los electrones, cuanto los protones son partículas cargadas que giran sobre
sus ejes y tienen una propiedad llamada momento angular de espín además de dar lugar
14
a un momento magnético (µ) que se representa por un vector. El numero cuántico de
espín se representa con I.
1- Los núcleos con Z par y N par (A = par), tienen µ = 0 porque el espín nuclear I = 0,
(ver fórmula arriba). Estos núcleos son magnéticamente inactivos y son invisibles a la
RMN.
2- Los núcleos con Z impar y N impar (A = par) poseen µ ≠ 0, con I igual a un número
entero. Ej.: 10B (I = 3), 50V (I = 6), 14N (I = 1).
3- Los núcleos con Z par y N impar o viceversa (A = impar), presentan espín magnético
que I que es un múltiplo entero de ½, Ej.: 1H (I = ½), 17O (I = ½).
15
u
u
B0
Bo
torque
movimiento de
precesión µ
0
núcleo
(7) ω = γ B0
16
(8) ν = γ B0/2π
π
Recordemos que cada frecuencia lleva asociada una cantidad de energía, ¿en qué
se emplea la energía absorbida por estos núcleos?
Siendo que existen sólo dos estados de espín, esta energía se utiliza para producir una
inversión del mismo, es decir, desde el estado de menor energía (m = + ½) al de mayor
energía (m = - ½). Puesto que el fenómeno inverso es igualmente probable (de m = - ½ a
m = + ½) es necesario que exista una diferencia de población a favor del estado de menor
energía, es así que el fenómeno se puede observar, sin embargo dado que la diferencia de
población es muy pequeña, esta técnica es mucho menos sensible que otras
espectroscopías como lo son la de UV-vis e IR.
B0 m = +1/2
m = -1/2
17
por electrones. En el caso contrario, se dice que el núcleo está desapantallado o
desprotegido.
ν = γB0/2π
π y siendo Bef = B0 - Bi ; reemplazando:
(9) ν = γBef/2π
π = γ(B0-Bi)/2π
π
Note que con el cambio de Bef cambia la frecuencia de resonancia del núcleo. Los
núcleos protegidos absorberán a ν menores y los desprotegidos a ν mayores.
La escala
Como que la frecuencia a la que aparece cada señal depende de la potencia del
campo B0 aplicado (ver fórmula 10), para independizarnos de esta variación y poder
comparar espectros adquiridos en distintos espectrómetros, se define una escala relativa
de corrimientos químicos y se expresa como δ (delta) o ppm (partes por millón). El
corrimiento químico se define como la frecuencia a la que aparece cada señal relativa a
una que se fija como 0, dividida por la frecuencia del equipo y multiplicada por 106. El
corrimiento químico de los metilos del tetrametilsilano (TMS) se toman como 0 en la
escala de espectros de protones. La señal del TMS aparece a la derecha del trazado del
espectro, mientras que la mayoría de las señales de los compuestos orgánicos aparecen
hacia la izquierda, es decir a δ mayores (ver figura).
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La multiplicidad
Como se ve en la figura anterior, las señales no son picos simples en todos los
casos, sino que se encuentran divididas en patrones simétricos (multipletes) que consisten
en 2 ó más líneas. El número de líneas para una señal se puede predecir por la expresión:
n + 1, donde n es el número de protones vecinos al protón que origina la señal que se está
observando.
Esta división de las señales surge del “acoplamiento” de los espines de los núcleos
vecinos. El estado de espín de un núcleo se transmite a través de los electrones de los
enlaces (máximo hasta 3 enlaces) y la combinación de los diferentes estados de espín de
los núcleos acoplados, origina la multiplicidad. De este modo es sencillo conocer el
número de núcleos vecinos a determinado protón que origina una señal múltiple.
Integración
El área debajo de cada señal es proporcional al número de moles de hidrógeno que
representa. Asignando un valor a una de las señales del espectro (ya sea porque se conoce
el número de protones que representa o bien se lo coloca arbitrariamente) el resto se
obtiene por comparación con ésta. Los instrumentos integran automáticamente las señales
19
imprimiendo el valor del área o bien trazando una línea cuya altura relativa indica el área
debajo del pico.
Resumiendo, se puede decir que de un espectro de RMN de 1H se puede obtener
información sobre el entorno químico de los protones por el corrimiento químico, a la vez
que se puede calcular el número de protones vecinos a un determinado núcleo, como así
también calcular el número de protones relativos de la molécula.
Introducción:
La espectrometría de masas es una técnica que permite medir la masa y como
consecuencia, el peso molecular de una molécula. La espectrometría de masas de alta
resolución puede dar una fórmula molecular exacta. Además es posible obtener
información sobre la estructura de la molécula, determinando la masa de los fragmentos
que se producen y reconstruyendo la molécula.
La espectrometría de masas difiere de los otros métodos espectroscópicos
estudiados en un aspecto fundamental, que es que no requiere de la absorción de una
radiación electromagnética , y además que es un método destructivo.
Cuando se hace pasar un haz de electrones de energía superior al potencial de
ionización a través de la muestra, un compuesto orgánico en estado de vapor , ocurre la
ionización de las moléculas, las cuales expulsan un electrón, formándose un radical
catión (ec.1)
M + e- ¨¨[M]+. + 2e-
Molécula radical catión (ec.1)
20
detector a través de una rendija estrecha , donde son contados (detección). La calibración
adecuada del instrumento permite medir la relación m/z y por tanto la masa molecular de
cada ion que alcanza el detector. Se emplean varios métodos para ionizar las moléculas
(impacto electrónico, ionización química, FAB, electrospray, MALDI)
21
Ejemplo:
Espectro de masa y fragmentaciones de N,N-
dietilmetilamina
22
Actividad Teórico-Práctica
23
c) 1500-1000 cm-1
d) 1000-600 cm-1
Prediga, utilizando los valores de frecuencias de tablas, cuál o cuáles de los siguientes
modos de vibración podrán originar absorciones en las diferentes zonas.
Tensión Deformación
O-H O-H
N-H N-H
C-H C-H
C-C
C=C
C≡C
C-N
C-Cl
C-Br
C-I
24
2
10) ¿Cuál o cuales serán las diferencias en los espectros de infrarrojo entre los
compuestos indicados en cada par ?
a) CH3CH2CH2N(CH3)2 y CH3CH2CH2NH2
c) CH3CH2C(O)CH3 y CH3CH2CO2CH3
b) CH3CH2CH2CO2H y CH3CH2CO2CH3
12) a) ¿Tienen alguna importancia para el fenómeno de RMN el número atómico (Z) y el
número másico (A)? ¿Por qué?
b) ¿Cuáles de los siguientes núcleos tienen número cuántico de spin I > 0?
1
H1; 18O8; 14N7; 13C6; 2H1; 17O8.
25
15) El orden de electronegatividad del carbono es sp3 < sp2 < sp, sin embargo el
corrimiento químico de un protón unido a un C sp2 es mayor que el de un protón unido a
un C sp.¿Cómo podría explicar este fenómeno?
17) En cada uno de los siguientes grupos de compuestos, indique cuál de los protones
subrayados absorberá a valores de δ menores:
a) CH3CH2CH2Cl, CH3CHClCH3, CH2ClCH2CH3
b) CH3CH2Cl, CH3CHCl2,
c) C6H12 (ciclohexano), C6H6 (benceno) (Lea pregunta 15)
d) CH3CH=CH2, CH3CH2CHO
18) ¿Cuántos tipos de protones equivalentes se encuentran en cada uno de las siguientes
estructuras? ¿Cuáles deben ser las áreas relativas, bajo las respectivas señales de RMN-
1
H?
a) (CH3)2CHCl b) CH3CH2OCH2CH3
20) Cuáles son los elementos en el espectro de RMN-1H que le permiten obtener la
siguiente información:
a) Tipos de hidrógeno en una molécula.
b) Cantidad relativa de hidrógenos que producen una dada señal.
c) Número de hidrógenos vecinos.
21) Dibuje el espectro de RMN-1H que cabe esperar para el 1,1-dicloroetano. Incluya
cualitativamente: desplazamientos químicos esperados, patrones de acoplamiento y áreas
apropiadas debajo de las señales.
26
22) Asocie cada uno de los espectros de RMN-1H de las figuras I, II, III con los
compuestos siguientes:
a) CH3CO2CH2CH3 b) CH3CH2CH2NO2 c) CH3CH2I
Apéndice 1:
I
II
III
27
IV
Apéndice 2
28
Espectro IR del H2O
25)Predecir los valores m/z y las estructuras de los fragmentos mas abundantes que se
observan en los espectros de masa de los siguientes compuestos:
a.-2-metilpentano
b.-3-metil-2-hexeno
c.-4-metil-2-pentanol
26)Explique como detecta la presencia en una molécula de átomos de Cl, Br, y I. Ilustre
con CH3X.
27)Escriba ecuaciones que incluyan las fórmulas con símbolos para cada fragmneto para
explicar las siguientes afirmaciones:
a.-Todos los alcoholes primarios RCH2CH2OH presentan en su espectro de masas un
fragmento prominente con m/z=31
b.-Todos los hidrocarburos del tipo C6H5CH2R presentan un fragmento prominente con
m/z=91
c.-Los alquenos del tipo H2C=CHCH2R presentan un fragmento prominente con m/z=41
29
d.-Los aldehídos muestran picos intensos a M-1 y m/z=29
28)Teniendo en cuenta losm picos mayores en los espectros de masas de los siguientes
compuestos, escriba las ecuaciones correspondientes a su formacion
a.-CH3OCH2CH2CH3: m/z=74, 59, 45, 31
b.-CH3CH2NHCH2CH2CH3: m/z=87, 72, 58, 44
c.-CH3CH2C(O)OCH3: m/z=88, 59, 57
B.-
30
C.-
31
30)Analice los siguientes espectros de masas y asigne estructuras (C6H10O)
A
32
C.-C12H26
D.-C12H26
33
34
TRABAJO PRACTICO 2: IDENTIFICACION DE
SUSTANCIAS ORGANICAS DESCONOCIDAS.
GRUPOS DE SOLUBILIDAD
Sin embargo, si el pH del medio es menor que el pKa, la mayor parte se encuentra
sin disociar, o sea, en la forma insoluble. Como el pKa de los ácidos carboxílicos (4-5)
es bastante menor que el de los fenoles (9-10), los primeros serán solubles en soluciòn de
bicarbonato de sodio, mientras que los últimos serán insolubles en este medio.
Hay que recordar que debido a la presencia de sustituyentes electronegativos (NO2,
halògenos), el pKa de un fenol puede ser lo suficientemente bajo como para ser soluble
en soluciòn de bicarbonato.
35
En solventes fuertemente ácidos, como el ácido sulfúrico concentrado, el oxígeno
de algunos grupos funcionales (alcoholes, éteres, ésteres) adicionan un protòn, dando
lugar a un ácido conjugado soluble.
La solubilidad de las mismas sustancias en un ácido mas débil, como el ácido
fosfòrico, dependerá del número de átomos de carbono de dicha sustancia, así por
ejemplo, las sustancias de menos de 9 átomos de carbono, serán solubles en ese medio,
mientras que los homòlogos superiores serán insolubles en ese medio.
Por lo tanto la solubilidad en ácido sulfúrico y fosfòrico nos da una idea de la presencia
de un grupo oxigenado y del tamaño de la molécula.
PROCEDIMIENTO:
Todos los ensayos se realizan en forma independiente sobre la muestra original. Para
cada ensayo se utilizan 30 mg de la sustancia bien molida (o 0,1 mL de líquido) y 1 mL
de solvente. Los ensayos se realizan a temperatura ambiente, agitando la muestra durante
30 minutos previos a la observaciòn.
Solubilidad en agua:
Se agregan gotas de agua hasta completar 1 mL, agitando bien antes de cada agregado.
Si la sustancia no se disuelve completamente en estas condiciones, se la considera
insoluble. Cuando se trate de un líquido, se debe agregar el mismo sobre 1 mL de agua y
agitar.
En el caso de sustancias solubles en agua, es interesante ensayar la reacciòn de la
soluciòn frente al papel de tornasol, lo cual nos puede indicar la presencia de grupos
ácidos (pKa < 8) o grupos básicos (pKb > 9).
Solubilidad en éter:
Se utiliza el mismo procedimiento que para ensayar la solubilidad en agua.
Si la sustancia es insoluble en éter, puede tratarse de una sal. Para investigar su presencia
se coloca una parte de la soluciòn acuosa en dos tubitos de ensayo y se acidifica uno de
ellos con HCl 5%, y el otro se basifica con una soluciòn de NaOH 5%.
Las sales de las aminas pueden dar turbidez y olor característico a las aminas en medio
alcalino.
Las sales de ácido sulfònicos o de amonio cuaternarias no presentan ningún cambio en
este ensayo.
36
Solublidad en bicarbonato de sodio 5%:
Si la sustancia es soluble en NaOH 5%, se ensaya su solubilidad en NaHCO3 5%. Debe
observarse si hay desprendimiento de anhídrido carbònico, lo cual puede ocurrir
inmediatamente (ácidos fuertes) o luego de un tiempo (algunos aminoácidos). Si hay
duda en la interpretaciòn de los resultados, puede operarse como se explicò para la
solubilidad con hidròxido de sodio, decantando y acidificando.
Grupo I:
Miembros mas pequeños de las series homòlogas de alcoholes, aldehídos, cetonas, ácidos
carboxílicos, ésteres, fenoles, anhídridos aminas, nitrilos, polihidroxifenoles, oximas y
lactonas.
Grupo II:
Acidos polibásicos e hidroxiácidos, glicoles, polihidroxialdehídos y polihidroxicetonas
(azúcares), algunas aminas y aminoácidos, di y poliaminas, aminoalcoholes, ácidos
sulfònicos, sales, haluros de acilo, semicarbacidas y semicarbazonas.
Grupo IIIA:
Acidos carboxílicos (los ácidos grasos dan jabones que forman dispersiones coloidales),
ácidos sulfònicos, ácidos sulfínicos, fenoles y tiofenoles con sustituyentes
electronegativos, ácidos aminosulfònicos y sulfatos de bases débiles.
Grupo IIIB:
Fenoles, α-cetoésteres y algunas dicetonas, imidas, nitrocompuestos alifáticos primarios
y secundarios, oximas, algunos aminoácidos y sulfonamidas, mercaptanos, tiofenoles, y
algunas amidas con sustituyentes electronegativos.
Grupo IVA:
Aminas alifáticas primarias , secundarias y terciarias.
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Grupo IVB:
Aminas aromáticas primarias, alquilarilaminas, algunas alquilarilaminas terciarias,
hidracinas, piranos, antocianinas, acetales que se hidrolicen fácilmente.
Grupo VA:
Alcoholes, aldehídos, ésteres, metilcetonas, y cetonas cíclicas todas de hasta
aproximadamente 9 átomos de carbono. Eteres de hasta aproximadamente 7 átomos de
carbono.
Grupo VB:
Hidrocarburos no saturados, algunos hidrocarburos aromáticos con sustituyentes dadores
de electrones. Alcoholes, aldehídos, cetonas, ésteres, de mas de 9 átomos de carbono.
Eteres (excepto diarílicos ) de mas de 7 átomos de carbono. Acetales, lactonas, haluros
de acilo.
Grupo VI:
Hidrocarburos alifáticos saturados. Hidrocarburos cíclicos saturados. Hidrocarburos
aromáticos. Derivados halogenados de las sustancias nombradas. Diariléteres.
Grupo VII:
Nitrocompuestos terciarios. Amidas. Nitrilos. Aminas muy poco básicas (con
sustituyentes electronegativos). Di o triarilaminas. Nitroso, azo, o hidrazocompuestos.
Sulfonas, sulfonamidas de aminas secundarias. Sulfuros y sulfatos.
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ESQUEMAS DE ENSAYOS DE GRUPOS DE SOLUBILIDAD
SUSTANCIA
AGUA
INSOLUBLE SOLUBLE
eter
NaOH, 5%
INSOLUBLE SOLUBLE
INSOLUBLE SOLUBLE
Grupo II Grupo I
NaHCO3, 5%
SOLUBLE
INSOLUBLE
ACOH/ACONa, pH=5,5
INSOLUBLE SOLUBLE
Grupo IVB Grupo IVA
Sin N y/ S
Con N y/o S
Grupo VII H2SO4 CONC
SOLUBLE INSOLUBLE
H3PO4 85% Grupo VI
SOLUBLE
INSOLUBLE
GrupoVB Grupo VA
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Otros Esquemas de Clasificaciòn
Para la determinaciòn del grupo al que pertenece la sustancia, se utilizan cinco mezclas
indicadoras.
Método Cromatográfico:
Este método consiste en observar el comportamiento cromatográfico de la sustancia en
ccd frente a una serie de solventes de desarrollo.
El fundamento de este método es semejante al de los grupos de solubilidad ya que utiliza
los mismos factores que en ese esquema. Aunque la clasificaciòn no es tan completa,
resulta útil por la cantidad de sustancia que se utiliza, ya que con 2 mg de muestra pueden
realizarse todos los ensayos. Utilizando distintos reveladores, puede obtenerse
informaciòn de los grupos funcionales presentes.
40
TRABAJO PRACTICO 3. ANALISIS DE LECHE
OBJETIVOS
.-Erlenmeyer de 100 mL
.-Bureta de 2 mL graduada al 0.1 mL
.-Pipeta aforada de 25 mL
.-Balanza analítica de 0,1 mg de precisión
.-Estufa a 102°°C
.-Baño de agua
.-Capsulas de 6 cm de diámetro y 2-3 cm de profundidad
.-Pipeta graduada de 10 mL
.-Arena lavada
.-Desecador con sílica gel e indicador de humedad
.-Frascos con tapa de cierre hermético
.-Crisoles
.-Mufla
.-Pinzas para crisoles
.-telas metálicas, tripodes, vidrios de reloj, termómetros
41
.-densímetros
.-pHmetro
.-Papel de filtro
.-Embudo, Ampolla de extracción, Probeta de 25 mL, titulador de enrase
REACTIVOS NECESARIOS
FUNDAMENTOS TEORICOS
42
El Código Almentariuo Argentino (CAA) fija en el Art. 555 parámetros para la
leche destinada al consumo como tal. Entre otros se establece que debe contener no
menos de 8.2 g / 100 g de extracto seco no graso y 3,0 g / 100 g de grasa propia. Se exige
el proceso de pasteurización. La acidez que se expresa en términos de ácido láctico, debe
estar entre 0,13 y 0,18 g / 100 mL. Estas concentraciones se conocen como 13 y 18
grados Dornic respectivamente.
LECHE FLUIDA
Recolección y Preparación de la Muestra. Es conveniente tomar mas de una unidad
disponible para la venta, mezclar su contenido trasvasándolo repetidamente, y agitar
durante 30 segundos. Si se ha formado grasa sobrenadante, calentar la leche a 30°C a
baño de Maria, homogeneizar y enfriar a 20°C. Toda muestra debe ser homogénea antes
de iniciar el análisis.
Grado de Frescura. Una leche normal de buena calidad y fresca no sufre ninguna
alteración, al ser mezclada con igual volumen de alcohol 70 % v/v. Mientras que si ha
sufrido cierta acidificación o es anormal (mamitis o calostro) precipita, formando
pequeños o grandes grumos de caseína. La leche que precipita debe ser decomisada, no
es apta para la elaboración de productos lácteos o el consumo directo, ni para someterla a
tratamiento térmico (pasterización, esterilización).
43
El pH. La leche de vaca tiene una reacción débilmente ácida, con pH comprendido entre
6,53 y 6,6 como consecuencia de la presencia de aniones fosfato y citrato y
fundamentalmente por la caseína. No es un valor constante, sino que varía en el
transcurso del ciclo de la lactancia y por la alimentación. La variación es pequeña y se
pueden considerar como anormales valores inferiores a 6,5 o superiores a 6,9. Del valor
del pH depende la estabilidad de la caseína.
Acidez Total. Se determina por titulación directa de la leche con hidróxido de sodio 0,1
M. Se expresa en gramos de ácido láctico por cada 100 mL de leche o en grados Dornic
. Las exigencias del CAA son: 0,13 a 0,18 g/100 mL de ácido láctico
(CH3CHOHCOOH, de PM 90.08). Expresados en grados Dornic los límites son 13 a 18
Dornic.
Determinación del extracto seco no graso. Conocidos extracto seco total y contenido de
materia grasa se puede calcular el extracto seco no graso para compararlo con los valores
que fija el CAA para los distintos tipos de leches.
Extracto seco no graso (g / 100 g)=Extracto seco total - materia grasa. El
extracto seco total y la materia grasa se deben exprezar en g / 100 g de leche
Contenido de Grasa. Permite verificar que el producto se ajusta a los requisitos legales.
Estos dependen de la clasificación del producto: leche común o descremada.
44
vigorosamente. Cuando se deja reposar la mezcla se produce la separación de dos capas
líquidas. En la capa superior de solventes orgánicos, está disuelta la grasa de la leche y
en la capa inferior acuosa, los componentes no grasos de la leche.
Se decanta y transfiere la capa eterea a un vaso de precipitados previamente tarado. La
evaporación del solvente deja en el vaso el residuo de la grasa presente en la muestra
analizada. Por pesada y diferencia se determina el porcentaje de grasa.
LECHE EN POLVO
Este producto se obtiene desecando la leche normalizada y pre-concentrada por
pulverización o mediante el empleo de tambores o rodillos calientes.
45
Se especifican para la leche entera en polvo (leche entera desecada o leche entera
deshidratada) los siguienets parámetros:
Humedad máximo 3,5% p/p
Cenizas máximo 7,0% p/p
Lípidos totales mínimo 26,0% p/p
Proteínas totales mínimo 25,0%p/p
Tareas a desarrollar
DENSIDAD
Procedimiento
.-Caliente la leche en un baño de agua a 40ºC, homogeinice luego enfríe a 20ºC.
.-Vierta la muestra en una probeta de 50 mL evitando formar espuma controle la
temperatura.
.-Sumerja el densímetro rellene la probeta con leche si fuera necesario. El densímetro
deberá flotar libremente sin tocar las paredes de la probeta.
.-Efectúe la lectura en el borde superior del menisco. Si se emplea un densímero común
deberá leer la densidad hasta la milésima. Si se empleó un lactodensímero que indica
lecturas entre 25 - 35, se aplica la siguiente fórmula de conversión
46
donde densidad = densidad a 15ºC
n = lectura del lactodensímetro a 15ºC
Ejemplo de conversión:
Lectura del lactodensímetro a 20ºC = 34, corresponde a 1.034 g/mL a 20ºC.
Conversión a densidad 15ºC:
.-Busque en el encabezamiento de la tabla el valor encontrado (34)
.-Busque la intersección con la fila que corresponde a 20ºC (35.3)
.-Utilice este valor para determinar la densidad de la leche a 15ºC (1.0+0.0353=1.0353)
La densidad a 20ºC (1.034) se convirtió , a 15ºC, en un valor superior (1.0353) pues la
misma leche será mas densa a una temperatura menor.
25 26 27 28 29 30 31 32 33 34
10 24.2 25.2 26.2 27.1 28.1 29 30 31 32 32.9
11 24.3 25.3 26.3 27.2 28.2 29.2 30.2 31.2 32.2 33.1
12 24.5 25.5 26.5 27.4 28.4 29.4 30.4 31.4 32.4 33.3
13 24.6 25.6 26.6 27.6 28.6 29.6 30.6 31.6 32.6 33.5
47
14 24.8 25.8 26.8 27.8 28.8 29.8 30.8 31.8 32.8 33.8
15 25 26 27 28 29 30 31 32 33 34
16 25.2 26.2 27.2 28.2 29.2 30.2 31.2 32.2 33.2 34.2
17 25.4 26.4 27.4 28.4 29.4 30.4 31.0 32.4 33.4 34.4
18 25.6 26.6 27.6 28.6 29.6 30.6 31.7 32.7 33.7 34.7
19 25.8 26.9 27.9 28.9 30.1 30.9 32 33 34 35
20 26 27.1 28.2 29.2 30.2 31.2 32.2 33.3 34.3 35.3
21 26.2 27.3 28.4 29.4 30.4 31.4 32.5 33.6 34.6 35.6
22 26.4 27.5 28.2 29.6 30.6 31.6 32.7 33.8 34.9 35.9
23 26.6 27.7 28.8 29.9 30.9 31.9 33 34.1 35.2 36.2
24 26.8 27.9 29 30.1 31.2 32.2 33.3 34.4 35.5 36.5
26 27.1 28.2 29.3 30.4 31.5 32.5 33.6 34.7 35.8 36.8
Densidad de una muestra de leche aguada
DETERMINACIO DEL pH
La determinación se realizará mediante métodos potenciométricos .
El pHmetro. Cuando dos soluciones de pH diferentes están separadas por una fina
membrana de vidrio delgado, se establece una diferencia de potencial entre los dos lados
de la membrana de vidrio, que depende de la diferencia de pH entre las dos soluciones.
Este fenómeno constituye la base para medir pH de soluciones empleando un electrodo
de vidrio.
48
El electrodo de vidrio consiste básicamente de un bulbo de vidrio muy fino que contiene
en su interior una solución de pH constante (por ejemplo HCl, 0.1 M). Al introducir este
electrodo en el seno de una solución de pH diferente al de la solución 0.1 M, se establece
una diferencia de potencial entre el interior y exterior del bulbo. Para medir esta
diferencia de potencial se podría introducir un alambre en el interior del bulbo y otro en
la solución donde está sumergido el bulbo de vidrio, pero el sistema es algo mas
sofisticado.
ACIDEZ TOTAL
Para saber que tamaño de bureta se debe seleccionar , empleando NaOH 0.1 M,
consideramos que la muestra tiene la acidez del límite superior (0.18 g / 100 mL) y
calculamos el consumo probable y el tamaño de muestra.
Acido láctico en 100 mL de leche = 0.18 g
49
Peso Equivalente del ácido láctico = 90.08
Número de milimoles en 0.18 g de ác. Láctico = 2 mmol
Consumo de NaOH 0.1 M para 2 mmole = 20 mL
Grados Dornic. Son unidades muy arraigadas en la insdustria alimentaria . Para fijar su
significado basta recordar que 0.13 g de ácido láctico por 100 mL de leche significan 13
grados Dornic.
Cálculos
Mililitros de leche = 25.0
Consumo de NaOH 0.1 M = 13.7 mL
Factor de NaOH = 0.9870
Milimoles consumidos = 1.352 mmoles
Miligramos de ácido láctico = 121.8
Masa en 100 mL de leche = 0.487
Grados Dornic = 48,7
50
Límites establecidos = 13 a 18 Dornic
Conclusión Leche fuera de las especificaciones
Lavado de arena:
El empleo de arena tiene por objeto aumentar la superficie de evaporación y acelerar la
eliminación del agua. Se utilizan gránulos de arena lavada con ácido clorhídrico para
eliminar las impurezas de hierro. Los granos deben quedar retenidos por el tamiz 40
51
(abertura 0.425 mm) y pasarán por el tamiz 80 (abertura 0.18 mm) es decir disponer de
partículas menores de 0.425 mm y mayores de 0.180 mm.
Lavar los gránulos de arena primero con ácido clorhídrico concentrado caliente para
disolver el óxido de hierro y luego con agua destilada hasta reacción negativa de cloruros.
Se seca en estufa y se calcina a 500 – 550° C durante 4 horas. Esta arena no contiene
materiales que puedan reaccionar con la leche ni sustacias que se volatilicen durante la
determinación del residuo seco de la leche.
Durante la evaporación se debe remover la mezcla de arena y leche con una varilla de
vidrio que será incluida en la pesada. Por lo tanto, cualquier partícula de arena que caiga
de la cápsula o la suciedad que pueda agregar con los dedos, influirá en el resultado. No
tendrá importancia alguna la introducción de gotas de agua, durante la fase de
evaporación.
Peso del recipiente con varilla, arena y leche secos (gramos)= (c)
Extracto seco (g/100g) = (c-a) x 100 / (b – a)
52
Contenido Graso
Método gravimétrico de Rose-Gottlieb
Procedimiento
.-Pese aproximadamente 10 g de leche en el aparato de extracción.
.-Añada 2 mL de la solución de amoníaco y mezcle bien
.-Añada 10 mL de alcohol etílico y mezcle bien
.-Agregue 25 mL de eter etílico y 25 mL de éter de petróleo
.-Luego de cerrar bien el aparato de extracción, agite e invierta varias veces
.-Deje al menos dos horas en reposo o centrifugue 5 – 10 min a 500 – 600 rpm hasta
tanto la capa de eter de petróleo sea perfectamente transparente y se haya separado de la
capa acuosa.
.-Decante tan íntegramnete como sea posible la capa de eter – eter de petróleo, por
decantación o sifonado (cuidando no arrastrar la capa acuosa) a un erlenmeyer seco y
tarado con perlas de vidrio
.-Repita la extracción una segunda y tercera vez, utilizando 25 mL de cada uno de los
éteres, reuniendo todos los extractos etéreos.
.-Destile el eter del erlenmeyer, y seque una hora en estufa de vacío a 75°C (presión
menor a 50 mmHg) o en estufa ordinaria a 102 – 105 °C hasta peso constante (Exactitud
del método, 0,02 %)
Cálculos. Cuando se tiene el peso neto del contenido de grasa extraído (peso constante)
se expresan los resultados con un decimal haciendo el cálculo:
Materia grasa (g/100 mL) = (a – b) x 100 / M (mL)
Materia grasa (g/100 g) = (a – b) x 100 / M x d
Donde a =peso de materia grasa extraída (g)
b =peso del blanco de reactivos (g)
M =muestra (mL)
d =densidad de la leche (g / mL)
53
Se debe tener en consideración que la densidad a utilizar debe ser la que corresponde a la
temperatura de la leche en el momento de medir la muestra a analizar.
Leche en Polvo
La leche entera desecada (CAA) debe ser un polvo uniforme, sin grumos, de color blano
amarillento, con olor agradable, no rancio semejante al de la leche fluida y sin olores
extraños. No tendrá sustancias extrañas visibles a simple vista o al microscopio.
Preparacion de la muestra
.-Transfiera todo el contenido de la leche en polvo a un frasco seco del doble del volumen
de la muestra. Mezcle bien agitando y rotando el frasco.
.-Coloque la cápsula y su tapa en la estufa a 102°C ± 2°C durante una hora. Deje enfriar
en un desecador y pese. Anote el peso de la cápsula vacía y seca.
.-Coloque aproximadamente 1 g de leche en polvo en la cápsula y pese rápidamente al 0,1
mg.
.-Caliente la cápsula en la estufa a 102°C ± 2°C . Deje enfriar en el desecador a
temperatura ambiente y pese.
.-Repita el proceso hasta que pesadas sucesivas no difieran en mas de 1mg. Es habitual
completar el secado en 2 horas.
Cálculos
54
p2 =peso final de la cápsula con leche en polvo secada
p =peso de leche en polvo tomada para análisis
todos los pesos exprezados en gramos
Procedimiento
.-Pese dos gramos de leche en polvo en una cápsula previamente tarada. Carbonice sobre
tela metálica, evitando las proyecciones, e incinere a 400°C aproximadamente durante
media hora.
.-Enfríe y humedezca la masa carbonosa con unas gotas de agua y tritúrela con una varilla
de vidrio. Lave la varilla de vidrio y coloque nuevamnete la cápsula sobre el baño de
María y luego en estufa a 105°C hasta completar el secado.
.-Incinere en una mufla a 475°C ± 25°C durante una hora aproximadamente . Si persisten
los residuos carbonosos, repita el tratamiento con agua, el secado y la incineración
nuevamente.
.-Coloque en un desecador para enfriar y finalmente pese las cenizas.
Cálculos
55
Donde a = peso de las cenizas, en gramos
p= peso de la muestra, en gramos
Cenizas solubles en agua: Se añaden a las cenizas 25 mL de agua , se cubre con vidrio de
reloj y se hierven suavemente durante 5 minutos. Se filtra, a traves de un papel de filtro
sin cenizas y se lava con agua caliente. En la misma cápsula se incinera el material
insoluble junto con el papel de filtro. Se enfría en un desecador y se pesan las cenizas
insolubles en agua. Por diferencia, se calculan las cenizas solubles en agua. Los
resultados se exprezan en g/100g de muestra.
Informe
Se entregará un informe analítico por cada leche analizada que debe incluir :
.-detalles que identifican a la muestra
.-los análisis realizados, con sus cálculos, con los valores de referencia.
.-Grado de frescura , densidad, pH, acidez total, extracto seco, contenido graso de leche
fluida
.-Humedad, cenizas totales y solubles en agua en leche en polvo.
CUESTIONARIO
1) Clasificación de los métodos de separación de lípidos
2) Describa en el método de extracción directa la preparación de la muestra, los
solventes generalmente usados, los equipos.
3) ¿Qué es un extractor de Twisselmann? Describa un extractor de Soxhlet.
4) ¿Qué es la extracción supercrítica? Explique sus ventajas. Describa las propiedades
del CO2.
56
5) ¿Por qué es ineficiente la extracción directa de lípidos de alimentos tales como
lácteos, harinas, pan, y carne? ¿Cómo soluciona este inconveniente para las harinas,
pan o yema de huevo?
6) ¿En los lácteos como soluciona el problema de la extracción de lípidos? ¿Qué es el
método de Gerber? ¿Qué es un butirómetro? ¿Para qué se utiliza el alcohol amílico?
¿Qué es un butirómetro de van Gulik?
7) ¿Qué es el método de Rose-Gottlieb? ¿Cuál es su exactitud?
