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Debido a que un gran número de enfermedades son transmitidas por vía fecal-
oral utilizando como vehículo los alimentos y el agua, es necesario contar con
microorganismos que funcione como indicador de contaminación fecal. Estos
deben de ser constantes, abundantes y exclusivos de la materia fecal, deben
tener una sobrevivencia similar a la de los patógenos intestinales y debe de ser
capaces de desarrollarse extra intestinalmente.
Cuando los coliformes llegan a los alimentos, no sólo sobreviven, sino que se
multiplican, por lo que en los alimentos el grupo coliforme adquiere un
significado distinto al que recibe en el agua. En productos alimenticios que han
recibido un tratamiento térmico (pasteurización, horneado, cocción, etc.), se
utilizan como indicadores de malas prácticas sanitarias.
Invasiva
- - - +
Intiminas
- + + -
Enterohemolisina - - + -
EQUIPOS Y MATERIALES:
a) Una autoclave
b) Un horno de aire caliente o estufa para esterilización
c) Un potenciómetro o cinta de pH universal
d) Una incubadora, con una temperatura de incubación de 35 +- 0.5°C,
con termostato y termómetro.
e) Un equipo de baño María, con una temperatura de reincubación de 44.5
+- 0.2 °C, con termostato y termómetro.
f) Un sistema de filtración.
g) Una bomba de vacío, frasco Erlenmeyer kitazato de un litro, mangueras
de conexión, equipo de multiplicación, porta filtro previamente
esterilizado (contiene Embudo en parte superior que se une o sujeta
con el soporte poroso o base
h) Placas de Petri de 60 milímetros x15 milímetros esterilizadas,
identificadas con el número de la muestra, así como el volumen de
muestra que va a ser filtrado.
i) Frascos de muestreo de vidrio y boca ancha estéril conteniendo agua
de dilución para enjuagar porta filtro.
j) Membranas filtrantes esterilizadas, de 47 milímetros de diámetro y una
porosidad de 0.45 micrómetros.
k) Frascos de dilución de 100 mililitros de boro silicato de vidrio neutro,
tapa rosca, con 90 mL de agua peptonada, auto clavada.
l) Pinza sin dientes.
m) Algodón, alcohol.
n) Pipetas estériles de 10 y 1 mililitros.
o) Estereoscopio o contador de colonias.
p) Refrigeradora.
Soluciones y medios:
PROCEDIMIENTO ANALÍTICO
1. Preparar el sistema de filtración según indica la figura colocar un matraz
de seguridad (Kitazato) entre la bomba de vacío y el equipo de
multifiltración que sostiene la porta filtros. El porta filtros debe estar
estéril y frío.
2. Prepara las placas Petri estériles. Distribuir entre 3 y 5 mililitros del agar
licuado (a 45°C aproximadamente) a la placa de Petri estéril. Taparla y
dejar solidificar el medio antes de proceder al análisis. Identificar las
placas con lápiz de vidrio o tinta indeleble.
3. Retirar la parte superior de la porta filtros y, con una pinza previamente
desinfectada con alcohol y flameada al mechero y fría, colocar un filtro
de membrana estéril, con la cara cuadriculada hacia arriba y en el centro
de la parte superior de la porta filtros.
4. Acoplar la parte superior del porta filtros, teniendo cuidado de no dañar
la membrana.
BIBLIOGRAFIA: