Pontificia Universidad

Católica del Ecuador

Facultad de Medicina
Carrera de Bioquímica Clínica
INFORME DE LABORATORIO

Asignatura: Laboratorio de Hematología Reporte №3

№ y nombre de la práctica: №3 Coloración Wright- Fecha de entrega:
Giemsa. Observación de la médula ósea: Eritropoyesis. 24/04/2018
Nombre: Josefa Elizabeth Castillo Yánez.

Resumen:
En esta práctica se determinó el principio de la coloración Wright-Giemsa para
comprender cómo se distribuyen los colores que captan las estructuras en un frotis de
médula ósea. También se capacitó al estudiante en la diferenciación morfológica de la
maduración de los glóbulos rojos. Como resultado de la tinción Wright-Giemsa y
observación de médula ósea se logró un frotis de médula ósea teñido de forma
adecuada. Se diferenció morfológicamente los estados de maduración de los glóbulos
rojos y se observó a los proeritroblastos, eritroblastos basófilos, eritroblastos
policromáticos y eritroblastos ortocromáticos. Como conclusión de la coloración Wright-
Giemsa se determinó que su principio se basa en una tinción policromática. Y en la
observación de la médula ósea se diferenció que las características morfológicas
celulares en el proceso de Eritropoyesis se basan en el tamaño, núcleo, tipo de
cromatina, relación núcleo/citoplasma, presencia o ausencia de nucléolo, entre otras.
Resultados/fotografías:

Resultados extracción de médula ósea

FROTIS

Extracción en preferiblemente
Cresta del hueso ilíaco.
huesos planos Esternón
 Resultados de la coloración Wright-Giemsa

3 minutos

Frotis seco y rotulado Añadir colorante Wright

Soplar, esperar 5 min. Lavar con agua (buffer),

dejar sobrenadante.

Añadir gotas de Giemsa, Lavar y secar.

esperar 8 min.

Resultados observación médula ósea: Eritropoyesis

Célula: Características:
Proeritroblasto - Tamaño: 12 a 20 um.
- Célula menos madura, célula grande.
Nucléolo
- Núcleo: redondo, violeta oscuro.
- Cromatina laxa, gruesa y homogénea.
Citoplasma
- Nucléolos: de 3 a 5 (poco evidentes).
- Citoplasma: Basófilo azul oscuro.
- Cada célula origina de 8 a 16
Halo
eritrocitos.
perinuclear
Núcleo - Relación núcleo/citoplasma (N/C):
elevado.
 Eritroblasto basófilo - Tamaño:10-16 um.
- Menor diámetro celular.
- Núcleo: esférico.
- Cromatina: violeta oscura, cuarteada
con grandes contrastes (hendiduras
Núcleo claras entre grumos de cromatina
violeta oscuro) a manera de rueda de
carro.
- Citoplasma: moderadamente basófilo.
- Relación N/C: menor.
Citoplasma
- Nucléolo: puede existir presencia.
Eritroblasto policromático
- Tamaño: 10-12 um.
- Similar al eritroblasto basófilo, pero
Núcleo
con menor diámetro.
- Núcleo: redondo.
- Citoplasma: gris-azulado violeta
(hemoglobinización progresiva).
- Relación N/C: menor.
Citoplasma
- Última etapa en la que existe mitosis.

Eritroblasto ortocromático - Tamaño: 8-10 um.

- Núcleo: redondo y condensado,
posición excéntrica.
Núcleo
- Cromatina: muy condensada (picnosis
nuclear).
- Citoplasma: gris amarillo a rojo
brillante.
- Relación N/C: mucho menor.

Citoplasma

Eritrocito
- Tamaño: 7-8 um.
- Núcleo: ausente.
Citoplasma - Forma: disco bicóncavo.
- Citoplasma: color salmón.
- Tiempo de vida: 120 días.

Conclusiones y recomendaciones:
- En la coloración Wright-Giemsa se concluye diciendo que este tipo de tinción
que se usa con frecuencia para frotis tanto de sangre periférica como de médula
ósea. Se dice que es un tipo de tinción policrómica ya que utiliza eosina y azul
de metileno. El frotis estuvo bien teñido y tuvo aspecto granular a simple vista
con la presencia de espacios vacíos típicos del frotis de medula ósea. También
se logró distinguir las características morfológicas de las células eritrociticas.