8) ¿Cuáles son los reactivos empleados en el método de Rose-Gottlieb y cual es su
función? ¿En qué recipiente se lleva a cabo este método?
9) Describir métodos indirectos para la determinación de lípidos de una muestra. Para
la determinación lipídica de que alimentos se puede emplear el método de Resonancia
Magnética Nuclear?
10) Describa un método de turbidimetría para la determinación lipídica
11) Fórmula de la caseína. Punto isoeléctrico de la caseína.
57
TRABAJO PRACTIVO 4.
ANALISIS DE GRUPOS FUNCIONALES
HALOGENUROS Y ALQUENOS
Objetivos
Reconocer los grupos funcionales
Br
Br2 KMnO4
+ MnO2
rojo violeta
Br OH OH
incoloro incoloro marrón
58
para clasificar los halogenuros de alquilo de acuerdo a su reactividad en una reacción de
SN2. El ión ioduro es un excelente nucleófilo y desplaza el bromo o cloro del halogenuro
de alquilo, mientras que la acetona es un solvente menos polar que el agua o los
alcoholes. El ioduro de sodio y el ioduro de potasio son solubles en acetona, pero los
bromuros y cloruros correspondientes son insolubles. Consecuentemente a medida que
los iones bromuro o los iones cloruro son producidos, éstos son precipitados de la
solución. De acuerdo al principio de Le Chatelier, la precipitación de un producto de la
solución de reacción, desplaza el equilibrio hacia la derecha, tal es el caso de la reacción
descrita aquí:
acetona
+ -
R-Cl + Na I RI + NaCl ↓
acetona
+ -
R-Br + Na I RI + NaBr ↓
C2H5OH C2H5OH
R+ R-OC2H5 R+ R-OC2H5
+ +
R-Cl + Ag R-Br + Ag
- -
Cl AgCl ↓ Br AgBr ↓
59
60
61
1,2,4,5-tetraclorobenceno
62
63
Ciclohexeno, H NMR
64
1-HEXENO
65
66
TRABAJO PRACTICO Nº 5
Objetivo general
Estudiar las propiedades generales ácido-base, rédox y reactividad de alcoholes,
aminas y sustancias que poseen grupo carbonilo (aldehídos y cetonas). Estudiar
reacciones para su caracterización. Identificación de α-metil cetonas.
Objetivo específico
Comprobar el carácter básico de las aminas y clasificarlas en primarias,
secundarias y terciarias mediante la preparación de las sulfonamidas. Comparar las
propiedades básicas con respecto al amoníaco. Estudiar reacciones típicas de
acomplejamiento de amoníaco y aminas con cationes metálicos.
Comprobar el carácter ácido de los alcoholes, mediante el ensayo con sodio
metálico y clasificarlos en primarios, secundarios o terciarios mediante el test de Lucas.
Comparar las propiedades ácidas con ácidos inorgánicos y orgánicos. Estudiar reacciones
de oxidación de alcoholes.
Formación de hidrazonas. Reacción del haloformo. Determinación de
insaturaciones. Reacciones redox sobre aldehídos y cetonas.
Conceptos
Acidez y basicidad
Solubilidad
Reacciones de óxido-reducción
Reacciones de adición
Sustitución nucleofílica
Halogenación en α
Introducción
67
I) Aminas
Las aminas son compuestos con propiedades básicas y por lo tanto son solubles en
medios ácidos como HCl, H2SO4 y en solventes orgánicos polares como dietiléter y en
agua cuando la cadena hidrocarbonada es inferior a 6 átomos de carbono.
Se clasifican en primarias, secundarias y terciarias, según estén sustituidos los
hidrógenos del amoníaco por uno, dos o tres grupos alquilo, respectivamente.
La distinción entre cada una se puede hacer por el ensayo de Hinsberg. Este
ensayo está basado en la generación de sulfonamidas mono- y disustituidas a partir de
aminas primarias y secundarias, respectivamente, por reacción con el cloruro de p-
toluensulfonilo (p-TsCl). Las sulfonamidas monosustituidas son relativamente ácidas y
por lo tanto son solubles en medio básico, mientras que las sulfonamidas disustituidas no
son solubles debido a que no tienen hidrógenos ácidos que pueden ser eliminados para
formar una sal soluble.
KOH
H3C SO2Cl + RNH2 H3C SO2NHR H3C SO2NR Na
HCl
amina primaria insoluble soluble
KOH
H3C SO2NR2 no se solubiliza
H3C SO2Cl + R2NH
no forma sal
amina secundaria insoluble
68
Resumen del Test de Hinsberg
Amina
a) p-TsCl
b) KOH
precipitado solución
HCl
amina
secundaria
precipitado solución
clara
amina amina
primaria terciaria
Aniline, H NMR
N-methyl aniline
69
70
Anilina
71
N-metilanilina
N,N-dimetilanilina
72
II) Alcoholes
Un alcohol es similar al agua, ya que puede actuar como base y aceptar un protón
para dar un alcohol protonado, ROH2+; y también puede actuar como ácido y perder un
protón para dar un ion alcóxido, RO-. Igual que el agua, un alcohol es un ácido o una base
muy débil; el equilibrio de la reacción de ionización de un alcohol puro o en solución
acuosa está desplazado hacia la especie asociada de la ecuación.
En disolución acuosa diluida, los alcoholes tienen aproximadamente los mismos
valores de pKa que el agua (pKa metanol = 15,5; pKa etanol = 15,9; pKa t-butanol ~= 18).
Sin embargo, en estado líquido puro (sin agua), los alcoholes son ácidos mucho más
débiles que el agua. El pKa del metanol puro es alrededor de 17 y los otros alcoholes son
ácidos aún más débiles. Para comparación, el valor de pKa del agua pura es 15,7 (no 14,
que es el pKw).
Agua:
O + O HO + H3O
H H H H
Metanol:
O +
H3C H H3C
O
H CH3O- + CH3OH2
ion metóxido
Metanol en agua:
ión metóxido
73
ROH + R´MgX RO-MgX + R`H
un alcóxido a partir de un alcohol, se requiere una base más fuerte que el alcóxido
mismo. La sodamida (NaNH2) y los carbaniones (por ejemplo reactivos de Grignard) son
bases bastante fuertes para sustraer un protón de un alcohol.
74
El test de Lucas consiste en la aparición de un cloruro de alquilo como un líquido
insoluble, cuando un alcohol se trata con una mezcla de ácido clorhídrico y cloruro de
zinc (Reactivo de Lucas).
ZnCl2
ROH + HCl R-Cl + H2O
+ Cl-
R3C-OH + ZnCl2 R3C-O-ZnCl2 R3C R3C-Cl
H
75
76
77
1-butanol
ciclohexanol
78
1,4-butanodiol
79
H R R
R C OH C O C O
H H HO
-1 + (-1) + 1 = -1 -1 + 2 = +1 +1 + 2 = + 3
H
O C O H C H
H
+2+2=+4 (-1) + (-1) + (-1) + (-1) = - 4
El grupo carbonilo está formado por un átomo de carbono con hibridación sp2
unido a un átomo de oxígeno mediante un enlace σ y otro π. El grupo carbonilo es polar,
debido a que los electrones que forman el enlace σ, y especialmente los que constituyen
el enlace π, están desplazados hacia el átomo de oxígeno que es más electronegativo que
el carbono. El átomo de oxígeno del
grupo carbonilo tiene dos pares de electrones de valencia no compartidos. Todos estos
hechos estructurales contribuyen a la reactividad del grupo carbonilo.
δ
O O
electrones no
C δ C
H3C CH3 H3C CH3 compartidos
µ = 2,85 D
O OH - H2 O
H+
RCH + H NH2 RCH NH2 RCH NH
una imina
80
Las iminas se hidrolizan fácilmente. Sin embargo, los productos del tipo imínico
formados a partir de aldehídos o cetonas y un compuesto nitrogenado del tipo H2N-NH2
(hidrazina) o
H2N-OH (hidroxilamina) son bastantes estables, (hidrazonas y oximas respectivamente).
O2N O2N
H3C H H3C
C O H2N NH NO2 C N NH NO2 H2O
H3C H3C
2,4-dinitrofenilhidrazina 2,4-dinitrofenilhidrazina
de la propanona
Las hidrazonas, en especial las 2,4-dinitrofenilhidrazonas (DNFH) de alto peso
molecular, son generalmente sólidas. Estos derivados se utilizaron extensamente como
medio de identificación, antes del masivo uso de los espectrómetros. Una cetona líquida,
de estructura desconocida, se puede transformar en su DNFH sólida, purificar
posteriormente por cristalización y una vez pura, comparar su punto de fusión con el de
otras DNFH de estructuras conocidas.
La reacción con 2,4-dinitrofenilhidrazina sirve como test de identificación de
aldehídos y cetonas, ya que al agregar la hidrazina al compuesto carbonílico en solución,
se observa la formación de un sólido cuyo color varía de amarillo a rojo, correspondiente
a la DNFH.
La diferenciación entre un aldehído y una cetona se puede realizar mediante
reactivos de oxidación específicos. (Consulte Guía de Actividades del Laboratorio No 1).
La α-halogenación es la base del ensayo químico llamado prueba del yodoformo
para compuestos metil carbonílicos. El grupo metilo de una metil cetona se yoda
totalmente hasta la formación de un sólido amarillo denominado yodoformo (CHI3).
O O
HO-, H2O
CH3CCH3 + 3I2 CH3CO + CHI3
acetona ión acetato iodoformo
81
aldehído. Las sales de permanganato y dicromato son los agentes oxidantes más
empleados, pero de ninguna manera, son los únicos reactivos que se pueden utilizar.
O O O
KMnO4 KMnO4
CH3CH2CH CH3CH2COH CH3CCH3 no reacciona
ó ó
K2CrO
2 7 K2Cr2O7
propanal ácido propanoico acetona
H NMR acetone
82
H NMR spectrum of dibenzylacetone (1,5-diphenyl-1,4-pentadien-3-ona)
83
84
Acetona
be
nzaldehido
85
dibenzalacetona
A. Actividad Teórico-Práctica
2. Dadas las constantes básicas para el amoníaco (Kb= 1,8 10-5) y las siguientes aminas,
CH3NH2
(Kb= 4,3 10-4) y (CH3)3N (Kb= 5,5 10-5), calcule el pH de soluciones de cada uno de estos
compuestos considerando una concentración de 0,01M. ¿Podría diferenciar estos
compuestos midiendo el pH con papel de tornasol?
3. ¿A qué se debe que una amina primaria sea más básica que el amoníaco? ¿Qué ocurre
en el caso de las aminas secundarias y terciarias?
4. Para determinar si una amina es primaria, secundaria o terciaria se puede recurrir al test
de Hinsberg. Este ensayo se basa en la formación de sulfonamidas. Explique por qué las
aminas terciarias no son reactivas bajo estas condiciones.
86
durante el proceso de reacción. Así este tipo de reacciones se las puede emplear como
reacciones de identificación de algunas sales metálicas. Escriba las reacciones de
acomplejamiento que tiene lugar cuando se mezcla nitrato de níquel con amoníaco y
etilendiamina.
6. Escribir la ecuación balanceada para la reacción de sodio con alcohol etílico. ¿Esta
reacción será más rápida o más lenta que la reacción de sodio con agua?
