Documente Academic
Documente Profesional
Documente Cultură
Prof. dr. C. Stefanescu, Sef. lucr. dr. I. Grierosu, Prof. dr. V. Rusu
2016 - 2017
CURSUL 5
Curs de Biofizică
Vă rugăm: gândiţi!
5
Disciplina de Biofizică
si Fizică medicală
6/18/2018 2
Cromatografia
Metodă de separare şi identificare
a componenţilor unui amestec.
c1
6/18/2018 5
3 exemple:
1. De adsorbţie 3. De permeaţie
2. De schimb ionic 4. De afinitate
6/18/2018 7
6/18/2018 8
A.Cromatografia
de adsorbţie
Retenţia la suprafaţa
fazei staţionare
6/18/2018 9
Cromatografia de adsorbtie
Frecvent,
adsorbantul
(faza
stationara) =
gel de siliciu
(este hidrofil,
acid si polar)
1. De adsorbţie 3. De permeaţie
2. De schimb ionic 4. De afinitate
6/18/2018 11
B. Cromatografia
de afinitate
În cromatografia de afinitate, un
ligand (care se cuplează specific la o
proteină) este fixat covalent de o
matrice poroasă (faza staţionară)
Separarea
unui anticorp dintr-un
amestec prin
cromatografie de
afinitate
2. 3.
not
6/18/2018 14
Cromatografia de afinitate
Exemplu: purificarea nucleazei stafilococului prin
cromatografie de afinitate - compusul
reprezentat în (b) a fost legat covalent la faza
staţionară (agaroză)
6/18/2018 15
Mecanisme diferite de retenţie
- 4 tipuri de cromatografie:
1. De adsorbţie 3. De permeaţie
2. De schimb ionic 4. De afinitate
6/18/2018 16
C. Cromatografie prin
schimb ionic
Ex! Generatorul de 99m-Tc
(v. Aplicatii radioizotopi …)
Ioni legaţi electrostatic la un suport insolubil şi chimic inert
sunt înlocuiţi reversibil de alţi ioni din amestecul de separat:
6/18/2018 17
Cromatografia prin schimb ionic
Generatorul de 99mTc
6/18/2018 18
1 2
3 4
Sursa
6/18/2018 = http://www.youtube.com/watch?v=q3fMqgT1do8 19
Cromatografia prin schimb ionic
6/18/2018 20
Mecanisme diferite de retenţie
- 4 tipuri de cromatografie:
1. De adsorbţie 3. De permeaţie
2. De schimb ionic 4. De afinitate
6/18/2018 21
D.Cromatografie de permeaţie
- prin filtrare în gel
În cromatografia de
permeaţie sau de
filtrare în gel,
(cromatografie de
excludere sau
tamisaj molecular),
proteinele sunt
separate după
mărimea şi forma
lor.
6/18/2018 23
Cromatografia de permeaţie
6/18/2018 24
Cromatografia de permeaţie se poate folosi
pentru estimarea masei moleculare
6/18/2018 25
6/18/2018 26
Cromatografia este o metoda de ...
6/18/2018 27
? In cazul generatorului de 99mTc etapele cromatografiei
prin schimb ionic sunt:
A. echilibrare
B. spalare cu solutie NaCl
C. elutie
D. regenerare
E. toate de mai sus
6/18/2018 28
? Ce tip de metoda cromatografica este
reprezentata in figura de mai jos:
A) de adsorbtie
B) de afinitate
C) prin schimb ionic
D) de permeatie
E) de absorbtie
6/18/2018 29
Bibliografie selectivă
• Aurengo A., Grémy F., Petitclerc T. - Biophysique, Médecine-Sciences
Flammarion, Paris, 1998.
• Dimoftache C., Herman S. – Principii de Biofizică umană, Ed. Universitară
“Carol Davila”, Bucureşti, 2003.
• Duncan G, Physics in the Life Sciences, Blackwell Scientific Publications,
The Alden Press, Oxford, 1990.
• Durand A., Escanyé J-M., Naoun A. La biophysique en 1001 QCM, Ed.
Ellipses, 2004.
• Goldfarb D. Biophysics DeMYSTiFieD. McGraw-Hill Companies, 2011.
• Herman S. Aparatura medicală. Principiile fizice ale aparaturii medicale
moderne,Ed.Teora,Bucureşti, 2000.
• Nölting, Bengt. Methods in Modern Biophysics. Springer. 2003.
• Pascu M., Rusu V., Vasile C., Spectrometria in IR in medicina si farmacie,
Editura BIT, 2003.
• Popescu A., Bazele Opticii, Ed. Universităţii „Al. I. Cuza”, Iaşi, 1988.
• Rusu V., Baran T., Brănişteanu D. D. - Biomembrane şi patologie, vol. I,
Ed. Medicală, Bucureşti, 1988, 63-92, 286-292.
• Rusu V. Note de curs. 2010.
• Rusu V. – Nobel – Retrospectivă 1905 – 1995 – Laureaţii premiului pentru
fiziologie şi medicină, Ed. Omnia, Iaşi, 1996.
• Rusu V si colab. Lucrări practice şi demonstraţii de Biofizică şi Fizică
Medicală, Ed. „Gr. T. Popa” Iaşi, 2003.
• Rusu V. – Dicţionar medical, Ed. Medicală, Bucureşti, ed. IV, 2011.
• Skoog D. A., Holler F. J., Nieman T. A., Principes d’analyse
instrumentale, De Boeck Université, Paris, 2003.
• Ştefănescu C, Rusu V. Biophysics and Medical Physics: An Introduction,
6/18/2018
Ed. Tehnopress, 2008. 30