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DIAGNÓSTICO

MICROBIOLÓGICO.
DIAGNÓSTICO INDIRECTO
NECESIDAD

 Imposibilidad de diagnóstico directo


 Diagnóstico directo muy complicado y
costoso
Estudios epidemiológicos
...
RESPUESTA INMUNOLÓGICA Y
DIAGNÓSTICO
 Contacto con un antígeno por primera vez...
Aparición precoz de Acs clase IgM
Persistencia corta
En general: infección aguda
Aparición más tardía de Acs clase IgG
Persistencia prolongada
Seroconversión
SEROCONVERSIÓN

 Incremento (generalmente 4 veces)


en la concentración de anticuerpos
específicos (IgG) al comparar dos
muestras separadas en el tiempo,
habitualmente 2 semanas

Estímulo antigénico
Infección
PRUEBAS SEROLÓGICAS.SELECCIÓN
 Sensibilidad: probabilidad de que un
individuo enfermo de positivo en el test (%
de (+) en grupo de enfermos
Especificidad: probabilidad de que un
individuo sano de negativo en el test (% de
(-) detectados en grupos de sanos)
Valor predictivo positivo: proporción de
verdaderos positivos entre aquellos que
han sido identificados como (+) por el test
Valor predictivo negativo: proporción de
verdaderos negativos entre aquellos que
han sido identificados como (-) por el test
PRUEBAS SEROLÓGICAS
TIPOS
 Técnicas rápidas y automatizadas
Técnicas cualitativas y cuantitativas
Título de un suero: Tras diluciones
seriadas y crecientes de un suero,
la última dilución que da un
resultado positivo
Perfiles
PRUEBAS SEROLÓGICAS. TIPOS
Ag unido a fase sólida
+
Suero

Lavado

+
Anti-Ac*

Lavado

+
Sustrato

Enzimoinminoanálisis de absorción ELISA


REACCIÓN DE PRECIPITACIÓN

Antígeno soluble
Exceso de
antígeno

Anillo de
Equvalencia precipitación

Exceso de
anticuerpo
Anticuerpo
INMUNODIFUSIÓN

Ac Ag

Banda de precipitación

Ac Ag

Bandas de precipitación
INMUNOELECTROFORESIS
Ag

Agar gel
Ag

anticuerpo

bandas
de precipitación
HEMAGLUTINACIÓN

pocillo

anticuerpo
células sanguíneas células sanguíneas no
aglutinadas aglutinadas (botón rojo)
TEST DE COOMBS

+ +

anticuerpos complejo anti Ig humana aglutinación


hematíes
anti Rh célula-Ac
TEST DE FIJACIÓN DEL COMPLEMENTO
Añadir complemento Añadir hematíes-Ac.
Añadir antígeno
TEST NEGATIVO

Suero sin
anticuerpos

No formación
de complejos Complemento Células rojas
libre lisadas
TEST DE FIJACIÓN DEL COMPLEMENTO
TEST POSITIVO Añadir antígeno Añadir complemento Añadir hematíes-Ac.

Suero con
anticuerpos

Formación Fijación del Células rojas


de complejos complemento íntegras
INMUNOFLUORESCENCIA
Colorante
Anticuerpo
fluorescente
Colorante Anticuerpo anti
fluorescente Ac. original
Antígeno

Superficie celular

Anticuerpo
RADIOINMUNOENSAYO
Placa
Antígeno
Pocillo

Anticuerpo

Anticuerpo
marcado
ELISA
Placa
Antígeno
Pocillo

Enzim
a

Anticuerpo

Substrato

Producto
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