7. Escribir la ecuación balanceada para la reacción que tiene lugar cuando el etóxido de
sodio se trata con agua. ¿Qué indica esta reacción respecto a la acidez relativa del agua y
del alcohol etílico y respecto a la basicidad de los iones hidróxido y etóxido?
9. ¿Por qué algunos alcoholes secundarios deben ser calentados levemente para que
reaccionen con el reactivo de Lucas?
10. El test de Lucas funciona únicamente para alcoholes que son solubles en el reactivo.
Dé una explicación al respecto.
11. Explique la reacción que tiene lugar cuando se mezcla silicato de sodio con etanol.
¿Cómo supo que transcurrió la reacción química una vez mezclados los dos líquidos?
13. Escriba la reacción que tiene lugar cuando se agrega glicerol al permanganato de
potasio. ¿A qué se debe la formación de la llama y el color rosado de la misma?
14. Explique si es posible formar los iones enolato de: propanona (acetona), etanal
(acetaldehído), acetato de etilo y 2,4-pentanodiona con: a) NaOH, b) NaNH2, c) NaH, d)
etóxido de sodio. (Nota: pKa acetona = 20; pKa acetaldehído = 19; pKa acetato de etilo =
25; pKa 2,4-pentanodiona = 9; pKa etanol = 16; pKa amoníaco = 3,5; pKa NaH = 40).
15. Una disolución acuosa de NaOH se adiciona a una mezcla de acetona y metanal
(formaldehído).
87
a) ¿Cuál es la estructura del anión orgánico que se forma?
b) ¿Reaccionará este anión a mayor velocidad con la acetona o el formaldehído?
c) Muestre cada paso en el mecanismo de la condensación aldólica predominante que
ocurriría.
16. ¿Cuáles de los siguientes compuestos dan positiva a la prueba del yodoformo?
Justifique su respuesta. a) etanol; b) benzaldehído; c) acetaldehído; d) benzofenona; e)
propanona; f) ciclopentanona; g) acetofenona.
17. ¿Qué metilcetona se puede utilizar para preparar, mediante la reacción del haloformo,
cada uno de los siguientes ácidos carboxílicos? a) (CH3)2CHCO2H; b) p-
HO2CC6H4CO2H.
18. ¿Cómo distinguiría mediante ensayos químicos cada uno de los compuestos de los
siguientes pares?
a) 2-propanona y etanal b) 2-propanona y 2-propanol
B. Actividad Experimental
I) AMINAS
I-1) Comparación de las propiedades básicas de las aminas y amoníaco. (Una por
comisión)
Realizar estas pruebas bajo campana. Colocar 2 mL de las aminas disponibles en
el laboratorio en un tubo de ensayo cortado y medir el pH con un pH-metro. Comparar
los resultados.
88
de ensayo. Tapar el tubo y agitarlo en forma intermitente por 3-5 minutos. Destapar y
calentar el tubo con agitación en un baño de agua por 5 minutos.
Si se forma un precipitado en la mezcla básica, diluir con 5 mL de H2O y agitarla
bien. Si el precipitado es insoluble probablemente está presente una sulfonamida
disustituida (producida de amina secundaria). Si no permanece el precipitado luego que
se diluye la mezcla, o si no se forma precipitado inicialmente, agregue cuidadosamente y
gota a gota (~30 gotas) HCl 2 M, agitando hasta observar un cambio neto o hasta que la
solución esté ácida usando papel indicador de pH (evite exceso de ácido). Si se forma un
precipitado en este punto, debería tener una sulfonamida monosustituida (producida de
una amina primaria). Si no hay reacción aparente durante este test, el compuesto original
era probablemente una amina terciaria.
Si el procedimiento indicado da resultado confusos, debe ser repetido usando 0,2
mL de cloruro de benceno sulfonilo. Aunque este reactivo probablemente dé aceites en
lugar de sólidos.
Compuestos a utilizar: anilina, N-metilanilina y N,N-dimetilanilina.
Las tres pruebas deben ser realizadas simultáneamente para permitir una
comparación fácil de los resultados.
II) ALCOHOLES
89
(propano-1,2,3-triol) (secarlo con CaCl2). Esperar 20 segundos y observar. Observar
detenidamente el aspecto y color del residuo sólido. Interprete estos resultados.
INSTRUCCIONES ESPECIALES
Los aldehídos aromáticos tienen olor penetrante. Los alumnos deben realizar el agregado de estos
compuestos bajo campana. Se debe tener cuidado al manejarlos, evitando contacto con la piel tanto de
los reactivos como de los productos de síntesis. Muchos derivados de la fenilhidrazina son posibles
agentes cancerígenos, deben ser manejados con precaución.
90
agitando hasta que persista el color marrón del yodo. Déjelo reposar unos minutos, si no
precipita el yodoformo a temperatura ambiente, entibie el tubo en baño de agua a 60 °C.
Si desapareció el color, agregue gotas del reactivo hasta que el color oscuro no se
desvanezca, aún después de 2 minutos de calentamiento a 60 °C.
Destruya el exceso de I2 agregando algunas gotas de NaOH diluído. Agregue
luego igual volumen de agua y deje reposar por 10 minutos.
La prueba es positiva cuando se observa la formación del precipitado amarillo de
yodoformo (se puede filtrar y medir el punto de fusión, p.f. = 120 °C). Realice este
ensayo con los reactivos utilizados y con la cetona sintetizada.
[O]
2 CH3CH2SH CH3CH2S-SCH2CH3
etanotiol [H] disulfuro de etilo
91
(5%), agregue 2 gotas de solución de NaOH (5%). Agregue 1 a 2 mL de una solución de
NH3 ~ 1 M, hasta que el precipitado inicialmente formado se disuelva. Agregue 5 gotas
del aldehído (glucosa) al reactivo de Tollens y caliente en un baño a 60 C por 10
minutos. Un depósito de plata ,"espejo de plata", sobre las paredes del tubo es un test
positivo.
Reactivo de Benedict*
El reactivo de Benedict contiene el ion cúprico como agente oxidante en medio
básico, estabilizado con el ión citrato como complejo. Si se agrega un aldehído,
reacciona transformándose a un ácido y se produce un precipitado rojo de óxido cuproso:
RECOMENDACIONES :
- Revisar las normas de seguridad del laboratorio.
- Los alumnos serán evaluados durante el desarrollo de la actividad experimental, por
lo que se recomienda estudiar el tema. Pueden consultar la bibliografía que se
especifica o similar y deben contestar los ejercicios siguientes de pre-laboratorio.
92
Ejercicios ( pre-laboratorio)
93
alcohol (metanol) a un aldehído (formaldehído) y posteriormente a un ácido carboxilico
(ácido fórmico). ¿Se trata de un proceso de oxidación o de reducción?
O O
CH 3OH HC HC
H OH
8) Calcule el cambio del estado de oxidación de los átomos de carbono en cada una de los
siguientes reacciones.
a) CH4 + Cl2 CH3Cl + HCl
b) CH3CH2CH = CH2 + HCl CH3CH2CHClCH3
OH
+ H 2O
c)
d) CH3CH2COOH + CH3OH CH3CH2COOCH3 + H2O
O O
H 2O
+ O3 C-(CH 2 )3-C
H H
e)
c) + KMnO4 / H+ ?
d) (CH3)2CHCH2OH + HNO3 ?
e) CH3CH2CH2OH + ? CH3CH2CHO
f) C6H5CH2OH + ? C6H5CHO
94
12) Complete e iguale las siguientes reacciones que ocurren en solución ácida acuosa:
a) I2 + H2S H+ + I- + S(s)
b) Ag(s) + NO3- Ag+ + NO(g)
c) S2O32- + I2 I- + S4O62-
d) Cr2O72- + C2H4O C2H4O2 + Cr3+
e) MnO42- MnO2(s) + MnO4-
f) ClO3- + As2S3 Cl- + H2AsO4- + SO42-
13) Complete e iguale las siguientes reacciones que ocurren en solución básica acuosa:
14) Complete e iguale las reacciones de acomplejamiento de los cationes Fe2+, Cu2+ y
Ni2+ con dimetilglioxima.
a) Na2SO4 + Ba(NO3)2
b) Na2C2O4 + CaCl2
c) K2CrO4 + AgNO3
e) KOH + Mg(NO3)2
Bibliografía específica
95
- R.Q. Brewster, C.A.Vanderwert, W.E Mc Ewan., “Curso Práctico de Química
Orgánica” Ed. Alambra 1979, pag. 72.
96
Trabajo Practico 6
ANALISIS DE HARINAS
Objetivos
.-Conocer los principales análisis de harinas para establecer su calidad y detectar
adulteraciones
.-Relacionar los valores encontrados en el análisis de cenizas con el proceso de molienda
y la presencia de aditivos inorgánicos
.-Tener en cuenta los detalles experimentales al utilizar los aparatos de extracción
continua.
.-Saber calcular la cantidad de muestra a analizar para obtener resultados significativos
.-Saber hacer determinaciones de pH utlizando el pHmetro y las soluciones buffers para
su calibración
97
Buffer de Ph 10.00
Eter de petróleo
Fundamentos Teóricos
Acidez de la Harina
Para esta deteminación se emplea un pHmetro que indica la concentración de ion
hidrógeno en el sobredanante de una suspención de agua y harina
GRASA BRUTA
Para conocer el contenido de grasa de la harina se puede emplear un extractor de tipo
intermitente como el Sohlet. Es de los mas eficaces, aunque tiene el inconveniente de
utilizar cantidades grandes de solventes. La determinación se hace sobre una muestra
desecada de la cual se ha eliminado el contenido de agua .
98
Cuando se inicia la ebullición del solvente (puro en la etapa inicial), sus vapores pasan
por el tubo grueso directamnete a la parte superior de la cámara y se condensan para caer
en forma líquida sobre el cartucho que tiene la muestra. Recién comienza el proceso
extractivo con el solvente condensado. El solvente se va acumulando en la cámara,
aumentando su nivel y continuando la extracción de la grasa de la muestra hasta que el
nivel sobrepasa el codo superior del tubo del sifón . Entonces todo el contenido de la
cámara pasa al matraz llevando la grasa disuelta. Se ha cumplido un ciclo de extracción.
Los ciclos se repiten en forma intermitente durante varias horas. En cada ciclo de
descarga aumenta la concentración de grasa en el matraz. Cuando se agota la grasa de la
muestra, se detiene el funcionamiento. Solo se puede conocer que el proceso ya no extrae
mas grasa comprobando que el residuo que queda luego de evaporar el solvente tiene
constancia de peso. En general se fija un número de horas que asegura la extracción
completa.
Terminando el proceso se desarma cuidadosamente el aparato y se evapora el solvente
calentando a baño de María y con ayuda de la succión de una trampa de agua. Se pesa
el residuo que queda al evaporar a sequedad y se completa el secado en la estufa.
Tareas a desarrollar
En este trabajo se medirá:
1.-el pH de la harina
2.-la humedad contenida en la harina
3.-el contenido de cenizas
4.-el contenido de grasas
Parte Experimental
99
Calibración del pHmetro
Preparación de soluciones buffer de referencia. Utilice agua de pH entre 6,5 y 7,5,
obtenida hirviéndola 15 minutos y enfriándola en atmósfera de bajo contenido de CO2.
Mantenga las soluciones en recipientes inertes (recuerde que el pH es función de la
temperatura).
Solución buffer de ftalato ácido de potasio 0,05M. Disolver 10,12 g de KHC8H4O4
secado 2 horas a 110°C en agua y diluir a 1 L. Utilizar para calibrar a pH =4.01 a 25°C.
