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INSTRUMENTACIÓN BIOMÉDICA

TEMA: VOLTAJE CLAMP

NOMBRE: Jonathan Yamberla


NRC: 2760
Fecha: 11 de Mayo de 2018

1. Realizar una consulta sobre el tema “Voltaje Clamp”, realice una descripción general del
método y su aplicación

Este método fue desarrollado en 1940 por Kenneth Cole, en esta técnica el potencial de
membrana se mantiene constante, a la vez que se mide la corriente a través de la membrana
requerida para mantener ese nuevo voltaje. [1]

Voltaje clamp es un generador de corriente (Figura 1). El voltaje de la transmembrana se registra


a través de un "electrodo de voltaje", relativo a la tierra, y un "electrodo de corriente" pasa la
corriente a la celda. El experimentador establece un "voltaje de retención", o "potencial de
comando", y la pinza de voltaje usa retroalimentación negativa para mantener la celda a este
voltaje. Los electrodos están conectados a un amplificador, que mide el potencial de la
membrana y alimenta la señal a un amplificador de realimentación. Este amplificador también
recibe una entrada del generador de señal que determina el potencial de comando, y resta el
potencial de la membrana del comando de potencial, amplifica cualquier diferencia, y envía una
salida al electrodo actual.

Siempre que la celda se desvía del voltaje de retención, el amplificador operacional genera una
"señal de error", que es la diferencia entre el potencial de comando y el voltaje real de la celda.
El circuito de retroalimentación pasa corriente a la celda para reducir la señal de error a cero.
Por lo tanto, el circuito de voltage clamp produce una corriente igual y opuesta a la corriente
iónica.
Figura 1. Técnica de voltage clamp

La utilidad del voltage clamp se encuentra principalmente en el hecho que permite la separación
de la corriente iónica de la corriente capacitiva. Ya que el verdadero interés del investigador no
radica en conocer la corriente transmembrana, sino que está interesado principalmente en la
conductancia de membrana, siendo ésta directamente proporcional a la actividad de los canales
iónicos. [2]

En cuanto a las aplicaciones, esta técnica es muy usada para registrar corrientes iónicas que
fluyen a través de canales individuales, para estudiar conductancias de membrana
cinéticamente lentas en neuronas centrales (Johnston et al. 1980) y para analizar corrientes
sinápticas más rápidas en el sistema nervioso central (Brown & Johnston, 1983), otra aplicación
ha sido controlar el voltaje y medir la corriente macroscópica en las neuronas, dejando un
segundo micro electrodo libre para hacer inyecciones intracelulares (Adams et al. 1982).

2. Realizar una descripción de la utilización del axón de calamar gigante para las medidas
de potenciales

Los calamares son moluscos con diez tentáculos y un cuerpo o manto muscular (tubo) inervado
por axones de gran diámetro que en algunas especies llegan a tener cerca de 1 mm, dimensiones
enormes cuando se las compara con los 10-20 µm de los axones de mamífero (mil veces mayor
que los axones de los mamíferos, Figura 2) [3].

Figura 2. Comparación de las neuronas de un calamar gigante con el de un conejo


En sus experimentos los electrodos eran finos alambres de plata enrollados en torno a una barra
aislante central con lo que solo podían entrar en una estructura tan grande como el axón
gigante. Un electrodo se colocaba dentro del axón y el otro fuera y los dos estaban conectados
a un amplificador con lo que podían medir los intercambios eléctricos en segmentos muy
pequeños de la membrana del axón del calamar.

Esto permitió a Alan Hodgkin y Andrew Huxley estudiar el comportamiento de las neuronas, y
permitió comprender el flujo de los iones de sodio y potasio a través de la misma. Gracias a ello,
Hodgkin y Huxley ganaron el premio Nobel de Medicina en 1963.

Referencias Bibliográficas

[1] Goldman D.E. Potential, impedance and rectification in membranes. J Gen Physiol 27, 37-
60, 1943

[2] James V. Halliwell, Tim D. Plant, Jon Robbins and Nick B. Standen. Voltage clamp
techniques. J.Physiol 228: 37-77, 1992.

Brown, T. H. & Johnston, D. (1983). Voltage-clamp analysis of mossy fiber synaptic input to
hippocampal neurons. J. Neurophysiol. 50, 487-507

Halliwell, J. V. & Adams, P. R. (1982). Voltage-clamp analysis of muscarinic excitation in


hippocampal neurons. Brain Res. 250, 71-92

[3] Kotsias, B. A. (2004). El axón gigante de calamar. Medicina (Buenos Aires), 64(3), 273-276.

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