- En la observación de las células en médula ósea en la Eritropoyesis se logró

diferenciar principalmente por las características morfológicas que poseen. Una
característica común entre las células eritropoyeticas como el proeritroblasto,
eritroblasto basófilo, eritroblasto policromático y eritroblasto ortocromático es
que poseen un núcleo redondo a diferencia del eritrocito maduro que es
anuclear.
 - El tamaño es otra característica para la diferenciación de las células
eritropoyeticas siendo el proeritroblasto la célula más grade ya que es también
la célula más inmadura, otras características que denotaron diferencias entre
estas células fueron también la forma del núcleo, la cromatina, citoplasma,
presencia de nucléolo y relación entre el núcleo y el citoplasma.

- También se debe señalar que la etapa de la mitosis termina en el eritroblasto

policromático y no se observaron reticulocitos ya que tienen una vida media de
2 días en la médula ósea y por el tipo de colorante Giemsa utilizado en la tinción.
Cuestionario:
a) ¿Qué es la coloración básica? Ejemplo.
Una coloración básica o simple es aquella que se realiza utilizando un solo colorante.
Se suele emplear cualquier tipo de colorante básico, preferiblemente azul de metileno o
fucsina, haciéndolo actuar en un tiempo de 1 a 2 minutos y eliminando el exceso por
lavado. Este tipo de tinción ofrece orientación sobre la presencia, concentración,
morfología y modo de agrupación de bacterias. Un ejemplo es la tinción con cristal
violeta (Tortora, Funke, & Case, 2007).
b) ¿Qué es la coloración diferencial? Ejemplo.
De acuerdo con Madigan, M. T., Martinko, J. M., & Bender, K. S. (2015):
Una coloración diferencial es aquella que tiñe de colores diferentes tipos distintos de
células. Un ejemplo de esta coloración diferencial muy importante es la tinción de Gram
que se usa en Microbiología. De acuerdo al resultado de esta tinción, las bacterias se
pueden dividir en dos grupos: las gram positivas y las gram negativas. Las bacterias
Gram positivas se observan de color morado y las gram negativas de color rosa. La
diferencia de color en la tinción de Gram se debe a las diferencias en la estructura de la
pared celular de las células. Se utiliza colorante básico: cristal violeta para teñir las
células moradas, se tratan después con etanol que decolora las células gramnegativas,
pero no las grampositivas. Luego se tiñe con una tinción de contraste con colorante
diferente, normalmente la safranina de color rojo y así se distinguen dos tipos de células
al microscopio por su color.
c) ¿Qué es la coloración directa? Ejemplo.
La coloración directa es aquella en la que el colorante interacciona directamente con el
sustrato, sin otro tratamiento previo. Un ejemplo de este tipo de coloración es la tinción
de May-Grumwald-Giensa, a partir de sangre heparinizada y centrifugada se utiliza el
sedimento para análisis bacteriológico como es el caso de rickettsias que aparecen de
color purpura (Granados & Villaverde, 2015).
d) ¿Qué es la coloración indirecta? Ejemplo.
De acuerdo con (García & Picazo, 2010):
La coloración indirecta o negativa es aquella que emplea una sustancia ácida y opaca
denominada mordiente (tinta china) que se deposita alrededor de la bacteria, sin teñirla,
resaltando su contorno. Un ejemplo de este tipo de coloración es la tinción de Burri para
observar la cápsula tanto de bacterias como de algunos hongos (Cryptococcus).
Bibliografía:
 García, J. Á., & Picazo, J. (2010). Compendio de microbiología médica. Madrid:
Harcourt.
 Granados, R., & Villaverde, M. d. (2015). Micribiologia. Madrid: Paraninfo.
 Madigan, M. T., Martinko, J. M., & Bender, K. S. (2015). Biología de los
microorganismos (14a. ed.). Retrieved from https://ebookcentral.proquest.com

 Tortora, G., Funke, B., & Case, C. (2007). Introducción a la microbiología.

Barcelona: Medica Panamericana.