Solución buffer de bórax 0,01 M. Disolver 3,80 g de Na2B4O7.10H2O en agua y diluir a 1
L. La sal no debe ser secada antes de usar. Proteger la solución del CO2 manteniendo
tapado el recipiente o protegido con una trampa de CaCl2. Utilizar para calibrar a
pH=9.18 a 25°C.
Luego de ajustar la temperatura del agua a 25°C, enjuagar los electrodos con agua
destilada y sumergirlos primero en la solución de referencia de pH=4.01 y ajustar el
potenciómetro a ese valor. Luego hacer lo mismo con la solución de pH=9.18.
Mantener siempre los electrodos en agua para evitar que se sequen. Manejarlos con
sumo cuidado.
PH de la harina
.-Suspender 10 g de harina en 100 mL de agua destilada a 25°C recién hervida
.-Esperar 30 minutos agitando ocacionalmente la suspensión
.-Dejar en reposo otros 10 minutos y decantar el líquido sobrenadante
.-Determinar el pH empleando el pHmetro calibrado y ajustando a 25°C
Humedad de la harina
.-Tomar muestras de 2 a 3 g de harina en cápsulas secas y previamente taradas
.-Secar en estufa de aire a 130°C exactamente una hora a partir del momento en que la
estufa alcance la temperatura indicada
.-Enfriar la capsula y su contenido en un desecador y pesar cuando haya alcanzado la
temperatura ambiente (40 – 50 minutos)
100
Cenizas
.-Pesar una muestra de 3 a 5 g de harina
.-Incinerar en una mufla a 425°C inicialmente y terminar a 550°C finalmente . Para
harinas de trigo duro se permite incinerar en le rango 575 - 900°C
.-Exprezar los resultados en %
Grasa bruta
Armado ded extractor, proceso de extracción
.-Verificar que el sifón de vidrio del cuerpo del extractor no esté roto o rajado. La
pérdida de solvente inflamable es peligrosa.
.-Limpiar y secar el matraz. Las uniones esmeriladas no deben estar engrasadas.
.-Pesar y registrar la tara del matraz.
.-Cargar con solvente el matraz (una vez y media la capacidad de la cámara). Se puede
adicionar mas solvente antes de iniciar el proceso de extracción .
.-Armar las tres piezas (matraz, cuerpo y refrigerante) verificando un buen cierre de las
uniones . La única abertura al exterior es la del extremo superior del refrigerante.
.-Circular agua por el refrigerante
.-Iniciar el calentamiento con una placa calefactora
.-Agregar plato poroso
.-Regular el calentamiento de modo de lograr un goteo de reflujo de 5 –6 gotas por
segundo
.-El solvente con su extracto se destila montando un aparato de destilación y se recoge el
destilado para ser utilizado nuevamente como solvente de extracción
.-Luego de reducir el solvente, se puede usar el rotavapor para sacar los últimos restos
.-Secar en la estufa. CUIDADO DE NO DEJAR A SECAR EN LA ESTUFA
RESIDUOS CON SOLVENTE INFLAMABLE, enfriar en desecador y pesar el matraz
y su residuo graso
.-Exprezar los resultados en % referidos a la muestra deshidratada.
101
INFORME
Expresar el pH, contenido de agua, de cenizas y de grasas en % (este último en base a
muestra deshidratada).
PROBLEMAS
1) Describa los cambios que ocurren durante la incineración de un alimento respecto de:
a.-sales y ácidos orgánicos; b.-compuestos orgánicos azufrados; c.-compuestos
orgánicos nitrogenados; d.-sustancias orgánicas fosforadas; e.-haluros, sulfuros y
algunos carbonatos.
2) ¿A qué temperatura se volatilizan los cloruros y el carbonato de potasio?
3) ¿Qué incompatibilidad tiene los carbonatos y fosfatos?
4) ¿Cómo puede evitar las volatilizaciones de haluros o carbonato de potasio?
5) ¿Cómo puede acelerar el proceso de oxidación?
6) ¿Qué análisis puede efectuar sobre las cenizas ?
7) ¿A qué se llama mineralización húmeda? ¿Qué otro nombre recibe?
8) ¿Qué métodos instrumentales se emplean actualmente para determinar minerales en
alimentos? Describa la técnica de espectroscopia de absorción atómica por plasma
inductivamente acoplado (ICP). ¿Para qué tipo de alimentos se emplea esta técnica, y
que minerales (elementos) se pueden estudiar?
Describa un método electroanalítico para la determinación de minerales en alimentos. De
ejemplos de metales que se determinan por estos métodos.
9)La determinación de grasa de una muestra de harina integral sin secar previamente dio
2,3%. Se determinó que contenía 9,8% de humedad. Utilice estos datos para expresar el
contenido de grasa de la muestra en base seca. Indique los cálculos efectuados.
10)Cómo afecta el agregado de carbonato de sodio a las harinas blancas en la
determinación de cenizas?
11)Para distinguir una muestra de harina contaminada con arena de otra que no lo está, se
puede recurrir a la determinación de cenizas solubles. Explique el procedimiento que
utilizaría y que resultados señalarían la muestra contaminada.
102
12)La determinación de grasa bruta de una muestra de harina integral sin secar
previamnete dio 1,8%. Se determinó que contenía 13,8% de humedad. Calcule la grasa
bruta en base seca.
13)A las harinas tipificadas como 00000 y 0000 le corresponden según CAA valores
máximos de cenizas de 0,492 y 0,650 (g/100g) respectivamente. Indique que cantidad de
muestra (en gramos con tres decimales) debe tomar para tener un residuo de cenizas de
al menos 20 mg al analizar ambos tipos de harinas.
14)Que cantidad de harina debe secar a 130°C para tener una diferencia de pérdida de
peso de al menos 150 mg suponiendo que la muestra contiene 15% de humedad
103
TRABAJO PRACTIVO 7.
ANALISIS DE GRUPOS FUNCIONALES ACIDO,
ESTER, AMIDA
Objetivos
Acidos:
Los ácidos caboxílicos, sulfónicos, y ciertos fenoles substituídos dan una prueba ácida al
tornasol o papel pH. Los cloruros de acilo y los anhídridos de ácidos pueden comportarse
como ácidos en virtud de su hidrólisis a ácidos durante la prueba de solubilidad. Estos
últimos pueden reconocerse por su rápida conversión a anilidas.
La constante de Duclaux proporciona un medio para la identificación de los ácidos
monobásicos saturados que tienen menos de siete átomos de carbonos. No es apropiada
para los ácidos valeriánico e isobutírico debido a que las constantes para estos dos ácidos
están muy cercanas.
Procedimiento: Se disuelven 3 g del ácido en 150 mL de agua destilada y la solución se
mezcla perfectamente. Se toman 10 mL de esta solución y se titulan con hidróxido de
sodio 0,1 M , usando fenolftaleína como indicador . Entonces se colocan 100 mL de la
solución en un matraz de destilación de 250 ml y se añade plato poroso. Se arma un
equipo de destilación simple (el refrigerante deberá formar un ánulo de 45º con la parte
superior de la mesada). El matraz se calienta hasta obtener una velocidad de goteo
constante. Se recogen 3 fracciones de 10 mL (A, B, C) usando una probeta de 10 mL .
Cada fracción se titula separadamente con la solución de NaOH 0,1 M usada
inicialmente. Los resultados se expresan como porcentaje de acidez de los 100 mL
usados
Número de Duclaux =(volumen de álcali (mL) para la fracción de 10mL x100)/(volumen de álcali (mL)
para los 10 mL iniciales x 10)
104
Haluros de acilo
Los cloruros de ácido reaccionan con agua con desprendimiento de calor. Añada unas
gotas de cloruro de acetilo o benzoílo a 1 mL de agua, y toque el tubo para ver si ha
desprendido calor
Reacción de Schotten-Baumann:
En un frasco pequeño con tapón de vidrio coloque 2 mL de anilina, 10 mL de agua y 2
mL de cloruro de benzoílo. A ésta solución añádale en porciones y con agitación
vigorosa, 10 mL de solución de hidróxido de sodio al 20%. Agite la mezcla durante
varios minutos y pruebe la solución con papel de tornasol hasta asegurarse que aún esté
alcalina
Esteres
En un matraz de destilación de 25 mL ponga 3 mL de dietilenglicol, 0,5 g de pastillas de
hidróxido de sodio y 0,5 mL de agua. Caliente la mezcla con llama pequeña hasta que se
haya disuelto el álcali y después enfríe; añada 1 o 2 mL del ester y mezcle perfectamente.
Cuando haya sólo una fase líquida o una fase líquida y una sólida la mezcla se calienta
vigorosamente para que destile el alcohol. El destilado se usa para la preparación de un
derivado sólido como el 3,5-dinitrobenzoato.
El residuo del matraz es la solución o la suspensión de la sal potásica del ácido derivado
del ester. Añada al residuo 10 mL de agua y 10 mL de etanol y agite. Añada ácido
sulfúrico 6M hasta que la solución esté ligeramente ácida a la fenolftaleína. Deje reposar
la mezcla durante 5 min. y entonces fíltrela.
Amidas
Trate 5 mL de solución de hidróxido de sodio al 10%, contenida en un tubo de ensayo,
con 0,2 g de urea. Agite la mezcla y observe si se desprende amoníaco. Repita la prueba
con tioacetamida, nicotinamida, y anilina.
El óxido de mercurio reacciona con determinadas amidas formando N,N-
mercuribisacilamidas, deivados sólidos de punto de fusión elevados. Pruebe la reacción
con nicotinamida, y dimetilformamida.
105
Cuestionario
1)Escribir las reacciones de ácidos orgánicos para dar esteres de fenacilo, y bencilo
sustituídos.
2) Si el ácido no está perfectamente seco, ¿su equivalente de neutralización será alto o
bajo?
3)Interferirá la presencia de un grupo amino aromático en la determinación del
equivalente de neutralización?
4)¿A qué se denomina Constantes de <Duclaux? Qué beneficios tiene el método por
arrastre con vapor?
5)Puede sugerir alguna explicación , desde el punto de vista estructural, al hecho de que
los ácidos superiores no formen mezclas azeotrópicas con el agua?
6)Hallar los números de Duclaux para los siguientes ácidos: fórmico, acético, propiónico,
n-butírico, isobutírico, n-valeriánico, isovaleriánico, n-caproico.
7)Por qué los números de Duclaux para la fracción A de estos ácidos son mayores que los
de las fracciones B y C?
106
Acido acético, H NMR spectrum
Acido benzoico
Acido maleico
107
108
Acido acetico
acido benzoico
109
acido maleico
Acrilamida, H NMR
110
acetato de etilo
111
acrilamida
112
2,4,6-trinitrofenol
113
TRABAJO PRACTIVO 8.
ANALISIS DE JUGOS Y JARABES
Objetivos
.-Familiarizarse con el método de determinación del punto final de equivalencia en una
titulación potenciométrica.
.-Conocer y comparar los distintos tipos de determinaciones de acidez, dependiendo del
alimento
.-Comprender el concepto y utilización de Gardos Brix y las maneras de determinarlos
.-Saber expresar los resultados para compararlos con los exigidos por la legislación
vigente
114
Fundamentos Teóricos
Jugos de Frutas. Acidez
Los ácidos que encontramos en los alimentos son: cítrico, málico, tartárico, fosfórico,
oxálico, acético, y láctico. Los ácidos acético y láctico son productos de la fermentación .
Los otros cinco están en los alimentos frescos.
El método a utilizar para conocer la acidez de los jugos de frutas es similar al aplicado en
la determinación de la acidez total de las bebidas alcohólicas. Como la elaboración de
los jugos puede enmascarar el punto final cuando se emplean indicadores , en estos se
titula empleando un pHmetro hasta alcanzar pH=8,1 o buscando el punto final de
equivalencia por el método gráfico.
Ejemplo de cálculo:
115
Otra manera de obtener la acidez es utilizar la siguiente fórmula
Acidez (g de ácido cítrico / 100 g muestra) = 0,064 x V x M x 100 /G
Donde:
V = volumen de NaOH 0,1 M en mL
G =cantidad de muestra en gramos
M =molaridad de la solución de NaOH utilizada
El factor 0,064 resulta de analizar la fórmula de ácido cítrico anhidro. Contiene tres
carboxilos titulables por mol y su peso molecular es 192,12. Al dividir el PM por tres
resulta el miliequivalente del ácido cítrico anhidro (64 mg / meq) y el factor mencionado.
Es posible expresar la acidez tomando otros ácidos orgánicos como referencia. La Tabla
que se incluye ofrece los distintos factores que se pueden utilizar.
116
Se exige que en el rótulo aparezca “preparado con X% de jugo” y la expresión “Para
obtener bebida sin alcohol lista para consumir con Y% de jugo”. No debe ser menor que
10% v/v. Deberá tener indicaciones claras para diluir y obtener una bebida que responda
a lo declarado en el rótulo. Estos requerimientos hacen necesario conocer , además del
contenido de jugo, el contenido de azúcar (sacarosa) en el producto.
Para determinar en forma rápida el contenido de sacarosa se miden las densidades de los
jarabes y basándose en Tablas , o con densímetros calibrados en grados Brix se conoce el
contenido porcentual de sacarosa de los diferentes jarabes.
Se entiende por grados Brix de una solución de sacarosa al porcentaje de sacarosa en peso
por peso de muestra (%p/p=°Brix)
Las lecturas en grados Brix deben hacerse a 20°C o si se hacen a otras temperaturas
deben corregirse adicionando la corrección si las mediciones fueron hechas por encima
de los 20°C o restando la corrección si las mediciones fueron tomadas por debajo de
20°C
PARTE EXPERIMENTAL
117
.-La solución obtenida se valorará con ftalato ácido de potasio (KHC8H4O4) , utilizando
fenolftaleína como indicador . El ácido ftálico es un ácido diprótico y el ftalato ácido de
potasio tiene un peso equivalente igual a su peso molecular
Ejemplo de cálculo
Acido clorhídrico concentrado 30% densidad 1,1510 g/mL y PM 36,5
Se necesita 0,1 equivalente = 3,65g
Estará en = 12,16 g (3,65/0,3)
En volumen = 10,57 mL (12,16/1,151)
Resultado: medir 10,16 mL y diluir a 1000 para obtener una solución 0,1 M de HCl
118
.-Armar el conjunto de electrodos , sensor de temperatura, agitador magnético y barra
agitadora y cargar agua destilada en el vaso de precipitados
.-Calibrar el pH metro regulando el control de temperatura y luego reemplazar el agua
destilada por una solución reguladora (buffer) de pH =7,0. Ajustar la indicación de la
escala al valor de 7,00.
.-Reemplazar el buffer de pH 7,0 por otro de pH 9,0 y calibrar la escala corrigiendo la
lectura.
.-Reemplazar buffer empleada en último término por un volumen exactamente medido de
HCl 0,1 M
Cada vez que se cambia la solución donde se sumerge el electrodo se debe lavar con
agua destilada. Las soluciones buffer se retornan a su recipiente original. Todas las
mediciones se efectúan luego de unos minutos de agitación
.-Titular agregando cantidades fijas de álcali (por ejemplo 2,0 mL cada vez) y registrar el
valor estable del pH alcanzado
Se debe continuar agregando solución alcalina (sobrepasando el punto final) y comprobar
el aumento de pH que produce cada mililitro agregado
.-Hacer los cálculos que indica el formulario y determinar el punto final
Para registrar los cambios de pH se anotan los valores que se miden luego del agregado
de cada mL de solución alcalina y se hace un gráfico de pH en función del volumen
escurrido de solución de NaOH
La forma de la curva obtenida indicará u punto de inflexión que represental el punto final
FORMULARIO PARA CALCULAR EL PUNTO DE EQUIVALENCIA
V base pH ∆ V base ∆ pH ∆ pH/∆
∆V base V base=(V+1/2∆
∆V)
agregada (mL) agregada
119
Titulación Potenciométrica de Jugos y Frutas
El valor del pH del jugo debe ser inferior a 7,00 lo cual indica que es ácido. Se arma una
bureta cuyo vástago está dirigido a la solución del jugo y se descarga NaOH 0,1 M gota a
gota, mientras se agita la solución . Cuando se alcanza el valor de pH=8,1 se considera el
punto final.
120
0,00 0,39
2,00 0,11 0,06 1,00
2,00 0,50
2,00 0,10 0,08 3,00
4,00 0.68
2,00 0,21 0,11 5,00
6,00 0,89
2,00 0,31 0,16 7,00
8,00 1,20
2,00 0,74 0,37 9,00
10,00 1,94
0,50 0,71 1,42 10,25
10,50 2,65
0,20 4,17 20,85 10,60
10,90 6,82
0,20 3,75 18,75 10,80
11,10 10,57
0,20 0,59 2,95 11.00
11,60 11,16
0,50 0,84 1,68 11,35
12,00
121
Medición de densidades. Gráfico
Los valores obtenidos se trasladarán a un gráfico de densidades en función de los %p/p.
Se interpretarán los desvíos.
°F 10 20 25 30 35 40 45 50 55 60
40 0,5 0,6 0,7 0,8 0,9 0,9 0,9 0,9 0,9 1,0
50 0,5 0,5 0,5 0,5 0,6 0,6 0,6 0,6 0,6 0,6
60 0,2 0,2 0,2 0,2 0,2 0,2 0,2 0,2 0,2 0,2
°F 10 20 25 30 35 40 45 50 55 60
70 0,1 0,2 0,2 0,2 0,2 0,2 0,2 0,2 0,2 0,2
80 0,5 0,6 0,6 0,6 0,6 0,6 0,6 0,6 0,6 0,6
90 0,9 1,0 1,0 1,0 1,1 1,1 1,1 1,1 1,1 1,0
100 1,3 1,4 1,5 1,5 1,5 1,5 1,5 1,5 1,5 1,5
120 2,5 2,6 2,6 2,6 2,6 2,6 2,6 2,6 2,5 2,5
122
1,065 16 1,110 26 1,158 36 1,210 46
1,074 18 1,119 28 1,168 38 1,221 48
NOTA: Tener en cuenta que las concentraciones de las soluciones de sacarosa no varían
con la temperatura . Lo que se altera es su densidad (aumenta cuando se reduce la
temperatura y disminuye cuando esta se eleva).
Las escalas que indican las concentraciones en función de las densidades están
preparadas para mediciones a 20º C. En estos casos no se aplica corrección alguna.
Informe:
Factor de corrección encontrado al valorar NaOH 0,1 M
El punto final (incluye gráfico) de la titulación de HCl 0,1 M con NaOH 0,1 M valorado
El punto final de la titulación de jugo de fruta con su gráfico
La acidez del jugo expresada en masa de ácido cítrico anhidro por 100 g de jugo
Los grados Brix encontrados para cada solución de sacarosa medida
Redactar un procedimiento analítico para determinar ácido benzoico (aditivo
conservante)
Cuestionario
1)Calcule cuanto debe pesar de biftalato de potasio (PM 204) para consumir entre 25 y 30
mL de solución de NaOH 0,1 M al determinar el factor de la solución
2)La acidez en los alimentos se valora con solución normalizada de hidróxido de sodio.
I)Desarrolle una expresión numérica que indique la acidez en equivalentes por 100 g para
una muestra de 83,00 g que consumió 22 mL de NaOH 0,1 M
Calcule la acidez en :
b)masa de ácido tartárico por 100 g de muestra
b)masa de ácido cítrico anhidro por 100 g de muestra
c)masa de ácido acético por 100 g de muestra
Parte B
EFECTO DEL TRATAMIENTO TERMICO SOBRE LA ACTIVIDAD
ANTIOXIDANTE Y ANTIRRADICALARIA DE JUGOS DE NARANJA
123
El jugo de naranjas es notorio por sus propiedades antioxidantes, debido al alto contenido
fenólico. Segmentos de naranjas se someterán a tratamientos térmicos breves antes de la
transformación a jugo, y se evaluarán los cambios en la composición química y actividad
antioxidante. El tratamiento térmico generalmete induce un incremento en sustancias
fenólicas del jugo de naranjas, tales como antocianinas y cinamatos, mientras que el ácido
ascórbico sufre un descenso. Las propiedades antioxidantes serán evaluadas mediante el
uso de DPPH. Se establecerá una posible relación entre propiedades antioxidantes y
antirradicalarias.
Materiales y métodos
Las naranjas (2 kg) se dividen en grupos homogéneos , se pelan, y reducen a segmentos.
Los segmentos se procesan según tres métodos distintos:
1.-los segmentos se exprimen, y el jugo producido no se trata termicamente
2.-los segmentos se someten a 80 C por seis minutos antes de exprimirlos
3.-los segmentos se exprimen, y el jugo se pasteuriza a 80 C por un minuto
124
S=100 – [(Ax/Ao]*100
Donde Ax es la DO de DPPH en solución en presencia de jugo de naranja, y Ao es la DO
de DPPh en ausencia de la muestra. Efectuar cada medición por cuadruplicado.
Discusión
Los resultados provenientes de la cuantificación de los hidroxicinamatos deberían indicar
un incremento en las fracciones térmicamente tratadas.
Informar lo siguiente:
Actividad antirradicalaria con respecto al blanco, de las tres fracciones tratadas
125
TRABAJO PRACTICO 9
AGUA. DESTILACION CON SOLVENTES NO
MISCIBLES
Objetivos
.-Conocer el fundamento de la destilación por arrastre con un solvente no miscible en
agua.
.-Reconocer las partes que componen el extractor y sus funciones en el proceso de
extracción
.-Familiarizarse con el manejo seguro del equipo y su calibración
.-Conocer la aplicación de la técnica en otros alimentos
.-Saber hacer los cálculos necesarios para expresar los resultados
126
Fundamentos Teóricos
Este procedimiento es de aplicación frecuente en la determinación de agua en quesos con
elevado contenido acuoso y también puede aplicarse para conocer la cantidad de agua que
contiene el dulce de leche. Está basado en la destilación contínua por arrastre con un
disolvente no miscible con agua.
La parte principal del equipo utilizado consiste en una trampa que permite separar , a
medida que destila, el agua contenida en la muestra. El método es conocido como
Bidwell – Sterling.
Calentamiento
Para lograr la ebullición del solvente contenido en el balón se calienta con una placa
calefactora o manta eléctrica que disminuyen los riesgos de incendio. El procedimiento
requiere varias horas de funcionamiento continuo.
127
.-Añadir entre 100 y 150 mL de solvente. Es conveniente introducir un agitador
magnético que facilitará una ebullición suave y uniforme .
.-Elevar la temperatura hasta que hierva el contenido del balón.
.-Destilar a una velocidad de una o dos gotas por segundo hasta que se haya recogido la
mayor parte de agua, entonces aumentar el calentamiento para destilar a razón de 4 gotas
por segundo. Cuando se torna clara la fase del disolvente (capa superior) es indicio que
se ha terminado el proceso.
.-Arrastrar , con un alambre, las gotas de agua que puedan quedar en el refrigerante y
continuar la destilación 5 minutos mas.
.-Dejar enfriar el tubo graduado y medir su contenido de agua al 0,01 mL
Cuando las desviaciones entre lo agregado (5 mL) y lo regogido son importantes (mas
del 5 %) se debe repetir la calibración , prolongando el tiempo de operación del equipo o
cambiando el disolvente de arrastre.
128
por segundo. Cuando se torna clara la fase del disolvente (capa superior) es indicio que
se ha terminado el proceso.
.-Arrastrar , con un alambre, las gotas de agua que quedan en el refrigerante y continuar
la destilación 5 minutos mas.
.-Dejar enfriar el tubo graduado y medir su coontenido de agua al 0,01 mL
Resulatdos
Expresar el contenido porcentual de agua en el queso crema del siguiente modo:
% de agua encontrada = 100 x mL de agua medida/ masa de muestra
Repetir el procedimiento con otro disolvente
Informe
.-Debe incluir % de agua recuperado en la calibración del aparato
.-El % de agua en el alimento analizado y su comparación con el reportado en el envase.
Problemas
1) Describa métodos químicos para la determinación de agua en alimentos. Para que
alimentos se utiliza el método de Karl Fischer? Desarrolle las ecuaciones químicas
respectivas.¿Cómo es el procedimiento en una titulación de agua por el método Karl
Fischer? ¿Qué tipos de detección puede emplear para ver el punto final? Desciba las
modificaciones del método mas empleadas en la actualidad.
2) ¿Qué propiedades eléctricas puede utilizar para determinar el contenido de agua en
alimentos? Describa un protocolo de técnica usada con el equipo empleado.
129
3) Mencione y describa una determinación de agua por absorción o reflexión en el
infrarrojo. Busque y describa un equipo (espectrómetro IR) empleado en la
determinación de agua en alimentos
4) Describa el método de la resonancia magnética nuclear y su empleo en la
determinación del contenido de agua en alimentos. Busque y describa el equipo de RMN
comúnmente empleado en la determinación de agua en alimentos
5) Sabiendo que el dulce de leche contiene 35 % de humedad máxima, calcule la
cantidad mínima de muestra que debe tomar para que en el ensayo mida al menos 5 mL
de agua
6) Para el análisis del contenido acuoso de una muestra (60g) de ricota se empleó una
mezclas de xileno: alcohol amílico (2:1) ¿Cuántos mL de agua se habrán de recolectar en
la trampa si el producto cumple la especificación de contenido máximo de agua 80%? Si
no se alcanza el volumen de agua que calculó, puede decir si la muestra cumple la
especificación ?
130
TRABAJO PRACTICO 10
PROTEINAS. METODO DE KJELDHAL
Objetivos
.-Familiarizarse con el método de digestión de Kjeldhal para la determinación de
proteínas
.-Comprender la utilidad del uso de sustancias carentes de nitrógeno en ensayos en blanco
.-Conocer y aplicar correctamente los factores de conversión a proteínas
.-Saber aplicar la misma técnica de digestión y destilación a otros alimentos
131
Fundamnetos Teóricos
Composición básica de la crne: Las carnes se pueden considerar constituídas por tejido
magro (que contiene las proteínas) , agua, grasas (con los triglicéridos) y cenizas. Las
carnes de vaca , cordero o cerdo tienen composiciones variables de las sustancias que las
constituyen según este detalle
Carne de Proteínas, % Agua, % Grasa, % Cenizas, %
Vaca 17 59 23 1
Cordero 15 55 29 1
Cerdo 13 46 40 1
El nitrógeno total conocido por titulación se conviete en proteínas por multiplicación por
el factor 6,25
132
Determinación de un blanco
Para descontar cualquier contribución de los reactivos al contenido de nitrógeno se hace
una determinación completa empleando 2 f de sacarosa en reemplazo de la muestra.
El valor encontrado de nitrógeno, debido a contaminaciones o impurezas de los reactivos,
se debe descontar del encontrado para la muestra.
Tarea s a desarrollar:
.-Se determinará nitrógeno usando un patrón de urea
.-Se determinará nitrógeno en un alimento (leche en polvo)
.-Expresar su contenido como proteínas totales.
PARTE EXPERIMENTAL
Procedimiento:
.-Pese una muestra que consuma entre 3 y 10 mL de HCl 0,01 o 0,02 M y transfiérala a
un balón de micro – Kjeldhal de 30 mL de capacidad
.-Agregue 1,9 ± 0,1 g de sulfato de potasio, 40 ± 10 mg de óxido de mercurio, y 2,0 ± 0,1
mL de ácido sulfúrico. Si la muestra es de mas de 15 mg, agregue 0,1 mL de ácido
sulfúrico por cada 10 mg de exceso sobre 15 mg.
.-Agregue granallas de Zn o piedritas para controlar la ebullición, que pasen tamiz 10
.-Digiera entre 1 y 1,5 horas hasta que toda el agua haya sido destilada y el ácido
comience a hervir
.-Enfríe y agregue la mínima cantidad de agua para disolver los sólidos y coloque un film
de vaselina en el borde del balón
.-Transfiera el producto digerido y las piedritas y enjuague el balón 5 o 6 veces con
porciones de 1 o 2 mL de agua .
.-Coloque debajo del refrigerante un erlenmeyer de 125 mL , que contenga 5 mL de
solución de ácido bórico y 2 a 4 gotas de solución de indicador rojo de metilo – azul de
metileno o indicador rojo de metilo – verde de bromo cresol. El pico del refrigerante
debe quedar debajo de la superficie del líquido.
133
.-Agregue 8 a 10 mL de solución de hidróxido de sodio – tiosulfato de sodio al recipiente
donde se produce el vapor.
.-Recoja aproximadamente 15 mL de destilado y diluya aproximadamente a 50 mL
.-Titule con ácido clorhídrico 0,02 M , hasta punto final gris o hasta aparición de color
violeta.
.-Haga una determinación de un blanco.
Cálculo
%Nitrógeno = (mL de HCl – mL blanco) x N x 14,007 x 100 / M
donde N = normalidad
14,007 =peso equivalente del nitrógeno (mL/ meq)
M =peso de la muestra
Notas
1.-La materia orgánica seca total de la muestra ne debe exceder 100 mg. Utilice un tubo
de carga para sólidos
2.-Para muestras por debajo de 7 mg utilice balones de 10 mL de capacidad y la mitad de
las cantidades de los reactivos
3.-Si se conioce que no hay compuestos nitrogenados cíclicos resistentes, hierva
solamnete media hora
Ejemplo de cálculo: Al analizar por el método de Kjeldhal una muestra (15 mg) de un
alimento de origen cárnico, se encontró que el destilado recogido sobre ácido consumió
2,2 mL de HCl 0,02 M. En el ensayo en blanco el volumen de HCl consumido fue de
0,5 mL. El porcentaje de nitrógeno total y proteína en la muestra analizada se calcula
así:
134
%N = 3,17
% Proteína = 3,17 x 6,25 = 19,81
Informe
.-Se informará el contenido de nitrógeno total titulado en cada muestra analizada
.-El contenido de nitrógeno del blanco
.-El % de proteínas encontrado en cada muestra
Problemas
1) Describa el método de Dumas para la determinación de nitrógeno en proteínas.
2) ¿Cuál es la modificación de Wilforth al método de Kjeldhal de determinación de
nitrógeno ¿ ¿Cuál es la modificación de Gunning?
3) ¿Qué proteínas requieren condiciones mas enérgicas para la digestión?
4) ¿Par qué propósito tiene el agregado de sulfato de potasio o sulfato de amonio?
5) Nombrar catalizadores empleados en la determinación de nitrógeno.
6) ¿En qué consiste el método colorimétrico de Nessler? Dar la reacción
correspondiente.
7) ¿De dónde proviene el factor de 6,26, aplicado a la determinación de proteínas.
8) ¿En qué consiste el método de Biuret para la determinación de proteínas?
9) ¿En qué consiste el Método de Lowry para la determinación de proteínas?
10) ¿En qué consiste el método tubidimétrico o nefelométrico para la determinación del
contenido proteico?
11) Describa el método dye-binding para la determinación de proteínas
12) Mencione compuestos nitrogenados no proteicos presentes en los alimentos
13) ¿Qué indicaría la presencia de aminoácidos libres en granos de cereales
14) ¿Qué métodos puede aplicar para separar proteínas de compuestos nitrogenados no
proteicos?
15) ¿Para qué se utiliza y en que consiste la valoración con formol? ¿Qué representa el
índice de formol?
16) ¿Para qué se utiliza la reacción con ninhidrina ¿ Escribir la ecuación correspondiente
17) ¿En qué consiste el método de Griess Ilosva? Dar un ejemplo de la reacción de
Griess-Ilosva.
135
18) ¿Cómo se puede determinar la presencia de nitratos?
19) ¿Qué es el nitrógeno básico volátil? ¿Cómo se determina el nitrógeno volátil básico?
¿Cómo se logra el medio básico adecuado para esta determinación?
20) ¿A qué longitud de onda se hace la determinación por absorbancia de la reacción de
aminoácidos con ninhidrina?
21) ¿Qué indicador se utiliza en el ensayo del índice de formol?
22) Mencione reactivos precipitantes de proteínas
23) ¿En qué casos es adecuada la coagulación de proteínas por calor?
24) Mencione compuestos nitrogenados no proteicos presentes en productos cárnicos que
pueden provocar toxicidad, mutagenicidad o carcinogenicidad.
25) Nombre compuestos inorgánicos nitrogenados que pueden ser usados como índice
del estado higiénico de alimentos , para controlar la maduración y procesado de
quesos o para asegurar la ausencia de cantidades indeseables de compuestos
utilizados en carnes procesadas.
26) ¿A qué se debe la coloración azul producida en el método de Lowry
27)En la determinación de Kjeldhal de proteínas de un alimneto cárnico se encontró que
una muestra de 13 mg destiló amoníaco que requirió un consumo de 2,5 mL de ácido
clorhídrico 0,02 M, factor 0,910. La valoració del blanco requirió 0,6 mL del mismo
ácido. Calcule a) el número de equivalentes netos de álcali titulados, b) el % de nitrógeno
total encontrado, y c) el porcentaje de proteínas de la muestra.
28)Calcular el volumen de ácido clorhídrico 0,02 M factor 1,025 que consumirá al titular
el nitrógeno destilado de 18 mg de muestra de origen animal , estimando que la misma
contiene 18% proteínas totales y que el blanco consume 0,5 mL
29)a.-Indique como resultará el % de nitrógeno (mayor, igual o menor a lo esperado) si
en la etapa de digestión no se mantiene el digestor cerrado. B.-¿qué ocurre si en la etapa
de destilación el destilador no se cierra convenientemente, c)¿cómo resultará el
porcentaje de proteínas calculado sin restar el consumo del blanco?
136